Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

सेप्टिक गठिया के अनुदैर्ध्य मूल्यांकन के लिए एमआर लक्षित कंट्रास्ट एजेंट का उपयोग इन विवो मैक्रोफेज इमेजिंग में

Published: October 20, 2013 doi: 10.3791/50296

Summary

हम बृहतभक्षककोशिका एमआर इमेजिंग की अनुमति, सेप्टिक गठिया में ultrasmall superparamagnetic विपरीत एजेंट (USPIO) का उपयोग करते हुए प्रदर्शन करने के लिए प्रदर्शन कैसे एक प्रारंभिक और अनुदैर्ध्य

Abstract

मैक्रोफेज दीक्षा, विकास और बैक्टीरिया के संक्रमण को भड़काऊ प्रतिक्रिया के नियमन में मुख्य सेल हैं. मैक्रोफेज अधिकता और तेजी से संक्रमण के प्रारंभिक चरणों से सेप्टिक जोड़ों में भर्ती कर रहे हैं और घुसपैठ रोगजनकों के कुशल हटाने के प्राप्त होने के बाद वापसी करने वाली है. चिकित्सा की तीव्र synovitis और निगरानी का जल्दी पता लगाने: एक संक्रमित संयुक्त में विवो बृहतभक्षककोशिका गतिविधि में पहचान करने की क्षमता इसलिए दो मुख्य आवेदन पत्र प्रदान कर सकते हैं.

विवो में मैक्रोफेज के noninvasive पता लगाने ऐसे ultrasmall superparamagnetic लोहे के आक्साइड (USPIO) के रूप में लोहे के नैनोकणों उपयोग चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग के साथ प्रदर्शन किया जा सकता है. Intravascular या intraarticular प्रशासन के बाद, USPIO विशेष रूप से अपने चुंबकीय गुणों के कारण सक्रिय मैक्रोफेज, और, द्वारा phagocytized रहे हैं, बृहतभक्षककोशिका घुसपैठ पेश ऊतकों में संकेत परिवर्तन प्रेरित. एक मात्रात्मककणों इंजेक्शन ऊतक के भीतर लोहे की राशि के साथ सहसंबद्ध है और इसलिए USPIO से भरी हुई कोशिकाओं की संख्या को दर्शाता है के बाद संकेत हानि के साथ क्षेत्र (अंधेरे पिक्सेल की संख्या) ढाल गूंज एमआर छवियों पर मनाया के रूप में घुसपैठ की ई मूल्यांकन, संभव है.

हम की अनुमति, सेप्टिक गठिया के एक पशु मॉडल में USPIO बढ़ाया एमआर इमेजिंग का उपयोग बृहतभक्षककोशिका इमेजिंग प्रदर्शन करने के लिए यहाँ एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत मैक्रोफेज घुसपैठ और चिकित्सा कार्रवाई के एक आकलन के vivo noninvasive मूल्यांकन में एक प्रारंभिक और अनुदैर्ध्य.

