एक कपाल विंडो का उपयोग करने के लिए endothelin-1 प्रेरित मध्य सेरेब्रल धमनी रोड़ा के दौरान मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी कल्पना
Summary
यह लेख एक कपाल अस्थायी कपालोच्छेदन का उपयोग करने में मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी के समीपस्थ भागों को देखने खिड़की के माध्यम से चूहा मस्तिष्क धमनियों visualizing के लिए एक विधि का वर्णन है (<strong> चित्रा 1</strong>). इस बहुमुखी विधि दवा वितरण के विभिन्न तकनीकों के साथ जोड़ा जा सकता है प्रमस्तिष्क धमनी जेट उपाय<em> Vivo में</em>.
Abstract
एक कपाल विंडो के निर्माण एक तरीका है कि 1-3 मस्तिष्क के cortical सतह पर संरचनाओं के प्रत्यक्ष दृश्य की अनुमति देता है. इस तकनीक को कई चूहा मस्तिष्क overlying स्थानों में किया जा सकता है, लेकिन सबसे अधिक आसानी से आसानी से सुलभ ललाट या पार्श्विका हड्डियों पर एक कपालोच्छेदन बनाने से बाहर किया जाता है. सबसे अधिक बार, हम संयोजन में इस तकनीक का इस्तेमाल किया है endothelin-1 ischemic स्ट्रोक के बीच मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल के साथ मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी पोत व्यास में परिवर्तन समीपस्थ एमसीए के निकट है कि मस्तिष्क पैरेन्काइमा में endothelin-1 के इंजेक्शन के साथ होते यों 4, 5. आदेश में endothelin -1 प्रेरित MCAO के दौरान एमसीए के समीपस्थ भाग कल्पना करने के लिए, हम एक चूहे खोपड़ी (1 चित्रा) के पार्श्व पहलू पर अस्थायी हड्डी के माध्यम से एक कपाल खिड़की बनाने के लिए तकनीक का उपयोग करें. सेरेब्रल धमनियों या तो ड्यूरा बरकरार या dura छिन्न और retra के साथ देखे जा सकते हैंcted. सबसे अधिक, हम endothelin 1 प्रेरित MCAO के बाद से दृश्य के दौरान ड्यूरा बरकरार vasoconstricting पेप्टाइड मस्तिष्क पैरेन्काइमा में प्रसव शामिल छोड़ दें. यह के ड्यूरा दवा वितरण के लिए कल्पना वाहिकाओं पर सीधे काटकर अलग कर देना की जरूरत नजरअंदाज. यह प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे एक कपाल एक कदम वार फैशन में मस्तिष्क धमनियों कल्पना, खिड़की के रूप में कैसे क्षमता इस विधि से संबंधित नुकसान के कई से बचने के लिए के रूप में अच्छी तरह से बनाने के लिए.
Protocol
Representative Results
Discussion
सारांश में, इस कपाल खिड़की तैयारी तकनीक बहुत बहुमुखी है के रूप में यह मामूली संशोधनों के 4, 5 के साथ कई प्रयोगों की जरूरतों को पूरा करने के लिए परिवर्तित किया जा सकता है. उदाहरण के लिए, हम सफलतापूर्वक व…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन ग्रेटर दक्षिण पूर्व (09GRNT2060421) संबद्ध, अमेरिकन मेडिकल एसोसिएशन, और फ्लोरिडा नैदानिक और translational विज्ञान संस्थान के विश्वविद्यालय से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया. एडम मक्का / एनआईएच NINDS, एनआरएसए predoctoral साथी (F30 NS +०,६०,३३५) है. रॉबर्ट Regenhardt उच्च रक्तचाप में फ्लोरिडा इन दोनों क्षेत्रों ट्रेनिंग प्रोग्राम के विश्वविद्यालय (T32 HL 083,810) से predoctoral फेलोशिप समर्थन प्राप्त है.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Inhalation anesthesia system | VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA | 901806 | |
| Isoflurane anesthetic | Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL, USA | 1001936060 | |
| Small animal stereotaxic system | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 900 | |
| Non-rupture ear bars, rat | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 957 | |
| Rat gas anesthesia head holder | David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA | 1929 | |
| BAT-12 microprobe thermometer | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | BAT-12 | |
| T/PUMP, Thermal blanket | Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, USA | T/PUMP, TP600 | |
| Metzenbaum Scissors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 501254 | |
| Iris forceps | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 15915 | |
| Bulldog clamp retractors | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 14119-G | |
| 10 μl syringe 26-gaugue | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | SGE010RNS | |
| Bovie, high temperature cautery kit | World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA | 500392 | |
| Rat tooth forceps 0.12 | Stotz | E1811 | |
| Micromotor drill | Stoelting, Wood Dale, IL, USA | 51449 | |
| 0.8 mm round drill bur | Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, USA | RS-6280C-1 | |
| STORZ Bonn suturing forceps | Bausch and Lomb, Inc., Rochester, NY, USA | ||
| Nylon Suture, size 3.0 | Oasis, Mettawa, IL, USA | MV-663 | |
| Cotton swabs | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | 22-029-488 | |
| Puralube eye ointment | Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA | NC0138063 | |
| Electric hair clippers | Oster, Providence, RI, USA | 78005-301 | |
| ET-1 diluted to 80 μM concentration in PBS | American Peptide, Sunnyvale, CA, USA | 88-1-10A | |
| Chlorhexidine, 2% | Agrilabs, St. Joseph, MO, USA | 1040, Rev. 6-06, NAC No.: 10580322 | |
| Surgical microscope | Seiler Instrument and Manufacturing, St. Louis, MO, USA | Evolution xR6 | |
| Sony Handycam | Sony, Minato, Tokyo, Japan | HDR-SR12 | |
| Fiber optic illuminator | TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA | FO1–150 | |
| VLC media Player | (Paris, France) | ||
| Image J software | U.S. National Institutes of Health, Bethesda, MA, USA |
References
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- Baumbach, G. L., Dobrin, P. B., Hart, M. N., Heistad, D. D. Mechanics of cerebral arterioles in hypertensive rats. Circ. Res. 62, 56-64 (1988).
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