Summary
Наиболее часто используемый метод для наноструктурированных липидного носителя (НЖК) синтеза включает масло-в-воде, гомогенизация и затвердевание. Это было изменено здесь путем применения высокой дисперсии сдвига после затвердевания для достижения НЖК с желаемого размера, улучшенной инкапсуляция наркотиков и эффективности загрузки лекарственного средства в качестве потенциального носителя для доставки дакарбазин.
Abstract
Единственная формула дакарбазину (КОР) в клиническом применении является внутривенная инфузия, представляя плохой терапевтический профиль вследствие низкой дисперсности лекарственного средства в водном растворе. Чтобы преодолеть это, носитель наноструктурированных липидов (НЖК), состоящий из глицерилпальмитостеарата и изопропилмиристат был разработан для инкапсулирования Dac. НЖК с контролируемым размером были достигнуты с использованием высокой дисперсии сдвига (HSD) после застывания масла в воде эмульсии. Параметров синтеза, в том числе концентрации поверхностно-активного вещества, скорость и время HSD были оптимизированы для достижения наименьшего НЖК с размером, индекс полидисперсности и дзета-потенциал 155 ± 10 нм, 0,2 ± 0,01 и -43.4 ± 2 мВ, соответственно. Оптимальные параметры были также использованы для Dac нагруженным НЖК подготовки. Полученный НЖК загружен с Дака обладал размер, индекс полидисперсности и дзета-потенциал 190 ± 10 нм, 0,2 ± 0,01 и -43.5 ± 1,2 мВ, соответственно. Капсула препарат эфтивность и погрузка наркотиков достигла 98% и 14%, соответственно. Это первый отчет о инкапсулирования Дака с использованием НЖК, подразумевая, что НЖК может стать новым потенциальным кандидатом в качестве носителя лекарственного средства для улучшения терапевтического профиля Дака.
Introduction
Дакарбазин (КОР) представляет собой алкилирующий агент , который проявляет противоопухолевую активность с помощью нуклеиновых кислот метилирование или прямого повреждения ДНК, что приводит к остановке клеточного цикла и гибели клеток 1.
В качестве первой линии химиотерапевтического агента, Dac был использован отдельно или в комбинации с другими химиотерапевтическими препаратами для лечения различных видов рака 2-6. Это самый активный агент до сих пор используется в лечении кожных и метастатической меланомы, которая является наиболее агрессивной формой рака кожи 3,7,8. Частота ответа, тем не менее, только 20%, в лучшем случае, и терапевтические эффекты часто сопровождается тяжелыми системными побочными эффектами.
В своей естественной форме, Dac является гидрофильным и нестабильными из - за его светочувствительность 9. Единственная доступная формула для клинического применения в настоящее время является стерильного порошка для использования в виде суспензии для внутривенного вливания 7,8. Низкий уровень ответа и высокая токсичность гели препарата в значительной степени объясняется его плохой растворимости в воде, поэтому низкая доступность на целевом сайте, и высокое распространение на нецелевых сайтов, который ограничивает максимальную дозу препарата 10. Быстрое разложение и обмен веществ после внутривенного приема вместе с развитием лекарственной устойчивости ограничивают клиническое применение и терапевтический эффект препарата 11. Таким образом, существует острая необходимость в разработке альтернативных формулировок Dac для лечения злокачественной меланомы.
Коллоидные системы , содержащие липосомы, мицеллы или частицы наноструктурные интенсивно исследовались для их использования в доставке наркотиков , как рассмотрено Marilene и др. 12 наноструктурных частиц в качестве потенциальных носителей лекарственных средств привлекают все большее внимание в последнее десятилетие из - за их способности увеличивать нагрузку наркотиков эффективность, контроль высвобождения лекарственного средства, улучшить фармакокинетику наркотиков и биораспределение и поэтому гнаркотиков развиваются системную токсичность 13. Только несколько nanoformulations, однако, были исследованы до сих пор для Dac доставки, показывая защиту лекарственного средства от фотографии дегенерации, повышенной растворимости лекарственного средства, а также улучшение терапевтического эффекта 10,14,15. Однако эти препараты страдают от низкой эффективности герметизирующего в то время как некоторые из них также с использованием наночастиц синтетических полимеров, которые не являются экономически эффективными.
Наноструктурированные липидные носители (НЖК), изготовленные из смеси твердых и жидких жиров, которые были разработаны для доставки лекарственных средств 16,17. Препараты инкапсулировать часто растворимы в обоих жидких липидов и твердых липидов фазы 18, что приводит к высокой нагрузке и контролируемое высвобождение 19. Данное исследование направлено на разработку новой композиции на основе DAC на НЖК-инкапсуляция с использованием глицерилпальмитостеарат и изопропилмиристат как липиды. Препарат участвует масло-в-воде, выпаривание, кристаллизацию и homogenizatioп. Препараты были охарактеризованы для НЖК размера, формы, ультраструктуры и дисперсности, эффективность инкапсулирования лекарственного средства и загрузки лекарственного средства 20.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Получение эмульсии масло-в-воде
- Взвесить глицерилпальмитостеарат (120 мг), изопропилмиристат (60 мг), D-α-токоферола полиэтиленгликоль сукцинат (30 мг) и соевый лецитин (30 мг), и добавить их к 12,5 мл органических растворителей (6,25 мл ацетона и 6,25 мл этанола). Быстро растворения смеси при температуре 70 ° С (5 ° C выше температуры плавления твердого липидов) в водяной бане.
- Добавить либо 125, 250 или 375 мг Poloxamer188 в 12,5 мл DDH 2 O достичь 1-3% (соответственно) полоксамера 188 раствора, который подлежит нагреву при той же температуре, что и выше.
- Добавляют водный раствор фазы со стадии 1.2 в масляную фазу раствора со стадии 1.1 по каплям образовывать эмульсии при перемешивании магнитной мешалкой при 400 оборотах в минуту. Перемешайте эмульсию при 400 оборотах в минуту в течение еще 4 ч, чтобы позволить испарение органических растворителей.
2. Затвердевание и усреднении
- Оставьте тон эмульсия в холодной комнате (4 ° С) в течение 2 ч, чтобы затвердеть / кристаллизоваться.
- Для получения НЖК, подвергать эмульсии высокой чистой дисперсии (HSD) с помощью гомогенизатора при 10000-15000 оборотов в минуту в течение 10-40 мин.
3. Оптимизация НЖК Подготовка
- Отбирают образцы из шага 2.2 с концентрацией поверхностно-активного вещества 1, 2 и 3%, подвергаемого HSD со скоростью 10000, 15000 и 20000 оборотов в минуту, соответственно, и временные интервалы 10, 20, 30 и 40 мин, соответственно,
- Изучите образцы для размера частиц (PS), поли индекса дисперсии (PDI), морфологии и ультраструктуры 20.
Примечание: Параметры, которые производят частицы с наименьшим размером (155 нм) и значение PDI (0.2) определяются оптимальным.
4. Получение Дак-нагруженной НЖК (НЖК-Дак)
- Готовят раствор масляной фазе, как описано на стадии 1.1, с добавлением Dac (70 мг) до растворения смеси при 70 ° С в водяной бане.
- пего восстановить водный раствор фазы, как описано на стадии 1.2 с 1% поверхностно-активного вещества, и добавить этот раствор, который получают на стадии 4.1 по каплям с образованием эмульсии при перемешивании магнитной мешалкой со скоростью 400 оборотов в минуту. Перемешайте эмульсию еще 4 ч для испарения органических растворителей.
- Оставьте эмульсию в холодном помещении (4 ° C) в течение 2 ч, чтобы затвердеть / кристаллизоваться, как описано на стадии 2, и, наконец, при условии эмульсии высокой чистой дисперсии (HSD), используя оптимальные параметры, определенные в шаге 3.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Препараты НЖК и НЖК-Дака использованием глицерилпальмитостеарат и изопропилмиристат с различными параметрами были охарактеризованы для PS, PDI, морфологии и ультраструктуры 20. PS и ППД НКС были концентрации поверхностно-активного вещества, скорость HSD и зависимой длительности. Судя по PS и ППД НЖК, наилучшие результаты были достигнуты с помощью 1% поверхностно -активного вещества и чистой скорости дисперсии 15000 оборотов в минуту в течение 30 мин (рис 1А, В и С), которые , следовательно , wwew выбранного в качестве оптимальных параметров НЖК подготовка в этом исследовании.
Рисунок 1. Оптимизация параметров , используемых в НЖК препарата. Концентрация оптимальная поверхностно -активное вещество и скорость и время HSD определяли в соответствии с их воздействием на PS и PDI. (
Оптимальные параметры были использованы для подготовки НЖК-Дак. Самый маленький размер достигнут составлял 150 ± 10 нм для НЖК (рис 2А) и 190 ± 10 нм для НЖК-DAC (рис 2В), как с PDI 0,2 ± 0,001, что указывает на хорошую однородность.
Рисунок 2. DLS измерение НЖК (A) Оптимальное распределение по размерам обычной НЖК. (B) оптимальное распределение по размерам НЖК-Дака.
(рисунок 3).
Рисунок 3. ПЭМ изображения НЖК и НЖК-DAC. Оба НЖК и НЖК-Дака показал сферическую форму. (A) Основная НЖК структура содержит слой поверхностно -активное вещество (сплошная черная стрелка), жидкий липидную матрицу (твердое вещество белого цвета со стрелкой), а также твердые кристаллы липидов (пунктирные белые стрелки); (B) НЖК-Дак также показали основную структуру , как показано в НЖК но слой поверхностно -активное вещество, жидкий липидную матрицу и твердые липидные кристаллы появились расширены; дополнительные подструктуры можно было увидеть внутри твердых кристаллов липида (показано пунктирной черными стрелками), что указывает на содержание лекарственного средства. Бар масштаб: 50 нм, Увеличение: 55,000X. Этот рисунок был изменен с 20.
"1"> загрузку и инкапсуляция Dac в НЖК указывается размер и структура изменений с , как показано на фиг.2 и 3 , где НЖК-DAC показывает больший размер и изменили внутренние структуры по сравнению с НЖК. Базовая структура НЖК содержит слой поверхностно -активное вещество, жидкий липидную матрицу и твердых кристаллов липида (рис 3 , а ). НЖК-DAC также демонстрируют базовую структуру как НЖК , но с расширенным слоем поверхностно -активного вещества, жидкого липидную матрицу и твердых кристаллов липида, вместе с дополнительным субструктуры внутри твердых кристаллов липида (фигура 3В), что указывает на содержание лекарственного средства и инкапсуляция. Твердые кристаллы липидов видели в НЖК оказалось более плотным, чем в НЖК-Дака, что указывает на то, что твердый липид меньше кристаллизуется в НЖК-Дака.
Эффективность инкапсулирования лекарственного средства (ФВ) и загрузка лекарственного средства в процентах (DL), были получены из следующих уравнений:
"ВОК: Keep-together.within-страницу =" 1 "> EE% = W 1 - W 2 / W 1 х 100 = 98,5%DL% = W 1 - W 2 / W 3 х 100 = 14%
где W 1 количество Дака добавляют в НЖК, W 2 количества ун-захваченный Дака, W 3 количество липидов добавляют 20.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Липидной основе наноструктурных частиц были использованы для обеспечения высокой степени липофильных носителя для доставки гидрофобных лекарственных препаратов. НЖК второе поколение твердого носителя липида наноструктурированного, которые являются твердыми при комнатной и температурой тела. Включение твердого липида в жидком липида в НЖК приводит к менее совершенной кристаллизации, тем самым повышая эффективность загрузки лекарственного средства, а также уменьшение выталкивание инкапсулированных лекарственных средств во время хранения.
Для НЖК синтеза, наиболее часто используемый метод включает масло-в-воде, гомогенизация и затвердевание / кристаллизацию 21,22. Гомогенизация позволяет НЖК тщательно диспергировать в водной фазе, в то время как затвердевание при низкой температуре позволяет внутреннюю фазу масла кристаллизоваться. Различные методы гомогенизация сообщалось в том числе при перемешивании магнитной мешалкой, обработки ультразвуком и HSD, которые используются до и / или во время кристаллизации 23,24
В этом исследовании, обычно используемый метод был первоначально следуют за НЖК подготовки. Как результат был неудовлетворительным, метод был модифицирован таким образом, что РНП был применен после того, как затвердевание. Эта модификация доказали свою высокую эффективность в генерации частиц, PS и PDI контроля, а также сделать НЖК синтез проще, по сравнению с предыдущими отчетами о НЖК подготовки с использованием тех же липидов 23,25. Это стоит отметить, что длина испарения (протокол 1.3) и отвердевания (протокол 2.1) имеет очень важное значение, как слишком долго или слишком короткое время будет иметь негативные последствия для генерации НЖК.
Это исследование показывает, что были сформированы НЖК частиц и их агрегация при затвердевании. HSD может сорвать агрегацию, которое было возможно из-за гидрофобного взаимодействия между НЖК, а также стабилизации частиц, тщательно ремиксы их с поверхностно-активным веществом. Процедура синтеза была оптимизирована таким тшляпа НЖК и НЖК-Дак были произведены с размером 155 ± 10 нм и 190 ± 10 нм, соответственно, и PDI 0,2 ± 0,01. Высокий уровень однородности с размерами частиц и малых значений PDI указывает на то, что достаточное количество энергии, дисперсия была достигнута, и хорошо распределяется в растворе для разрушения агрегатов частиц. Было высказано предположение , что частицы 100-200 нм не склонны к сообразительности нецелевых клеток, в том числе системы фагоцитов мононуклеаров, таким образом , на длительное время циркуляции крови в естественных условиях 26,27, в то время как в PDI более 0,5 является показателем агрегации частиц 28; Чем ниже значение ИПД, тем выше размер гомогенность между частицами 29. Дальнейшее увеличение скорости и времени HSD выше оптимальной точки может привести к дальнейшему снижению PS, и, следовательно, увеличение взаимодействия между мелкими частицами, а также повторной агрегации. Разница в размерах и структуре между НЖК и NLC-Дак предполагает, что погрузка и герметизация Dac был успешным. Препарат связывания с внешним слоем НЖК и инкапсуляцией внутри липида матрицы обеспечивают потенциал для пролонгированного высвобождения лекарственного средства, что может включать в себя высвобождение лекарственного средства, во-первых от внешнего слоя, с последующим выделением из жидкой липидной матрице, а затем из твердых кристаллов липида НЖК 30.
В настоящее время четыре nanoformulations были испробованы на поставку Дака в качестве единственного агента. Последняя формулировка сообщила , была разработана для дуэли инкапсулирования Дака и витамина А , 32. Однако эти препараты, страдали от низкой эффективности инкапсулирования и / или относительно сложных способов синтеза. Это первый отчет для инкапсулирования Дака с НЖК, доказывая преимущество над другими инкапсуляций сообщалось ранее. НЖК-Дак легко сделать и представляет более высокую герметизацию наркотиков и эффективность загрузки наркотиков 20. НЖК-Дак показал почти 50%Выделяемый лекарственный препарат в течение первых 2 ч в то время как остальные выпустили медленно , в течение до 30 часов 20. Ранний выпуск может быть из-за связывания лекарственного средства с слоем поверхностно-активного вещества на поверхности НЖК, указывая, что этот препарат не может быть идеальным, чтобы в настоящее время заменить формулировку в клиническом применении. Однако препарат в НЖК-Дака оказался более стабильным по сравнению с наноэмульсии сообщалось ранее 10. Кроме того, транспортные средства на липидной основе, были предложены для лечения меланомы кожи и плоскоклеточный рак через местной доставки лекарственных средств 32,10, что свидетельствует о том , что НЖК-DAC разработан в данном исследовании , также могут быть потенциально полезными для местного применения , где раннее высвобождение лекарственного средства не будет потенциально привести до тяжелой системной токсичности.
Из-за коллективных ограничений с имеющимися носителями доставки лекарственных средств, разработанных до сих пор, необходимы дальнейшие исследования для разработки более продвинутых наноматериалов для Dac доставки для целевыхлечение рака.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего раскрывать.
Acknowledgments
Авторы признают Саудовская Аравия финансируемую стипендию (I821) для принятия исследования возможно. Авторы выражают благодарность д-ру XIANWEI Лю для экспертной поддержки в анализе ТЭМ в университете Cranfield.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Dacarbazine (DAC) | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | D2390-100MG | drug used for uploading |
| glyceryl palmitostearate | Gattefossé (Saint_Priest_cédex, France) | 85251-77-0 | solid lipid |
| d-α- Tocopherol polyethylene glycol succinate (TPGS) | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 57668 | lipid phase surfactant |
| Poloxamer 188 | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 15759-1KG | liqiud phase surfactant |
| Acetone | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 650501-1L | organic solvent |
| Ethanol | Sigma Aldrich (Gillingham Dorset, UK) | 459836-1L | organic solvent |
| Soybean lecithin (SL) | Cuisine Innovation (Dijon, France) | SLL1402 | lipid phase surfactant |
| Double-distilled water was collected in our laboratory from | Millipore-Q Gradient A10 ultra-pure water system (Millipore, France) | SAS - 67120 | aqueous phase |
| T 25 digital ULTRA-TURRAX | IKA | 3725000 | as high shear disperser |
| Hotplate Magnetic Stirrer | Scientific Support, Inc | 1454 | emulsion homogenization |
References
- Loo, T. L., Housholder, G. E., Gerulath, A. H., Saunders, P. H., Farquhar, D. Mechanism of action and pharmacology studies with DTIC (NSC 45388). Cancer Treat Rep. 60 (2), 149-152 (1976).
- Behringer, K., et al. Omission of dacarbazine or bleomycin, or both, from the ABVD regimen in treatment of early-stage favourable Hodgkin's lymphoma (GHSG HD13): An open-label, randomised, non-inferiority trial. The Lancet. 385 (9976), 1418-1427 (2014).
- Carvajal, R. D., et al. A phase 2 randomised study of ramucirumab (IMC-1121B) with or without dacarbazine in patients with metastatic melanoma. Eur J Cancer. 50 (12), 2099-2107 (2014).
- Jiang, G., Li, R., Sun, C., Liu, Y., Zheng, J. Dacarbazine combined targeted therapy versus dacarbazine alone in patients with malignant melanoma: A meta-analysis. PLoS ONE. 9 (12), (2014).
- Lazar, V., et al. Sorafenib plus dacarbazine in solid tumors: A phase i study with dynamic contrast-enhanced ultrasonography and genomic analysis of sequential tumor biopsy samples. Invest New Drugs. 32 (2), 312-322 (2014).
- Niemeijer, N. D., Alblas, G., Van Hulsteijn, L. T., Dekkers, O. M., Corssmit, E. P. M. Chemotherapy with cyclophosphamide, vincristine and dacarbazine for malignant paraganglioma and pheochromocytoma: Systematic review and meta-analysis. Clin Endocrinol (Oxf). 81 (5), 642-651 (2014).
- Bedikian, A. Y., Garbe, C., Conry, R., Lebbe, C., Grob, J. J. Dacarbazine with or without oblimersen (a Bcl-2 antisense oligonucleotide) in chemotherapy-naive patients with advanced melanoma and low-normal serum lactate dehydrogenase: 'The AGENDA trial'. Melanoma Res. 24 (3), 237-243 (2014).
- Daponte, A., et al. Phase III randomized study of fotemustine and dacarbazine versus dacarbazine with or without interferon-a in advanced malignant melanoma. J Trans Med. 11 (1), (2013).
- Jiao, J., Rhodes, D. G., Burgess, D. J. Multiple Emulsion Stability: Pressure Balance and Interfacial Film Strength. J Colloid Interface Sci. 250 (2), 444-450 (2002).
- Kakumanu, S., Tagne, J. B., Wilson, T. A., Nicolosi, R. J. A nanoemulsion formulation of dacarbazine reduces tumor size in a xenograft mouse epidermoid carcinoma model compared to dacarbazine suspension. Nanomedicine. 7 (3), 277-283 (2011).
- Xie, T., Nguyen, T., Hupe, M., Wei, M. L. Multidrug resistance decreases with mutations of melanosomal regulatory genes. Cancer Res. 69 (3), 992-999 (2009).
- Estanqueiro, M., Amaral, M. H., Conceição, J., Lobo, J. M. S. Nanotechnological carriers for cancer chemotherapy: the state of the art. Colloids Surf., B. 126, 631-648 (2015).
- Koziara, J. M., Whisman, T. R., Tseng, M. T., Mumper, R. J. In-vivo efficacy of novel paclitaxel nanoparticles in paclitaxel-resistant human colorectal tumors. J Controlled Release. 112 (3), 312-319 (2006).
- Ding, B., et al. Biodegradable methoxy poly (ethylene glycol)-poly (lactide) nanoparticles for controlled delivery of dacarbazine: Preparation, characterization and anticancer activity evaluation. Afr J Pharm Pharacol. 5 (11), 1369-1377 (2011).
- Ding, B., et al. Anti-DR5 monoclonal antibody-mediated DTIC-loaded nanoparticles combining chemotherapy and immunotherapy for malignant melanoma: target formulation development and in vitro anticancer activity. Int J Nanomedicine. 6, 1991-2005 (2011).
- Jenning, V., Thünemann, A. F., Gohla, S. H. Characterisation of a novel solid lipid nanoparticle carrier system based on binary mixtures of liquid and solid lipids. Int J Pharm. 199 (2), 167-177 (2000).
- Müller, R. H., Radtke, M., Wissing, S. A. Nanostructured lipid matrices for improved microencapsulation of drugs. Int J Pharm. 242 (1-2), 121-128 (2002).
- Pouton, C. W. Lipid formulations for oral administration of drugs: Non-emulsifying, self-emulsifying and 'self-microemulsifying' drug delivery systems. Eur. J. Pharm. Sci. 11 (Suppl. 2), S93-S98 (2000).
- Jores, K., Mehnert, W., Drechsler, M., Bunjes, H., Johann, C., Mäder, K. Investigations on the structure of solid lipid nanoparticles (SLN) and oil-loaded solid lipid nanoparticles by photon correlation spectroscopy, field-flow fractionation and transmission electron microscopy. J Controlled Release. 95 (2), 217-227 (2004).
- Almousallam, M., Zhu, H. Encapsulation of cancer therapeutic agent dacarbazine using nanostructured lipid carrier. Int nano lett. , (2015).
- Ng, W. K., et al. Thymoquinone-loaded nanostructured lipid carrier exhibited cytotoxicity towards breast cancer cell lines (MDA-MB-231 and MCF-7) and cervical cancer cell lines (HeLa and SiHa). BioMed Research International. , (2015).
- Sun, M., et al. Quercetin-nanostructured lipid carriers: Characteristics and anti-breast cancer activities in vitro. Colloids Surf., B. 113, 15-24 (2014).
- Savla, R., Garbuzenko, O. B., Chen, S., Rodriguez-Rodriguez, L., Minko, T. Tumor-Targeted Responsive Nanoparticle-Based Systems for Magnetic Resonance Imaging and Therapy. Pharm Res. 31 (12), 3487-3502 (2014).
- Chen, Y., et al. Formulation, characterization, and evaluation of in vitro skin permeation and in vivo pharmacodynamics of surface-charged tripterine-loaded nanostructured lipid carriers. Int J Nanomedicine. 7, 3023 (2012).
- Sanna, V., Caria, G., Mariani, A. Effect of lipid nanoparticles containing fatty alcohols having different chain length on the ex vivo skin permeability of Econazole nitrate. Powder Technol. 201 (1), 32-36 (2010).
- Brigger, I., Dubernet, C., Couvreur, P. Nanoparticles in cancer therapy and diagnosis. Adv Drug Deliv Rev. 54 (5), 631-651 (2002).
- Visaria, R. K., et al. Enhancement of tumor thermal therapy using gold nanoparticle-assisted tumor necrosis factor-a delivery. Mol Cancer Ther. 5 (4), 1014-1020 (2006).
- Tripathi, A., Gupta, R., Saraf, S. A. PLGA nanoparticles of anti tubercular drug: Drug loading and release studies of a water in-soluble drug. Int J PharmTech Res. 2 (3), 2116-2123 (2010).
- Joshi, M., Patravale, V. Nanostructured lipid carrier (NLC) based gel of celecoxib. Int J Pharm. 346 (1-2), 124-132 (2008).
- Lim, W. M., Rajinikanth, P. S., Mallikarjun, C., Kang, Y. B. Formulation and delivery of itraconazole to the brain using a nanolipid carrier system. Int J Nanomedicine. 9 (1), 2117-2126 (2014).
- Bei, D., Zhang, T., Murowchick, J. B., Youan, B. C. Formulation of dacarbazine-loaded cubosomes. Part III. physicochemical characterization. AAPS PharmSciTech. 11 (3), 1243-1249 (2010).
- Lei, M., et al. Dual drug encapsulation in a novel nano-vesicular carrier for the treatment of cutaneous melanoma: Characterization and in vitro/in vivo evaluation. RSC Advances. 5 (26), (2015).