Introduction

चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) अपनी उच्च स्थानिक संकल्प और कोमल ऊतकों के विपरीत होने के कारण संक्रामक synovitis के प्रदर्शन के लिए पसंद की इमेजिंग साधन माना जाता है. वाहिकाप्रसरण और angiogenesis 1 से बढ़ा vascularity कारण histologically निष्कर्षों के साथ संगत गठिया कम T1 और बाह्य पानी की मात्रा की वृद्धि की उपस्थिति दर्शाती उच्च टी 2 संकेत, और gadolinium आधारित विपरीत एजेंट प्रशासन के बाद एक उल्लेखनीय वृद्धि में एमआरआई पर मनाया सिग्नल परिवर्तन,. फिर भी, एमआरआई अक्सर लगातार वृद्धि बढ़े बाह्य अंतरिक्ष के हठ (दानेदार ऊतक, तंतुमय निशान) 2 के कारण चिकित्सकीय और जैविक रूप से चंगा सेप्टिक गठिया के रोगियों के जोड़ों में मनाया जा सकता है के रूप में एंटीबायोटिक उपचार के दौरान संक्रमण का संकल्प प्रदर्शित करने में असमर्थ है. बाह्य परिवर्तन के अलावा, मैक्रोफेज की एक गहन भर्ती सहित भड़काऊ कोशिकाओं बड़े पैमाने में घुसपैठश्लेषक fected. मैक्रोफेज जीवाणु संक्रमण 3 की तीव्र और जीर्ण अवस्था दोनों में एक प्रमुख भूमिका निभाते हैं. बृहतभक्षककोशिका प्रेरित सूजन 4 शुरू करने के लिए मरम्मत को रोकने के रूप में लंबे परिगलित ऊतकों नहीं हटा रहे हैं के रूप में बनी हुई है, क्योंकि वे रोगजनक सूक्ष्मजीवों के उन्मूलन के लिए आवश्यक भड़काऊ प्रतिक्रिया को प्रेरित, और सूजन संकल्प समन्वय. इस प्रकार, कुशल उपचार के बाद संक्रमित श्लेषक भीतर बृहतभक्षककोशिका घुसपैठ की कमी संक्रमण के संकल्प का एक विश्वसनीय संकेत हो सकता है. सेलुलर इमेजिंग वैकृत ऊतक के अंदर विशिष्ट सेलुलर घुसपैठ प्रदर्शित करने में सक्षम है. विशिष्ट बृहतभक्षककोशिका एमआर इमेजिंग विपरीत एजेंट व्यापक रूप से जांच की गई है लक्षित का उपयोग करते हुए और संयुक्त सूजन या संक्रमण 5-7 प्रदर्शित करने के लिए अपनी क्षमता का प्रदर्शन किया. नसों में इंजेक्शन के बाद, ऐसी USPIO (ultrasmall superparamagnetic लोहे के आक्साइड) कणों के रूप में इस तरह के लक्ष्य विपरीत एजेंटों, ऐसे मैक्रोफेज रूप phagocytic कोशिकाओं द्वारा हाथ में लिया और कर रहे हैंअपने चुंबकीय गुणों के कारण, बृहतभक्षककोशिका घुसपैठ 8 पेश ऊतकों में संकेत परिवर्तन प्रेरित. अनुदैर्ध्य उन एमआर संकेत परिवर्तन चिकित्सा के अनुवर्ती बृहतभक्षककोशिका घुसपैठ के vivo noninvasive मूल्यांकन में एक के लिए अनुमति देता है, और USPIO लोड-मैक्रोफेज संबंधित संकेत परिवर्तन की कमी चिकित्सा सफलता का प्रदर्शन होगा. इस रिपोर्ट का उद्देश्य noninvasively श्लेषक भीतर बृहतभक्षककोशिका घुसपैठ की कमी का प्रदर्शन द्वारा सेप्टिक गठिया की निगरानी के लिए बृहतभक्षककोशिका एमआर इमेजिंग प्रदर्शन करने के लिए मौजूद है.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

पशु विषयों को शामिल सभी प्रक्रियाओं विश्वविद्यालय अस्पताल संस्थागत पशु की देखभाल समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है.

