Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Neuroscience

Registratie en analyse van circadiane ritmen bij Running-wheel activiteit in knaagdieren

doi: 10.3791/50186 Published: January 24, 2013

Summary

Circadiane ritmes in vrijwillige wiel lopende activiteit bij zoogdieren zijn nauw gekoppeld met de moleculaire oscillaties van een moederklok in de hersenen. Als zodanig kunnen deze dagelijkse ritme in gedrag worden gebruikt om de invloed van genetische, farmacologische en omgevingsfactoren op de werking van deze circadiane klok bestuderen.

Abstract

Wanneer knaagdieren gratis toegang tot een loopwiel in hun kooi hebben, zal vrijwillig gebruik van dit wiel is afhankelijk van de tijd van de dag 1-5. Nachtelijke knaagdieren, zoals ratten, hamsters en muizen, zijn 's nachts actief en relatief inactief gedurende de dag. Veel andere gedrags-en fysiologische maatregelen vertonen ook dagelijkse ritmes, maar in knaagdieren, hardlopen wielen activiteit dient als een bijzonder betrouwbare en handige maat voor de output van de master circadiane klok, de suprachiasmatische kern (SCN) van de hypothalamus. In het algemeen, door een proces genaamd meesleuren, zal de dagelijkse patroon van het runnen van wielen activiteit natuurlijk af te stemmen op de milieu-licht-donker cyclus (LD-cyclus, bijvoorbeeld 12 uur licht: 12 uur-donker). Maar circadiaanse ritmes worden endogeen gegenereerd patronen in gedrag dat een ~ 24 uur periode vertonen, en volharden in constante duisternis. Dus in de afwezigheid van een LD cyclus, de registratie en analyse van lopende wielen activiteit kanworden gebruikt om de subjectieve tijd van de dag te bepalen. Omdat deze ritmen worden geleid door de biologische klok de persoonlijke tijd van de dag wordt aangeduid als de circadiane tijd (CT). Wanneer daarentegen een LD cyclus aanwezig is, wordt de tijd van de dag die wordt bepaald door het milieu LD cyclus genoemd zeitgeber tijd (ZT).

Hoewel circadiane ritmen bij running-wheel-activiteit zijn meestal gekoppeld aan de SCN klok 6-8, kon circadiane oscillatoren in vele andere gebieden van de hersenen en het lichaam negen-veertien ook worden betrokken bij de regulatie van de dagelijkse activiteiten ritmes. Bijvoorbeeld niet dagelijks ritme in voedsel-anticiperende activiteit niet vereist dat de SCN 15,16 en in plaats daarvan, zijn gecorreleerd met veranderingen in de activiteit van extra-SCN oscillatoren 17-20. Aldus kan draaien wielen activiteit opnames een belangrijke gedragsinformatie niet alleen de uitgang van de master clock SCN, maar ook de activiteit van extra-SCN oscillators. Hieronder geven we descrIBE de apparatuur en methoden die worden gebruikt om op te nemen, te analyseren en circadiane ritmes locomotorische activiteit weer te geven in het laboratorium knaagdieren.

