Summary

Sonda baseada Endomicroscopy Laser Confocal do Trato Urinário: A Técnica

Published: January 10, 2013
doi:

Summary

Sonda baseada endomicroscopy laser confocal permite microscopia em tempo real do aparelho urinário humano durante cistoscopia, fornecendo imagens, dinâmico intravital de estados patológicos tais como o cancro da bexiga, com resolução celular. Endomicroscopy pode aumentar a precisão do diagnóstico do padrão de luz branca endoscopia intra-operatória e fornecer orientação imagem para melhorar a ressecção cirúrgica.

Abstract

Sonda baseada confocal a laser endomicroscopy (CLE) é uma tecnologia de imagem óptico emergente que permite em tempo real em microscopia in vivo de superfícies mucosas durante padrão endoscopia. Com aplicações actualmente nos tractos respiratório e gastrointestinal 1, 2-6 CLE também tem sido explorada no trato urinário para o diagnóstico do cancro da bexiga. Morfologia celular 7-10 e micro-arquitectura do tecido pode ser resolvido com a escala mícron resolução em tempo real, para além imagens dinâmicas da vasculatura normal e patológico. 7

A sonda baseada CLE sistema (Cellvizio, Mauna Kea Technologies, França) é constituído por uma sonda de imagiologia reutilizável fibra óptica acoplada a uma unidade de varrimento 488 nm do laser. A sonda de imagiologia é inserida nos canais de trabalho do padrão de endoscópios flexíveis e rígidos. Um endoscópio baseado CLE sistema (Optiscan, Austrália), em que o functionalit endomicroscopy confocaly é integrado para o endoscópio, é também utilizado no tracto gastrointestinal. Dado que o diâmetro maior alcance, contudo, a aplicação no tracto urinário está actualmente limitada a utilização ex vivo. 11 de aquisição de imagem confocal é feito através do contacto directo da sonda de imagiologia com o tecido alvo e registada como sequências de vídeo. Tal como no tracto gastrointestinal, endomicroscopy do trato urinário requer um agente de contraste exogenenous mais comumente de fluoresceína, que pode ser administrado por via intravenosa ou intravesical. Administração intravesical é um método bem estabelecido para introduzir agentes farmacológicos localmente, com o mínimo de toxicidade sistêmica, que é exclusivo para o trato urinário. Fluoresceína rapidamente manchas da matriz extracelular e tem um perfil de segurança estabelecido. 12 testes de imagem de vários diâmetros habilitar a compatibilidade com endoscópios de diferentes calibres. Até o momento, 1,4 e 2,6 milímetros sondas têm sido avaliadas com flexível e rigid cistoscopia. recente disponibilidade de 10 a <1 mm de imagens da sonda 13 abre a possibilidade do LEC no trato urinário superior durante ureteroscopia. Fluorescência cistoscopia (diagnóstico fotodinâmica, por exemplo) e imagens de banda estreita são adicionais endoscópio baseados em métodos de imagem óptica 14 que podem ser combinados com CLE para conseguir imagens multimodal do trato urinário. No futuro, a CLE pode ser acoplado com agentes de contraste molecular, tais como péptidos marcados fluorescentemente 15 e de anticorpos para imagiologia endoscópica de processos de doenças com especificidade molecular.

Protocol

1. Preparação do paciente Paciente consentimento prevista para cistoscopia de diagnóstico e outros procedimentos endourological como a ressecção transuretral de tumor de bexiga (TURBT) para CLE. Incluir na autorização uma descrição da utilização de fluoresceína intravesical e / ou por via intravenosa, como agente de contraste. Informe história de reação de hipersensibilidade a fluoresceína. Paciente é posicionado por cistoscopia (normalmente na posição de litotomia) e preparada de…

Representative Results

CLE imagens são salvos como arquivos em tons de cinza seqüência de vídeo em 12 frames por segundo. A interpretação das imagens é feita em tempo real, e pode ser utilizada para influenciar a decisão clínica sob um protocolo experimental. Análise off-line, o qual inclui a revisão da sequência de vídeo, processamento de imagem adicional, tal como mosaicos, 7 e comparação com o padrão de patologia, são importantes durante a fase de curva de aprendizagem associada com a tecnologia. Figuras 1B e 1C…

Discussion

Alcançar e manter contato face sólida en entre a sonda de imagem e da mucosa da bexiga é a etapa mais importante em adquirir melhor qualidade de imagem. Existe cerca de 3-5 curva de aprendizagem do paciente desenvolver a destreza para manipular a sonda de geração de imagens e para manter a sonda estável durante a aquisição de imagem. Além disso, dado que este procedimento é realizado in vivo, os movimentos do paciente (isto é, respiratória) e pulsações vasculares podem a…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Os autores gostariam de agradecer Technologies Mauna Kea para suporte técnico. Os autores também agradecem Shelly Hsiao para assistência técnica e E. Kathleen Mach para a revisão crítica. Este trabalho foi financiado em parte pelo NIH R01CA160986 a JCL

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Cellvizio 100 Series Mauna Kea Technologies 100 Series Includes confocal processor and LSU: F400-v2 at 488 nm
Cellvizio Confocal Miniprobe Mauna Kea Technologies Gastroflex UHD
AK-FLUOR 10% Akorn, Inc. NDC 17478-253-10

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Cite This Article
Chang, T. C., Liu, J., Liao, J. C. Probe-based Confocal Laser Endomicroscopy of the Urinary Tract: The Technique. J. Vis. Exp. (71), e4409, doi:10.3791/4409 (2013).

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