1. Intraarticular बैक्टीरियल टीका

  1. इंजेक्शन से पहले, निर्माता spinae मांसपेशियों के भीतर xylazine (4 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ मिश्रित ketamine के इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन (30 मिग्रा / शरीर के वजन के प्रति किलो) के माध्यम से खरगोश anesthetize. जानवरों वे पंजा चुटकी का जवाब असफल कि जाँच के द्वारा पूरी तरह से anesthetized हैं सुनिश्चित करें. इस प्रोटोकॉल संयुक्त घुटने की intraarticular इंजेक्शन के लिए पर्याप्त संज्ञाहरण प्रदान करता है. संज्ञाहरण के दौरान ऑक्सीजन मास्क के तहत जानवरों रखें.
  2. 'जानवरों घुटने दाढ़ी. Povidone आयोडीन समाधान के आवेदन के बाद povidone आयोडीन साफ़ और शराब के 3 बारी पोंछे से सड़न रोकनेवाला इंजेक्शन के लिए घुटने की तैयारी.
  3. मैन्युअल रूप में दिखाया गया एक बाँझ सुई टोपी या एक बाँझ जांच का उपयोग घुटने के पूर्वकाल पहलू पर एक लोचदार संरचना के रूप में patellar कण्डरा पहचान.
  4. 10 6 के एक एकाग्रता यूएफसी / एमएल स्ताफ्य्लोकोच्चुस की एक जीवाणु निलंबन (न्यूमन तनाव) के 1 मिलीलीटर के साथ प्रत्येक घुटने इंजेक्षन. प्रतिरोध के बिना एक इंजेक्शन की सुई की नोक के intraarticular स्थान की पुष्टि करता है.
  5. इंजेक्शन प्रक्रियाओं के बाद, गर्मी के नुकसान से बचने और छाती के आंदोलन को देख कर सांस की दर पर नजर रखने के लिए संवहनी स्रोत के तहत पशु रहते हैं. एक बार जाग, भोजन और पानी के लिए स्वतंत्र पहुँच के साथ पिंजरों में जानवरों को रखने के लिए.
  6. 0.1 मिलीग्राम / किलो buprenorphine हर 8 घंटे की एक इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन प्रशासन द्वारा दर्द प्रबंधन.
  7. चिकित्सकीय भोजन और पानी, वजन घटाने, तापमान, और सामान्य व्यवहार की खपत की मात्रा की निगरानी, ​​प्रत्येक दिन खरगोश पालन.
  8. छवि को संक्रमण की तीव्र चरण के रूप में जल्द ही पहले एमआर इमेजिंग सत्र प्रदर्शनएक पशु पर्याप्त वजन घटाने प्रस्तुत के रूप में (10%), आम तौर पर इस बारे में 2 दिनों के बाद होता है.
  9. नसों में दवा प्रशासन एमआरआई परीक्षा से पहले की आवश्यकता है, एक auricular शिरापरक एक्सेस (cf. नीचे) स्थापित किया जा सकता है.

2. एमआरआई परीक्षा

इमेजिंग जानवरों रहते हैं, एक सावधान पशु स्थापना जानवर आराम और इष्टतम संज्ञाहरण सुनिश्चित करने के लिए एक प्रमुख विशेषता है. यह सबसे अच्छा इमेजिंग परिणामों के लिए अनुमति देते हैं और अनुदैर्ध्य अध्ययन के लिए एक प्रजनन छवि अधिग्रहण सुनिश्चित करेगा. जानवर के आकार के कारण, एक नैदानिक ​​आकार एमआर इकाई (1.5 टी या 3 टी) के उपयोग के लिए सबसे उपयुक्त है. यह खरगोश घुटने के अन्वेषण के लिए उपयुक्त संकल्प और इसके विपरीत करने के लिए शोर अनुपात प्रदान करता है के रूप में 8 चैनल नैदानिक ​​घुटने का तार प्रयोग किया जाता है.