Protocol

1. Animal Housing

  1. Cage: Met het oog op de exploitatie-wiel activiteit van een individu knaagdier op te nemen, elke kooi moet een knaagdier en actief-wiel te huisvesten. Omdat loopwielen kan worden beschouwd als een vorm van verrijking, moeten alle knaagdieren in een studie hebben soortgelijke toegang tot een loopwiel.
  2. Beddengoed wijzigingen: Animal behandeling en veranderingen in kooien of beddengoed zijn alle niet-fotische effecten op de circadiaanse ritmes éénëntwintig-drieëntwintig, dus, kooien met mesh-vloeren zijn ideaal, omdat ze te minimaliseren contact met het dier. Niettegenstaande de beschikbaarheid van dergelijke een lade-systeem, moet beddengoed veranderingen worden vermeden tijdens kritieke fasen van een experiment. Alternatieven omvatten met langdurige beddengoed, dat maakt een meer frequente kooi vervangen of kooien op een pseudo-random schema.
  3. Isolatie Boxes: kooien worden afgezonderd gehouden dozen die zijn geluid verzwakt, licht-controlled, en goed geventileerd zijn. Afhankelijk van de grootte en configuratie van de isolatie boxen, wordt het aantal kooien In elk vak typisch variëren van 1-8. Bij de huisvesting van meerdere kooien in een isolement doos, moet men zich ervan bewust dat verschillende geuren en geluiden van andere dieren kunnen verstorende effecten op het circadiane gedrag van individuele dieren. Om deze problemen te vermijden, moet men proberen om een ​​kooi per isolatie doos te huisvesten.
  4. Ventilatie: Voldoende luchtstroom is het noodzakelijk om het maken van de dozen een comfortabele woonomgeving voor knaagdieren. De ventilator in elk vak moet hooded, teneinde te voorkomen dat licht buiten de box bereiken binnen. Ook zullen de fans het algemeen verwijdert de lucht uit de doos en blaas het in de kamer. Kleine lichtdichte openingen wordt luchtcirculatie mogelijk om de isolatie boxen te voeren vanuit verschillende punten, en helpen om ongemakkelijk wind te voorkomen. Om te controleren of er voldoende ventilatie is, de temperatuur in de isolatie box (wanneergesloten enkele uren, met de lichten) moeten nagenoeg gelijk aan de temperatuur in de ruimte waar het gehuisvest.
  5. Verlichting: Milieu lichtintensiteit moeten hetzelfde zijn in alle kooien. Schik een enkel licht op een soortgelijke locatie boven elke kooi, en gebruik altijd hetzelfde merk / type lamp. Gebruik matige intensiteit verlichting (100-300 lux) op kooi niveau. Vermijd te hoge lichtsterktes, die hebben meer kans op directe veranderingen op het gedrag toe te schrijven aan het licht in plaats van het circadiane systeem, op zich (bijvoorbeeld maskeren) te produceren.
  6. Darkness / Dim rode verlichting: Als het nodig is te hanteren of te behandelen dieren in het donker (bijv. in constante duisternis of 's nachts), nachtkijker worden gebruikt. Als alternatief, omdat het circadiane systeem relatief ongevoelig voor rode golflengten kan dim rood licht gebruikt. De specifieke rode licht u gebruikt moet worden getest om ervoor te zorgen het niet alter running-wiel activiteit (bijvoorbeeld maskeren) of stel de circadiane klok (bijv. produceren een faseverschuiving).

2. Data Collection (Zie Figuur 1 - Vitalview Hardware Configuration)

  1. Loopwielen: De diameter en de ergonomie van het loopwiel verandert de mate van gebruik 24. Dus, gebruik van kleinere en lichtere wielen voor muizen, en grotere zwaardere wielen voor ratten. Bij het wassen en het opnieuw installeren van wielen, ervoor te zorgen dat de wielen in staat zijn om een ​​onbelemmerde, niet "wiebelen", en dat de opname van micro-schakelaars worden geactiveerd door elke draai van het wiel te draaien.
  2. Microschakelaars: elke omwenteling van het loopwiel moet een magnetische of mechanische micro-schakelaar te activeren. Informatie van de micro-schakelaar wordt via een kanaal en geregistreerd door een computer die kan bin de data in de tijd (bijvoorbeeld elke 2, 5, 6 of 10 min).
  3. Computer hardware: Onze running-wheel-opnamen zijn gemaakt met Vitalview, een hardware en software platform ontwikkeld door Mini Mitter ( http://www.minimitter.com/vitalview_software.cfm ). Er zijn echter andere opname platforms zoals ClockLab, ontwikkeld door Actimetrics ( http://www.actimetrics.com/ClockLab/ ). Beide platformen samenbrengen van gegevens uit een groot aantal single-kanaals bronnen (bv een micro-schakelaar geactiveerd door een enkele loopwiel) in een digitaal dossier. Gegevens van individuele kanalen kunnen dan worden getekend en apart geanalyseerd op een later tijdstip.

