Apesar de ser um modelo conhecido, a cobaia representa atualmente um nicho em ciências experimentais em animais e dados limitada disponível sobre a execução da maioria dos procedimentos. Apresentamos aqui quatro abordagens diferentes para não-terminal em técnicas de amostragem de sangue vivo em qualquer cobaias conscientes ou anestesiados.
As cobaias possuem várias semelhanças biológicas para os seres humanos e são validados modelos animais experimentais 1-3. No entanto, o uso de cobaias representa atualmente uma área relativamente estreita de dados de pesquisa e descritivos sobre metodologia específica é correspondentemente escasso. As características anatômicas de cobaias são um pouco diferentes de outros modelos de roedores, daí modulação de técnicas de amostragem para acomodar as diferenças espécie-específicos, por exemplo., Em comparação com camundongos e ratos, são necessários para obter amostras suficientes e de alta qualidade. Como tanto a longo e curto prazo em estudos in vivo, muitas vezes requerem repetidas sangue amostragem a escolha da técnica deve ser bem considerado, a fim de reduzir o estresse e desconforto nos animais, mas também para garantir a sobrevivência, bem como o cumprimento dos requisitos de tamanho da amostra e acessibilidade. Amostras de sangue venoso pode ser obtido em uma série de sites em cobaias por exemplo., A safena e jugularveias, cada uma das técnicas que contém tanto vantagens como desvantagens 4,5. Aqui, apresentamos quatro técnicas de amostragem de sangue diferentes para ambos cobaias conscientes ou anestesiados. Os procedimentos são todos os procedimentos não-terminal na condição de os volumes de amostra e número de amostras não exceder as diretrizes para coleta de sangue em animais de laboratório 6. Todos os métodos descritos têm sido exaustivamente testado e aplicado para repetido em amostras de sangue vivo em estudos dentro do nosso centro de pesquisa.
A cobaia um modelo experimental animal valioso e validado devido a um número de semelhanças biológicos para os seres humanos, tais como a exigência de uma fonte dietética de vitamina C, a lipoproteína plasmática comparável enzimas que metabolizam e perfis de lipoproteína, bem como semelhanças compartilhadas com placentação humana e desenvolvimento pré-natal 1-3,7,8. Isso faz com que a cobaia um modelo atraente e adequado para estudar os efeitos de doenças associadas à dieta, como a doença não alcoólica do fígado gorduroso, doenças cardiovasculares e efeitos putativos de deficiência de vitamina C, mas também o efeito de, por exemplo., A intervenção dietética materna sobre o desenvolvimento prole.
Coleta de sangue repetida muitas vezes é necessária tanto em curto e longo prazo em estudos in vivo. Devido às diferenças anatómicas específicas de espécies é necessário modulação da técnica de amostragem, a fim de obter amostras de sangue em cobaias, em comparação com outros modelos de roedores <sup> 4,5. Isto inclui a variação ao longo de veias e artérias, e também que as cobaias não tem uma cauda, assim, ter diferentes requisitos e opções de amostragem e de manuseamento. Amostragem do safena ou veia do tarso, induz o mínimo de desconforto e estresse no animal e não requer anestesia 3,9. Esta técnica permite que as amostras de pequenas quantidades de sangue (100-400 ul), por exemplo, repetido., Para determinar os marcadores bioquímicos no plasma. Se um tamanho ainda mais pequeno da amostra é suficiente (50-100 ul), este pode facilmente ser obtido por punção da veia da orelha. Esta técnica também pode ser levada a cabo em animais conscientes e é útil, por exemplo, quando a medição da glucose no sangue 10,11. A amostragem a partir da veia jugular permite a recolha de maiores quantidades de sangue (1-2 ml), mas requer anestesia.
Aqui, apresentamos quatro técnicas de amostragem de sangue diferentes para ambos cobaias conscientes ou anestesiados. O procedures são todos os procedimentos não-terminal na condição de os volumes de amostra e número de amostras não exceder as diretrizes para coleta de sangue em animais de laboratório 6. É no interesse da boa ciência, bem como de bem-estar animal que o estresse deve ser reduzido ao mínimo. Consequentemente, apenas bem treinados e pessoal competente deve executar os procedimentos com animais.
Em comparação com camundongos e ratos, cobaias estão com medo, por natureza e deve ser abordada com calma e tratada corretamente, a fim de reduzir o estresse. Do ponto de vista do bem-estar animal, agindo com cuidado é naturalmente uma prioridade; no entanto, este também irá reduzir o risco de efeitos associados a ansiedade sobre o por exemplo, dados coletados., aumento dos níveis sanguíneos de corticosteróides e glicose 12. Da mesma forma, a movimentação diária irá habituar os animais c…
The authors have nothing to disclose.
Reconhecemos a assistência hábil de Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft e os cuidadores de animais no Departamento de Medicina Experimental, Frederiksberg Campus da Faculdade de Saúde e Ciências Médicas da Universidade de Copenhague, na Dinamarca. Jacob Lønholdt está agradeceu por sua assistência técnica excelente em filmar os procedimentos. Este estudo foi financiado em parte pelo Centro LIFEPHARM de farmacologia in vivo e da Universidade de Copenhagen.
Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
Electric shaver | Wella (Contura), Denmark | 273207 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Syringes | B.Braun-Omnifix-F, Germany | 9161406V | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Needles | BD Microlance,Spain | 301156 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Microvette collection tube | Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany | 201,288,100 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
Accu-Check analyzer | Roche A/S Diagnostics, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Heparin 5000 IE/ml | LEO Pharma, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Anesthesia | Zoletil 50, Chemvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Anesthesia | Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Anesthesia | Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
Neutral eye ointment | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
Gauze or a cotton swab | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
Disinfectant (70% alcohol) | Alternative product may be used. Multiple suppliers |