  1. इमेजिंग प्रणाली पर स्थापना से पहले, एक auricular नस के माध्यम से एक परिधीय शिरापरक उपयोग स्थापित करें. इस पहुँच विपरीत एजेंट इंजेक्षन की सेवा करेंगे.
    1. दाढ़ी और कान कीटाणुरहित.
    2. पार्श्व auricular नस के अंदर एक 25 जी कैथेटर डालें.
    3. 1 मिलीलीटर बाँझ शारीरिक सीरम का इंजेक्शन द्वारा पारगम्यता का आकलन करें.
    4. चिपकने वाला टेप के साथ कैथेटर बनाए रखें.
  2. Xylazine (4 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ मिश्रित ketamine के इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शन (30 मिग्रा / शरीर के वजन के प्रति किलो) के माध्यम से पशुओं anesthetize. वे पंजा चुटकी का जवाब असफल एक बार पशु पूरी तरह anesthetized हैं. 200 मिलीग्राम / मिनट की एक प्रवाह दर के साथ यह ऑक्सीजन देने, खरगोश पर एक चेहरे का मुखौटा रखें.
  3. एक बार पूरी तरह से anesthetized, एमआर इमेजिंग यूनिट के लिए पशुओं को ले. जगह जानवरों तो घुटनों एमआर कुंडली के केंद्र में स्थित हैं. टिबिया की लंबी अक्ष एमआर इमेजिंग इकाई तालिका के समानांतर है, जिससे कि पूरा विस्तार में 'जानवरों के पैर रखें. इष्टतम पैर की स्थिति बनाए रखने के लिए वेल्क्रो फास्टनरों या रेत बैग का प्रयोग करें.
  4. पशुओं के हृदय सांस की निगरानी के रूप में की आवश्यकता नहीं हैसंज्ञाहरण प्रोटोकॉल सहज श्वास पर गहरी संज्ञाहरण की अनुमति देता है, लेकिन जानवरों संज्ञाहरण प्रेरित गर्मी के नुकसान से बचने के लिए कवर किया जाना है.
  5. एमआर प्रोटोकॉल तालिका 1 में विस्तृत है. इष्टतम स्थापना सहित कुल अधिग्रहण के लिए औसत समय 20 मिनट के बारे में है.
  6. विभिन्न विमानों में एमआर इमेजिंग प्रदर्शन करना. यह अनुक्रमिक अनुदैर्ध्य परीक्षाओं के लिए छवि स्थिति की शारीरिक reproducibility सुनिश्चित करता है और histologic स्लाइस के साथ इष्टतम सहसंबंध की अनुमति देता है फिर भी, घुटनों की अनुप्रस्थ विमान (टिबिया के orthogonal) संदर्भ योजना है.
  7. Unenhanced दृश्यों के पूरा होने पर, चुपचाप कान मे कहा शिरापरक उपयोग के माध्यम से UPSIO विपरीत एजेंट इंजेक्षन. धीरे धीरे 150 μmol फ़े / किलो की एक खुराक में आयरन ऑक्साइड के कणों प्रशासन. बाँझ शारीरिक सीरम के 1 मिलीग्राम के इंजेक्शन से कैथेटर कुल्ला.
  8. इंजेक्शन के बाद बढ़ाया जीआरई भारित अनुक्रम 24 घंटा दोहराएँ. इस देरी के कणों से phagocytized की अनुमति देता हैमैक्रोफेज.
  9. दवाओं के प्रभाव (एंटीबायोटिक दवाओं, स्टेरॉयड, विरोधी बृहतभक्षककोशिका एंटीबॉडी, आदि.) का मूल्यांकन अनुदैर्ध्य अध्ययन के लिए, ऊपर वर्णित प्रोटोकॉल का उपयोग अनुक्रमिक एमआर परीक्षाओं दोहराएँ.

3. छवि विश्लेषण

  1. अनुदैर्ध्य मूल्यांकन के लिए एक ही शारीरिक स्तर पर मापन प्रदर्शन, और एक को आसानी से पहचाना ऐतिहासिक परिभाषित. उदाहरण के लिए, पटेला की सबसे बड़ी व्यास मनाया जाता है जहां अक्षीय विमान के माध्यम से अधिग्रहण प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य माप (चित्रा 1) प्राप्त करने के लिए एक विश्वसनीय तरीका है.
  2. एक DICOM आधारित सॉफ्टवेयर (जैसे Osirix) के रूप में या एक छवि संसाधन सॉफ्टवेयर (ImageJ) का उपयोग कर छवि विश्लेषण करते हैं.
  3. ImageJ सॉफ्टवेयर का प्रयोग, "अनियमित क्षेत्र" ड्राइंग उपकरण का उपयोग USPIO बढ़ाया जीआरई टी 2 भारित छवि पर संकेत हानि दर्शाता है कि श्लेष क्षेत्र का विभाजन करते हैं. अंधेरे संकेत के साथ synovium उल्लिखित है, एक बार / क्षेत्र प्राप्त करने के लिए "विश्लेषण" पर क्लिक करेंपिक्सेल की संख्या (चित्रा 2).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Unenhanced छवियों पर, संक्रमित घुटनों के synovium फीमर और वुटने की चक्की कम संकेत संरचनाओं (चित्रा 1) के रूप में दिखाई देते हैं, जबकि मुलायम ऊतकों आसपास से अलग पहचाना गैर है कि मध्यवर्ती संकेत की एक फैलाना सूजन प्रस्तुत करता है.

