Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Протокол клинического исследования для обнаружения нетипичных и классических scrapie в овцах

Published: January 19, 2014 doi: 10.3791/51101

Summary

Для оказания помощи в выявлении классического и нетипичного скребка у овец и коз представлен краткий протокол клинического обследования.

Abstract

Диагноз скребок, трансмиссивной губчатой энцефалопатии (TSEs) овец и коз, в настоящее время основан на выявлении связанных с болезнью прионных белков с помощью посмертных тестов. Если случайная выборка популяции овец или коз активно контролируется для скребки, выявление случаев царапин зависит от отчетности клинических подозреваемых, которая зависит от ознакомления человека с болезнью и способность распознавать клинические признаки, связанные с царапинами. Scrapie не может быть рассмотрен в дифференциальной диагностики неврологических заболеваний у мелких колинцев, особенно в странах с низкой распространенностью царапин, или не признается, если он представляет как неприритической форме, как нетипичные царапины. Для оказания помощи в выявлении клинических подозреваемых представляется краткий протокол обследования для оценки отображения специфических клинических признаков, связанных с зудными и непреритическими формами ТЦ У овец, которые также могут применяться к козам. Это включает в себя оценку поведения, зрение (путем тестирования реакции на угрозу), зуд (путем тестирования реакции на царапины), и движение (с и без завязывания глаз). Это может привести к более подробной неврологической экспертизы отчетности животных, как царапины подозреваемых. Он также может быть использован в экспериментальных исследованиях TSE овец или коз для оценки прогрессирования заболевания или для определения клинической конечной точки.

Introduction

Scrapie является трансмиссивной губчатой энцефалопатии (TSE) овец и коз, которая принадлежит к группе белковых расстройств неправильного сфоливания, как губчатая энцефалопатия крупного рогатого скота крупного рогатого скота, хронические заболевания оленей, и болезнь Крейтцфельдта-Якоба у людей. Диагноз ставится посмертно путем выявления аномальной формы прионные белки, который является белказы устойчивостью, как правило, в головном мозге. Можно выделить две основные естественные формы скребок, которые являются эпидемиологическими, патологическими и биохимически разными: классическая царапина и нетипичная царапина. Кроме того, неврологическое заболевание с классическими царапинами, как клинические признаки могут быть вызваны овец и коз экспериментальной инфекциис агентом BSE 6,10-11. В самом деле, естественные BSE был диагностирован у коз3,17. Контроль классического скребка (и BSE у овец, если это произошло естественным образом) был достигнут путем размножения для генетической устойчивости ориентации гена прионового белка, но это труднее для нетипичных скребок, который считается спорадическим заболеванием и был диагностирован в странах, которые считаются свободными от классического scrapie, например, Новая Зеландия 7.

Scrapie является неврологическим заболеванием взрослых овец и коз, что приводит к изменениям в поведении, ощущения, и движение, но болезнь медленно прогрессивный, и клинические признаки часто не признаются, потому что животное хранитель или ветеринарный хирург не может быть знаком с клиническими признаками, или царапины не рассматривается на всех дифференциальной диагностики неврологических заболеваний у мелких жвачных.

Предлагаемый протокол обследования был разработан, чтобы помочь в клинической диагностике царапин с двумя целями в виду: она должна быть значительно кратким, чтобы сканирование многих животных в течение короткого периода времени, но достаточно конкретным, чтобы позволить обнаружение царапин пострадавших животных, что достигается путем оценки наличия клинических признаков часто встречаются в скребок пострадавших животных. Этот протокол представляет собой небольшую модификацию от того, который используется для мониторинга коз для признаковклассического скребок 11 и включает в себя повязки на глазах животного, которые могут усугубить клинические признаки, обычно не связанные сцарапины 9.

Protocol

1. Оценка осанки

  1. Оцените осанку животного в то время как спокойно.
  2. Пострадавшие от TSEs животные могут стоять с широкими конечностями, могут казаться сгорбившись, или могут стоять с низкой головой перевозки.

2. Оценка поведения

  1. Изучите поведение животного, когда его ходят в покое, когда подходят, и когда обрабатываются.
  2. Tse пострадавших животных может отображать измененное mentation, стоя отдельно от других овец или не сразу после других овец.
  3. Когда животное приближается, он может убежать и разрушается, или он падает на пол при обращении. Компульсивное по часовой стрелке или против часовой стрелки кружить можно увидеть в овец с нетипичным скребок.

3. Тестирование реагирования на угрозы

  1. Держите голову животного для проверки реакции угрозы: переместить руку или несколько пальцев несколько раз к каждому глазу животного, чтобы вызвать мигающий ответ, но будьте осторожны, чтобы не коснуться любых волос на лице или создать какие-либо турбулентности воздуха, которые могут привести к животному мигать.
  2. Реакция на угрозу может отсутствовать у животных, пострадавших от скребок, особенно у овец с нетипичным скребок. Хотя тестирование угрозы ответ является единственным черепно-мозгового нерва тестирования, используемого в рамках протокола, визуальный осмотр лица во время этой процедуры может выявить другие признаки неврологического дефицита обычно не видели в царапины, например, лицевой паралич. Если животное не моргает в ответ на угрозу, желательно проверить палебральный рефлекс, касаясь век, чтобы убедиться, что неспособность животного мигать не вызвана параличом лица.

4. Тестирование царапин ответ

  1. Убедитесь, что животное спокойно во время этой процедуры, потому что тест не может быть интерпретирован в борьбе животных.
  2. Царапины области спины в грудной, поясничной и сакральной областях, останавливаясь между каждым царапин эпизод.
  3. Если животное реагирует ритмичными движениями головы или тела, или двигает или лижет губы при царапинах одной конкретной области, повторите тест на царапины, чтобы подтвердить воспроизводимость реакции царапины.
  4. Повторяемый ответ, как правило, вызывается у животных, которые зуд, которые обычно включает в себя овец с классической царапины или коз с зудитической форме царапины, но, как правило, нет ответа у овец с нетипичным царапины, если другие зудяные условия кожи или эктопарабитов присутствуют.

5. Проверка на потерю шерсти и поражения кожи

  1. Осмотрите кожу.
  2. Pruritus из-за царапины обычно вызывает выпадение волос, которые могут быть на опросе, спине, rump, стороне груди или живота из-за чрезмерного трения или царапин, где основная кожа появляется нормально.
  3. Ссадины могут появиться позже, если животное имеет возможность тереться о острые предметы. Укус раны могут появиться, особенно на конечностях, из-за чрезмерного грызть конечностей.

6. Состояние тела

  1. Оцените состояние тела животного путем пальпирования спинных и поперечных процессов поясничных позвонков.
  2. Scrapie может вызвать прогрессирующую потерю состояния тела, где поперечные процессы поясничных позвонков можно легко почувствовать индивидуально, и концы процессов кажутся острыми.

7. Ослепить животное

  1. Обложка глаза животного с капюшоном, который может быть сделано с помощью любого невидя через мешок, где один угол отрезан, чтобы дыхание животного.
  2. Отпустите животное только в том случае, если нет никаких проблем с безопасностью, и нет риска получения травмы из-за панику животного; в противном случае держать овец и изучать движения животных в то же время в контроле над животным.
  3. Повязка может усугубить признаки вестибулярной системы или мозжечковой дисфункции, которые могут быть скрыты способностью животного компенсировать через свое зрение. Потеря равновесия, несогласованности или кружения могут быть вызваны, особенно в противном случае клинически ничем не примечательных овец с нетипичным скребок.

8. Оценка движения животных

  1. Изучите походку животного и движения мышц, когда оно свободно движется.
  2. Несогласованности может характеризоваться широкой основе движений задних конечностей, прыжки с обеих задних конечностей, или покачиваясь чрезмерно в задних четвертях, что может привести к спотыкаясь или кратко садясь.
  3. Присутствие тремор головы часто тонкие, когда животное спокойно, но может стать более заметным во время или после завершения клинического обследования.

9. Интерпретация

  1. Рассмотрим значение выводов в отношении царапин.
  2. Хотя наличие отдельных признаков, таких как повторяемая реакция на царапины, тремор, ненормальное поведение, кружащие, рушится эпизодов, атаксия, или отсутствует угроза ответ, может иметь различные причины, в сочетании возникновения двух или более из этих признаков весьма наводящий на царапины у овец или коз.

Representative Results

Клинически здоровые овцы. Опрос Дорсет wether от скребка свободной стадо intracerebrally прививки с бычьим мозгом новозеландского происхождения и рассмотрены на 49 месяцев после прививки. Эта овца имеет нормальную осанку, ведет себя нормально, отображает нормальную реакцию угрозы(рисунок 1), не реагирует на царапины тест, имеет нетронутыми флис, и очень хорошее состояние тела. Это клинически ничем не примечательный, когда с завязанными глазами и не показывает никаких признаков расстройства движения.

Нетипичные овцы скребок, присутствующие с непреритической формой TSEs у овец. Cheviot wether из стаи без царапин intracerebrally прививки с гомогенатом мозга из нетипичного случая поля скребок того же генотипа белка приона (AH ' / AH) и рассмотрены на 36 месяцев после прививки. Эта овца также имеет нормальную осанку, но ведет себя по-разному по отношению к другим овцам в ручке и кружит по часовой стрелке. Он не мигает, когда проверяется реакция на угрозу. Царапины не вызывает никакой реакции, и никаких изменений шерсти очевидны, но состояние тела является справедливым. Он кружит по часовой стрелке, когда с завязанными глазами (Рисунок 2) и теряет равновесие. Походка является ataxic, и тонкий тремор головы виден.

