Selv om en kjent modell, representerer marsvin for tiden en nisje i eksperimentelle dyre vitenskaper og begrenset informasjon er tilgjengelig for utførelse av de fleste fremgangsmåter. Her presenterer vi fire forskjellige tilnærminger til ikke-terminal in vivo blodprøvetaking teknikker i enten bevisst eller bedøvede marsvin.
Marsvin har flere biologiske likheter med mennesker, og er validert eksperimentelle dyremodeller 1-3. Imidlertid representerer bruk av marsvin i dag et relativt smalt område for forskning og beskrivende data om spesifikke metode er tilsvarende begrenset. De anatomiske trekk av marsvin er litt forskjellig fra andre gnagere modeller, derav modulering av sampling teknikker for å tilrettelegge for artsspesifikke forskjeller, f.eks. Mot mus og rotter, er nødvendig for å oppnå tilstrekkelig og høy kvalitet prøver. Som både lang og kort sikt in vivo studier ofte krever gjentatt blod prøvetaking valg av teknikk bør være godt vurderes for å redusere stress og ubehag for dyrene, men også for å sikre overlevelse samt etterlevelse av kravene i utvalgsstørrelse og tilgjengelighet. Venøse blodprøver kan fås på en rekke steder i marsvin f.eks., Saphenous og venavener, hver teknikk som inneholder både fordeler og ulemper 4,5. Her presenterer vi fire forskjellige blodprøvetaking teknikker for enten bevisst eller bedøvede marsvin. Prosedyrene er alle ikke-terminal prosedyrer gitt at prøvevolumer og antall prøver ikke overstiger retningslinjer for blodprøvetaking hos forsøksdyr seks. Alle de beskrevne metodene har blitt grundig testet og anvendt for gjentatt in vivo blodprøvetaking av studier innenfor vår forskning anlegget.
Marsvin er en verdifull og validert eksperimentell dyremodell på grunn av en rekke biologiske likheter med mennesker slik som et krav for et diett-tilførsel av vitamin C, tilsvar plasma lipoprotein metaboliserende enzymer og lipoproteinprofiler, samt felles likheter med human og placentation prenatal utvikling 1-3,7,8. Dette gjør marsvin en attraktiv og egnet modell for å studere effektene av diettrelaterte sykdommer slik som ikke-alkoholholdige fettleversykdom, kardiovaskulære sykdommer og mulige effekter av vitamin C-mangel, men også virkningen av f.eks. Maternal kost inngrep på utvikling avkom.
Gjentatte blodprøvetaking er ofte nødvendig i både lang og kort sikt in vivo studier. Med hensyn til det artsspesifikke anatomiske forskjeller modulering av prøvetagningsteknikk er nødvendig for å oppnå blodprøver hos marsvin sammenlignet med andre gnagermodeller <sup> 4,5. Dette inkluderer variasjon i løpet av vener og arterier, og også at marsvin ikke har en hale, og dermed har forskjellige krav og muligheter for både prøvetaking og håndtering. Prøvetaking fra saphena eller tarsal vene, induserer minimalt ubehag og stress i dyret, og krever ikke anestesi 3,9. Denne teknikken gjør det mulig gjentatte prøver av små mengder av blod (100-400 pl), f.eks. For å bestemme de biokjemiske markørene i plasma. Ved en enda mindre prøvestørrelsen er tilstrekkelig (50-100 ul), kan dette ganske enkelt oppnås ved punktering ørevenen. Denne teknikken kan også bli utført i bevisste dyr og er nyttige for eksempel ved måling av blodglukose 10,11. Prøvetaking fra vena jugularis tillater innsamling av større mengder av blod (1-2 ml), men krever anestesi.
Her presenterer vi fire forskjellige blodprøvetaking teknikker for enten bevisst eller bedøvede marsvin. Procedures er alle ikke-terminal prosedyrer gitt at prøvevolumer og antall prøver ikke overstiger retningslinjer for blodprøvetaking hos forsøksdyr seks. Det er av hensyn til god vitenskap samt dyrevelferd at stress bør holdes på et minimum. Dermed kan bare godt trente og kompetente personlige bør utføre dyre prosedyrer.
Sammenlignet med mus og rotter, marsvin er engstelig av natur og må nærmet rolig og håndteres på riktig måte for å redusere stress. Fra et dyrevelferd synspunkt, opptrer med forsiktighet er naturligvis en prioritet; men dette vil også redusere risikoen for angstassosierte effekter på de innsamlede data, f.eks., økte blodnivåer av kortikosteroider og glukose 12.. Likeledes vil daglige håndtering tilvenne dyrene til normale prosedyrer og kan tjene til å redusere stress ytterligere. Praktisk…
The authors have nothing to disclose.
Vi erkjenner dyktig hjelp av Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft og dyre vaktmester ved Institutt for eksperimentell medisin, Frederiksberg Campus, Fakultet for helse og medisinske basalfag, Universitetet i København, Danmark. Jacob Lønholdt takkes for hans utmerkede teknisk assistanse i filme prosedyrene. Denne studien ble støttet delvis av LIFEPHARM Senter for in vivo Farmakologi og Københavns Universitet.
Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
Electric shaver | Wella (Contura), Denmark | 273207 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Syringes | B.Braun-Omnifix-F, Germany | 9161406V | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Needles | BD Microlance,Spain | 301156 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Microvette collection tube | Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany | 201,288,100 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Accu-Check analyzer | Roche A/S Diagnostics, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Heparin 5000 IE/ml | LEO Pharma, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Anesthesia | Zoletil 50, Chemvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Anesthesia | Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Anesthesia | Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Neutral eye ointment | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
Gauze or a cotton swab | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
Disinfectant (70% alcohol) | Alternative product may be used. Multiple suppliers |