3. Gegevens Recordings

  1. Bestanden: De bovengenoemde software platforms kan worden gebruikt om te scheiden out single kanalen, zodat individuele bestanden worden aangemaakt voor elke lopende wielen record. Dergelijke gegevens zijn best gevisualiseerd en stroomvorm opgenomen met speciaal designed programma's zoals ActiView (Minimitter, Bend, OR), Circadia of Clocklab (Actimetrics, Wilmette, IL), die alle kunnen produceren periodograms en actograms. Echter, single-channel-bestanden ook worden geopend en geanalyseerd met behulp van algemene spreadsheet programma's zoals Excel (Microsoft, Redmond, WA).
  2. Berekening van Circadiaanse Time (CT): CT 12 is per definitie het begin van het runnen van wielen activiteit in nachtelijke knaagdieren. Parallel met de 24-uurs dag, volgens afspraak, is een circadiane dag ingebroken in 24 circadiane uur. Daarom moet bij circadiane vrijlopende bedraagt ​​24 uur 30 min zoals gemeten door de wandklok, CT 0 zal ongeveer 12 uur 15 min later CT12.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

  1. Computerprogramma's: Specialized computer programma's worden gebruikt bij het ​​genereren van actograms en de berekening van circadiane periode. Deze programma's omvatten, maar zijn niet beperkt tot, ActiView (Minimitter, Bend, OR) en Circadia.
  2. Actograms: Actograms een grafische illustratie van de dagelijkse patronen van lopende wielen activiteit. Er zijn enkele uitgezet (x-as = 24 uur) en dubbel uitgezet (x-as = 48 uur) actograms. Beide methoden plot opeenvolgende dagen van boven naar beneden, maar dubbel uitgezet actograms perceel twee dagen op elke horizontale lijn. Specifiek dubbele uitgezet actograms tonen "tweede dag" aan de rechterzijde van elke lijn, en bij het begin van de tweede horizontale lijn, enzovoorts. Double-plotten is vooral nuttig voor niet-24 uur ritmes te visualiseren.
  3. Periodogram: A periodogram is opgebouwd uit een spectrale analyse van het loopwiel activiteit in de tijd. Periodograms de relatieve power voor een reeks vooraf ingestelde periodes, en worden vaak gebruikt om de free-running te bepalen.
  4. Resultaten: In het laboratorium knaagdieren worden meestal ondergebracht onder een 24-uurs LD cyclus. Onder deze omstandigheden het ritme van activiteit meegevoerde, zodanig dat de dagelijkse werking patroon van wielen activiteit uitgelijnd met de precieze LD 24 uur cyclus. In figuur 2A, de dubbele uitgezet actogram aan de linkerkant toont de running-wiel activiteit van een rat die actief werd op hetzelfde tijdstip iedere dag, kort na de milieu-lichten waren uitgeschakeld. De periodogram rechts toont een sterke piek bij 24 uur, in overeenstemming met entrainment een nauwkeurige LD 24 uur cyclus. Figuur 2B illustreert het loopwiel gebruik van een rat die is ondergebracht in continu donker. In dit geval is de dagelijkse begin van werking wielen activiteit trad iets later dagelijks, waardoor een rechts "drift". Deze rechts "drift" geeft aan dat de endogene circadiane periode groter than 24 uur, maar het is de piek in de periodogram dat deze periode kwantificeert. Volgens de periodogram, wordt het maximale vermogen waargenomen bij 24,33 uur. In tegenstelling tot de geautomatiseerde periodogram analyse Figuur 3 toont een methode om handmatig berekenen vrijlopende periode met de tijd van begin van werking wielen activiteit. Het is belangrijk te realiseren dat berekening van de periode met de hand te berekenen met een periodogram enigszins verschillende resultaten opleveren.
    De dagelijkse patronen van running-wiel-activiteit kan worden verstoord op verschillende manieren. Figuur 4 illustreert een aritmisch patroon van het runnen van wielen activiteit, die door een elektrolytische laesie van de SCN. Dit type experiment voorzag een aantal van het eerste bewijs dat de SCN de "master" circadiane klok 7,8 bevatte. De periodogram rechts bevestigt dit aritmische patroon van activiteit door te laten zien equivalent laag stroomverbruik voor alle periodes in het circadiane bereik (20-30 uur). De circadian patroon van running-wiel kan ook gebruik worden verstoord door woningbouw ratten in constant licht. Figuur 5 toont een actogram van een rat achtereenvolgens blootgesteld aan een aantal van de lichtomstandigheden reeds beschreven. Aanvankelijk werd de rat ondergebracht in continu donker en vertoonde een loopwiel activiteit ritme van ongeveer 24,33 uur. Ten tweede werd de milieu-licht bleef en de rat was gehuisvest in een constant verlichte omgeving. Constant licht is bekend dat de SCN-gebaseerde klok verstoren en aritmische patronen van lopende wielen activiteit, vergelijkbaar met een SCN laesie te produceren. Deze verstoring door licht treedt echter geleidelijk in de loop van 2-3 weken. Daarom, wanneer de running-wiel record wordt geanalyseerd na de eerste 3 weken in constant licht, is de periodogram niet toegeven een piek. Ten slotte in de derde fase de rat werd weer op een 12 uur: 12 uur LD cyclus en het loopwiel activiteit ritmes bijna onmiddellijk terug.
    De hoeveelheid van het runnen van, en de tijd van de dag het occurs, kunnen ook worden gemanipuleerd door omgevingsfactoren. Als bijvoorbeeld knaagdieren gevast en krijgen een tijdelijk-restricted maaltijd per dag, zal deze beperkte voerschema induceren dagelijks bout voedsel anticiperende activiteit. Het wordt "anticiperende" omdat het voorkomt vóór de komst van de dagelijkse maaltijd, en is bijzonder duidelijk wanneer de maaltijd wordt in het midden van de dag, een tijd waarin nachtelijke knaagdieren relatief inactief. Bijvoorbeeld, als een experiment biedt een 2 uur maaltijd elke dag voedsel kan worden toegevoegd aan de kooi ZT 4 (4 uur na verlichting ingeschakeld) en verwijderd ZT 6 (2 uur later). Bovendien gaas vloeren in de kooien is ook voordelig voor dit type experiment omdat het onmogelijk de ratten voedsel verstoppen en voor later slaan, waardoor de rat consumeren is eigenlijk al het voedsel binnen de voorgeschreven maaltijd. Ten slotte is een van de belangrijkste voordelen van een nauwkeurige werking wielen activiteit opname is dat het zorgt voor samenhangs worden gemaakt tussen lopende wielen activiteit en dagelijks oscillaties in de expressie van circadiane klok genexpressie in de hersenen en het lichaam.
  5. Vaak valkuilen:
    1. Veel software platformen automatisch aanpassen aan zomertijd. Bij het uitvoeren van een experiment op het moment van de jaarlijkse tijd verandert, moet u deze optie is uitgeschakeld in de opnamesoftware en de computer besturingssysteem. Deze beveiliging moet helpen voorkomen dat verschillen tussen de opname en het externe licht cyclus.
    2. Om te kunnen controleren op onregelmatigheden in de gegevens of onverwachte veranderingen in gedrag, houden een tekstbestand met de precieze tijd en datum van elke doos openen, voederen en drenken, beddengoed veranderingen, experimentele manipulaties, en alle andere storingen die zich kunnen voordoen. De precieze begin-en eindtijd van de gegevensregistratie moet worden opgemerkt in dit bestand.
    3. Het is belangrijk om regelmatig te controleren of de lichten aan-en uitzetten van eent de verwachte tijd. Veel problemen kunnen optreden, met inbegrip stroomuitval en uitgebrande lampen. Sommige running-wheel-platforms zijn uitgerust met licht-sensoren, maar anderen niet verifiëren lichtomstandigheden.

Figuur 1
Figuur 1. Vitalview De hardwareconfiguratie begint met een knaagdier loopwiel, die is ontworpen om een micro-schakelaar met elke omwenteling activeren. Deze informatie vervolgens naar de QA4 modules en wordt doorgegeven aan de DP24 dataport en uiteindelijk wordt opgenomen door de Vitalview uitgeruste computer. De computer vat lopen-wiel omwentelingen van elk kanaal om de 10 min., deze gegevens kunnen later worden gezien als een actogram of periodogram. Afhankelijk van hoe de lichten zijn ingesteld, kunnen ze op afstand gecontroleerd moeten worden door dezelfde VitalviewUitgeruste computer of door wand timers gekocht van een elektronica winkel.

Figuur 2
Figuur 2 Representatieve actograms en periodograms voor mannelijke Wistar ratten ondergebracht in een 12 uur:. LD 12 uur cyclus (A) en in continu donker (B). Dubbelklik uitgezet actograms (linker kolom) illustreren de lichtomstandigheden aan de bovenkant, 48 uur van het runnen van wielen activiteit langs de X-as en plot opeenvolgende dagen van boven naar beneden. Periodograms (rechterkolom) uitvoeren van een spectrale analyse van het loopwiel data weergegeven in de actograms. Figuur 1A toont het gedrag van een rat die is gehuisvest onder een 24 uurs cyclus LD. Onder deze condities actief rat op hetzelfde tijdstip, met een exacte 24 uur piek in de periodogram. Figuur 1B toont het gedrag van een rat die is ondergebracht in continu donker. Onder Thes e voorwaarden van de rat actief was iets later elke dag, vandaar de naar rechts drift in de actogram en 24.33 uur piek in de periodogram.

Figuur 3
Figuur 3. Periode kan ook worden geëxtrapoleerd hand. Teken eerst een lijn van best-fit op basis van de dagelijkse intreden van de werking (rode lijn). Volgende berekenen van de helling in uur / dag, bedenk dan dat als het ritme is <24 uur de helling zal een negatieve waarde zijn, en voeg ten slotte 24 uur. Deze procedure zal een schatting geven van de circadiane periode voor dat dier. In dit geval vier dagen hr/10 suggereert dat het dier gezien worden ongeveer 0,4 uur later per dag (helling 0,4 uur / dag). Daarom is de circadiane bedraagt ​​ongeveer 24,4 uur (of ongeveer 24 uur en 24 min). Iedere manipulatie die is gepland volgens CT heeft vrijlopende periode een accurate voorspelling van CT.

ENT "fo: keep-together.within-page =" always "> Figuur 4
Figuur 4. Elektrolytische laesies van de SCN zal produceren aritmische patronen van lopende wielen activiteit. In dit geval wordt de rat is ondergebracht onder constante duisternis en, omdat de "master" circadiane klok is gelaedeerde, de rat niet om aan te tonen een endogene circadiane ritme in werking wielen activiteit. De periodogram rechts bevestigt dat er geen significante ritme in het circadiane bereik.