Нетипичные овцы BSE, присутствующие с зудяной формой TSEs у овец, которая клинически похожа на клиническую презентацию классических овец, пострадавших от скрепса. По этой причине классический случай скребок не включен. Опрос Дорсет wether от скребка свободной стадо intracerebrally прививки с бычьей атипичной (L-типа) БФБ мозга гомогената и рассмотрены на 50 месяцев после прививки. Эта овца стоит слегка сгорбившись, как правило, держать задние конечности широкой основе и падает на пол, когда поймали. Реакция на угрозу слаба. Царапины различных областях спины вызывает головы или губ движений(рисунок 3), и есть потеря шерсти с незначительными травмами кожи на опросе. Состояние тела хорошее. Когда с завязанными глазами, он не хочет двигаться и опирается на его задней части на препятствие для поддержания баланса. Овцы являются атаксисом и отображает гиперметрию конечностей.

Figure 1
Рисунок 1. Тестирование реагирования на угрозы. Угрожающий жест в сторону глаза животного вызывает реакцию моргания. Нажмите здесь, чтобы просмотреть изображение большего размера.

Figure 2
Рисунок 2. С завязанными глазами. По часовой стрелке кружили вызвали завязывания глаза овец с капюшоном. Нажмите здесь, чтобы просмотреть изображение большего размера.

Figure 3
Рисунок 3. Тестирование реакции царапины. Царапины на спине вызывает губы лизать с боковыми движениями головы Нажмите здесь, чтобы просмотреть большее изображение.

Discussion

Scrapie является перечисленным заболеванием Всемирной организации здравоохранения по охране здоровья животных (OIE), который, в отсутствие быстрого и надежного теста на дотла, опирается на способность фермеров или ветеринаров распознавать клинические признаки, связанные с этим заболеванием. Однако в большинстве случаев скребок, особенно нетипичных случаях скребок, в настоящее время проводится целевое наблюдение за TSE, т.е. в результате обследования мозга мелких колинов, подлежащих убою или выпавших стоковых животных. Разведение овец для устойчивости к классической скребок, который сократил число классических случаев скребок, скорее всего, также снижение осведомленности людей о болезни, так что это реже рассматривается в дифференциальной диагностики неврологических расстройств у овец. Нетипичный скребок также имеет низкую распространенность примерно с пятью случаями на скотобойнях и восемью случаями в упавших запасах на 10 000 проверенных вЕвропе 4. Кроме того, зуд, как правило, очевидно, как облысение с или без экскориации, часто считается характерным признакомцарапины 13. Таким образом, неврологическое заболевание без сопутствующих зуд, как наблюдается в нетипичных царапин12 или неприритетной форме каприн скребок11 не может вызвать подозрение на царапины.

Этот протокол исследования был разработан для выявления клинических признаков TSE у овец путем оценки конкретных клинических признаков, связанных с различными типами царапин (атипичный и классический скребок, последний представлен нетипичной BSE-прививки овец, которые представлены с классическими царапины, как признаки). В классическом scrapie, процент случаев которые показали положительный ответ скреста («рефлекс грызть») колебался от 50-77 в над 100 sheepизученных 5.8. Нарушения движения можно наблюдать в до 81% классических случаев скребок на основе различных исследований18. Несогласованности также является важным признаком в различных естественных случаях нетипичных скребок, часто сопровождается поведенческимиизменениями 1, но дополнительные признаки сообщили в обоих естественно и экспериментально инфицированных нетипичных овец скребоккружили и нарушения зрения 12,15,16, поэтому повязки и тестирование угрозы ответ включен в протокол экспертизы. Оценка состояния тела, например, с помощью 6-балльнойсистемы оценки 14, позволяет оценки истощения, которые могут наблюдаться в царапины пострадавшиховец 5. Хотя клинические критерии, чтобы помочь в обнаружении царапин уовец были предложены ранее 2, они связаны только с обнаружением классического скребок и принял клиническую историю во внимание, которые не могут быть доступны, если животные представлены на скотобойне.

Действующий протокол позволяет скрининг многих животных на наличие признаков царапины в течение короткого периода времени. Кроме того, протокол обследования может быть применен к экспериментальным исследованиям скребок у овец и коз для мониторинга клинического начала, прогрессирования и конечной точки. Тем не менее, он не заменяет более подробное физическое и неврологическое обследование с соответствующей записи клинической истории болезни, возможно, следуют вспомогательные диагностические тесты (обследование крови и спинномозговой жидкости; более сложные методы визуализации, если это необходимо), которые могут быть необходимы впоследствии, чтобы исключить различные другие условия в малых омасов, которые присутствуют с аналогичными признаками , такие как метаболические или воспалительные неврологические заболевания, абсцессы мозга, или опухоли.

Хотя клиническое обследование, как правило, менее чувствительны в обнаружении TSE пострадавших животных, чем посмертные тесты, основанные на обнаружении прионового белка 2,11, особенно на ранней стадии инкубационный период, это в настоящее время единственный метод обнаружения у живых животных и наиболее актуальным для тех стран, которые не имеют целевой системы эпиднадзора в месте для выявления TSE пострадавших мелких омчин.

Disclosures

Все процедуры с участием животных были проведены в соответствии с Законом 1986 года о животных (научных процедурах) по лицензии правительства Соединенного Королевства.
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Acknowledgments

Исследования, в которых были проведены животные, финансировались Министерством продовольствия, окружающей среды и сельских районов Великобритании и Европейским союзом (за счет финансирования Справочной лаборатории ЕС TSE). Мы признаем поддержку руководителей проекта, д.M-р Симмонс и д.M. Джеффри.

References

  1. Benestad, S. L., Arsac, J. N., Goldmann, W., Nöremark, M. Atypical/Nor98 scrapie: properties of the agent, genetics, and epidemiology. Vet Res.. 39 (4), 19 (2008).
  2. D'Angelo, A., Maurella, C., et al. Assessment of clinical criteria to diagnose scrapie in Italy. Vet. J. 174 (1), 106-112 (2007).
  3. Eloit, M., Adjou, K., et al. BSE agent signatures in a goat. Vet. Rec. 156 (16), 523-524 (2005).
  4. Fediaevsky, A., Maurella, C., et al. The prevalence of atypical scrapie in sheep from positive flocks is not higher than in the general sheep population in 11 European countries. BMC Vet. Res. 6, 9 (2010).
  5. Healy, A. M., Weavers, E., et al. The clinical neurology of scrapie in Irish sheep. J. Vet. Intern. Med. 17 (6), 908-916 (2003).
  6. Houston, E. F., Gravenor, M. B. Clinical signs in sheep experimentally infected with scrapie and BSE. 152 (11), 333-334 (2003).
  7. Kittelberger, R., Chaplin, M. J., et al. Atypical scrapie/Nor98 in a sheep from New Zealand. J. Vet. Diagn. Invest. 22 (6), 863-875 (2010).
  8. Konold, T., Bone, G., et al. Associations of clinical signs and prion protein genotypes in British sheep with scrapie. Dtsch. Tierärztl. Wochenschr. 116 (11), 380-388 (2009).
  9. Konold, T., Bone, G., et al. Scrapie in goats. Vet. Rec. 161 (11), 395-396 (2007).
  10. Konold, T., Bone, G., et al. Pruritus is a common feature in sheep infected with the BSE agent. BMC Vet. Res. 4, 16 (2008).
  11. Konold, T., Bone, G. E., et al. Monitoring of clinical signs in goats with transmissible spongiform encephalopathies. BMC Vet. Res. 6, 13 (2010).
  12. Konold, T., Davis, A., et al. Clinical findings in two cases of atypical scrapie in sheep: a case report. BMC Vet. Res. 3, 1 (2007).
  13. Passler, T., Walz, P. H., Pugh, D. G. Diseases of the Neurologic System. In: Sheep and Goat Medicine. Pugh, D. G., Baird, A. N. , 2, W.B.Saunders. Saint Louis. 361-405 (2012).
  14. Russel, A. Body condition scoring of sheep. In Pract. 6 (3), 91-93 (1984).
  15. Simmons, H. A., Simmons, M. M., et al. Atypical scrapie in sheep from a UK research flock which is free from classical scrapie. BMC Vet. Res. 5, 8 (2009).
  16. Simmons, M. M., Konold, T., et al. The natural atypical scrapie phenotype is preserved on experimental transmission and sub-passage in PRNP homologous sheep. BMC Vet. Res. 6, 14 (2010).
  17. Spiropoulos, J., Lockey, R., et al. Isolation of prion with BSE properties from farmed goat. Emerg. Infect. Dis. 17 (12), 2253-2261 (2011).
  18. Ulvund, M. J. Clinical Findings in Scrapie. In: Prions in humans and animals. Hörnlimann, B., Riesner, D., Kretzschmar, H. , de Gruyter. Berlin. 398-407 (2006).

Tags

Медицина Выпуск 83 трансмиссивная губчатая энцефалопатия овцы нетипичные царапины классический скребок неврологическое обследование скретч-тест ответ на угрозу завязывание глаза
Протокол клинического исследования для обнаружения нетипичных и классических scrapie в овцах
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Konold, T., Phelan, L. ClinicalMore

Konold, T., Phelan, L. Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep. J. Vis. Exp. (83), e51101, doi:10.3791/51101 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter