Summary
Den mest almindeligt anvendte fremgangsmåde til nanostrukturerede lipid-bærer (NLC) syntese involverer olie-i-vand-emulsion, homogenisering og størkning. Dette blev ændret her ved at anvende spredning høj forskydning efter størkning at opnå en NLC med ønskelig størrelse, forbedret medicin indkapsling og narkotika lastning effektivitet som en potentiel bærer for dacarbazin levering.
Abstract
Den eneste formel for dacarbazin (DAC) i klinisk anvendelse er intravenøs infusion, der udgør en dårlig terapeutisk profil grund af den lave dispersitet af lægemidlet i vandig opløsning. For at overvinde dette problem blev en nanostruktureret lipid-bærer (NLC) bestående af glycerylpalmitostearat og isopropylmyristat udviklet til indkapsling Dac. Nlcs med kontrolleret størrelse blev opnået ved anvendelse af dispersion høj forskydning (HSD) efter størkning af olie-i-vand-emulsion. Synteseparametrene, herunder overfladeaktivt koncentration, hastigheden og tidspunkt for HSD blev optimeret for at opnå den mindste CNT med størrelse, polydispergeringsindeks og zeta-potentialet af 155 ± 10 nm, 0,2 ± 0,01, og -43,4 ± 2 mV hhv. De optimale parametre blev også anvendt til Dac-loaded NLC præparat. Den resulterende CNT fyldt med Dac besad størrelse, polydispergeringsindeks og zeta-potentialet på 190 ± 10 nm, 0,2 ± 0,01, og -43,5 ± 1,2 mV hhv. Det stof indkapsling efficiency og medikamentbelastning nåede 98% og 14%, hhv. Dette er den første rapport om indkapsling af Dac hjælp NLC, hvilket indebærer, at NLC kunne være en ny potentiel kandidat som narkotika luftfartsselskab til at forbedre den terapeutiske profil Dac.
Introduction
Dacarbazin (DAC) er et alkylerende middel, som udøver antitumoraktivitet gennem nukleinsyrer methylering eller direkte DNA-skader, hvilket fører til standsning af cellecyklus og celledød 1.
Som et første linje kemoterapeutisk middel, er Dac blevet anvendt alene eller i kombination med andre kemoterapeutiske lægemidler til behandling af forskellige cancertyper 2-6. Det er den mest aktive middel hidtil bruges i behandling af kutant og metastatisk melanom, som er den mest aggressive form for hudkræft 3,7,8. Svarprocenten er imidlertid kun 20% i bedste, og de terapeutiske virkninger ledsages ofte med alvorlige systemiske bivirkninger.
I sin naturlige form, Dac er hydrofil og er ustabil på grund af sin lysfølsomhed 9. Den eneste tilgængelige formel til klinisk anvendelse i øjeblikket er et sterilt pulver, der skal anvendes i suspension til intravenøs infusion 7,8. Den lave svarprocent og høj systemisk toksicitet rspiste af lægemidlet er i høj grad tilskrives dens ringe vandopløselighed, derfor lav tilgængelighed på target site, og høj fordeling på uden for målgruppen sites, der begrænser den maksimale dosis af lægemidlet 10. Den hurtige nedbrydning og metabolisme efter intravenøs optagelse sammen med udviklingen af lægemiddelresistens begrænse den kliniske anvendelse og terapeutiske virkning af lægemidlet 11. Derfor er der et presserende behov for at udvikle alternative Dac formuleringer til behandling af malignt melanom.
Kolloide systemer, der indeholder liposomer, miceller eller nanostrukturerede partikler er blevet intensivt undersøgt for deres anvendelse i drug delivery som gennemgået af Marilene et al. 12 Nanostrukturerede partikler som potentielle lægemiddelkandidater luftfartsselskaber har været stigende opmærksomhed i de seneste ti år på grund af deres evne til at øge medikamentifyldning effektivitet, kontrol medikamentfrigivelse, forbedre narkotika farmakokinetik og biodistribution, og dermed reduce lægemiddel systemisk toksicitet 13. Kun et par nanoformulations, er imidlertid blevet undersøgt hidtil for Dac levering, der viser beskyttelse af lægemidlet fra foto degeneration, forøget lægemiddelopløselighed og forbedret terapeutisk virkning 10,14,15. Men disse formuleringer lidt fra lav indkapslende effektivitet, mens nogle også bruger syntetiske polymere nanopartikler, der ikke er omkostningseffektiv.
Nanostrukturerede lipidbærere (NAR), fremstillet af en blanding af faste og flydende lipider, er blevet udviklet til lægemiddeladministration 16,17. Lægemidlerne, der skal indkapsles, er ofte opløselige i både flydende lipider og faste lipider faser 18, hvilket resulterer i en høj belastning og kontrolleret frigivelse 19. Denne undersøgelse har til formål at udvikle en ny Dac formulering baseret på NLC-indkapsling hjælp glycerylpalmitostearat og isopropylmyristat som lipider. Fremstillingen involveret olie-i-vand-emulsion, fordampning, størkning og homogenization. Præparaterne er blevet karakteriseret for NLC størrelse, form, ultrastruktur, og dispersitet, narkotika indkapslingseffektivitet og lægemiddelfyldning 20.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Fremstilling af olie-i-vand-emulsion
- Afvej glycerylpalmitostearat (120 mg), isopropylmyristat (60 mg), d-α-tocopherylpolyethylenglycol succinat (30 mg) og sojabønnelecithin (30 mg), og tilføj dem til 12,5 ml af organiske opløsningsmidler (6,25 ml acetone og 6,25 ml ethanol). Hurtigt opløses blandingen ved temperaturen 70 ° C (5 ° C over smeltepunktet for det faste lipid) i vandbad.
- Tilføj enten 125, 250 eller 375 mg Poloxamer188 i 12,5 ml Hedeselskabet 2 O at opnå 1-3% (henholdsvis) af Poloxamer 188 opløsning, som er genstand for opvarmning ved samme temperatur som ovenfor.
- Tilsæt vandig fase opløsning fra trin 1.2 til oliefasen opløsningen fra trin 1.1 dråbevis til dannelse emulsioner under magnetisk omrøring ved 400 rpm. Omrør emulsionen ved 400 rpm i yderligere 4 timer for at tillade fordampning af de organiske opløsningsmidler.
2. Størkning og Homogenisering
- Lad than emulsion i et koldt rum (4 ° C) i 2 timer for at størkne / krystallisere.
- Til opnåelse NLC, underkaste emulsionen til høj sheer dispersion (HSD) med en homogenisator ved 10.000-15.000 rpm i 10-40 min.
3. Optimering af NLC Forberedelse
- Tage prøver fra trin 2.2 med et overfladeaktivt middel koncentration på 1, 2 og 3% undergår HSD ved hastigheder på 10.000, 15.000 og 20.000 rpm, henholdsvis og tidsintervaller på 10, 20, 30 og 40 min, henholdsvis
- Undersøg prøverne for partikelstørrelse (PS), poly Dispersionsindekset (PDI), morfologi og ultrastruktur 20.
Bemærk: De parametre, der producerer partikler med den mindste størrelse (155 nm) og PDI (0,2) værdi bestemmes som optimal.
4. Fremstilling af Dac-loaded NLC (NLC-Dac)
- Forbered oliefaseopløsning som beskrevet i trin 1.1 med tilsætning af Dac (70 mg) før opløsning af blandingen ved 70 ° C i vandbad.
- Prepare en vandig fase opløsning som beskrevet i trin 1.2 med 1% overfladeaktivt middel, og tilføje denne opløsning til at fremstillet i trin 4.1 dråbevis til dannelse af en emulsion under magnetisk omrøring ved 400 rpm. Omrør emulsion til yderligere 4 timer til at fordampe de organiske opløsningsmidler.
- Efterlad emulsionen i et koldt rum (4 ° C) i 2 timer for at størkne / krystallisere som beskrevet i trin 2, og endelig underkaste emulsionen til høj sheer dispersion (HSD) under anvendelse af de optimale parametre bestemmes i trin 3.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Forberedelserne af NLC og NLC-Dac hjælp glycerylpalmitostearat og isopropylmyristat med forskellige parametre blev karakteriseret for PS, PDI, morfologi og ultrastruktur 20. PS og PDI af NLCS var overfladeaktivt koncentration, HSD hastighed og varighed afhængig. Bedømt ved PS og PDI af NLCS blev de bedste resultater opnået med 1% af overfladeaktivt middel og en ren dispersion hastighed på 15.000 rpm i 30 minutter (figur 1A, B og C), som derfor wwew valgt som de optimale parametre for NLC forberedelse i denne undersøgelse.
Figur 1. Optimering af parametre, der anvendes i NLC forberedelse. Den optimale overfladeaktive koncentration og hastighed og tidspunkt for HSD blev bestemt efter deres effekt på PS og PDI. (
De optimale parametre blev anvendt til NLC-Dac præparat. Den mindste størrelse opnåede, var 150 ± 10 nm for NLC (figur 2A) og 190 ± 10 nm for NLC-Dac (figur 2B), begge med PDI på 0,2 ± 0,001, hvilket indikerer en god ensartethed.
Figur 2. DLS måling af NLC (A) Den optimale størrelsesfordelingen af almindeligt NLC.; (B) den optimale størrelsesfordelingen af NLC-Dac.
(figur 3).
Figur 3. TEM billeddannelse af NLC og NLC-Dac. Både NLC og NLC-Dac viste en kugleform. (A) Basic NLC struktur omfatter et overfladeaktivt lag (helt sorte pil), flydende lipidmatrix (hvidt fast pil), og faste lipidkrystaller (stiplede hvide pile); (B) NLC-Dac udviste også den grundlæggende struktur som set i NLC men overfladeaktivt lag, flydende lipid matrix og fast lipidkrystaller optrådte ekspanderet; en ekstra underkonstruktion kunne ses i et solidt lipidkrystaller (angivet med stiplede sorte pile), der indikerer lægemiddelfyldning. Bar skala: 50 nm, Forstørrelse: 55,000X. Denne figur er blevet ændret fra 20.
"1"> uploade og indkapsling af Dac i NLC er angivet med størrelse og struktur ændringer, som ses i figur 2 og 3, hvor NLC-Dac viser en større størrelse og ændret interne strukturer i forhold til NLC. Den grundlæggende struktur af NLC omfatter et overfladeaktivt lag, et flydende lipidmatrix og faste lipidkrystaller (figur 3A). NLC-Dac udviste også den grundlæggende struktur som en CNT men med udvidet overfladeaktivt lag, flydende lipidmatrix og faste lipidkrystaller, sammen med en ekstra underkonstruktion inde de faste lipidkrystaller (figur 3B), hvilket indikerer lægemiddelfyldning og indkapsling. De faste lipidkrystaller set i NLC banke tættere end den NLC-Dac, hvilket indikerer, at den faste lipid er mindre krystalliseret i NLC-Dac.
Det stof indkapsling effektivitet (EF) og medikamentbelastning (DL) procentdel blev afledt af følgende ligninger:
"Fo: holde-together.within-side =" 1 "> EE% = W 1 - W 2 / W 1 x 100 = 98,5%DL% = W1 - W2 / W3 x 100 = 14%
hvor W 1 mængde Dac tilføjet i NLC, W 2 mængde un-indfanget Dac, W 3 mængde af lipider tilføjet 20.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Lipidbaserede nanostrukturerede partikler er blevet anvendt til at tilvejebringe et stærkt lipofilt bærer til afgivelse af hydrofobe lægemidler. En NLC er anden generation af fast lipid nanostrukturerede bærer, der er fast ved stue- og legemstemperatur. Inkorporeringen af en fast lipid i en flydende lipid i et NAR resulterer i en mindre perfekt krystallisation, hvilket øger lægemiddelfyldning effektivitet og også reducere udsendelse af indkapslede lægemidler under opbevaring.
For NLC syntese, den mest anvendte fremgangsmåde involverer olie-i-vand-emulsion, homogenisering og størkning / krystallisation 21,22. Homogeniseringen giver nlcs at dispergere grundigt i en vandig fase, mens størkningen ved lav temperatur muliggør den indre oliefase at krystallisere. Der er rapporteret forskellige homogeniseringsmetoder herunder magnetisk omrøring, ultralydbehandling, og HSD, der anvendes før og / eller under størkning 23,24
I denne undersøgelse blev det almindeligt anvendte metode, der oprindelig blev fulgt til NLC forberedelse. Som resultat var utilfredsstillende, blev metoden modificeret således, at HSD blev anvendt efter størkning. Denne modifikation vist sig meget effektiv i partikel generation, PS og PDI kontrol, samtidig med at den NLC syntese enklere, sammenlignet med tidligere rapporter om NLC forberedelse med de samme lipider 23,25. Det var værd at bemærke, at længden af fordampningen (protokol 1.3) og størkning (protokol 2.1) er meget kritisk som for lang eller for kort tid ville have negative virkninger på generation af NLC.
Denne undersøgelse tyder på, at NAR partikler og deres aggregering blev dannet under størkning. HSD kan afbryde aggregering, som var muligvis som følge af hydrofob vekselvirkning mellem nlcs, og stabiliserer også partiklerne ved grundigt remixing dem med overfladeaktivt middel. Proceduren Syntesen blev optimeret sådan that NLC og NLC-Dac blev produceret med en størrelse 155 ± 10 nm og 190 ± 10 nm, og en PDI på 0,2 ± 0,01. Det høje niveau af ensartethed med partikelstørrelser og de små PDI-værdier indikerer, at en tilstrækkelig spredning energi blev opnået og er godt fordelt inden løsningen for afbrydelse af partikelaggregater. Det er blevet foreslået, at partikler på 100-200 nm er ikke tilbøjelige til optagelse af ikke-målrettede celler, herunder mononukleare fagocyterende system således har en lang blodcirkulationen tid in vivo 26,27, en PDI på mere end 0,5 ruller er en indikation af partikelaggregering 28; jo lavere PDI-værdi, jo højere størrelsen homogenitet mellem partiklerne 29. Yderligere forøgelse af HSD hastighed og tid over det optimale punkt kunne resultere i yderligere PS reduktion, og dermed en stigning i samspillet mellem små partikler samt re-sammenlægning. Forskellen i størrelse og struktur mellem NLC og NLC-Dac tyder på, at Dac lastning og indkapsling var vellykket. Lægemidlet binder til det ydre lag af CNT og indkapsling inden i lipidmatricer rumme potentiale for langvarig lægemiddelfrigivelse, der kan indebære lægemiddelfrigivelse først fra det ydre lag, efterfulgt af frigivelse fra den flydende lipid matrix og derefter fra de faste lipidkrystaller af NLC 30.
I øjeblikket fire nanoformulations har været forsøgt for levering af Dac som et enkelt middel. Den seneste formulering rapporteret designet til duel indkapsling af Dac og vitamin A 32. Disse formuleringer led under en lav indkapslingseffektivitet og / eller relativt komplekse synteseprocedurer. Dette er den første rapport til indkapsling af Dac med en NLC, beviser fordelagtige i forhold til andre indkapslinger tidligere rapporterede. NLC-Dac er let at lave og præsenterer højere narkotika indkapsling og medikamentbelastning effektivitet 20. CNT-Dac viste næsten 50% aflægemiddel frigives inden for de første 2 timer, mens den resterende frigives langsomt i op til 30 timer 20. Den tidlige frigivelse kan skyldes binding af lægemidlet med overfladeaktivt lag på overfladen af CNT, hvilket indikerer, at denne formulering ikke kan være ideel til at erstatte formuleringen i klinisk brug. Men lægemidlet i NLC-Dac forekom mere stabil sammenlignet med den nanoemulsionen rapporteret tidligere 10. Desuden er der blevet foreslået lipidbaserede køretøjer til behandling kutant melanom og epidermoid carcinom gennem topisk lægemiddeltilførsel 32,10, hvilket indikerer, at NLC-Dac udviklet i denne undersøgelse også kan være potentielt gavnlig til topisk applikation, hvor tidlig lægemiddelfrigivelse ikke potentielt ville føre til alvorlig systemisk toksicitet.
På grund af de kollektive begrænsninger med de tilgængelige drug delivery luftfartsselskaber udviklet hidtil, er der behov for yderligere forskning for at udvikle mere avancerede nanomaterialer for Dac levering for målrettetkræftbehandling.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Forfatterne anerkender Saudi-Arabien-finansieret stipendium (I821) for at gøre forskningen muligt. Forfatterne er taknemmelige for Dr. Xianwei Liu for eksperthjælp i TEM analyse på Cranfield University.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Dacarbazine (DAC) | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | D2390-100MG | drug used for uploading |
| glyceryl palmitostearate | Gattefossé (Saint_Priest_cédex, France) | 85251-77-0 | solid lipid |
| d-α- Tocopherol polyethylene glycol succinate (TPGS) | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 57668 | lipid phase surfactant |
| Poloxamer 188 | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 15759-1KG | liqiud phase surfactant |
| Acetone | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 650501-1L | organic solvent |
| Ethanol | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 459836-1L | organic solvent |
| Soybean lecithin (SL) | Cuisine Innovation (Dijon, France) | SLL1402 | lipid phase surfactant |
| Double-distilled water was collected in our laboratory from | Millipore-Q Gradient A10 ultra-pure water system (Millipore, France) | SAS - 67120 | aqueous phase |
| T 25 digital ULTRA-TURRAX | IKA | 3725000 | as high shear disperser |
| Hotplate Magnetic Stirrer | Scientific Support, Inc | 1454 | emulsion homogenization |
References
- Loo, T. L., Housholder, G. E., Gerulath, A. H., Saunders, P. H., Farquhar, D. Mechanism of action and pharmacology studies with DTIC (NSC 45388). Cancer Treat Rep. 60 (2), 149-152 (1976).
- Behringer, K., et al. Omission of dacarbazine or bleomycin, or both, from the ABVD regimen in treatment of early-stage favourable Hodgkin's lymphoma (GHSG HD13): An open-label, randomised, non-inferiority trial. The Lancet. 385 (9976), 1418-1427 (2014).
- Carvajal, R. D., et al. A phase 2 randomised study of ramucirumab (IMC-1121B) with or without dacarbazine in patients with metastatic melanoma. Eur J Cancer. 50 (12), 2099-2107 (2014).
- Jiang, G., Li, R., Sun, C., Liu, Y., Zheng, J. Dacarbazine combined targeted therapy versus dacarbazine alone in patients with malignant melanoma: A meta-analysis. PLoS ONE. 9 (12), (2014).
- Lazar, V., et al. Sorafenib plus dacarbazine in solid tumors: A phase i study with dynamic contrast-enhanced ultrasonography and genomic analysis of sequential tumor biopsy samples. Invest New Drugs. 32 (2), 312-322 (2014).
- Niemeijer, N. D., Alblas, G., Van Hulsteijn, L. T., Dekkers, O. M., Corssmit, E. P. M. Chemotherapy with cyclophosphamide, vincristine and dacarbazine for malignant paraganglioma and pheochromocytoma: Systematic review and meta-analysis. Clin Endocrinol (Oxf). 81 (5), 642-651 (2014).
- Bedikian, A. Y., Garbe, C., Conry, R., Lebbe, C., Grob, J. J. Dacarbazine with or without oblimersen (a Bcl-2 antisense oligonucleotide) in chemotherapy-naive patients with advanced melanoma and low-normal serum lactate dehydrogenase: 'The AGENDA trial'. Melanoma Res. 24 (3), 237-243 (2014).
- Daponte, A., et al. Phase III randomized study of fotemustine and dacarbazine versus dacarbazine with or without interferon-a in advanced malignant melanoma. J Trans Med. 11 (1), (2013).
- Jiao, J., Rhodes, D. G., Burgess, D. J. Multiple Emulsion Stability: Pressure Balance and Interfacial Film Strength. J Colloid Interface Sci. 250 (2), 444-450 (2002).
- Kakumanu, S., Tagne, J. B., Wilson, T. A., Nicolosi, R. J. A nanoemulsion formulation of dacarbazine reduces tumor size in a xenograft mouse epidermoid carcinoma model compared to dacarbazine suspension. Nanomedicine. 7 (3), 277-283 (2011).
- Xie, T., Nguyen, T., Hupe, M., Wei, M. L. Multidrug resistance decreases with mutations of melanosomal regulatory genes. Cancer Res. 69 (3), 992-999 (2009).
- Estanqueiro, M., Amaral, M. H., Conceição, J., Lobo, J. M. S. Nanotechnological carriers for cancer chemotherapy: the state of the art. Colloids Surf., B. 126, 631-648 (2015).
- Koziara, J. M., Whisman, T. R., Tseng, M. T., Mumper, R. J. In-vivo efficacy of novel paclitaxel nanoparticles in paclitaxel-resistant human colorectal tumors. J Controlled Release. 112 (3), 312-319 (2006).
- Ding, B., et al. Biodegradable methoxy poly (ethylene glycol)-poly (lactide) nanoparticles for controlled delivery of dacarbazine: Preparation, characterization and anticancer activity evaluation. Afr J Pharm Pharacol. 5 (11), 1369-1377 (2011).
- Ding, B., et al. Anti-DR5 monoclonal antibody-mediated DTIC-loaded nanoparticles combining chemotherapy and immunotherapy for malignant melanoma: target formulation development and in vitro anticancer activity. Int J Nanomedicine. 6, 1991-2005 (2011).
- Jenning, V., Thünemann, A. F., Gohla, S. H. Characterisation of a novel solid lipid nanoparticle carrier system based on binary mixtures of liquid and solid lipids. Int J Pharm. 199 (2), 167-177 (2000).
- Müller, R. H., Radtke, M., Wissing, S. A. Nanostructured lipid matrices for improved microencapsulation of drugs. Int J Pharm. 242 (1-2), 121-128 (2002).
- Pouton, C. W. Lipid formulations for oral administration of drugs: Non-emulsifying, self-emulsifying and 'self-microemulsifying' drug delivery systems. Eur. J. Pharm. Sci. 11 (Suppl. 2), S93-S98 (2000).
- Jores, K., Mehnert, W., Drechsler, M., Bunjes, H., Johann, C., Mäder, K. Investigations on the structure of solid lipid nanoparticles (SLN) and oil-loaded solid lipid nanoparticles by photon correlation spectroscopy, field-flow fractionation and transmission electron microscopy. J Controlled Release. 95 (2), 217-227 (2004).
- Almousallam, M., Zhu, H. Encapsulation of cancer therapeutic agent dacarbazine using nanostructured lipid carrier. Int nano lett. , (2015).
- Ng, W. K., et al. Thymoquinone-loaded nanostructured lipid carrier exhibited cytotoxicity towards breast cancer cell lines (MDA-MB-231 and MCF-7) and cervical cancer cell lines (HeLa and SiHa). BioMed Research International. , (2015).
- Sun, M., et al. Quercetin-nanostructured lipid carriers: Characteristics and anti-breast cancer activities in vitro. Colloids Surf., B. 113, 15-24 (2014).
- Savla, R., Garbuzenko, O. B., Chen, S., Rodriguez-Rodriguez, L., Minko, T. Tumor-Targeted Responsive Nanoparticle-Based Systems for Magnetic Resonance Imaging and Therapy. Pharm Res. 31 (12), 3487-3502 (2014).
- Chen, Y., et al. Formulation, characterization, and evaluation of in vitro skin permeation and in vivo pharmacodynamics of surface-charged tripterine-loaded nanostructured lipid carriers. Int J Nanomedicine. 7, 3023 (2012).
- Sanna, V., Caria, G., Mariani, A. Effect of lipid nanoparticles containing fatty alcohols having different chain length on the ex vivo skin permeability of Econazole nitrate. Powder Technol. 201 (1), 32-36 (2010).
- Brigger, I., Dubernet, C., Couvreur, P. Nanoparticles in cancer therapy and diagnosis. Adv Drug Deliv Rev. 54 (5), 631-651 (2002).
- Visaria, R. K., et al. Enhancement of tumor thermal therapy using gold nanoparticle-assisted tumor necrosis factor-a delivery. Mol Cancer Ther. 5 (4), 1014-1020 (2006).
- Tripathi, A., Gupta, R., Saraf, S. A. PLGA nanoparticles of anti tubercular drug: Drug loading and release studies of a water in-soluble drug. Int J PharmTech Res. 2 (3), 2116-2123 (2010).
- Joshi, M., Patravale, V. Nanostructured lipid carrier (NLC) based gel of celecoxib. Int J Pharm. 346 (1-2), 124-132 (2008).
- Lim, W. M., Rajinikanth, P. S., Mallikarjun, C., Kang, Y. B. Formulation and delivery of itraconazole to the brain using a nanolipid carrier system. Int J Nanomedicine. 9 (1), 2117-2126 (2014).
- Bei, D., Zhang, T., Murowchick, J. B., Youan, B. C. Formulation of dacarbazine-loaded cubosomes. Part III. physicochemical characterization. AAPS PharmSciTech. 11 (3), 1243-1249 (2010).
- Lei, M., et al. Dual drug encapsulation in a novel nano-vesicular carrier for the treatment of cutaneous melanoma: Characterization and in vitro/in vivo evaluation. RSC Advances. 5 (26), (2015).