Figuur 5
Figuur 5. Lichtomstandigheden hebben een sterke invloed op de patronen van loopwiel activiteit. In dit record wordt de rat aanvankelijk gehuisvest onder constante duisternis (DD), zoals aangegeven door het gearceerde deel van de record. Onder deze conditiop, de circadiane klok drijft een circadiaan ritme in rijklare-wheel-activiteit met een periode van 24,33 uur, blijkt uit de periodogram (rechts boven). Vervolgens wordt de rat zich onder constant licht (LL), zoals aangegeven door het witte gedeelte van de actogram. Onder deze voorwaarde de endogene biologische klok geleidelijk verstoord gedurende 2-3 weken, en zoals blijkt uit de periodogram (midden rechts) de rat wordt aritmische. Ten slotte is de normale 12 uur: 12 uur LD-cyclus werd hersteld en de werking wielen activiteit ritme werd gerestaureerd met een nauwkeurige 24-uurs ritme, zoals blijkt uit de periodogram (rechtsonder).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Monitoring dagelijkse activiteiten ritme met loopwielen is de meest gebruikte en betrouwbare methode om de uitvoer van het master circadiane klok in nachtelijke knaagdieren. Wiel lopende activiteit echter slechts een van de vele aspecten van gedrag en fysiologie die continu kan worden bewaakt. Hoewel de overgrote meerderheid van running wielen activiteit plaatsvindt tijdens de nacht, dan 30% van de totale waakzaamheid overdag optreedt 25,26. Andere eindpunten kunnen worden gebruikt om circadiaanse ritmes, met inbegrip van de algemene activiteit, voeding-bin benaderingen, drinken, slapen, en de lichaamstemperatuur te beoordelen. Dus afhankelijk van de aard van de studie kan onderzoekers tegelijk opnemen verschillende ritmes.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Geen belangenconflicten verklaard.

Acknowledgments

De auteurs willen graag salaris awards, apparatuur subsidies, en operationele fondsen erkennen van het Fonds de la recherche en sante Quebec (FRSQ), Canadese Institutes of Health Research (CIHR), het Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (NSERC), en de Concordia University Research Chairs Program (cruc), alsook de doordachte feedback over deze manuscript van Dr Jane Stewart.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Vitalview Card & Software Mini Mitter #855-0030-00 (Bend, OR, USA)
DP24 Dataport Mini Mitter #840-0024-00 (Bend, OR, USA)
QA4-Module Mini Mitter #130-0050-00 (Bend, OR, USA)
Magnetic Switch Mini Mitter #130-0015-00 (Bend, OR, USA)
C-50 Cable assembly Mini Mitter #060-0045-10 (Bend, OR, USA)
Rat running wheel assembly Mini Mitter #640-0700-00 (Bend, OR, USA)
Cage and tray support Mini Mitter #640-0400-00 (Bend, OR, USA)
Useable cut away cage Mini Mitter #664-2154-00 (Bend, OR, USA)
Grid floor for cage Mini Mitter #676-2154-00 (Bend, OR, USA)
Waste tray Mini Mitter #684-2154-00 (Bend, OR, USA)
Lamp housing Microlites Scientific #R-101 (Toronto, ON, Canada)
4W Fluorescent lamps Microlites Scientific #F4T5/CW (Toronto, ON, Canada)
Isolation chambers Custom built 28"H x 20"W x 28"D ½" Black Melamine.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. V. Pacemaker Structure: A Clock for All Seasons. J. Comp. Physiol. 106, 333-355 (1976).
  2. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. IV. Entrainment: Pacemaker as Clock. J. Comp. Physiol. 106, 291-331 (1976).
  3. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. III. Heavy Water and Constant Light: Homeostasis of Frequency? J. Comp. Physiol. 106, 267-290 (1976).
  4. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. II. The Variability of Phase Response Curves. J. Comp. Physiol. 106, 253-266 (1976).
  5. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. I. The Stability and Lability of Spontaneous Frequency. J. Comp. Physiol. 106, 223-252 (1976).
  6. Ralph, M. R., Foster, R. G., Davis, F. C., Menaker, M. Transplanted suprachiasmatic nucleus determines circadian period. Science. 247, 975-978 (1990).
  7. Moore, R. Y., Eichler, V. B. Loss of a circadian adrenal corticosterone rhythm following suprachiasmatic lesions in the rat. Brain Res. 42, 201-206 (1972).
  8. Stephan, F. K., Zucker, I. Circadian rhythms in drinking behavior and locomotor activity of rats are eliminated by hypothalamic lesions. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 69, 1583-1586 (1972).
  9. Abe, M., et al. Circadian rhythms in isolated brain regions. J. Neurosci. 22, 350-356 (2002).
  10. Yamazaki, S., et al. Resetting central and peripheral circadian oscillators in transgenic rats. Science. 288, 682-685 (2000).
  11. Lamont, E. W., Robinson, B., Stewart, J., Amir, S. The central and basolateral nuclei of the amygdala exhibit opposite diurnal rhythms of expression of the clock protein Period2. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 4180-4184 (2005).
  12. Amir, S., Lamont, E. W., Robinson, B., Stewart, J. A circadian rhythm in the expression of PERIOD2 protein reveals a novel SCN-controlled oscillator in the oval nucleus of the bed nucleus of the stria terminalis. J. Neurosci. 24, 781-790 (2004).
  13. Yoo, S. H., et al. PERIOD2::LUCIFERASE real-time reporting of circadian dynamics reveals persistent circadian oscillations in mouse peripheral tissues. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 5339-5346 (2004).
  14. Guilding, C., Piggins, H. D. Challenging the omnipotence of the suprachiasmatic timekeeper: are circadian oscillators present throughout the mammalian brain? Eur. J. Neurosci. 25, 3195-3216 (2007).
  15. Boulos, Z., Terman, M. Food availability and daily biological rhythms. Neurosci. Biobehav. Rev. 4, 119-131 (1980).
  16. Boulos, Z., Rosenwasser, A. M., Terman, M. Feeding schedules and the circadian organization of behavior in the rat. Behav. Brain Res. 1, 39-65 (1980).
  17. Verwey, M., Amir, S. Food-entrainable circadian oscillators in the brain. Eur. J. Neurosci. 30, 1650-1657 (2009).
  18. Davidson, A. J., Poole, A. S., Yamazaki, S., Menaker, M. Is the food-entrainable circadian oscillator in the digestive system? Genes Brain Behav. 2, 32-39 (2003).
  19. Hara, R., et al. Restricted feeding entrains liver clock without participation of the suprachiasmatic nucleus. Genes Cells. 6, 269-278 (2001).
  20. Damiola, F., et al. Restricted feeding uncouples circadian oscillators in peripheral tissues from the central pacemaker in the suprachiasmatic nucleus. Genes Dev. 14, 2950-2961 (2000).
  21. Mrosovsky, N. Phase response curves for social entrainment. J. Comp. Physiol. A. 162, 35-46 (1988).
  22. Cain, S. W., et al. Reward and aversive stimuli produce similar nonphotic phase shifts. Behav. Neurosci. 118, 131-137 (2004).
  23. Antle, M. C., Mistlberger, R. E. Circadian clock resetting by sleep deprivation without exercise in the Syrian hamster. J. Neurosci. 20, 9326-9332 (2000).
  24. Banjanin, S., Mrosovsky, N. Preferences of mice, Mus musculus, for different types of running wheel. Lab Anim. 34, 313-318 (2000).
  25. Verwey, M., Lam, G. Y., Amir, S. Circadian rhythms of PERIOD1 expression in the dorsomedial hypothalamic nucleus in the absence of entrained food-anticipatory activity rhythms in rats. Eur. J. Neurosci. 29, 2217-2222 (2009).
  26. Gooley, J. J., Schomer, A., Saper, C. B. The dorsomedial hypothalamic nucleus is critical for the expression of food-entrainable circadian rhythms. Nat. Neurosci. 9, 398-407 (2006).
Registratie en analyse van circadiane ritmen bij Running-wheel activiteit in knaagdieren
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Verwey, M., Robinson, B., Amir, S. Recording and Analysis of Circadian Rhythms in Running-wheel Activity in Rodents. J. Vis. Exp. (71), e50186, doi:10.3791/50186 (2013).More

Verwey, M., Robinson, B., Amir, S. Recording and Analysis of Circadian Rhythms in Running-wheel Activity in Rodents. J. Vis. Exp. (71), e50186, doi:10.3791/50186 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter