Abstract
עדשת העין היא איבר שקוף כי ומשגרת ומתמקד אור כדי ליצור תמונה ברורה על הרשתית. אצל בני אדם, שרירים מתכווצים ריסים כדי לעוות את העדשה, מה שמוביל לעלייה בכוחה האופטי 'העדשה להתמקד בעצמים קרובים, תהליך המכונה אירוח. גיל הקשורים שינויים נוקשים עדשה קושרו פרסביופיה, הפחתת העדשה 'היכולת להכיל, ובהרחבה, את הצורך במשקפי קריאה. למרות עדשות עכבר אינה להתאים או לפתח פרסביופיה, במודלים של עכברים יכולים לספק כלי רב ערך עבור גנטי פתולוגיות עדשת הבנה, וההזדקנות המואצת נצפתה בעכברים מאפשרת הלימוד של שינויים הקשורים בגיל בעדשה. פרוטוקול זה מדגים שיטה פשוטה, מדויקת, וחסכונית לקביעת נוקשות עדשת עכבר, באמצעות coverslips זכוכית ליישם ברצף הגדלת עומסי דחיסה על גבי העדשה. נציג נתונים לאשר עדשות העכבר להיות נוקשה עם הגיל, כמועדשות אדם. שיטה זו היא מאוד לשחזור ואף עלול להיות מדורג עד מכנית עדשות מבחן מחיות גדולות יותר.
Protocol
הנהלים כל חיה בוצעו בהתאם ההמלצות מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה על ידי המכונים הלאומיים לבריאות ותחת פרוטוקול שאושר על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים מוסדיים השתמש במכון המחקר סקריפס.
1. עדשות Dissection
- להרדים עכברים על פי המלצות המכונים הלאומיים לבריאות "מדריך לטיפול והשימוש בחי מעבדה" ופרוטוקולי שימוש בבעלי חיים במוסד שאושר.
- Enucleate העין מעכברים באמצעות מלקחיים מעוקלים. לדכא את הרקמה סביב העין עם מלקחיים כדי להביא את העין מתוך השקע, ואז לקטוף את העין מהשקע עם מלקחיים. עבר עיניים בופר פוספט 1x הטרי (PBS) בצלחת לנתיחה.
- חותכים את עצב הראייה קרוב גלגל העין ככל האפשר. בעדינות ובזהירות להכניס פינצטה ישר עדין אל תוך גלגל העין דרך wher חורדואר עצב הראייה יוצא האחורי.
- בזהירות עושים חתך במספריים לתוך גלגל העין מן אחורי אל הקצה של הקרנית. עדשות מכרסמות לכבוש ~ 30% של העין. ודא חתכים אלה בזהירות, ואל תכניס פינצטה או מספריים עמוק מדי לתוך העין כדי למנוע נזק העדשה.
- חותכים לאורך המפגש בין הקרנית בלובן העין בבית חצי הדרך לפחות סביב גלגל העין.
- דחוף בעדינות את הקרנית כדי להסיר את העדשה מהעין דרך הפתח שנעשה צעדי 1.4 ו -1.5.
- שימוש במלקחיים ישר טיפ נאים כדי להסיר כל פסולת גדולה בזהירות כי הוא עדיין מחובר העדשה. ראייה לבדוק את העדשה לכל נזק לפני שתמשיך המדידות נוקשות.
2. מדידות נוקשות
- לשקול לפחות 10 coverslips מאותה תיבה באמצעות איזון אנליטיים. מצא את המשקל הממוצע של coverslips. לקבלת עקביות, השתמש באותה קופסת coverslips עבור כל הניסויים. טרום רטובבמראה coverslips ו-זווית ישרה ב PBS 1x בטמפרטורת החדר למשך שעה לפחות 2 לפני תחילת הניסויים.
- ממלא את החדר המדיד (ראה איור 1) עם 65 - 75 מיליליטר של 1x PBS. תא המדידה נעשה מתוך פרספקס ידי חנות מכונת in-house, ואת divots בתא נעשה על ידי מקדחה מוגדרת לעומק הרצוי עם מקדח מתאים. עדשות לשמור על שקיפות ב 1x PBS בטמפרטורת החדר למשך בדיקות מכניות.
איור 1:. נוקשות מדידת לשכת תצלום מראה את הממדים של חדר המדידה נוקשת מחוייט עם מגוון רחב של divots עומקים שונים ובצורות שונות. Divots העגול 200 מיקרומטר או 300 מיקרומטר עמוק (ראשי חץ צהובים) משמש את המידות על עדשות עכבר. Divots הם 2 מ"מ בקוטר ~ 13-. 14 מ"מ מהקצה של החדר אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
- מניחים המראים בזווית ישר לתוך התא במרחק קבוע מן השקע אשר ישמש כדי להחזיק את העדשה. ודא במראה לא זז במהלך הניסוי.
- עדשות העברת גזור לתא מדידה בקפידה עם מלקחיים לתפוס או מלקחיים מעוקלים.
- קח תמונה עליונה לאור העדשה פרקה ישר מלמעלה. קח תמונות העדשה העכבר 30X הגדלה עם תאורה מ מיקרוסקופ לנתח (למטה) ומקור אור סיבים אופטיים על הצדדים על ימין ועל שמאל. הגדר את אספקת החשמל סיבים אופטיים עד 80% של עוצמת האור המקסימלית. התאם את פלט אספקת החשמל מבוסס על תאורה מפוזרת, העדפות המשתמש ואת איכות התמונה לפי הצורך.
- קח תמונת נוף בצד של העדשה לא הטעונה, אשר ניתן לראות דרך רימראה ght-זווית. אם המצלמה אינה מכוילת, לצלם תמונה של הקצה המראה בפוקוס. קצה המראה באורך 5 מ"מ, מדידה זו ניתן להשתמש מאוחר יותר כדי לקבוע את הפיקסלים / מ"מ ולשמש סרגל קנה המידה של תמונות.
- עדשת מקום לתוך השקע, ולאשר כי העדשה מונחת כהלכה ו ישר את השקע. קח תמונה של העדשה לפני הטעינה. העדשה צריכה להיות נחה את השקע על הקדמי שלה או בקוטב אחורי.
- מקום 1 coverslip בעדינות על העדשה. חכה 2 דקות כדי לאפשר שרץ, ולקחת עוד תמונת הצד להציג של העדשה הטעונה.
- ממשיכים להוסיף coverslips כמו בשלב 2.8 וצילמו-מבט מהצד לאחר תוספת של כל coverslip כמו בשלב 2.8 עד סך של 10 coverslips מוחלים.
- הסר את כל coverslips. חכה 2 דקות, ולצלם תמונת נוף בצד של העדשה (ומחוץ לה את השקע) לאחר הסרת כל coverslips.
3. מדידת העדשה Nucleus
- כדי determine בגודל גרעין העדשה, להזיז את העדשה אל צלחת נקייה פטרי מלא 1x PBS.
- בעדינות decapsulate העדשה באמצעות מלקחיים ישר בסדר.
- להשיל את תאי סיבי קליפת המוח על ידי גלגול העדשה בין אצבע עטוית כפפה. גרעין העדשה הנותר ירגיש כמו גולה קשה. השתמש בהליך זה כדי לבודד את הגרעין על עדשות מבוגרות מתחיל ב -1 לחודש של גיל. מאז הגרעין המבודד הוא גוף נוקשה, בדיקה מכאנית נוספת של גרעין העדשה לא יכולה להתבצע באמצעות שיטה מתוארת זה.
- לשטוף בעדינות את גרעין העדשה 1x PBS בצלחת פטרי.
- מניחים את גרעין העדשה בחזרה לתוך תא המדידה (לא את השקע), ולקחת תמונה של גרעין העדשה דרך המראה בזווית ישרה.
איור 2:. עדשות עכבר דחוסים ידי Coverslips (א) סכמטי ו- (ב) תצלום של האקסהתקנת perimental מראה עדשת עכבר 2 בן חודש בתוך שקע 200 מיקרומטר עמוק בתוך תא המדידה מלא 1x PBS. מראה זווית נכונה ומצלמה דיגיטלית רכובה על מיקרוסקופ לנתיחה שמשו כדי לאסוף תמונות של העדשה במהלך דחיסה על ידי coverslips. (C) תמונות של נופי sagittal של עדשת wild-type 2-בן חודש הדחוסה על ידי מספר הגדל והולך של coverslips ברציפות ספקו את הנתונים הגולמיים למדידת קטרים ציריים משווניים וחישוב זנים ציריים משווניים במהלך בדיקת דחיסה מבוססת coverslip. השתקפות של העדשה ניתן לראות לפעמים את coverslips (רוב נראה בבירור בתמונה 1 coverslip). בעת ביצוע מדידות, להתעלם ההשתקפות ולמדוד אל הקודקוד של העדשה. (ד) תמונות של נופי sagittal של עדשת wild-type בן חודש 2-דחיסת הדואר ועל גרעין העדשה המבודד. עדשת פוסט-דחיסת הגרעין מבודד ישב מחוץ את השקע. ברי סולם, 1 מ"מ. נתון זה שונה מן Gokhב, et al. PLoS ONE, 2012 19. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
ניתוח תמונה 4.
- מדוד בקטרים משווניים ו ציריים של עדשות לפני טעינה ואחרי כל שלב טעינה באמצעות ImageJ או תוכנה דומה. מדוד את הקוטר של כל גרעין העדשה. גרעין העדשה כמעט כדורי כך מדידה בכל אורינטציה תספיק 19,21.
- תקן את העדשה צירית בקטרים ידי הוספת עומק השקע בשימוש. בתא המדידה, את השקע הסתיר 200 מיקרומטר (עדשות עכבר 2-בן חודש) או 300 מיקרומטר (4 בן חודש ו -8 חודשים ישנות עדשות עכבר) של העובי הצירי של העדשה.
- חשבת את צירית זנים משווניים מן מדידות קוטר עדשה באמצעות המשוואה, ε = (d - d 0) / ד 0, שם ε הוא זן, d הוא צירי או דוארקוטר quatorial בעומס נתון, ד 0 הוא בקוטר צירי או משווני המקביל בעומס אפס.
- מגרש את צירית זנים משווניים כפונקציה של העומס המוטל (במ"ג).
- מגרש את צירי, הקו משווה ובקטרים גרעיניים. לחשב ולתכנן את יחס ממדי עדשה על ידי חלוקה בקוטר הצירי ידי הקוטר המשווני.
- לחשב ולתכנן את היקף העדשה באמצעות המשוואה, נפח = 4/3 × π × r E 2 × r A, כאשר r E הוא רדיוס r המשווני הוא הרדיוס הצירי נמדד על פי התמונה לקחה צעד 2.6. משוואה זו מניחה העדשה היא אליפטית oblate (אליפסואיד) 1,22.
- לחשב ולתכנן את היקף גרעיני באמצעות המשוואה, נפח = 4/3 × π × r N 3, כאשר r N הוא רדיוס של גרעין העדשה כפי שהן נמדדות תמונה לקחה צעד 3.5. משוואה זו מניחה את i גרעין העדשהsa בתחום 19,21.
- לחשב ולתכנן את השבר גרעיני כיחס בין היקף גרעיני בהיקף העדשה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
הנוקשות והממדים של 2, 4 ו 8 חודשים ישני עדשות עכבר נמדדו. עכברים היו כל wild-type חיות על רקע המתח טהור C57BL6 המתקבל מתקן גידול בעלי חיים TSRI, ואת כל עדשה היתה עמוסה 1 עד 10 coverslips. הזנים הציריים משווניים חושבו כפונקציה של עומס המופעל על ידי מדידה הצירית ובקטרי קו משווים של העדשה לאחר התוספת של כל coverslip, ולאחר מכן נרמול כל שינוי בקוטר לקוטר פרקו המקביל. שמונה עדשות מכל גיל נבדקו, והתוצאות באות לידי ביטוי בדברים ± סטיית התקן הממוצעת. כפי שניתן לראות 19 בעבר, זן צירי הוא פונקציה לוגריתמית של עומס המופעל (איור 3 א). חלה ירידה תלוית גיל מובהקת סטטיסטית זנים ציריים משווניים תחת העומס מופעל המרבי (איור 3), המציין כי עדשת העכבר מתקשחת עם גיל. רחובמדידות גשם היו מאוד לשחזור פני עדשות של הבנים אותו הגיל, כפי שהודגמו על ידי סטיות התקן הקטנות.
נתוני הדמות שנאספו במהלך הניסוי הזה שימשו גם כדי לקבוע מאפיינים מורפולוגיים העדשה כמה אחרים (איור 4). כצפוי, צירי ובקטרים משווניים ונפח עדשה עלה עם גיל (איור 4 א, 4 ב ו 4D). יחס ההיבט עולה כי העדשה בעל קוטר משווני מעט גדול יותר בקוטר צירי, ו פרמטר זה לא השתנה עם גיל (האיור 4C). הקוטר, נפח שבריר של גרעין העדשה עלתה עם הגיל (איור 4E, 4F ו 4G). תוצאות אלו מצביעות כי גרעין העדשה Remodels להגדיל את שטחו היחסי כפי הגילאים העדשה.
נתונים אלה מראים כי עדשות עכבר להגדיל נוקשות עם גיל, בדומה לשינויים בתוך גינג 9,15 עדשות אדם. נתונים אלה גם מסכים עם תצפיות קודמות שנעשו בשיטה דומה 18 ועל ידי מיקרוסקופיה אופטית ברילואן 23 כי עדשות העכבר להגדיל נוקשות עם הגיל. שני מחקרים אחרים השתמשו בשיטה המתוארת להראות tropomodulin-1 כי, גידול יקטין הצביע לקצה מכסת חלבון, CP49, חלבון סיבי ביניים חרוזים, ואת aquaporin 0 יש צורך לשמור על עדשה נוקשת 19,20. באמצעות שיטה זו, השפע של דגמי עכבר עבור פתולוגיות עדשה וההזדקנות המואצת עכברים יכול לשמש כדי להבין את השינויים נוקשים עדשה עקב וריאציה גנטית ו / או הזדקנות. שיטה זו יכולה גם להיות מותאמת עבור עדשות ממינים אחרים. הממדים של החדר המשמש בניסויים האלה מותאמים עבור עדשות עכבר, אבל יכולים להיות מדורג בקלות עבור עדשות ממינים גדולים. בעתיד, זה יהיה מעניין לקבוע אם גודל עדשת מאזניים עם קשיחות עדשה פני מינים.
o: keep-together.within-page = "1"> בעומס הנמוך ביותר (1 coverslip, 129.3 מ"ג), לא היה הבדל ברור צירי זנים משווניים בין 2, 4 ו 8 חודשים ישני עדשות. הגידול נוקשה עדשה עם גיל הפך לברור יותר בעומסים גבוהים יותר. יתכן כי הקורטקס החיצוני של העדשה (~ 100 מיקרומטר) שנדחס על ידי coverslip הראשון אינו משנה נוקש עם גיל, או ששיטה זו אינה מסוגלת להבחין שינויים קטנים זן בעומסים נמוכים. נתוני morphometrics עולים כי עליות היא העדשה כולו והנפח גרעיני לתאם עם קשיחות עדשה מוגברת כפונקציה של גיל.
איור 3:. הצירי המשווני זני עומס Curves עבור 2, 4 ו 8 חודשים הישן (2M, 4M ו 8M) עדשות עכבר wild-type (א) Axial זן דחיסה זמם כפונקציה של העומס המופעל ( מ"ג). (ב) המשוונית compזן ressive זמם כפונקציה של העומס המופעל (מ"ג). ארבע ושלושה חודשים בת 8 עדשות הציג פחות לחץ מאשר עדשות בן 2 חודשים בעומסים המקסימלית, מה שמצביע על עלייה נוקשות העדשה עם הגיל. ** P <0.01. ראוי לציין, כי ציר Y שונה בין (א) ו- (ב). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 4:. מאפיינים מורפולוגיים של 2, 4 ו 8 חודשים הישן (2M, 4M ו 8M) עדשות עכבר wild-type (א) Axial בקוטר (B) בקוטר המשוונית בהדרגה עם העלייה בגיל. היחס היבט העדשה (C) מראה כי עדשות העכבר רחבים מעט בקו המשווה העדשה. נפח העדשות (D), קוטר הגרעין (E), נפח גרעיני (F) שברים גרעיני (G) בהדרגה עם העלייה בגיל. **, P <0.01. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ישנם מספר שיקולים מרכזיים בעת שימוש בשיטה זו כדי למדוד נוקשות עדשה. ראשית, coverslips מוחלים על העדשה בזווית אלכסונית מעט (8 - 8.5 °) ביחס לחלק התחתון של החדר (θ). זה יחול מרכיב קטן מאוד של עומס equatorially ולא axially. עם זאת, עומס משווני זה נחשב זניח בגלל חטא θ ≈ 0.1 19. אם שיטה זו מותאמת עבור עדשות גדולות, את הזווית של coverslips אל החלק התחתון של החדר היה צריכה להימדד על מנת לקבוע האם עומס משווני יש בחשבון חישובי זן. שנית, חשוב לאפשר את העדשה כדי לאזן לאחר תוספת של כל coverslip. תקופת ההמתנה של 2 דקות מאפשרת עיוות תלוי זמן (כלומר., זחילה) להתרחש, כך תמונות נלקחות רק כאשר העדשה נמצאת צורת שיווי משקל 19. שלישית, פרוטוקול זה הוא מותאם למדידת מתח דחיסה על מ 'Ouse עדשות על פני טווח דינמי רחב של עומסים. במחקרים טייס, עומס להחיל של 1,293 מ"ג (כלומר, עשרה 18 x 18 מ"מ coverslips) דחוס העדשה בעכבר כדי זן מקסימלית, מעבר שהגדילה המון לא לגרום לעיוות נוסף ניכר. זאת בשל נוכחותם של גרעין העדשה הנוקשה שאינו לעוות ניכרת תחת דחיסת 19. רביעית, פרוטוקול זה ימנע נזק לרקמות בלתי הפיך. בניסויים שפורסמו בעבר, ללא כל שינוי, תכונות מכניות של עדשות העכבר נצפו בטעינה חוזרת, דבר המצביע על כך בשיטה זו אינו גורם נזק העדשה 19. כאשר בודקים עדשות מכאניות של מינים שונים או עדשות מוטציה, בדיקות טייס צריכים להיעשות כדי לקבוע את העומס המרבי דרוש זן מירבית על-ידי חזרה על שלבי 2.8 - 2.10 השוואת עקומות עומס זן, בקטרי עדשה ואמצעי אחסון עדשה בין הראשון ושני טוען. לבסוף, שיטה זו מספקת מדידה אמפירית של קשיחות o f העדשה כולה ולא ניתן להבדיל בין תרומות של תאים מסוגים שונים (תאי אפיתל, סיבי קליפת המוח, סיבי גרעיני) ואת הקפסולה העדשה תכונות מכניות מחיטה העדשה.
הזנים הציריים משווניים הם זממו כאן כפונקציה של העומס המוטל. המחקרים קודמים לכמת עדשת עכבר נוקש 19,21, חוסן 21 או השינוי בקוטר 18 על עומס מופעל. זנים הוא גודל חסר ממד המאפשר השוואה ישירה בין עדשות בגדלים שונים. שים לב רחבה משוונית (זן חיובי) מתרחשת בד בבד עם הדחיסה צירית מיושמת (זן השלילי) בשל שימור נפח עדשה (כלומר, השפעת Poisson). עם זאת, הזנים המשווניים שנצפו היו הרבה יותר קטנים ב בהירות מוחלטת מאשר הזנים הציריים, המציין כי בשיטה זו יש פחות ברזולוציה לזהות שינויים קטנים זן משווני לעומת זן צירי.
NT "> לסיכום, זו שיטה פשוטה עם מכשיר התאסף בקלות למדידת קשיחות עדשת עכבר ניתן ליישם באופן כללי נרחב במחקר עדשה כדי להבין טוב יותר כיצד מוטציות בחלבונים, פתולוגיות ו / או הזדקנות להשפיע נוקשות עדשה. בעוד שעדשות עכבר לא להכיל, שיטה זו עדיין יכולה להבהיר את חלבוני שינויים הקשורים בגיל שתורמים נוקשות עדשה גדלו, ואפשרות לתרום ידע חדש לפיתוח טיפולים חדשניים פרסביופיה.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
החוקרים אין לי מה לחשוף.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Fine tip straight forceps | Fine Scientific Tools | 11252-40 | |
| Microdissection scissors, straight edge | Fine Scientific Tools | 15000-00 | |
| Curved forceps | Fine Scientific Tools | 11272-40 | |
| Seizing forceps | Hammacher | HSC 702-93 | Optional |
| Dissection dish | Fisher Scientific | 12565154 | |
| 60 mm Petri dish | Fisher Scientific | 0875713A | |
| 1x phosphate buffered saline (PBS) | Life Technologies | 14190 | |
| 18 x 18 mm glass coverslips | Fisher Scientific | 12-542A | |
| Measurement chamber with divots to hold lenses | Custom-made (see Figure 1) | ||
| Right-angle mirror | Edmund Optics | 45-591 | |
| Light source | Schott/Fostec | 8375 | |
| Illuminated dissecting microscope | Olympus | SZX-ILLD100 | With SZ-PT phototube |
| Digital camera | Nikon | Coolpix 990 |
References
- Lovicu, F. J., Robinson, M. L. Development of the ocular lens. , Cambridge University Press. (2004).
