Summary

एक कपाल विंडो का उपयोग करने के लिए endothelin-1 प्रेरित मध्य सेरेब्रल धमनी रोड़ा के दौरान मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी कल्पना

Published: February 22, 2013
doi:

Summary

यह लेख एक कपाल अस्थायी कपालोच्छेदन का उपयोग करने में मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी के समीपस्थ भागों को देखने खिड़की के माध्यम से चूहा मस्तिष्क धमनियों visualizing के लिए एक विधि का वर्णन है (<strong> चित्रा 1</strong>). इस बहुमुखी विधि दवा वितरण के विभिन्न तकनीकों के साथ जोड़ा जा सकता है प्रमस्तिष्क धमनी जेट उपाय<em> Vivo में</em>.

Abstract

एक कपाल विंडो के निर्माण एक तरीका है कि 1-3 मस्तिष्क के cortical सतह पर संरचनाओं के प्रत्यक्ष दृश्य की अनुमति देता है. इस तकनीक को कई चूहा मस्तिष्क overlying स्थानों में किया जा सकता है, लेकिन सबसे अधिक आसानी से आसानी से सुलभ ललाट या पार्श्विका हड्डियों पर एक कपालोच्छेदन बनाने से बाहर किया जाता है. सबसे अधिक बार, हम संयोजन में इस तकनीक का इस्तेमाल किया है endothelin-1 ischemic स्ट्रोक के बीच मस्तिष्क धमनी रोड़ा मॉडल के साथ मध्यम प्रमस्तिष्क धमनी पोत व्यास में परिवर्तन समीपस्थ एमसीए के निकट है कि मस्तिष्क पैरेन्काइमा में endothelin-1 के इंजेक्शन के साथ होते यों 4, 5. आदेश में endothelin -1 प्रेरित MCAO के दौरान एमसीए के समीपस्थ भाग कल्पना करने के लिए, हम एक चूहे खोपड़ी (1 चित्रा) के पार्श्व पहलू पर अस्थायी हड्डी के माध्यम से एक कपाल खिड़की बनाने के लिए तकनीक का उपयोग करें. सेरेब्रल धमनियों या तो ड्यूरा बरकरार या dura छिन्न और retra के साथ देखे जा सकते हैंcted. सबसे अधिक, हम endothelin 1 प्रेरित MCAO के बाद से दृश्य के दौरान ड्यूरा बरकरार vasoconstricting पेप्टाइड मस्तिष्क पैरेन्काइमा में प्रसव शामिल छोड़ दें. यह के ड्यूरा दवा वितरण के लिए कल्पना वाहिकाओं पर सीधे काटकर अलग कर देना की जरूरत नजरअंदाज. यह प्रोटोकॉल का वर्णन कैसे एक कपाल एक कदम वार फैशन में मस्तिष्क धमनियों कल्पना, खिड़की के रूप में कैसे क्षमता इस विधि से संबंधित नुकसान के कई से बचने के लिए के रूप में अच्छी तरह से बनाने के लिए.

Protocol

इस प्रोटोकॉल संस्थागत पशु की देखभाल और फ्लोरिडा के विश्वविद्यालय में उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित किया गया था और के अनुपालन में है "देखभाल के लिए गाइड और प्रयोगशाला पशु का प्रयोग" (8 संस्करण, नेशन…

Representative Results

अभी भी कब्जा कर लिया वीडियो शो से लिया छवियों कि प्रमस्तिष्क धमनी व्यास में परिवर्तन के बाद एट -1 इंजेक्शन आसानी से हो सकता है इस कपाल खिड़की तकनीक (2 चित्रा) के उपयोग की सराहना कर सकते हैं. ET 1-इंजेक्?…

Discussion

सारांश में, इस कपाल खिड़की तैयारी तकनीक बहुत बहुमुखी है के रूप में यह मामूली संशोधनों के 4, 5 के साथ कई प्रयोगों की जरूरतों को पूरा करने के लिए परिवर्तित किया जा सकता है. उदाहरण के लिए, हम सफलतापूर्वक व…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

इस काम अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन ग्रेटर दक्षिण पूर्व (09GRNT2060421) संबद्ध, अमेरिकन मेडिकल एसोसिएशन, और फ्लोरिडा नैदानिक ​​और translational विज्ञान संस्थान के विश्वविद्यालय से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया. एडम मक्का / एनआईएच NINDS, एनआरएसए predoctoral साथी (F30 NS +०,६०,३३५) है. रॉबर्ट Regenhardt उच्च रक्तचाप में फ्लोरिडा इन दोनों क्षेत्रों ट्रेनिंग प्रोग्राम के विश्वविद्यालय (T32 HL 083,810) से predoctoral फेलोशिप समर्थन प्राप्त है.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Inhalation anesthesia system VetEquip Inc., Pleasanton, CA, USA 901806
Isoflurane anesthetic Baxter Pharmaceutics, Deerfield, IL, USA 1001936060
Small animal stereotaxic system David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA 900
Non-rupture ear bars, rat David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA 957
Rat gas anesthesia head holder David Kopf Instruments, Tujunga, CA, USA 1929
BAT-12 microprobe thermometer World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA BAT-12
T/PUMP, Thermal blanket Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, NY, USA T/PUMP, TP600
Metzenbaum Scissors World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA 501254
Iris forceps World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA 15915
Bulldog clamp retractors World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA 14119-G
10 μl syringe 26-gaugue World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA SGE010RNS
Bovie, high temperature cautery kit World Precision Instruments, Inc., Sarasota, FL, USA 500392
Rat tooth forceps 0.12 Stotz E1811
Micromotor drill Stoelting, Wood Dale, IL, USA 51449
0.8 mm round drill bur Roboz Surgical Instrument Co., Inc., Gaithersburg, MD, USA RS-6280C-1
STORZ Bonn suturing forceps Bausch and Lomb, Inc., Rochester, NY, USA
Nylon Suture, size 3.0 Oasis, Mettawa, IL, USA MV-663
Cotton swabs Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA 22-029-488
Puralube eye ointment Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA NC0138063
Electric hair clippers Oster, Providence, RI, USA 78005-301
ET-1 diluted to 80 μM concentration in PBS American Peptide, Sunnyvale, CA, USA 88-1-10A
Chlorhexidine, 2% Agrilabs, St. Joseph, MO, USA 1040, Rev. 6-06, NAC No.: 10580322
Surgical microscope Seiler Instrument and Manufacturing, St. Louis, MO, USA Evolution xR6
Sony Handycam Sony, Minato, Tokyo, Japan HDR-SR12
Fiber optic illuminator TechniQuip Corp., Livermore, CA, USA FO1–150
VLC media Player (Paris, France)
Image J software U.S. National Institutes of Health, Bethesda, MA, USA

References

  1. Levasseur, J. E., Wei, E. P., Raper, A. J., Kontos, A. A., Patterson, J. L. Detailed description of a cranial window technique for acute and chronic experiments. Stroke. 6, 308-317 (1975).
  2. Baumbach, G. L., Dobrin, P. B., Hart, M. N., Heistad, D. D. Mechanics of cerebral arterioles in hypertensive rats. Circ. Res. 62, 56-64 (1988).
  3. Regrigny, O., et al. Effects of melatonin on rat pial arteriolar diameter in vivo. Br. J. Pharmacol. 127, 1666-1670 (1999).
  4. Mecca, A. P., O’Connor, T. E., Katovich, M. J., Sumners, C. Candesartan pretreatment is cerebroprotective in a rat model of endothelin-1-induced middle cerebral artery occlusion. Exp. Physiol. 94, 937-946 (2009).
  5. Mecca, A. P., et al. Cerebroprotection by angiotensin-(1-7) in endothelin-1-induced ischaemic stroke. Exp. Physiol. 96, 1084-1096 (2011).

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Cite This Article
Regenhardt, R. W., Ansari, S., Azari, H., Caldwell, K. J., Mecca, A. P. Utilizing a Cranial Window to Visualize the Middle Cerebral Artery During Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion. J. Vis. Exp. (72), e50015, doi:10.3791/50015 (2013).

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