Introduction
Det övergripande målet med denna metod är att använda dynamisk kontrastförstärkt magnetisk resonanstomografi (DCE-MRI) för orthotopic pankreas tumörxenotransplantat hos möss. DCE-MRI är en icke-invasiv metod för att bedöma mikrovaskulatur i en målvävnad genom att övervaka förändringen av MR kontrast under en viss tidsperiod efter injektion. DCE-MRI har använts för att diagnostisera maligna tumörer och bedöma tumör svar på olika terapier 1-4. Kvantitativ DCE-MRI har present hög reproducerbarhet 5. Att kvantifiera farmakokinetiska parametrar för en MR-kontrastmedel i en målvävnad, måste alla DCE-MR-bilder som förvärvats vid olika tidpunkter och T1 karta erhållits före kontrastinjektion vara coregistered 6. Men på grund av respiratoriska och peristaltiska rörelser i buken, har kvantitativ DCE-MRI haft begränsad ansökan om gastrointestinala tumörer.
Orthotopic pankreastumörmodeller har använts för att utvärderapankreas-tumörrespons efter biologiska terapier och kemoterapi 7,8. Orthotopic tumörmodeller anses överlägsen konventionella subkutana modeller, eftersom mikro i originaltumörstället reflekteras och därmed mänskligt tumörterapisvar kan mer exakt förutsägas. Dock är musen bukspottkörteln ligger i den övre vänstra kvadranten av buken, så kvantitativ DCE-MRI för orthotopic pankreas tumörxenotransplantat i möss har inte lätt genomförts.
Vi har etablerat ett protokoll av DCE-MRI av buken tumörer hos möss genom fastställande av tumörer med hjälp av en ortogonalt böjd plastkortet för att förhindra rörelse överföring från bröstregionen 9. Trycket tillämpas av denna styrelse var lokaliserad på buken, och har inte resulterat i andningssvårigheter. En automatiserad bild coregistration teknik har validerats för DCE-MRI av bukorganen i en fri-andning läge, men den presterar effectively endast när målregionerna röra sig långsamt och regelbundet 10. Andningsfrekvens av djur är variabel under avbildning, kommer så fysisk återhållsamhet i buken vara nödvändigt att hämta tillförlitliga farmakokinetiska parametrar i orthotopic pankreasmodeller tumör mus. Vi har framgångsrikt kvantifieras de farmakokinetiska parametrarna för en MR-kontrastmedel i orthotopic pankreas tumörxenografter använder ortogonalt böjda plastkortet i DCE-MRI 11-13. Här presenterar vi det detaljerade förfarandet för orthotopic pankreastumör modellering, DCE-MRI av tumörxenografter i möss och kvantifiering av farmakokinetiska parametrar.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla förfaranden godkändes av Institutional Animal Care och användning kommittén vid University of Alabama i Birmingham.
1. Orthotopic pankreastumör Mouse Ling
- Kultur standard humana pankreascancercellinjer i Dulbeccos modifierade Eagles medium (DMEM) kompletterat med 10% fetalt bovint serum. Bibehåll alla kulturer vid 37 ° C i fuktad atmosfär med 5% CO2.
- Använd 8-10 veckor gamla kvinnliga svåra kombinerade immundefekta möss. Placera djurburar vid 12 timmar ljus och 12 h mörker cykel vid RT (21 ± 2 ° C) och 60% luftfuktighet.
- Söva alla djur som använder ventilation med 2% av isofluran blandat med syre (2 L / min) under hela operationen. Bekräfta anestesidjupet genom tå nypa reflex. Placera djur på en värmedyna (37 ° C) för att hålla kroppstemperaturen. Applicera veterinär oftalmologiska salva på ögonen för att förhindra torrhet under narkos. &# 160;
- Avlägsna håret i den övre vänstra kvadranten av buken på varje mus, och ge ett analgetiskt läkemedel (carpofen, 5 mg / kg kroppsvikt subkutant) in i området. Applicera en Betadine lösning på exponerad hud. Förbered autoklaveras kirurgiska instrument.
- Gör en 1 cm snitt i huden och bukhinnan med hjälp iris raka sax. Försiktigt bort bukspottkörteln från buken med hjälp av kirurgisk pincett.
- Sätt 28 G nål hos en spruta 0,5 ml insulin i svansen av pankreas och sedan långsamt infundera en lösning av 2,5 miljoner humana pankreatiska cancerceller i 30 ^ il DMEM. Bekräfta att en liten Bleb skapas i huvudet av bukspottkörteln av lösningen.
- Placera försiktigt bukspottkörteln tillbaka in i buken med hjälp av kirurgisk pincett. Stäng bukhinnan och huden i 1 lager med 2 avbryts 5-0 Prolene suturer, och sedan avsluta anestesi. Skicka inte tillbaka ett djur som har genomgått en operation för att bolaget av andra djur tills återhämtat sig helt.60; Ta bort suturer vid 7 ~ 10 dagar efter operationen.
- Ge ytterligare en dos av det smärtstillande läkemedlet (carpofen, 5 mg / kg kroppsvikt subkutant) vid 24 h efter kirurgi.
- Kontrollera tumörstorlek genom att palpera operationen området med två fingrar. Tumörer känner typiskt tätare och bumpier än omgivande vävnader och organ. Vanligtvis tar det ~ 1 - 2 veckor för att börja känna en tumör.
- Övervaka djur dagligen för tecken på sjukdom. När djuren verkar sjuka (brist normala grooming och undvikande beteenden), avslutade vi dem med halsdislokation under anestesi.
2. Magnetic Resonance Imaging
- Applicera MRI när tumörstorleken är ca 5 - 7 mm i diameter vid vanligtvis 2 ~ 4 veckor efter cellimplantation. Använd en MR scanner tillägnad litet djur avbildning eller en klinisk MR scanner utrustad med en specialiserad spole för små djur avbildning.
OBS: Vi använde en 9.4T litet djur MR scanner med en kombination av en 1 H-volym resonator/ Sändare och en ytspole mottagare (30 mm i diameter) (Bruker BIOSPIN Corp., Billerica, MA). En ytspolen ger bättre signal-till-brusförhållande (SNR) 14. - Bered en gadolinium-baserade MR-kontrastmedel för att injicera ~ 0,1-0,2 mmol / kg till varje djur i ~ 0,1 till 0,2 ml PBS (fosfatbuffrad saltlösning).
OBS: Vi använde gadoteridol och injicerades 0,2 mmol / kg i 0,15 ml PBS under en period av 15 sek (0,1 ml / sek). - Förbered en mikro polyetylen röret (längd: 7,62 mm, innerdiameter: 0,28 mm, ytterdiameter: 0,64 mm). Sätt i en 30 G nål (12,7 mm längd) i en ände av röret, och en 30 G trubbig spets nål (9,5 mm längd) i den andra änden. Anslut en 1 ml spruta innehållande MR-kontrastmedel till den trubbiga spetsen nålen och tryck långsamt ned sprutans att fylla upp hela röret med MR kontrastmedel.
- Söva djuren med hjälp av ventilation med ~ 1 - 2% av isofluran blandat med syre (2 L / min) under förberedelse och bildbehandling. Bekräfta djupet av Anesthesia från tå nypa reflex. Applicera veterinär oftalmologiska salva på ögonen för att förhindra torrhet under narkos. Dilatera svansvenen med användning av en värmelampa före nålinförande. Ta mitten av 30 G nål med hjälp Kelly pincett, och sätt in det i svansvenen. Tejpa både svansen och röret på en bit plast eller kartong papper (10 mm bredd x 100 mm längd) för att hålla svansen rakt.
- Placera djuret i ryggläge i en djur bädd utrustad med cirkulerande varmt vatten (eller varm luft) för att reglera kroppstemperaturen under avbildning. Ställ in temperaturen på bädden till 37 ° C. Sätt i en rektal temperatursond för att övervaka kroppstemperaturen under avbildning.
- Applicera ett ortogonalt böjd plastkortet i buken. Se till att tumören är belägen bakom den övre änden av styrelsen, och dra sedan ner brädan något (~ 2 mm) för att säkerställa att tumören fångas av styrelsen. Tejpa styrelsen att djuret säng ordentligt.
- Tejpa en andnings pad omvandlar (SA Instrument, Inc., Stony Brook, NY) på bröstet för att övervaka djurens andning under avbildning. Placera en yta spole på toppen av tumörområdet, och tejpa den till djur säng ordentligt. Skjut djuret bädden in i MR scanner för att placera tumörområdet i mitten av volymen polen (innerdiameter: 72 mm).
- Utför matchning och tuning för både mottagaren och sändaren, följt av mellanlägg.
- Börja med en anatomisk MR-sekvens för att lokalisera tumören. Använd en T2-viktade (T2W) turbo spin-eko sekvens för att erhålla axiala bilder med följande förvärvs parametrar. Repetitionstid (TR) / ekotid (TE) = 3000/34 ms, 128 x 128 matris, 30 x 30 mm synfält, antal medelvärden = 1, eko tåglängd = 4, och 20 angränsande en mm tjocka skivor i vanliga interlace att täcka hela tumörområdet (total scanning tid: 1,6 min).
Anmärkning Eftersom orthotopic pankreatiska tumörer är svårare att vara belägen än subkutana sådana, konventionella localiZer bilder med lägre upplösning kan inte vara bra. - Förvärva T1-viktade (T1W) bilder med olika flip vinklar för att hämta T1 kartan. För detta ändamål använder en gradient eko Multi vinkel tillvägagångssätt med följande parametrar: repetitionstid (TR) / ekotid (TE) = 115/3 ms, 128 x 128 matris, en 30 x 30 mm synfält, antal medelvärdes = 4, ~ 5-7 sammanhängande 1 mm tjocka skivor i vanliga interlace att täcka tumörområdet och sju flip vinklar 10, 20, 30, 40, 50, 60 och 70 (total scanning tiden per flip vinkel: 1 min).
OBS: Det är dock Multi vinkel tillvägagångssätt effektiv endast när B1 fält homogenitet är hög. Om inte, kan kartor T1 erhållas med flera TR tillvägagångssätt istället 15. - Förvärva T1W bilder före och efter gadolinium baserade MR kontrastinjektion. Använd samma förvärvs parametrar och geometrin för T1 kartläggning men med fast flip vinkeln 30. Använd linjär kodning för att säkerställa steady state när centrum av k-space erhålls, especially när en kort TR och en låg grad flip vinkel används. Förvärva 5 baslinjen bilder innan kontrastinjektion. Då förvärvar 40 bilder efter kontrastinjektion (total scanning tid: 45 min). Använd en sprutpump för att injicera kontrastmedlet vid en konstant hastighet (0,01 ml / sek).
- Övervaka djur andas kontinuerligt, och justera isofluran koncentration för att hålla andningsfrekvensen till 50-100 andetag per minut. Övervaka djurkroppen temperatur genom avbildning.
- Efter avslutad DCE-MRI, ta av nålen och andra sonder, och placera djuret i en tom bur bäddsrum med hushållspapper. Massera mjukt nedre delen av buken. Buren ska placeras hälften under en värmelampa för att låta djuret att flytta in och ut ur värme lutning som den återhämtar sig. Lämna inte ett djur utan tillsyn tills den har återfått tillräckligt medvetandet för att upprätthålla sternala VILA.
3. Bildbehandling och analys
- Segmenttumör REGI på i T2W bilder. I T2W bilder, är signalstyrkan i tumörområdet ljusare än för omgivande vävnader, så att tumören gränsen kan manuellt avgränsas.
OBS: Halvautomatiska segmente tekniker såsom global tröskel eller aktivt konture kan användas 16,17, men ojämna bakgrundsintensiteten bör korrigeras speciellt när en yta spole används. - Skapa T1 och protondensitetskartor. I T1W bilder som förvärvats med en gradient eko sekvens, förutsatt att eko tid (TE) är mycket mindre än T2 * värde, är pixelvärdet bestäms av
där S 0 är protontäthet, T 1 är T 1 relaxatidskonstant, TR är repetitionstid, och θ är en flip vinkel. Ekvation (1) kan skrivas om till
641eq2.jpg "/>
när S (θ) / sinθ ersätts med Y, och S (θ) / tanö är ersatt med X. Ekvation (2) är en linjär ekvation, och dess lutning och intercept kan användas för att hämta T1 och S 0 värden, respektive. - Beräkna MR kontrastkoncentration i DCE-MR-bilder. När gadolinium baserade MR kontrastmedel injiceras, är T 1 relaxatidskonstant förändrats över tiden. Så, kan ekvation (1) skrivas om till
T 1 (t) är relaterad med MR kontrastkoncentration, C (t), enligt följande,
där r 1 är längs relaxivitet MR-kontrastmedel. Så, genom att kombinera ekvationerna (3) och (4), är MR kontrastkoncentration bestäms av - Kvantifiera de farmakokinetiska parametrarna för MR-kontrastmedel. Cp (t) presenteras MR kontrastkoncentration i blodplasma vid tiden t efter påbörjad kontrastinjektion. Cp (t) kallas arteriell ingångsfunktion (AIF). Om AIF är tillgänglig, kan de farmakokinetiska parametrarna för MR-kontrastmedel beräknas genom
där C t (t) är MR kontrastkoncentration i en målvävnad, är v p fraktionerad blodplasmavolym, v e är fraktionerad extravaskulär extracellulär volym, och K trans är volymöverföring konstant. Flux hastighetskonstant, k ep, är lika med K trans dividerat med v e. Om AIF inte är tillgänglig, då referensområdet modellen kan användas i stället 18,19. Referensregionen Modellen bygger på flödesbegränsade Kety modell 20 och använder kontrastkoncentration i ett referensområde för att ta bort behovet av AIF enligt följande,
där C t, ROI (t), K träns, ROI, och v e, ROI är kontrastkoncentration, volym överföringskonstant, och fraktionerad extravaskulära-extracellulär volym, respektive, i regionen av intresse (ROI), medan C t, RR (t), K träns, RR, och v e, RR är de i referensregionen. Paravertebrala muskeln väljs ofta som referensregionen, och v e, RR i murin paravertebral muskel antas vara konstant på 0,08 21. Vi använde referensområdet modellen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Mänskliga pankreastumörceller växa framgångsrikt i mus bukspottkörteln skapa en solid tumör. Figur 1 visar fotografier av (A) en normal bukspottkörteln där tumörcellslösning injiceras, och (B) ett representativt mus som bär en orthotopic pankreastumör xenograft (MIA PaCa-2 ). Tumör är beläget i den övre vänstra kvadranten av buken, intill mjälten. Det brukar ta 2-4 veckor för tumörer att växa upp till 5-7 mm i diameter efter cellimplantation.
Motion av orthotopic pankreas tumörxenografter var kraftigt undertryckt, men rörelseartefakt var närvarande i MR-bilder till en viss omfattning. I T2W MR-bilder, standardavvikelsen för MR-signalen i luften ovanför tumörområdet var cirka 2,5 gånger större när pankreastumörceller ortotopiskt implanteras än att när en subkutan tumörmodell användes. Figur 2A visar schema för en setup för DCE -MRI av en ortotop pancreatic tumör xenograft. Den orange cirkeln representerar tumören, fångas av den övre änden av en ortogonalt böjd plast ombord. Figur 2B visar den schematiska av plastkortet med dimensioner. Brädan bredd (30 mm) var avsedd att vara densamma med bredden av djuret sängen för möss. Styrelsen längden var avsedd att vara tillräckligt lång för att tillämpa tejpen ordentligt. Djupet av styrelsen spetsen (4 mm) var avsedd för 20 g möss. Figur 2C visar T2W MR-bilder (sagittalvy) av ett representativt mus som bär en orthotopic pankreastumör xenograft (MIA PaCa-2). Tumör indikeras i en prickad röd cirkel, och intryckn induceras av plastkortet anges med en vit pil.
Kvantitativ DCE-MRI med framgång sökt orthotopic pankreas tumörxenografter använder referensområdet (RR) modell, som beskrivs i ekvation (7). Figur 3A visar kontrast kartor i tumörområdet (färgskala) på 1 minut innan MR c ontrast (gadoteridol) injektion och vid 5 och 40 minuter efter injektion, respektive, överlappad med T2W MR-bilder (gråskala). Musen var bär ett MIA PaCa-2 tumör xenograft ortotopiskt. Figur 3B visar kontrastförstärkningskurvor genomsnitt i tumörområdet (3 x 3 fönster) och paravertebrala muskelregion (9 x 9 fönster) anges med två vita rutor, respektive, i figur 3A. Figurerna 3C och 3D visar K trans och k ep kartor, respektive.
Figur 1. Fotografier av (A) en normal bukspottkörteln injicerats med tumörcellslösning och (B) en orthotopic bukspottskörteln tumör xenograft i ett nedsatt immunförsvar mus. Tumör ligger i övre vänstra kvadranten av buken, indikeras med en vit streckad cirkel.es / ftp_upload / 52641 / 52641fig1highres.jpg "target =" _ blank "> Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2. Schema i DCE-MRI av en orthotopic pankreastumör xenograft. (A) Schematisk bild av en setup för DCE-MRI av en orthotopic pankreastumör xenograft (orange cirkulär region). En kateter införes i svansvenen för att ingjuta MR kontrastmedel. (B) Schematisk bild av en ortogonalt böjd plastskiva med dimensioner. (C) T2W MR-bilder (sagittalvy) av en mus som har fått en orthothopic pankreatisk tumör xenograft indikeras med en streckad röd cirkel, när ett ortogonalt böjd plastkortet tillämpades (indikeras med en vit pil). Klicka här för att se en större versiom av denna siffra.
Figur 3. DCE-MR-bilder och paramatric kartor över en orthotopic bukspottskörteln tumör xenograft. (A) Kontrast kartor på 1 minut före eller vid 5 och 40 minuter efter MR kontrast (gadoteridol) injektion. (B) Kontrast förstärkningskurvor genomsnitt i tumörområdet (3 x 3 fönster) och paravertebrala muskelregion (9 x 9 fönster) indikeras med 2 vita rutor, respektive, i figur 3A. (C) K trans kartan. (D) k ep kartan. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi har infört de detaljerade metoder för orthotopic pankreastumör modellering använder immundefekta möss, DCE-MRI av buken tumörer hos möss, och kvantifiering av dess kinetiska parametrar. I orthotopic pankreastumör modellering, måste man vara försiktig när du sätter en nål i svansen av bukspottkörteln. Om det lyckas, kommer cellerna att överföras till chefen för bukspottkörteln skapa en liten Bleb. Vid tillämpning ett ortogonalt böjd plastkortet, är det viktigt att bekräfta att tumören är belägen under den övre änden av styrelsen. Eftersom pankreastumör är nära till membranet, kan styrelsen inte vara i stånd att hålla den stadigt, speciellt när tumörstorleken är mindre än 5 mm i diameter. Efter bildbehandling, bör buken masseras försiktigt tills djuret är vid medvetande. Det rekommenderas att inte överskrida den totala bildbehandling och förberedelsetiden för varje djur längre än 90 minuter för att förhindra buksmärtor.
Dimensionen av plastenbräda kan behöva justeras i enlighet med storleken av tumörer eller djur. Om tumörstorleken är mindre än 5 mm, tumörerna får inte vara stadigt fångas av den ortogonalt böjd skiva med 4 mm djup och därmed rörelseartefakt kan uppträda i MR-bilder. Även om djuret storleken är större än 20 g, får 4 mm djup inte tillräckligt för att hålla tumören. Emellertid kan alltför högt tryck i buken skada buken nervsystemet förlamande underkroppen av djuret.
Orthotopic pankreastumör modellering i möss med användning av standard humana pankreascancer cellinjer har använts för att studera den terapeutiska svaret av pankreastumörer. Men tumör ta hastighet (procentandel av att ett djur kommer att ha en påtaglig tumör efter implantation) och tillväxttakten var i hög grad beroende tumörcellegenskaper, så det rekommenderas att börja med två gånger fler djur och välj hälften av dem som bär liknande storlek tumörer. Tumörer med oregelbunden form bör uteslutas,eftersom de kan reagera på en terapi annorlunda; formen oegentligheter kan upptäckas genom rutinmässig palpation, men ultraljudsundersökningar kommer att ge bättre bedömning 9. Vissa cellinjer kan utveckla metastaser vanligen i levern. Levermetastaser (MET) kan detekteras vanligen använder självlysande avbildning när luciferas-positiva celler implanterades eller lever dissektion efter djuren dog. Lever MET förkorta livslängden för djuren, så att studieplanen bör fastställas i enlighet därmed.
Kvantitativ DCE-MRI har genomförts framgångsrikt för en orthotopic pankreastumör musmodell. För att kvantifiera farmakokinetiska parametrarna för MR kontrastmedel baserade på flödesbegränsade Kety modell 20, måste den arteriella ingångsfunktion (AIF) vara tillgängliga. I denna tillämpning är bukaorta inom synfältet, så AIF kan erhållas genom direkt mätning av förändringen av MR kontrastkoncentrationen i bukaortan. Emellertid tHan innerdiameter av musen bukaorta är mindre än 1 mm (0,5-0,7 mm) 22, och empiriskt pixelstorleken bör vara minst fyra gånger mindre än diametern (0,125 mm) för att förhindra allvarlig partiell volymeffekt. Dessutom är den idealiska samplingshastighet på AIF 1 - 2 sek 23. I MRI, rumsliga och tids resolutioner kompromissa med SNR. Därför är det en utmaning att få en tillförlitlig AIF i DCE-MRI av möss. Alternativt kan användas den referensområdes (RR) modell. RR-modellen använder data för kontrastförstärkning i ett referensområde (typiskt muskelvävnad) för att ta bort behovet av AIF i farmakokinetiska parametrar kvantifiering. Dock måste fraktionsextravaskulär extracellulära volymen i referensområdet antas, vilket orsakade ca 35% fel i en studie (n = 9) 21. Ändå kan bytet av tumör mikrovaskulatur efter behandling mätas noggrant, om samma referens region väljs vid varje tidpunkt.
24,25.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| DMEM | Invitrogen | 11965-118 | |
| Fetal bovine serum | Harlan Laboratories | BT-9501 | |
| Betadine | Purdue products | 67618-153-01 | |
| 5-0 Prolene sutures | Ethicon | 8720H | |
| 9.4T MR scanner | Bruker Biospin Corporation | BioSpec 94/20 USR | |
| Gadoteridol | Bracco Diagnostics Inc | NDC 0270-1111-03 | |
| Micro-polyethelene tube | Strategic Applications, Inc | #PE-10-25 | |
| 30 G blunt tip needle | Strategic Applications, Inc | 89134-194 | |
| Monitoring and gating system | SA instruments, Inc | Model 1030 | This is an MR compatiable system to measure resiratory rating and body temperature of small animals at the same time. |
| Syringe pump | New Era Pump Systems, Inc. | NE-1600 |
References
- Ergul, N., et al. Assessment of multifocality and axillary nodal involvement in early-stage breast cancer patients using 18F-FDG PET/CT compared to contrast-enhanced and diffusion-weighted magnetic resonance imaging and sentinel node biopsy. Acta Radiol. , (2014).
- Park, J. J., et al. Assessment of early response to concurrent chemoradiotherapy in cervical cancer: value of diffusion-weighted and dynamic contrast-enhanced MR imaging. Magn Reson Imaging. , (2014).
- Nguyen, H. T., et al. Prediction of chemotherapeutic response in bladder cancer using K-means clustering of dynamic contrast-enhanced (DCE)-MRI pharmacokinetic parameters. J Magn Reson Imaging. 10, (2014).
- Teo, Q. Q., Thng, C. H., Koh, T. S., Ng, Q. S. Dynamic Contrast-enhanced Magnetic Resonance Imaging: Applications in Oncology. Clin Oncol (R Coll Radiol). , (2014).
- Zhang, X., Pagel, M. D., Baker, A. F., Gillies, R. J. Reproducibility of magnetic resonance perfusion imaging. PLoS One. 9 (2), e89797 (2014).
- Kim, H., et al. Pancreatic adenocarcinoma: a pilot study of quantitative perfusion and diffusion-weighted breath-hold magnetic resonance imaging. Abdominal imaging. , (2014).
- Derosier, L. C., et al. Combination Treatment with TRA-8 Anti Death Receptor 5 Antibody and CPT-11 Induces Tumor Regression in an Orthotopic Model of Pancreatic Cancer. Clin Cancer Res. 13 (18), 5535s-5543s (2007).
- Derosier, L. C., et al. TRA-8 anti-DR5 monoclonal antibody and gemcitabine induce apoptosis and inhibit radiologically validated orthotopic pancreatic tumor growth. Mol Cancer Ther. 6 (12), 3198-3207 (2007).
- Kim, H., et al. Early therapy evaluation of combined anti-death receptor 5 antibody and gemcitabine in orthotopic pancreatic tumor xenografts by diffusion-weighted magnetic resonance imaging. Cancer Res. 68 (20), 8369-8376 (2008).
- Klein, S., Staring, M., Murphy, K., Viergever, M. A., Pluim, J. P. elastix: a toolbox for intensity-based medical image registration. IEEE Trans Med Imaging. 29 (1), 196-205 (2010).
- Kim, H., et al. Early therapy evaluation of combined cetuximab and irinotecan in orthotopic pancreatic tumor xenografts by dynamic contrast-enhanced magnetic resonance imaging. Mol Imaging. 10 (3), 153-167 (2011).
- Kim, H., et al. Antagonistic effects of anti-EMMPRIN antibody when combined with chemotherapy against hypovascular pancreatic cancers. M Mol Imaging Biol. 16 (1), 85-94 (2014).
- Kim, H., et al. Dual combination therapy targeting DR5 and EMMPRIN in pancreatic adenocarcinoma. Mol Cancer Ther. 11 (2), 405-415 (2012).
- Moyher, S. E., Vigneron, D. B., Nelson, S. J. Surface coil MR imaging of the human brain with an analytic reception profile correction. J Magn Reson Imaging. 5 (2), 139-144 (1995).
- Voigt, T., Nehrke, K., Doessel, O., Katscher, U. T1 corrected B1 mapping using multi-TR gradient echo sequences. Magn Reson Med. 64 (3), 725-733 (2010).
- Liu, H., Liu, Y., Zhao, Z., Zhang, L., Qiu, T. A new background distribution-based active contour model for three-dimensional lesion segmentation in breast DCE-MRI. Medical physics. 41 (8), 082303 (2014).
- Sarkar, S., Das, S. Multilevel image thresholding based on 2D histogram and maximum Tsallis entropy--a differential evolution approach. IEEE Trans Image Process. 22 (12), 4788-4797 (2013).
- Yankeelov, T. E., et al. Quantitative pharmacokinetic analysis of DCE-MRI data without an arterial input function: a reference region model. Magn Reson Imaging. 23 (4), 519-529 (2005).
- Cardenas-Rodriguez, J., Howison, C. M., Pagel, M. D. A linear algorithm of the reference region model for DCE-MRI is robust and relaxes requirements for temporal resolution. Magn Reson Imaging. 31 (4), 497-507 (2013).
- Tofts, P. S., et al. Estimating kinetic parameters from dynamic contrast-enhanced T(1)-weighted MRI of a diffusable tracer: standardized quantities and symbols. J Magn Reson Imaging. 10 (3), 223-232 (1999).
- Yankeelov, T. E., et al. Comparison of a reference region model with direct measurement of an AIF in the analysis of DCE-MRI data. Magn Reson Med. 57 (2), 353-361 (2007).
- Cao, R. Y., Amand, T., Ford, M. D., Piomelli, U., Funk, C. D. The Murine Angiotensin II-Induced Abdominal Aortic Aneurysm Model: Rupture Risk and Inflammatory Progression Patterns. Front Pharmacol. 1 (9), (2010).
- Parker, G. J., et al. Experimentally-derived functional form for a population-averaged high-temporal-resolution arterial input function for dynamic contrast-enhanced MRI. Magn Reson Med. 56 (5), 993-1000 (2006).
- Tseng, W., Leong, X., Engleman, E. Orthotopic mouse model of colorectal cancer. J Vis Exp. (10), 484 (2007).
- Bhullar, J. S., et al. A true orthotopic gastric cancer murine model using electrocoagulation. J Am Coll Surg. 217 (1), 64-70 (2013).