USPIO बढ़ाया छवियों पर, विपरीत एजेंट प्रशासन के बाद 24 घंटा, USPIO लोड मैक्रोफेज युक्त श्लेष क्षेत्र संकेत हानि (आंकड़े 1 और 2) का प्रदर्शन करेंगे.

Synovium भीतर बृहतभक्षककोशिका घुसपैठ विशिष्ट immunostaining (चित्रा 3) का उपयोग करते हुए प्रदर्शन किया जा सकता है. दाग पर्ल्स 'प्रशिया नीले नीले डॉट्स (चित्रा 4) के रूप में दिखाई देते हैं, जो लोहे के कणों का पता लगा सकते हैं.

जीआरई टी 2 भारित
पुनरावृत्ति समय (मिसे) 450
इको समय (मिसे) 4 कोण पलटें 30
टर्बो कारक
फैट दमन
टुकड़ा मोटाई (मिमी) 1.5
अंतराल की खाई 0
देखने के फील्ड (मिमी) 70
मैट्रिक्स 448 एक्स 360
बैंडविड्थ 80
सिग्नल का अधिग्रहण 2
लंबाई स्कैन 3'10

तालिका 1. एक 3T एमआर इकाई पर जीआरई टी 2 भारित एमआर अनुक्रम के मापदंडों का उदाहरण है.

चित्रा 1
चित्रा 1. गंभीर पर एक खरगोश घुटने का अक्षीय जीआरई टी 2 भारित छवियोंछवियाँ पटेला के स्तर (पी) और फीमर (च) में प्राप्त कर रहे हैं, (ए) और 24 घंटे USPIO का (बी) intravascular प्रशासन के बाद से पहले संक्रमण के चरण,. Unenhanced छवि पर (ए), synovium गाढ़ा है (तीर) और आसपास के कोमल ऊतकों से अस्पष्ट एक समरूप मध्यवर्ती संकेत प्रस्तुत करता है. USPIO प्रशासन के बाद (बी), synovium USPIO लोड मैक्रोफेज की उपस्थिति के कारण बड़े पैमाने पर अंधेरे संकेत के एक बैंड की तरह क्षेत्र (नोक) के रूप में अब प्रकट होता है. (अनुमति के साथ Lefèvre एस एट अल. 9 से reprinted).

चित्रा 2
चित्रा 2. विभाजन और ImageJ का उपयोग संकेत हानि प्रस्तुत कि श्लेष क्षेत्र का दृढ़ संकल्प.


चित्रा 3. विशिष्ट बृहतभक्षककोशिका immunostaining के सूक्ष्मदर्शीफ़ोटोग्राफ़ संक्रमित synovium (तीर) के भीतर मैक्रोफेज की तीव्र घुसपैठ को दर्शाता है. (रैम 11 immunostaining, मूल बढ़ाई 40X).

चित्रा 4
चित्रा 4. सूक्ष्मदर्शीफ़ोटोग्राफ़ (पर्ल्स 'प्रशिया नीला दाग, मूल बढ़ाई 40X) USPIO लोड मैक्रोफेज (तीर) को correspondig कई नीले दाग कोशिकाओं से पता चलता है. (अनुमति के साथ Lefèvre एस एट अल. 9 से पुनर्प्रकाशित).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

अविशिष्ट gadolinium आधारित विपरीत एजेंटों बाह्य अंतरिक्ष की मात्रा और छिड़काव के बारे में जानकारी प्रदान करते हैं, USPIO बढ़ाया एमआर द्वारा बृहतभक्षककोशिका इमेजिंग ऊतक नमूना 9 की आवश्यकता के बिना एक सटीक संरचनात्मक स्थानीयकरण और संक्रमित synovium भीतर बृहतभक्षककोशिका घुसपैठ की एक गुणात्मक मूल्यांकन की अनुमति देता है. उनके उच्च संवेदनशीलता के कारण, USPIO भी सूक्ष्म सेलुलर संक्रमण के प्रारंभिक चरणों में उपस्थित घुसपैठ का प्रदर्शन कर सकते हैं. रोगजनकों उत्तरोत्तर हटा रहे हैं के रूप में सफल एंटीबायोटिक चिकित्सा के तहत, इस घुसपैठ synovium भीतर USPIO तेज की कमी करने के लिए अग्रणी, कम करने के लिए माना जाता है. अंधेरे संकेत के क्षेत्र tissular लौह सामग्री के लिए जोड़ा जाता है के रूप में, USPIO प्रशासन के बाद श्लेष संकेत एक biomarker, अनुदैर्ध्य मूल्यांकन 10 हो सकता है कि सेलुलर घुसपैठ की एक मात्रात्मक प्रतिनिधित्व के रूप में माना जा सकता है. इसके अलावा, और इस तरह के विकल्प के रूप में अन्य इमेजिंग रूपात्मकता के विपरीतराजनैतिक इमेजिंग या समस्थानिक इमेजिंग, सेलुलर एमआर इमेजिंग कोशिकाओं से संबंधित संकेत परिवर्तन की सटीक स्थानीयकरण की अनुमति है कि उच्च संकल्प शारीरिक छवियों को उत्पन्न करने की क्षमता है.