- Piatigorsky, J. Lens differentiation in vertebrates. A review of cellular and molecular features. Differentiation. 19 (3), 134-153 (1981).
- Glasser, A. Restoration of accommodation: surgical options for correction of presbyopia. Clin Exp Optom. 91 (3), 279-295 (2008).
- Keeney, A. H., Hagman, R. E., Fratello, C. J. Dictionary of ophthalmic optics. , Butterworth-Heinemann. (1995).
- Millodot, M. Dictionary of optometry and visual science. 7, Elsevier/Butterworth-Heinemann. (2009).
- Heys, K. R., Cram, S. L., Truscott, R. J. Massive increase in the stiffness of the human lens nucleus with age: the basis for presbyopia. Mol Vis. 10, 956-963 (2004).
- Heys, K. R., Friedrich, M. G., Truscott, R. J. Presbyopia and heat: changes associated with aging of the human lens suggest a functional role for the small heat shock protein, alpha-crystallin, in maintaining lens flexibility. Aging Cell. 6 (6), 807-815 (2007).
- Pierscionek, B. K. Age-related response of human lenses to stretching forces. Exp Eye Res. 60 (3), 325-332 (1995).
- Glasser, A., Biometric Campbell, M. C. optical and physical changes in the isolated human crystalline lens with age in relation to presbyopia. Vision Res. 39 (11), 1991-2015 (1999).
- Weeber, H. A., van der Heijde, R. G. On the relationship between lens stiffness and accommodative amplitude. Exp Eye Res. 85 (5), 602-607 (2007).
- Weeber, H. A., et al. Dynamic mechanical properties of human lenses. Exp Eye Res. 80 (3), 425-434 (2005).
- Fisher, R. F. Elastic properties of the human lens. Exp Eye Res. 11 (1), 143 (1971).
- Krueger, R. R., Sun, X. K., Stroh, J., Myers, R. Experimental increase in accommodative potential after neodymium: yttrium-aluminum-garnet laser photodisruption of paired cadaver lenses. Ophthalmology. 108 (11), 2122-2129 (2001).
- Burd, H. J., Wilde, G. S., Judge, S. J. An improved spinning lens test to determine the stiffness of the human lens. Exp Eye Res. 92 (1), 28-39 (2011).
- Glasser, A., Campbell, M. C. Presbyopia and the optical changes in the human crystalline lens with age. Vision Res. 38 (2), 209-229 (1998).
- Pau, H., Kranz, J. The increasing sclerosis of the human lens with age and its relevance to accommodation and presbyopia. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 229 (3), 294-296 (1991).
- Hollman, K. W., O'Donnell, M., Erpelding, T. N. Mapping elasticity in human lenses using bubble-based acoustic radiation force. Exp Eye Res. 85 (6), 890-893 (2007).
- Baradia, H., Nikahd, N., Glasser, A. Mouse lens stiffness measurements. Exp Eye Res. 91 (2), 300-307 (2010).
- Gokhin, D. S., et al. Tmod1 and CP49 synergize to control the fiber cell geometry, transparency, and mechanical stiffness of the mouse lens. PLoS One. 7 (11), e48734 (2012).
- Sindhu Kumari, S., et al. Role of Aquaporin 0 in lens biomechanics. Biochem Biophys Res Commun. , (2015).
- Fudge, D. S., et al. Intermediate filaments regulate tissue size and stiffness in the murine lens. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52 (6), 3860-3867 (2011).
- Kuszak, J. R., Mazurkiewicz, M., Zoltoski, R. Computer modeling of secondary fiber development and growth: I. Nonprimate lenses. Mol Vis. 12, 251-270 (2006).
- Scarcelli, G., Kim, P., Yun, S. H. In vivo measurement of age-related stiffening in the crystalline lens by Brillouin optical microscopy. Biophys J. 101 (6), 1539-1545 (2011).
