עכברי צוואר הרחם לב השתלת דגם שימוש בטכניקת חפתים השתנה
Summary
מודל השתלת לב בצוואר הרחם העכברי הוא גם מתאים חיסוני, כמו גם מחקרי פציעת reperfusion איסכמיה. שינינו את התהליך תוך שימוש בטכניקת שרוול שאינו תפר וביצעו יותר מ 1,000 השתלות מוצלחות עם גישה זו.
במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.
Abstract
מודלים של עכברים הם בעלי עניין מיוחד במחקר מאז מגוון רחב של נוגדנים חד שבטיים ומוגדרים באופן מסחרי טהור וזני נוקאאוט זמינים לביצוע מכניסטית במחקרי vivo. בעוד מודלים השתלת לב תוך שימוש בטכניקת תפר היו ראשון שפותחו בהצלחה בחולדות, התרגום למקבילה עכברית משומשת באותה מידה נרחבת מעולם לא הושגה בשל המורכבות הטכנית של הליך מייקרו. בניגוד לכך, טכניקות שרוול שאינו תפר, גם פיתחו בתחילה בחולדות, הותאמו בהצלחה לשימוש בעכברי 1-3. טכניקה זו לrevascularization כוללת שני גדולים צעדי I) everting כלי המקבל על שרוול פוליאתילן; II) מושך את כלי התורם להשתלט על כלי שיט נמען everted לשעבר ומחזיק אותו במקום עם עניבה היקפית. זה מבטיח המשכיות של שכבת האנדותל, זמן פעולה קצר ושיעורי patency גבוהים מאוד 4.
t "> שימוש בטכניקה זו להשקת כלי דם שבצעו יותר מ 1,000 השתלות לב בצוואר הרחם עם שיעור הצלחה כולל של 95%. לעורקי זרימה בעורק התרדמה המשותף וקשת אב העורקים הפרוקסימלי היו anastomosed וכתוצאה מכך זלוף מדרדר של הלב המושתל. לניקוז ורידי עורק הריאה של השתל היה anastomosed עם וריד הצוואר החיצוני של הנמען 5.במסמך זה, אנו מספקים פרטים נוספים בטכניקה זו כדי להשלים את הווידאו.
Introduction
השתלת לב מייצגת את טיפול בחירה בחולים הסובלים ממחלות לב בשלב סופי שונות. התקדמות בטכניקות כירורגיות, טיפול מונע יעיל יותר של זיהומים, ומשטרי דיכוי המערכת החיסונית רומן הביאה תוצאה בשיפור ניכרת של השתלת איברי 6. עם זאת, הישרדות שתל לטווח ארוך לא השתפרה בקפדנות בשנים האחרונות 7. הדחייה כרונית, מאופיינת בטרשת עורקת השתלה ממשיכה להיות מכשול עיקרי להישרדות שתל לטווח ארוך 8-11.
המודל של השתלת לב heterotopic בעכברים מספק כלי חשוב ותקף לניתוח של מנגנון חיסוני במהלך אקוטי כמו גם דחייה כרונית 12-15.
נכון להיום מודל ההשתלה השכיח ביותר היא עדיין השתלת לב עכבר הבטן תוך שימוש בטכניקת התפר. אב העורקים העולה של לב תורם anastomosed לאב העורקים bdominal ועורק הריאה הוא anastomosed לווריד הנבוב הנחות של הנמען. חלק ניכר מהקושי מייקרו של מודל התפר מבוסס על גודלו הקטן של כלי השיט, אשר נתפרו 16,17.
בניגוד למודל תפר הלב ממוקם באזור הצוואר של הנמען בי וריד הצוואר החיצוני anastomosed לעורק הריאה ועורק תרדמה המשותף אב העורקים של התורם.
הרציונל של פיתוח מודל השתלת לב בצוואר הרחם תוך שימוש בטכניקת השרוול היה לי מודל חיה, אשר מאפשר השגת אחוזי הצלחה גבוהה עם מיומנויות מייקרו בסיסיות שתאפשר יישום רחב של מודל זה. היתרונות העיקריים של שיטה זו הם ההשקה מתרחשת באופן משמעותי פחות קשורות לסיבוכים כמו דימומים ופקקת בהשוואה למודל התפר 18.
Protocol
Representative Results
Discussion
דחייה של allografts כלי הדם כרוך שפע של צעדים שונים שניתן להעריך רק באמצעות מספיק במודלים חוץ גופית. תופעות כמו הרגישות של המקבלים, עיבוד אנטיגן באיברי הלימפה משניים אלא גם הבידול וההתפשטות של תאים חיסוניים המוסמכים הן טובים יותר מאופיינות in vivo. מודלים של בעלי ה?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors declare that they have no competing financial interests.
Materials
| Yasargil Clip Mini Permanent 7mm | Aesculap | FE720K | |
| Micro vessel clip | S & T | B1 00396 V | |
| Microscissor | FST | 14075-11 | |
| Vesseldilatator | S & T | D-5a.2 00125 | |
| Microforceps | FST | Dumont 11271- 30 | |
| Clipapplicator | S & T | CAF-4 00072 | |
| Microvessel clip | S & T | B1 00396 V |
References
- Brandacher, G., et al. Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity. Transplantation. 81, 583-589 (2006).
- Schneeberger, S., et al. The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation. Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).
- Sucher, R., et al. IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival. JImmunol. 188, 37-46 (2012).
- Yamashita, K., et al. Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs. FASEB J. 20, 776-778 (2006).
- Kienzl, K., et al. Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection. Transplantation. 88, 553-560 (2009).
- Aurora, P., et al. Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report–2007. J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).
- Häyry, P. Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development. Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).
- Hosenpud, J. D. Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update. Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).
- Libby, P., Pober, J. S. Chronic rejection. Immunity. 14, 387-397 (2001).
- Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine. Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).
- Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction. Transpl Int. 13, 385-401 (2000).
- Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
- Huang, X., Chen, D., Chen, L. [A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research]. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).
- Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).
- Wang, C. Y., et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105, 1609-1614 (2002).
- Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51, 896-898 (1991).
- Tomita, Y., et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).
- Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
- Zimmermann, F. A., et al. Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts. Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).
- Maglione, M., et al. Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model. Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).
- Heron, I. A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats. Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).