मैक्रोफेज इमेजिंग ऊतक नमूने की आवश्यकता के बिना सेल उपस्थिति और हित के ऊतक के भीतर वितरण के आकलन की अनुमति देता है. इसलिए यह देशी ऊतक सामान्य जीव विज्ञान के invasiveness और संशोधन कर रहे हैं कि इन विवो जैविक अध्ययन में में अक्सर आवश्यक दोहराया ऊतक नमूने के दो मुख्य कमियों से बचा जाता है. इसके अलावा, अनुक्रमिक ऊतक नमूना अनुदैर्ध्य मूल्यांकन precluding, दोहराया तनावपूर्ण प्रक्रियाओं को बर्दाश्त नहीं है कि छोटे जानवरों में संभव नहीं हो सकता है. इसके विपरीत, अनुक्रमिक USPIO बढ़ाया एमआर स्कैनिंग आसानी Nonin के मॉडल में विरोधी भड़काऊ चिकित्सा, संक्रामक रोगों में एंटीबायोटिक चिकित्सा के अनुदैर्ध्य निगरानी के लिए छोटे जानवरों के लिए लागू किया जा सकता का उपयोग कर एक ऊतक के भीतर बृहतभक्षककोशिका सामग्री के अनुवर्ती vivo इमेजिंग मेंfectious गठिया, या किसी भी मैक्रोफेज-शामिल रोगों में उपचार के.

ब्याज की मॉडल (गठिया, सेप्टिक synovitis, आदि.) को चुना जाता है, तो इसके विपरीत एजेंट प्रशासन आसानी से धीमी intravascular इंजेक्शन के माध्यम से प्रदर्शन किया और सामान्य में तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण नहीं है. है USPIO विपरीत एजेंट का उपयोग कर एमआर सेलुलर इमेजिंग की मुख्य सीमा 24 घंटा इंजेक्शन, 5-7 मैक्रोफेज द्वारा विशिष्ट phagocytosis की अनुमति इस देरी स्कैनिंग दोहराया के लिए की जरूरत है. इसलिए, तुलनीय इमेजिंग डेटा के क्रम में, एमआर इकाई के भीतर एक सटीक पशु स्थापना अनिवार्य है. हमारे अनुभव में, हम अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और तुलनीय छवियों की अनुमति चिपकने वाला टेप से प्राप्त कम पैर पूर्ण विस्तार के साथ जुड़े एमआर कुंडल भीतर प्रवण स्थिति में है कि जानवरों की स्थापना मनाया.

हम उनके प्राकृतिक का लाभ ले रही है, आसानी से USPIO साथ विवो मैक्रोफेज में लेबल करने के लिए कैसे इस रिपोर्ट में प्रस्तुतphagocytic गतिविधि. एक अतिरिक्त प्रारंभिक पूर्व vivo प्रक्रिया के लिए आवश्यक हो सकता है यहां तक कि अगर (नहीं प्राकृतिक phagocytic कोशिकाओं में विपरीत एजेंट के प्रवेश की अनुमति देने के लिए), इस तरह के लौह ऑक्साइड के कणों के रूप में अत्यधिक संवेदनशील एमआर विपरीत एजेंट के साथ सेल लेबलिंग polymorphonuclear, ऐसे लिम्फोसाइटों के रूप में अन्य प्रकार की कोशिकाओं के लिए लागू किया जा सकता है ल्यूकोसाइट्स, या मस्तूल कोशिकाओं. सेलुलर एमआर इमेजिंग इसलिए संक्रमण से संबंधित सूजन में शामिल सभी प्रकार की कोशिकाओं के अनुक्रमिक भर्ती की noninvasively जांच के लिए एक बहुत ही दिलचस्प उपकरण हो सकता है, और सामान्य के प्रभाव के रूप में अच्छी तरह से सेल लक्षित चिकित्सा का मूल्यांकन करने के लिए.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.

