Summary
Vi beskriver de protokoll som används för att undersöka samspelet mellan 13,56 MHz radiofrekvens (RF) el-fält med guldnanopartiklar kolloider i både icke-biologiska och biologiska system (in vitro / in vivo). Dessa interaktioner utreds för applikationer inom cancerterapi.
Abstract
Cancerbehandlingar, vilka är mindre toxiska och invasiv än sina befintliga motsvarigheter är mycket önskvärd. Användningen av RF el-fält som tränger djupt in i kroppen och orsaka minimal toxicitet, för närvarande studeras som ett hållbart sätt att icke-invasiv cancerbehandling. Det förutses att växelverkan av RF-energi med internaliserade nanopartiklar (NPS) kan frigöra värme, som sedan kan leda till överhettning (hypertermi) av cellen, slutligen slutar i cellnekros.
I fråga om icke-biologiska system, presenterar vi detaljerade protokoll som rör kvantifiera den värme som frigörs av högt koncentrerade NP kolloider. För biologiska system, när det gäller in vitro-försök, beskriver vi de metoder och villkor som måste följas för att effektivt utsätta cancerceller för RF-energi utan bulk medievärme artefakter betydligt skymmer data. Slutligen ger vi en detaljerad metod feller in vivo musmodeller med ektopisk levercancertumörer.
Introduction
Absorptionen av RF-energi genom biologisk vävnad (beroende på deras inneboende elektrisk permittivitet) resulterar i förhöjda vävnadstemperaturer som en funktion av tid, vilket slutligen leder till celldöd genom hypertermi. Det antas att cancer hypertermi kan optimeras med hjälp av riktade nanomaterial som internaliserar inom cancercellen och fungera som RF-termiska givare, lämnar de närliggande friska, normala celler intakta. Flera rapporter har redan visat att en rad olika nationella parlamenten kan fungera som effektiva värmekällor som stöd i cancer nekros 1-4 RF.
I dessa avseenden, guld NP (AuNPs) 3-5, kolnanorör 1, och kvantprickar 6, 7 har uppvisat spännande egenskaper vid användning i både in vitro och in vivo RF experiment. Även om den exakta innebörden av uppvärmningsmekanism för dessa NP när den utsätts för ett RF-fält är fortfarande diskuteras, en seriegrundläggande experiment med AuNPs har lagt stor vikt vid både NP storlek och aggregering tillstånd. Det visades att endast AuNPs med diameter <10 nm värms när det utsätts för ett RF-fält 8. Dessutom är denna uppvärmningsmekanism avsevärt dämpas när AuNPs aggregeras. Denna aggregering villkor var också validerats inom in vitro-modeller som placerade betydelse vid optimering AuNP kolloidal stabilitet inom endolysomal intracellulära fack för effektiv RF-behandling 4. Däremot kan den teknik och experimentella principer används för att samla och utvärdera dessa data vara problematiskt, särskilt när det gäller att validera RF värmeprofiler från NP kolloider.
Flera rapporter har visat att Joule uppvärmning av bakgrunden joniska fjädring som de nationella parlamenten är suspenderade i kan vara den viktigaste källan till RF värmeproduktion och inte de nationella parlamenten själva 9-12. Även om vår senaste papper 8 har validerat tHan använder RF interaktioner generera värme från AuNPs av diametrar mindre än 10 nm, strävar vi efter att beskriva dessa protokoll mer i detalj i den här artikeln.
Vi visar också de protokoll och tekniker som behövs för att utvärdera effektiviteten av AuNPs som hyper termiska agenter i både in vitro och in vivo-experiment för levercancermodeller. Även om vi i första hand fokusera på enkla kolloider av citrat-begränsade AuNPs, kan samma teknik appliceras på andra AuNP hybrider såsom antikropps-och kemoterapi-konjugerade komplex. Genom att följa dessa principer i experimentalist ska förhoppningsvis snabbt kunna utvärdera potentialen för alla nanomaterial för att vara en effektiv RF-inducerad termisk hyper agent.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
En fullständig experimentell översikt visas i figur 1.
Ytterligare detaljer visas i steg 1-3 nedan.
1. Bedöma RF Uppvärmning av NP kolloider: AuNPs som ett exempel
- I allmänhet för varje NP provet utreds först tvätta provet flera gånger genom ett centrifugeringsfilter med avjoniserat (DI) vatten för att avlägsna bakgrunds joner och föroreningar. Alla joner och föroreningar kommer att ha tagits bort från AuNP fjädring när vätskan spolas ut har liknande uppvärmning priser (HRS) RF som DI vatten. Detta reningsförfarande tillåter även högre koncentrationer av NP som skall erhållas. Det är värt att notera att även använda AuNPs i detta exempel, kan de grundläggande principerna tillämpas på andra NP material.
- Som ett exempel, rena en 500 ml flaska av kommersiellt tillgängliga AuNPs med diametern 5 nm, och sedan utsätta dem för en 13,56 MHz RF-fält för elektrisk-field styrka 90 kV / m.
- Ta ~ 125 ml från aktie AuNP lösningen och split mellan sex 50 kDa centrifugfilterrören. Centrifugera vid 3000 rpm. i 2 min 5 sek. Ta filtrerade buffert och refillfilter med mer stamlösning. Upprepa tills alla 500 ml har filtrerats.
- Byt ut den filtrerade bufferten med en liknande volym avjoniserat vatten och upprepa ca 8 gånger (eller tills de filtrerade buffert RF HRs motsvarar DI-vatten). Obs, UV-Vis-analys kan också användas för att övervaka kontaminerande absorptionstoppar. När väl bufferten föroreningar har helt avlägsnats, pipett ungefär 0,5 ml avjoniserat vatten i varje filter och suspendera AuNPs genom upprepad pipettering. Detta bör helt ta bort AuNPs från filtret och möjliggöra fullständig resuspension. Kombinera alla sex suspensionerna i ett 15 ml Eppendorf-rör.
- När AuNPs har renats och koncentrerades, analysera provet med användning av ICP-OES och / eller ICP-MS, UV-vis-och Zeta potential för data på Koncentration och NP stabilitet, respektive. SEM och / eller TEM-analys kan också användas för erhållande av morfologiska data. Detaljerad beredning av prov för dessa tekniker kan hittas i litteraturen 4.
- Använda Kanzius RF-system som beskrivits i tidigare studier 8, eller avledningar av detta system genom att placera en 1,3 ml cylindriskt kvartskyvett så att RF-elektriska fältet i luft (utan något prov närvarande) skulle vara ~ 90 kV / m inne i kyvetten. För en vanlig koksalt prov (0,9% NaCl) det elektriska fält skulle reduceras till ~ 1,1 kV / m. Dessa är de ungefärliga betingelser som används för att möjliggöra jämförelser mellan olika system.
- Pipettera 1,3 ml av en 1000 mg / l prov av renat AuNP kolloid i kvartskuvett och införa detta i RF-området. Detta kan göras genom att använda en specialbyggd Teflon provhållaren. Exponera provet till RF-fält för en period på 120 sekunder eller tills provet når 70 ° C för att förhindra elektrisk ljusbågsbildning eller snabb kokning. Capture de termiska bilddata (samt kontrollområden) med hjälp av en IR-kamera och tillhörande programvara. Upprepa detta tre gånger.
- Filtrera provet genom ett 50 kDa-centrifug filter för att extrahera AuNPs från Dl-vatten-buffert. Återexponera bufferten till RF-fältet, återigen tre gånger. Skillnaden i HRs mellan AuNP kolloid och bakgrunden DI vatten buffert bestämmer HR grund av de AuNPs själva. Räkna med att få timmars ~ 0,3 ° C / s och 0,05 ° C / sek för att ge en AuNP beroende HR på ~ 0,25 ° C / sek. Resuspendera återstående AuNPs från filtret i 1,3 ml vatten för in vitro / in vivo experiment.
2. Nanoparticle assisterad RF-inducerad hypertermi: In vitro-studier
- Dessa in vitro-studier kan användas på någon typ av cancer celltyp som bildar 2D-monoskikt. I detta experiment använder mänskliga hepatocellulär cancer härrör Hep3B celler.
- Plate ~ 50.000 cells i de främre tre brunnar i en 12-brunnsplatta med 1 ml av tillväxtmediet. Upprepa 6 gånger (använd tre plattor för NP-studier och tre plattor som kontroller). Inkubera vid 37,5 ° C under 24 h före införande av NPS. Sterilisera NP först använda biosäkerhetsskåp UV-ljusexponering under 5 min.
- I varje brunn införa 0,1 ml av en 1000 mg / L AuNP lösning och låt stå i ytterligare 24 timmar. Lägg till 0,1 ml vatten till varje brunn i de tre cellplattorna kontroll och även lämna efter 24 timmar.
- Efter 24 timmar har passerat, aspirera cell media och tvätta med PBS för att avlägsna eventuella yt-bundna AuNPs. Ersätt cellmediet. Cellerna är nu redo för RF-exponering.
- Placera varje cell pack 12-väl inom RF-området. Vänta till dess att cellerna har svalnat till 31 ° C. Slå på RF-generatorn och exponera för 3,5 min. Den slutliga temperaturen av cellmediet kommer att vara ~ 37 ° C. Stäng av RF-fältet. Avlägsna cellerna och placera dem i en inkubator under 24 timmar före analysen.
- <li> Ta bort celler från inkubatorn och aspirera cellmedia. Lägg till 1,6 ml av cell media till varje brunn och vid 0,4 ml MTT-reagens. Inkubera cellerna under 4 timmar. Aspirera media och ersätta med 2 ml dimetylsulfoxid (DMSO). Placera cellplattorna på en bänk rocker och låt stå i 10 min för att medge att DMSO solubilisera MTT-reagens. Slutligen pipett 100 pl av varje brunn i en 96-brunnsplatta och optiskt läsa brunn vid 570 nm med användning av en plattläsare såsom SPECTROstar Nano plattläsare.
3. Nanopartikel-assisted RF-inducerad hypertermi: In vivo-studier
- Dessa in vivo-studier kan tillämpas på alla typer av cancer, som bildar fasta tumörer i en orthotopic eller ektopisk murin modell. Detta experiment använder Hep3B levercancerceller i en ektopisk tumör BALB-C Naken musmodell.
- OBS: alla in vivo experiment utförs i enlighet med alla relevanta riktlinjer, föreskrifter och tillsynsmyndigheter. Dessutom var det protokoll som demonstreras utförs under ledning och godkännande av University of Texas MD Anderson Cancer Centers Institutional Animal Care och användning kommittén (IACUC).
- Odla ett lämpligt antal celler (~ 100 K) i en vävnadsodlingsflaska med den lämpliga tillväxtmediet. Inkubera i 37 ° C inkubator med 5% CO2 under hela cellkulturen.
- Behandla celler med trypsin (för att lösgöra från kolven) och producera en lösning av 2 miljoner celler per 25 | il. Lägg till en lika stor mängd Matrigel (på is) och blanda noga för att förbereda den slutliga injektionslösningen. Injicera denna lösning till önskat läge på musen tillbaka och vänta en lämplig tid för tumörerna att växa till önskad storlek (2-4 veckor för de flesta celler). Innan RF-exponering, bör BALB-C Nakna möss bär solida ektopiska tumörer 0,5-1 cm i diameter.
- Förbered mössen som skall användas (i detta fall BALB-C nakna möss) genom Anaesthetizing dem med en lösning av ketamin och xylazin genom IP-injektion. Medan möss somna, hålla dem i en temperaturkontrollerad kammare vid 37 ° C. 20 möss totalt kommer att behövas, alla bär liknande tumörer storlek. Tio möss kommer att användas i samband med och utan AuNPs (den senare är PBS endast injektioner), medan de återstående 10 möss kommer att delas mellan RF-exponerade och icke RF-exponerade kontroller: båda grupper utan AuNP injektioner.
- När de väl bedövas injicera AuNPs direkt i tumören med användning av en 1-cc spruta med en 27 G nål. Den AuNP lösning bör vara på en Au koncentration av 200 mg / l i 0,1 ml PBS. Efter injektion, använd en kirurgisk pinne för att absorbera blod och torka av injektionsstället med en spritkompress.
- Montera sedan musen för att behandlas på den mottagande chefen för RF-generatorn. Musen måste placeras så att tumören är närmast överföringshuvudet. Skydda de områden som är inte att behandlas, samt känsligativa områden såsom ögon, öron och tår, med kopparband. Se till att kopparband är lämpligt att kontakta jordplanet så att ingen kostnad ackumulering inträffar. Dessutom måste exponeringsområdet har en lucka på minst 1 cm större än storleken på det önskade behandlingsstället.
- Placera IR-värmekamera så att tumören och behandlingsområdet är synliga. Slå på RF i 5 min. Spela kurvan resultetemperaturen. Om behandlingen uppnår temperaturer över 42 ° C stopp behandling omedelbart.
- Efter RF-exponering åter mössen från anestesi i en varm kammare tills de är medvetna.
- Upprepa försöket med samma möss 48 timmar senare (steg 3.3.1 - 3.4.1).
- Efter experimentet, euthanize möss i enlighet med institutionella protokoll och förfaranden. Notera vikten av tumören. För histologisk analys fastställa tumörer med formalin och bädda in dem i paraffin. Tumörsektionerna typiskt färgades with hematoxylin och eosin och att målen är relevanta att mäta terapeutisk effekt, t ex Ki-67, kluvna caspase-3, osv.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
1. Bedömning av RF-uppvärmning av NP kolloider: AuNPs som ett exempel.
Efter följande avsnitt 1.1 - 1.2.3 räknar med att ha en mycket koncentrerad, stabil och renad lösning av 5 nm och 10 AuNPs nm i diameter. Från de 500 ml som köpta stamlösning, räkna med att få minst 4 ml lösning i en koncentration av 1,000 mg / L. Skillnaden i HRs mellan AuNPs och bakgrunden DI-vatten-buffertlösning vid denna koncentration bör vara ~ 0,25 ° C / s och 0,1 ° C / sek för 5 nm och 10 nm AuNPs, respektive, som visas i figur 2.
2. Nanoparticle assisterad RF-hypertermi: In vitro-studier
Resultaten bör helst visa att celler som utsätts för ett RF-fält som har internalis AuNPs är mindre lönsamma än de icke-AuNP RF-exponerade celler. Ett exempel på sådana förväntade resultaten belyses i figur 3.
3. Nanotikel assisterad RF-inducerad hypertermi: In vivo-studier
Vid injektion av PBS-suspenderade AuNPs och efter exponeringen behandling av ~ 2-3 veckor RF bör posthumous analys avslöjar kontrollerad tumörtillväxt och / eller en minskning i tumörstorlek / massa (såsom visas i fig. 4). Det kan också vara ett tecken på direkt cellulär termisk ablation. Men detta kanske inte är fallet så enkla citrat-begränsade AuNPs är långt ifrån optimerade och tenderar att aggregera i tumörvävnad. Som kan ses i de senaste publikationerna måste AuNPs vara icke-aggregerade inom intracellulära organeller för att förbättra RF-inducerad cytotoxicitet. Dessutom har nya studier visat att konjugering av cytostatika såsom gemcitabin till AuNPs optimerar RF-behandling. Utredaren kan fortfarande använda dessa protokoll dock att direkt jämföra effektiviteten i sina egna AuNP-komplex i förhållande till våra gruppers tidigare arbete.
Figur 1. Experimentell översikt. AuNP uppvärmning bedömning: As-köpt AuNPs (1.a) placeras i ett filter (1.b) 50 kDa och centrifugeras ner för att separera AuNPs från filtratet (1.c). Detta möjliggör för högkoncentrerade och renade AuNPs som skall formas (1.d). Provet placeras sedan i RF-system med användning av en Teflon-provhållare monterad på en justerbar rotationssteg (1.e). De AuNPs uppvärmning priser, samt fyra andra kontrollområden, registreras med hjälp av en IR-kamera (1.f) In vitro-protokoll:. Hep3B levercancerceller odlas i de främre 3-brunnar av flera 12-brunnars cellpaket som visas i 2.a (mängden cell förpackningar används dep slutar på vad experimentalist vill undersöka vad gäller tillämpad RF-effekt, AuNP koncentration, kontroll, etc.). Varje 12-brunnars platta utsattes sedan till RF-fält (2.b). Även om det inte är nödvändigt eftersom exponeringstiden optimal RF redan har fastställts temperaturen media kan också spelas in med hjälp av IR-kamera (2 c) in vivo-protokoll:. BALB-C-möss med ektopisk levertumörer (3.a) utsattes för intratumoral injektioner av AuNPs och exponerade till RF-system (3 b) i flera minuter. Koppartejp användes för att jorda mössen i syfte att förhindra brännande känsla i huden. En kvartskuvett fylld med AuNPs visas också bredvid musen för att validera RF-exponering. Tumörområdet bör ha en högre temperatur än resten av musen och vanligtvis visas rött i IR-bilden (3 c). ys ">
Figur 2. Uppvärmning priser (° C / sek) av 5 nm och 10 nm diameter AuNPs lösningar. Enligt protokollinstruktioner, är uppvärmning priser bestäms för AuNPs med supernatanten (AuNPs + SN), AuNPs filtreras bort så att endast den överstående är närvarande (SN) , och skillnaden i uppvärmningshastigheter mellan dessa två (skillnad). Genomsnittlig uppvärmning priser är från tre olika experiment (A, B och C).
Figur 3. . Idealiserade Hypertermi cytotoxicitet livskraft (MTT-analys) Visas fyra cellförsök: kontroll (inget RF), AuNP endast (ingen RF), RF endast, och RF med tillägg av cellulära interna AuNPs (A, B, C, och D, respektive ).
Figur 4. Postumt analys av ektopisk möss tumörer. Den vänstra tumör är vad som skulle förväntas från båda kontrollprover dvs ingen RF och ingen AuNP injektion). Den mellersta tumören visar en liten minskning i storlek när den utsattes för RF-fältet enbart. Dock visar den högra tumören att RF + AuNP kombinerad terapi kan minska / kontrollera tumörtillväxt ytterligare.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dessa protokoll tillåter experimentalist att fullt ut analysera i vilken mån nanomaterial (i detta fall AuNPs) kan öka RF-inducerad hypertermi för cancerbehandling. Det första protokollet behandlar specifikt analysera värmeproduktion från hög-koncentrerade och renade AuNP prover. Även andra grupper har rapporterat värmeproduktion i första hand från de buffertar som AuNPs är suspenderade i och inte de AuNPs själva 9-11, deras RF-system användes lägre koncentrationer av AuNPs med diametrar> 10 nm, såväl som lägre RF rörelse krafter med elektrisk- fältstyrkor <90 kV / m, som är för låga för att se några märk RF värmeeffekter från AuNPs. Endast genom att följa de protokoll och parametrar som anges i denna rapport kan det experimentalist observera nanonivå värmefenomen.
In vitro-sektionen möjliggör utvecklingen av cellulär-RF-NP-gränssnitt som ska studeras för optimerad RF / NP-inducerad hypertermi. Befmalm tillägg av AuNPs och RF-exponering, bör du räkna med att ha en livskraftig 2D lager tillväxt av relevanta cancercellinjer (i detta fall Hep3B). Men rätt RF-exponeringstid för varje cellinje måste förutbestämt innan dessa experiment genom att exponera celler till RF-fält vid olika tidpunkter, t.ex. 2 -8 min) och tittar på deras livskraft profilen efter 24 tim. Rätt RF exponeringstid för att använda bör vara där cellerna är ~ 80% livskraftiga. I fallet med Hep3B celler detta befanns vara ~ 3,5 min.
Den enklaste assay valt för viabilitet är standard 3 - (4,5-dimethylthiazol2-yl) 2,5-difenyltetrazoliumbromid (MTT)-analys, även om en annan analys kan behövas om det förutses att de NP kommer att samverka med analysreagensen (vilket var fallet med MTT-analys reagera med CNTs 13). Andra mer avancerade och detaljerade analyser kan användas för att bedöma celldödsmekanism, såsom FACS-analys med Annexin-V och propidium succinylkolinjodide (PI)-färgning. Framtiden i systemet vitro utvecklingen inom vår grupp kommer att titta på att placera cellerna i en temperaturstyrd RF-inert inkubator för att helt utesluta eventuella källor till hypertermi grund av bulk uppvärmning av cellmedia. Också mängden AuNPs som måste internalis inom en cell för maximal celldöd, såväl som deras stabilitet i intracellulära organeller, kommer att undersökas i närmare detalj. Detta är i enlighet med senaste arbete som visade att AuNPs måste vara icke-aggregerade inom lysosomer för ökad RF-behandling 4.
Slutligen har in vivo-protokoll som beskrivs för att medge fullständig biologisk analys av AuNPs i ektopiska levercancer möss modeller för deras förmåga att kontrollera eller minska tumörväxt och / eller storlek i kombination med RF-behandling. En viktig punkt för diskussion är möjligheten för RF-fältet för att framkalla brännskador på musen på grund av felaktig jordning. Användningen av properly jordad och placeras koppartejp, som nämnts i protokollet sektionen, är ett krav för att stoppa dessa brännskador.
Framtida in vivo arbete i vårt labb kommer att arbeta på att bedöma den faktiska mekanismen för tumör död / storlekskontroll från RF-AuNP exponering. Även om det är en hypotes att hypertermi spelar en avgörande roll, har detta att valideras även om användningen av sådana kontroller som direkt insättning av optisk fiber termiska sonder in i tumören och omgivande friska celler att titta på RF-inducerad temperatursvar av sådana vävnader . Dessutom skulle utvecklingen av en intracellulär fluorescerande termisk färgämne vars emissionsvåglängd är en direkt funktion av temperaturen vara ett utmärkt verktyg för detta validering och kan även användas för in vitro-modeller.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Vi har inget att lämna ut.
Acknowledgments
Detta arbete har finansierats av NIH (U54CA143837), NIH MD Anderson Cancer Center Support Grants (CA016672), V-stiftelsen (SAC), och en oinskränkt forskningsanslag från Kanzius Research Foundation (SAC, Erie, PA). Vi tackar Kristine Aska från Institutionen för Kirurgisk Oncology, MD Anderson Cancer Center, för administrativt stöd.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagent/Material | |||
| 500 ml gold nanoparticles (5 nm) | Ted Pella, INC | 15702-5 | |
| Amicon Ultra-4/-15 Centrifugal Filter Units (50 kDa) | Millipore | UFC805024/UFC910096 | (4 ml and 15 ml volumes) |
| MEM X1 Cell Culture Media | Cellgro | 10-101-CV | (add extra nutrients as necessary) |
| Fetal Bovine Serum | Sigma | F4135-500 ml | |
| Copper Tape | Ted Pella | 16072 | |
| Equipment | |||
| Kanzius RF System (13.56 MHZ) | ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA) | ||
| IR Camera | FLIR SC 6000, FLIR Systems, Inc. (Boston, MA, USA) | Contact FLIR | |
| 1.3 ml Quartz Cuvette | ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA) | ||
| Teflon Sample holder with Rotary Stage | ThermMed, LLC, Inc. (Erie, PA, USA) | ||
| SPECTROstar Nano Microplate reader | BGM Labtech | ||
| UV-Vis spectrometer | Applied Nanofluorescence, Houston, TX) | NS1 NanoSpectralyzer | |
| ICP-–S | PerkinElmer | Optima 4300 DV | |
| Zetasizer | Malvern | Zen 3600 Zetasizer | |
References
- Gannon, C. J., et al. Carbon nanotube-enhanced thermal destruction of cancer cells in a noninvasive radiofrequency field. Cancer. 110, 2654 (2007).
- Curley, S. A., Cherukuri, P., Briggs, K., Patra, C. R., Upton, M., Dolson, E., Mukherjee, P. Noninvasive radiofrequency field-induced hyperthermic cytotoxicity in human cancer cells using cetuximab-targeted gold nanoparticles. J. Exp. Ther. Oncol. 7, 313 (2008).
- Gannon, C. J., Patra, C. R., Bhattacharya, R., Mukherjee, P., Curley, S. A. Intracellular gold nanoparticles enhance non-invasive radiofrequency thermal destruction of human gastrointestinal cancer cells. Journal of Nanobiotechnology. 6, 2 (2008).
- Raoof, M., et al. Stability of antibody-conjugated gold nanoparticles in the endolysosomal nanoenvironment: implications for noninvasive radiofrequency-based cancer therapy. Nanomedicine. 8, 1096 (2012).
- Glazer, E. S., Massey, K. L., Zhu, C., Curley, S. A. Pancreatic carcinoma cells are susceptible to noninvasive radio frequency fields after treatment with targeted gold nanoparticles. Surgery. 148, 319 (2010).
- Glazer, E. S., Curley, S. A. Radiofrequency field-induced thermal cytotoxicity in cancer cells treated with fluorescent nanoparticles. Cancer. 116, 3285 (2010).
- Glazer, E. S., Curley, S. A. Non-invasive radiofrequency ablation of malignancies mediated by quantum dots, gold nanoparticles and carbon nanotubes. Therapeutic Delivery. 2, 1325 (2011).
- Corr, S. J., Raoof, M., Mackeyev, Y., Phounsavath, S., Cheney, M. A., Cisneros, B. T., Shur, M., Gozin, M., McNally, P. J., Wilson, L. J., Curley, S. A. Citrate-Capped Gold Nanoparticle Electrophoretic Heat Production in Response to a Time-Varying Radiofrequency Electric-Field. J. Phys. Chem. C. 116, 24380 (2012).
- Kruse, D. E., et al. A Radio-Frequency Coupling Network for Heating of Citrate-Coated Gold Nanoparticles for Cancer Therapy: Design and Analysis. IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 58, 10 (2011).
- Li, D., et al. Negligible absorption of radiofrequency radiation by colloidal gold nanoparticles. J. Colloid Interf. Sci. 358, 47 (2011).
- Liu, X., Chen, H. J., Chen, X., Parini, C., Wen, D. Low frequency heating of gold nanoparticle dispersions for non-invasive thermal therapies. Nanoscale. , (2012).
- Sassaroli, E., Li, K. C. P., O'Neill, B. E. Radio frequency absorption in gold nanoparticle suspensions: a phenomenological study. J. Phys. D App. Phys. 45, 075303 (2012).
- Worle-Knirsch, J. M., Pulskamp, K., Krug, H. F. Oops they did it again! Carbon nanotubes hoax scientists in viability assays. Nano Lett. 6, 1261 (2006).