Acknowledgments

हम ईमानदारी से वीडियो उत्पादन और संपादन में सहायता के लिए एफ Bierry धन्यवाद.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
P904 Guerbet Dose: 150 μmol Fe/kg
Ketamine (500 mg/ml ketamine) Virbac Dose: 30 mg/kg
Rompun (20 mg/ml Xylazine) Axience Dose: 4 mg/kg
Buprenorphine Vetoquinol Dose: 0.1 mg/kg/8 hr
BD 22 G, 1 inch BD Biosciences 381423
BD 25 G, 5/8 inch BD Biosciences 305122

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Madri, J. Inflammation and healing. Anderson's Pathology. Kissane, J. , 67-110 (1990).
  2. Sephel, G., Woodward, S. Repair, regeneration, and fibrosis. Rubin's Pathology. Rubin, R., Strayer, D. , 5th ed, Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. 71-98 (2008).
  3. Verdrengh, M., Tarkowski, A. Role of macrophages in Staphylococcus aureus-induced arthritis and sepsis. Arthritis Rheum. 43 (10), 2276-2282 (2000).
  4. Heale, J., Speert, D. Macrophages in bacterial infection. The Macrophage. Burke, B., Lewis, C. , Oxford University Press. Oxford, England. 210-252 (2008).
  5. Bierry, G., et al. Macrophage activity in infected areas of an experimental vertebral osteomyelitis model: USPIO-enhanced MR imaging--feasibility study. Radiology. 248 (1), 114-123 (2008).
  6. Bierry, G., et al. MRI of macrophages in infectious knee synovitis. AJR Am. J. Roentgenol. 194 (6), W521-W526 (2010).
  7. Lutz, A. M., et al. Detection of synovial macrophages in an experimental rabbit model of antigen-induced arthritis: ultrasmall superparamagnetic iron oxide-enhanced MR imaging. Radiology. 233 (1), 149-1457 (2004).
  8. Weissleder, R., et al. Ultrasmall superparamagnetic iron oxide: an intravenous contrast agent for assessing lymph nodes with MR imaging. Radiology. 175 (2), 494-498 (1990).
  9. Lefevre, S., et al. Septic arthritis: monitoring with USPIO-enhanced macrophage MR imaging. Radiology. 258 (3), 722-728 (2011).
  10. Sigovan, M., et al. Rapid-clearance iron nanoparticles for inflammation imaging of atherosclerotic plaque: initial experience in animal model. Radiology. 252 (2), 401-409 (2009).

Tags

चिकित्सा अंक 80 बायोमेडिकल इंजीनियरिंग एनाटॉमी फिजियोलॉजी आण्विक जीवविज्ञान डायग्नोस्टिक इमेजिंग musculoskeletal प्रणाली बैक्टीरियल संक्रमण और Mycoses मैक्रोफेज एमआर इमेजिंग संक्रमण गठिया USPIO इमेजिंग नैदानिक ​​तकनीक
सेप्टिक गठिया के अनुदैर्ध्य मूल्यांकन के लिए एमआर लक्षित कंट्रास्ट एजेंट का उपयोग <em>इन विवो</em> मैक्रोफेज इमेजिंग <em>में</em>
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Bierry, G., Lefevre, S., Dietemann,More

Bierry, G., Lefevre, S., Dietemann, J. L., Jehl, F. In vivo Macrophage Imaging Using MR Targeted Contrast Agent for Longitudinal Evaluation of Septic Arthritis. J. Vis. Exp. (80), e50296, doi:10.3791/50296 (2013).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter