Introduction
सामाजिक हानि, कठिनाई भाषा के माध्यम से संवाद स्थापित करने, और दोहराव नमूनों व्यवहार 1: ऑटिज्म स्पेक्ट्रम विकार (एएसडी) एक neurodevelopmental तीन मुख्य लक्षण से मिलकर विकार है। 2000 के बाद से, जो एएसडी के साथ का निदान किया गया व्यक्तियों की संख्या 1 से 150 में 1 से 68 में दस साल 2 की अवधि में वृद्धि हुई है। हालांकि विकार के प्रसार में वृद्धि जारी है, विकार के कारण अभी तक ज्ञात नहीं है। वहाँ, कोर और एएसडी के जुड़े लक्षण के लिए उपयुक्त माउस मॉडल की पहचान के रूप में इन मॉडलों अंतर्निहित लक्षणों और एएसडी के कारणों में से एक वृद्धि की समझ के लिए ले जा सकता है के प्रयासों में वृद्धि हुई है। वहाँ कई जन्मजात माउस उपभेदों कि दोहराए व्यवहार 3 सहित एएसडी के मूल लक्षण, के लिए चेहरे की वैधता के साथ व्यवहार प्रदर्शित करने के लिए दिखाई देते हैं।
प्रतिबंधित, दोहराए व्यवहार (आरआरबी) इस तरह के एएसडी के रूप में कुछ मानसिक विकारों का एक कोर के लक्षण हैं।क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों विकार 4 की गंभीरता के साथ बढ़ा सकते हैं, और काफी प्रभावित व्यक्तियों की जीवन शैली को बाधित कर सकते हैं। क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों को आमतौर पर दो श्रेणियों, निचले क्रम दोहराए व्यवहार है, जो मनुष्यों में इस तरह की कमाल की है और हाथ फड़फड़ा के रूप में कार्रवाई से मिलकर में रखा जाता है; और उच्च आदेश दोहराए व्यवहार है, जो नियमित और प्रतिरोध के लिए सख्त पालन से मिलकर 5-8 बदलने के लिए।
निचले क्रम के दोहराव व्यवहार में व्यापक रूप से मूषक जहां वे मोटर stereotypies, जो आसानी से एक प्रयोगशाला की स्थापना 9 में मनाया जा सकता है के रूप में प्रकट में अध्ययन किया गया है। इन कार्यों के लिए मानव में क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के लिए अच्छा चेहरा वैधता, और संभवतः मजबूत निर्माण वैधता के रूप में अच्छी तरह से 10 लग गए हैं। निचले क्रम क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों की उपस्थिति के लिए परीक्षण मुकाबलों और इन मोटर stereotypies 11 वर्ष की अवधि का अध्ययन करने के लिए माउस गतिविधि की वीडियो निगरानी के माध्यम से पूरा किया जा सकता। उच्च आदेश दोहराए व्यवहार बुनियादी जैव चिकित्सा पुनः के लिए एक चुनौती बनमूषक उपयोग खोज, के रूप में इन क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के रूप में आसानी से सरल अवलोकन के माध्यम से पहचान नहीं कर रहे हैं। इन कार्यों की पहचान करने में कठिनाई के कारण, उच्च आदेश दोहराए व्यवहार के लिए कम से स्थापित assays के लिए मौजूद हैं। परंपरागत रूप से, उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के एक उलझन के प्रतिमान, जहां परीक्षण पशु भागने में योग्यता तक पहुंचने के लिए प्रशिक्षित किया जाता है का उपयोग कर कृन्तकों में मापा गया है। भागने स्थान तो बंद है और भागने स्थान को फिर से जानने के लिए आवश्यक परीक्षणों की संख्या 12 दर्ज की गई है। के रूप में वे एक लंबी अवधि के प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है ये assays आदर्श नहीं हैं, अक्सर चिंता प्रेरित है, और अत्यधिक चर परिणामों में परिणाम कर सकते हैं। होल-बोर्ड अन्वेषण भी उच्च आदेश यों तो क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों 13,14 इस्तेमाल किया गया है। इस दृष्टिकोण को विस्तृत प्रशिक्षण सत्र की आवश्यकता नहीं है, लेकिन भोजन प्रेरणा और / या घ्राण भेदभाव पर निर्भर करता है। उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों कि anxiogenic नहीं हैं या आवश्यकता प्रशिक्षण छेद बोर्ड exploratio की मौजूदा प्रदर्शनों की सूची के लिए एक अच्छा पूरक होगा के लिए Assays n और वर्तमान में उपयोग में भूलभुलैया आधारित assays।
C58 / जम्मू (C58) जन्मजात माउस तनाव जोरदार एएसडी, अर्थात् दोहराव, बेमतलब मोटर stereotypies और आत्म-संवारने 3,11 का ऊंचा स्तर के साथ जुड़े stereotypic व्यवहार के उच्च स्तर पर एक मिसाल है। इसके अतिरिक्त, C58 चूहों पालन, वापस flipping और 11,14,16 संभावनाएं तलाशने लगे के उच्च स्तरों के माध्यम से क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों प्रदर्शित करते हैं। इस तनाव इन कार्यों नवजात की अवधि में जल्दी दिखा शुरू होता है और वयस्कता के दौरान उन्हें प्रदर्शित करने के लिए जारी है। यह अच्छी तरह से प्रलेखित निचले क्रम क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के इस तनाव के साथ ही अन्य माउस उपभेदों में मौजूद पूरक करने के लिए ऊपर उठाया उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों की उपस्थिति के लिए परीक्षण करने में सक्षम होना करने के लिए आदर्श होगा। उपन्यास वस्तु अन्वेषण परख यहाँ वर्णित अवसर शोधकर्ताओं ने निचले क्रम और उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों का निरीक्षण करने के लिए एक साथ, के रूप में यह नमूनों व्यवहार के साथ ही दोहराए मोटर stereotypies उपाय करने की क्षमता देता है।
e_content "> उच्च आदेश दोहराए व्यवहार के लिए एक परख के रूप में उपन्यास वस्तु अन्वेषण का प्रयोग पियर्सन एट अल द्वारा विकसित किया गया था। 17। इस नए आकलन करने के लिए चार उपन्यास वस्तुओं के अलावा के साथ अच्छी तरह से स्थापित खुले मैदान परीक्षण 18-21 का ही विस्तार है अखाड़ा। चूहे इस का प्रयोग, स्वतंत्र रूप से इन अपरिचित वस्तुओं और नंबर और वस्तु की जांच के आदेश की जांच करने की अनुमति दी गई वस्तुओं के बीच नमूनों की जांच का ऊंचा संख्या प्रदर्शित BTBR चूहों के साथ लगाया गया था। वस्तु की जांच तो पैटर्न की उपस्थिति के लिए विश्लेषण किया गया। परख, चूहों, जबकि अनावश्यक उत्तेजनाओं को हटाने के साथ ही व्यवहार में जानने के लिए आवश्यकता को नष्ट उच्च आदेश दोहराव और नमूनों व्यवहार प्रदर्शित कर सकते हैं। उपन्यास वस्तु अन्वेषण उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों को प्रेरित करता है के रूप में यह चूहों को उनके प्राकृतिक खोज के माध्यम से पैटर्न और फार्म दृश्यों बनाने के लिए अनुमति देता है । इस परख की अनुमति देता है इन उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों की उपस्थिति यों तो अन्वेषक का उपयोग करना।पियर्सन एट अल। इस परख विकसित किया है और इसे इस्तेमाल किया, BTBR जन्मजात माउस तनाव में संभावित उच्च आदेश दोहराए व्यवहार की उपस्थिति के लिए परीक्षण करने के लिए पेचीदा परिणाम 17 के साथ। हमने हाल ही में एक अनुवर्ती C58, C57BL / 6J (C57) और / FVB न्यू जर्सी (FVB) उपभेदों के व्यवहार को देख के अध्ययन, साथ ही संभावित confounding चर में एक अधिक विस्तृत जांच के इस परख में मौजूद है, और संभव प्रकाशित किया है डेटा का विश्लेषण करने के लिए सांख्यिकीय दृष्टिकोण 22 उत्पन्न।
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Protocol
यहां वर्णित प्रोटोकॉल Redlands विश्वविद्यालय में संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। इन अध्ययनों में प्रयुक्त C58, C57, और FVB चूहों स्टॉक से विश्वविद्यालय Redlands की मछली पालने का बाड़ा मूल जैक्सन प्रयोगशाला (बार हार्बर, इ) से प्राप्त की नस्ल थे। इस मछली पालने का बाड़ा से प्रहरी हर छह महीने में जांच की और रोगज़नक़ मुक्त होना पाया गया।
1. उपकरण और रूम सेट अप
नोट: हम उपन्यास वस्तु के परीक्षण के लिए दो अलग अलग एरेनास प्रयोग किया है: एक स्पष्ट प्लास्टिक आयताकार पिंजरे (45 सेमी x 24 सेमी x 20 सेमी) या 41 सेमी का एक आधार व्यास के साथ एक अपारदर्शी परिपत्र पिंजरे; हालांकि, किसी भी पिंजरे में इस्तेमाल किया जा सकता है। पियर्सन एट अल। उनकी परख में एक छोटे आयताकार पिंजरे (20 सेमी x 30 सेमी x 20 सेमी) का इस्तेमाल किया। विवरण इस विशिष्ट प्रयोगात्मक डिजाइन से नीचे शामिल कर रहे हैं, लेकिन इस परख की नवीनता को देखते हुए वहाँ वर्णित चर से किसी के लिए व्यवहार phenotyping के क्षेत्र के भीतर कोई स्वीकार मानकों है।
- चार अलग-अलग उपन्यास वस्तुओं का चयन करें। चार वस्तुओं है कि लगभग एक ही आकार के होते हैं, उच्च घनत्व प्लास्टिक का निर्माण सफाई की सुविधा के लिए और आकार और रंग में एक दूसरे से अलग चबाने और विरोध करने के लिए चयन करें। महत्वपूर्ण बात है, यह सुनिश्चित करें कि परीक्षण चूहों तक परख में चलाया जा रहा है इन वस्तुओं को उजागर नहीं कर रहे हैं।
नोट: उदाहरण के लिए, एक गुलाबी खिलौना ईंट, एक लाल बंदर, नीले लेखन के साथ एक सफेद टाइल और एक मानक सफेद मरने यहां इस्तेमाल किया गया। - आयताकार क्षेत्र में, इन वस्तुओं के कोनों से लगभग 3 सेमी जगह है। दौर के मैदान में, जगह वस्तुओं ऐसी है कि वे और पक्षों से लगभग 10 सेमी एक दूसरे से समान दूरी पर हैं। एक अलग संख्या, 1-4 (चित्रा 1) के रूप में प्रत्येक वस्तु का प्लेसमेंट रिकॉर्ड। सुनिश्चित करें कि वस्तुओं के परीक्षण के दौरान एक यादृच्छिक या counterbalanced क्रम में रखा जाता है।
- एक कैमरा के परीक्षण के सीधे ऊपर की स्थितिअखाड़ा दशानुकूलन और परीक्षण अवधि के दौरान पूरे क्षेत्र रिकॉर्ड करने के लिए।
नोट: चूहों संभावित परीक्षण के दौरान गतिविधि का स्तर और अन्वेषण प्रभावित कर सकते हैं के साथ एक ही कमरे में जांचकर्ताओं बीत रहा है।
2. उपन्यास वस्तु अन्वेषण टेस्ट
- लगभग 100 लक्स पर एक कमरे में फ्लोरोसेंट प्रकाश व्यवस्था के साथ प्रबुद्ध में प्रकाश चक्र की शुरुआत में टेस्ट। सुनिश्चित करें कि प्रकाश उपस्थिति जबकि वीडियो रिकॉर्डिंग के मानकीकरण के लिए परीक्षण के मैदान भर में एक समान है।
- ज्ञात आयामों की एक notecard परीक्षण के मैदान के नीचे में रखें और वीडियो रिकॉर्डिंग शुरू करते हैं।
- 10 मिनट के एक दशानुकूलन अवधि के रूप में सेवा करने के लिए एक खाली परीक्षण के मैदान में परीक्षण माउस स्थानांतरण। वीडियो रिकॉर्ड दशानुकूलन अवधि।
- दशानुकूलन अवधि के बाद, क्षेत्र में माउस छोड़ देते हैं, जल्दी से परीक्षण के मैदान में चार उपन्यास वस्तुओं को जोड़ने और एक अतिरिक्त 10 मिनट के लिए माउस व्यवहार रिकॉर्ड है।
- एक बार पूरे 20 मिनट दशानुकूलन / परीक्षण पीईriod बीत गया है, अपने घर पिंजरे और अच्छी तरह से साफ करने के लिए परीक्षण माउस लौटने और उपन्यास वस्तुओं और unscented पकवान साबुन और पानी के साथ परीक्षण के मैदान सूखी।
3. वीडियो स्कोरिंग
- विश्वसनीयता की सुविधा के लिए वीडियो का उपयोग कर सभी व्यवहार स्कोरिंग को पूरा करें।
नोट: व्यवहार प्रवेश सॉफ्टवेयर Noldus ऑब्जर्वर कदम 22 के रूप में यहाँ वर्णित प्रदर्शन करने के लिए इस्तेमाल किया गया था, लेकिन एक विशेष कार्यक्रम आवश्यक नहीं है:- पहली बार वीडियो स्कोरिंग करने से पहले, इस परियोजना के लिए एक नई परियोजना बनाने के द्वारा या संपादन के लिए एक मौजूदा, इसी तरह की परियोजना से व्यवहार प्रवेश सॉफ्टवेयर में इस योजना कोडिंग की स्थापना की।
- परियोजना सेटअप बॉक्स के भीतर, करने के लिए डाटा अधिग्रहण सेट 'ऑफलाइन अवलोकन।' व्यवहार कोडिंग बॉक्स, कार्यक्रम "स्क्रैबल", "खुदाई", "पालन", "सौंदर्य" और "सूंघ वस्तु 1, 2, 3 और 4" के रूप में 'राज्य की घटनाओं' के भीतर। कार्यक्रम "कूद" एक 'बिंदु घटना' के रूप में। नोट: परिभाषाइन कार्यों के लिए विस्तार से कहीं और 11 में वर्णित हैं।
नोट: राज्य के घटनाक्रम एक शुरुआत है और समय के लिए बंद है, जबकि प्वाइंट घटनाओं बस गिनती डेटा इकट्ठा। प्रत्येक असतत व्यवहार के लिए कीस्ट्रोक्स सॉफ्टवेयर द्वारा उत्पन्न कर रहे हैं और इन इसी कीस्ट्रोक्स एक माध्यमिक कीबोर्ड (कदम 3.1.2) में क्रमादेशित रहे हैं। - माध्यमिक कुंजीपटल कार्यक्रम के लिए, कुंजीपटल सॉफ्टवेयर को खोलने, उचित माध्यमिक कुंजीपटल बटन स्क्रीन पर प्रदर्शित किया है, उचित कीस्ट्रोक संयोजन में प्रकार पर क्लिक करें, और ठीक क्लिक करें। एक बार माध्यमिक कीबोर्ड प्रोग्राम किया गया है, इस कार्यक्रम के कंप्यूटर की पृष्ठभूमि में चला जाएगा के रूप में सॉफ्टवेयर को बंद करें।
- परियोजना सेटअप बॉक्स के भीतर, करने के लिए डाटा अधिग्रहण सेट 'ऑफलाइन अवलोकन।' व्यवहार कोडिंग बॉक्स, कार्यक्रम "स्क्रैबल", "खुदाई", "पालन", "सौंदर्य" और "सूंघ वस्तु 1, 2, 3 और 4" के रूप में 'राज्य की घटनाओं' के भीतर। कार्यक्रम "कूद" एक 'बिंदु घटना' के रूप में। नोट: परिभाषाइन कार्यों के लिए विस्तार से कहीं और 11 में वर्णित हैं।
- एक बार जब परियोजना और स्थापित किया गया है, संख्या और rears की अवधि (दोनों सामने पंजे के रूप में परिभाषित क्षेत्र की एक दीवार पर रखा जा रहा है) स्कोर करने के लिए व्यवहार प्रवेश सॉफ्टवेयर का उपयोग करें, खोदता (माउस में बिल खोदने के सामने दो पंजे के रूप में परिभाषित क्षेत्र के बिस्तर), आत्म दूल्हे (मीटर के रूप में परिभाषितअपने स्वयं के शरीर और / या माउस उनके सामने पंजे के साथ चेहरे के किसी भी हिस्से को छू) के किसी भी क्षेत्र के चाट, और कूदता OUSE (एक माउस के पालन के रूप में परिभाषित किया गया है और फिर कूद इतना है कि सभी एक साथ चार फीट जमीन से कर रहे हैं)।
- एक वीडियो स्कोर करने के लिए, फ़ाइल> ओपन परियोजना और फिर ध्यान से देखें> अवलोकन> नई जाओ। इस कार्यक्रम के एक फ़ाइल नाम के लिए संकेत देता है। एक बार नामित किया गया है, उचित वीडियो मीडिया फ़ाइल का चयन करें।
- शुरू अवलोकन बटन पर क्लिक करके स्कोरिंग शुरू करते हैं।
नोट: जब माउस दोहराए व्यवहार स्कोरिंग, सभी राज्य घटनाओं में दो कीस्ट्रोक्स की आवश्यकता होती है, पहली व्यवहार की दीक्षा के लिए इसी और दूसरी व्यवहार के अंत करने के लिए इसी। प्वाइंट घटनाओं के लिए केवल एक बटन दबाने की आवश्यकता होती है।
- स्कोर संख्या बार के माउस प्रत्येक वस्तु सूँघा। Sniffs किसी भी समय एक माउस एक वस्तु की 0.5 सेमी के भीतर अपनी नाक कदम के रूप में परिभाषित कर रहे हैं। उपाय सूंघ अवधि एक ही तरीका है कि repet में व्यवहार प्रवेश सॉफ्टवेयर का उपयोग करitive व्यवहार durations (कदम 3.1.2) मापा गया।
- हर बार एक माउस एक वस्तु sniffs, इसी स्थिति संख्या है, जो 10 मिनट के परीक्षण अवधि (जैसे 1243421 ...) के अंत तक संख्या की एक स्ट्रिंग को बढ़ावा मिलेगा रिकॉर्ड है। इन डेटा मैन्युअल रिकॉर्ड है।
नोट: जबकि स्कोरिंग वीडियो, संख्या हमेशा दी गई स्थिति के अनुरूप दक्षता और स्थिरता की सुविधा के लिए है, न कि वस्तु। - एक माउस एक वस्तु sniffs, तो दूर लग रहा है, तो फिर वस्तु sniffs, दो बार है कि संख्या गिनती।
- एक बार पूरे 10 मिनट के वीडियो रन बनाए किया गया है, विश्लेषण पर व्यवहार विश्लेषण> नई> क्लिक करके डेटा कल्पना। एक बार डेटा स्क्रीन, निर्यात पर दिखाई देते हैं या कॉपी और एक अलग स्प्रेडशीट में पेस्ट करें।
- हर बार एक माउस एक वस्तु sniffs, इसी स्थिति संख्या है, जो 10 मिनट के परीक्षण अवधि (जैसे 1243421 ...) के अंत तक संख्या की एक स्ट्रिंग को बढ़ावा मिलेगा रिकॉर्ड है। इन डेटा मैन्युअल रिकॉर्ड है।
- कुल दूरी माउस परीक्षण के दौरान क्षेत्र के भीतर की यात्रा की रिकॉर्ड।
नोट: वीडियो ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर, परीक्षण माउस को ट्रैक और कुल दूरी सेंटीमीटर में ले जाया रिकॉर्ड करने के लिए calibrated, इस्तेमाल किया गया थाइस कदम के प्रदर्शन करने के लिए। सभी वीडियो वीडियो ट्रैकिंग सॉफ्टवेयर के द्वारा बनाये गए वीडियो की शुरुआत में मैदान में रखा जाना जाता आयामों की एक notecard था।- notecard के प्रत्येक के अंत के साथ एक अंशांकन लाइन स्थापित करने और सॉफ्टवेयर के अंशांकन स्क्रीन के अंदर उचित लंबाई inputting द्वारा सॉफ्टवेयर के भीतर प्रत्येक वीडियो जांच करने के लिए notecard का प्रयोग करें। एक बार जब लाइनें तैयार कर रहे हैं, इनपुट नाम से जाना जाता लंबाई और notecard कि प्रत्येक पंक्ति के अनुरूप की चौड़ाई।
- एरिना रूपरेखा के भीतर, पूरे क्षेत्र का चयन करें।
नोट: क्षेत्र के अलग-अलग क्षेत्रों में सॉफ्टवेयर में भेदभाव किया जा सकता है, तो उदाहरण के लिए, दीवारों के साथ बनाम केंद्र के माध्यम से माउस आंदोलन ब्याज की थी। - ट्रायल नियंत्रण सेटिंग्स के भीतर, एक दस मिनट की अवधि का चयन करें। जांच सेटिंग्स में, एक प्रकाश पृष्ठभूमि पर एक अंधेरे वस्तु चुनें।
नोट: यह अगर सूरजमुखी मनुष्य चूहों का इस्तेमाल किया जा रहा था परिवर्तित करने की आवश्यकता होगी या यदि पृष्ठभूमि एक गहरा शेड था। - सेटिंग्स एक बारप्रोग्राम किया गया है, वीडियो स्कोर। प्राप्ति> ओपन अधिग्रहण पर क्लिक करें। अधिग्रहण नियंत्रण बॉक्स में, नए परीक्षण क्लिक करें और फिर ट्रायल शुरू करो। बाद दस मिनट बीत गया है, कार्यक्रम बंद हो जाता है और डेटा देखे जा सकते हैं।
- विश्लेषण क्लिक करें> गणना सांख्यिकी। एक बार डेटा स्क्रीन, निर्यात पर दिखाई देते हैं या कॉपी और एक अलग स्प्रेडशीट में पेस्ट करें।
- पहली बार वीडियो स्कोरिंग करने से पहले, इस परियोजना के लिए एक नई परियोजना बनाने के द्वारा या संपादन के लिए एक मौजूदा, इसी तरह की परियोजना से व्यवहार प्रवेश सॉफ्टवेयर में इस योजना कोडिंग की स्थापना की।
4. सांख्यिकीय विश्लेषण, अनुक्रमण
- प्रत्येक माउस के द्वारा उत्पन्न की जांच पर आपत्ति करने के लिए इसी नंबर की स्ट्रिंग के भीतर, दोहराने संख्या के बिना सब संभव 3 अंकों संयोजन (जैसे 121, 123, 124 नहीं बल्कि 112 या 122) की कुल संख्या की पहचान।
नोट: अजगर प्रोग्रामिंग भाषा में लिखा एक कार्यक्रम हर संभव क्रम संख्या की स्ट्रिंग में प्रकट होता है समय की संख्या की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया गया था। यह एक बाहर प्रोग्राम का उपयोग करने के लिए आवश्यक नहीं है, और इस कदम के कई अलग अलग तरीकों का उपयोग (जैसे पूरा किया जा सकता हैएक माइक्रोसॉफ्ट वर्ड या एक्सेल में समारोह) का पता लगाएं। - बार प्रत्येक दृश्य होता है की संख्या रिकॉर्ड और प्रत्येक माउस के लिए तीन सबसे अधिक बार दोहराया दृश्यों की पहचान।
नोट: अलग-अलग दृश्यों माउस द्वारा अलग अलग होंगे और वास्तविक अनुक्रम बार एक दृश्य दोहराया गया था की संख्या की तुलना में कम ब्याज (यानी एक पैटर्न का पालन पैटर्न ही से ज्यादा महत्वपूर्ण है) का है। - क्योंकि दृश्यों की कुल संख्या एक माउस दोहराता गतिविधि के स्तर पर सकारात्मक सहसंबंधी जाएगा, प्रत्येक व्यक्ति माउस के लिए पैटर्न की कुल संख्या से सबसे लगातार पैटर्न की मात्रा को विभाजित करके इन मूल्यों को सही। यह एक अनुक्रम दोहराने सूचकांक समग्र गतिविधि से स्वतंत्र है कि निकलेगा।
- एक उचित एनोवा, एकाधिक तुलना प्रक्रिया (Dunnett का परीक्षण, उदाहरण के लिए) और पोस्ट अस्थायी परीक्षण का उपयोग कर संख्या बार की प्रत्येक माउस इसकी सबसे आम दृश्यों को दोहराता (गतिविधि के स्तर के लिए सही) समूहों के बीच तुलना कर लें।
- ऊपर (कदम 3.1.3.1) उत्पन्न संख्या का एक ही स्ट्रिंग का उपयोग करना, समय की कुल संख्या की गणना के द्वारा प्रत्येक माउस के उपन्यास वस्तु वरीयता पहचान प्रत्येक वस्तु की जांच की थी, या दूसरे शब्दों में, 1 सेकंड की कुल संख्या की गणना, 2 सेकंड , 3 सेकंड, और डेटा की स्ट्रिंग में 4 सेकंड। गतिविधि के स्तर के लिए सही और ऊपर के रूप में (कदम 4.3-4.4) में वर्णित एनोवा के माध्यम से तुलना करें।
नोट: इन विधियों हमारी प्रयोगशाला 22 द्वारा प्रकाशित और यहाँ वर्णित पियर्सन एट अल पर भारी आधारित हैं 17।
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Representative Results
प्रतिनिधि डेटा 22 शो है कि महिला C58 / जम्मू चूहों दौर के क्षेत्र में अन्य नस्लों की तुलना में अनुक्रम पैटर्न (चित्रा 2, पैनल ए) के एक उच्च संख्या प्रदर्शित, लेकिन आयताकार क्षेत्र में नहीं (चित्रा 2, पैनल सी)। तीन पुरुष एक दूसरे को (चित्रा 2, पैनल बी और डी) से मतभेद उपभेदों से कोई नहीं। प्रतिनिधि डेटा है कि पुरुष और महिला दोनों C58 / जम्मू चूहों उनकी सबसे का दौरा वस्तु के लिए एक मजबूत वरीयता दौर के मैदान में (उनके कम से कम का दौरा किया वस्तु के लिए एक कम वरीयता और इसके बाद) प्रदर्शन दिखाने (चित्रा 3, पैनल ए और सी), लेकिन नहीं आयताकार क्षेत्र (चित्रा 3, पैनल बी और डी) में।
चित्रा 1:। आयताकार और उपन्यास वस्तु परीक्षण के लिए परिपत्र एरिना सेट-अप टीवह संख्या प्रत्येक वस्तु है, जो बेतरतीब ढंग से प्रत्येक माउस के लिए सौंपा गया की स्थिति को दर्शाते हैं। यह आंकड़ा संदर्भ 22 से संशोधित किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 2:। प्रतिनिधि डेटा टाइम्स की संख्या तीन सबसे आम 3-पैटर्न दृश्यों को दोहराया गया, के कुल तीन जन्मजात माउस उपभेदों में पैटर्न की संख्या एक प्रतिशत के रूप में लिया दृष्टांत C58 महिलाओं को अपने पसंदीदा जांच पड़ताल पैटर्न के लिए एक मजबूत पालन में दिखाया गया है दौर के मैदान (ए), लेकिन नहीं आयताकार क्षेत्र (सी)। नर चूहों के तीन उपभेदों या तो गोल (बी) या आयताकार (डी) में एक दूसरे से अलग नहीं किया हैएनएएस। डेटा मतलब + मतलब * पी <0.05 बनाम C57 और FVB ** पी <0.01 बनाम C57 और FVB की मानक त्रुटि के रूप में व्यक्त कर रहे हैं। यह आंकड़ा संदर्भ 22 से संशोधित किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 3:। प्रतिनिधि डेटा तीन जन्मजात माउस उपभेदों में व्यक्तिगत उपन्यास वस्तुओं के लिए पसंद दृष्टांत डेटा विकल्प 1 प्रत्येक व्यक्ति के लिए माउस और विकल्प 4 कम से कम पसंदीदा वस्तु के लिए सबसे पसंदीदा वस्तु का प्रतिनिधित्व करने के साथ, कुल वस्तु की जांच के प्रतिशत के रूप में प्रदर्शित कर रहे हैं। के अलावा अन्य दो उपभेदों किया नर (ए) और महिला (बी) के दौर के मैदान में C58 चूहों उनकी सबसे पसंदीदा वस्तु के लिए एक मजबूत वरीयता दिखाया। नर(सी) और महिला (डी) चूहों आयताकार क्षेत्र में वस्तु वरीयता के लिए कोई तनाव अंतर दिखाया। डेटा मतलब + मतलब * पी <0.05 बनाम C57 और FVB # पी <0.05 बनाम FVB की मानक त्रुटि के रूप में व्यक्त कर रहे हैं। यह आंकड़ा संदर्भ 22 से संशोधित किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
पूरक संहिता फ़ाइल:। अजगर बराबर कोड कार्यक्रम चलाने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
यहाँ, हम एक हाल ही में विकसित परख है कि मानव में उच्च आदेश दोहराए व्यवहार के लिए चेहरे की वैधता के साथ माउस व्यवहार बढ़ाता के लिए उपयोगी हो सकता है प्रस्तुत करते हैं। बार्न्स या टी भूलभुलैया की तरह अधिक स्थापित assays के विपरीत, इस उपन्यास वस्तु अन्वेषण परख किसी भी माउस प्रशिक्षण की आवश्यकता नहीं है और न ही यह विशेष रूप से चिंता उत्तेजक है। इसके अतिरिक्त, उपन्यास वस्तु अन्वेषण किसी भी खाद्य या सामाजिक उत्तेजनाओं की आवश्यकता नहीं है, ब्याज, क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के व्यवहार के बारे में अधिक ध्यान देने के लिए अनुमति देता है, और परिणाम skewing confounding चर की संभावना को कम करता है। इसके अलावा, विभिन्न माउस उपभेदों उपभेदों बुलंद निचले क्रम क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों को भी दिखा उपन्यास वस्तु अन्वेषण परख 17,22 में ऊंचा नमूनों अन्वेषण और वस्तु वरीयता का प्रदर्शन के साथ, इस परख में अंतर व्यवहार प्रदर्शित करते। जैसे, इस परख मानव में क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के लिए अच्छा चेहरा वैधता के अधिकारी प्रतीत होता है। परख भविष्य के शोधकर्ताओं द्वारा संशोधित किया जाता है, यह रहने के लिए फायदेमंद होगाऊपर सूचीबद्ध लाभ, अर्थात् आवश्यक प्रशिक्षण की कमी और चिंता उत्प्रेरण उत्तेजनाओं के न्यूनतम के प्रति जागरूक। उपन्यास वस्तुओं (धारा 1.2) परख में इस्तेमाल का चयन महत्वपूर्ण है। वस्तुओं को साफ करने के लिए आसान होना चाहिए, लेकिन दिखने में अलग और आकार में समान हो। (धारा 2.3) के परीक्षण के मैदान में acclimate करने के लिए परख (धारा 1.4) दर्ज करने के लिए एक कैमरे का उपयोग और चूहों की अनुमति के भी महत्वपूर्ण हैं, अखाड़ा की नवीनता या कमरे में एक प्रयोगकर्ता की उपस्थिति के रूप में के व्यवहार को प्रभावित कर सकता चूहों। ये यहां वर्णित प्रोटोकॉल का महत्वपूर्ण पहलू हैं।
इन फायदों के बावजूद, वहाँ अन्य कारकों है कि जब उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के लिए एक उपयुक्त परख पर निर्णय लेने पर विचार किया जाना चाहिए रहे हैं। इस परख द्वारा उत्पन्न डेटा का विश्लेषण करने में प्राथमिक चुनौती गतिविधि का स्तर है, जो अलग माउस उपभेदों 23,24 के बीच बेहद अलग कर सकते हैं करने के लिए संबंध है। गतिविधि छुट्टी भिन्न करने के लिए नियंत्रित करने का एक तरीका संभवतुलना समूहों के बीच रास चर्चा की गई थी; वहाँ अन्य अधिक उचित या सुरुचिपूर्ण समाधान या तो प्रयोगात्मक डिजाइन या सांख्यिकीय विश्लेषण के साथ विचार करने के लिए हो सकता है। ध्यान से इसी तरह की गतिविधि के स्तर के साथ नियंत्रण उपभेदों चुनने के रूप में ब्याज का तनाव एक संभावना है। वैकल्पिक रूप से, केवल डेटा (पहले 50 उपन्यास वस्तु जांच, उदाहरण के लिए) के एक सबसेट पर सांख्यिकीय विश्लेषण एक और संभावना है।
हालांकि इस परख स्वाभाविक चिंता उत्प्रेरण नहीं है, एक अलग तनाव के प्राकृतिक चिंता का स्तर एकत्र परिणामों में मतभेद पैदा हो सकती है। अति उत्सुक चूहों आम तौर पर दीवारों और एक खुले मैदान अखाड़ा 23,25 के कोनों के साथ स्थानांतरित करने के लिए है और यदि इस परख में उपन्यास वस्तुओं किनारों या कोनों, कृत्रिम रूप से उच्च उपन्यास वस्तु की जांच के लिए उत्सुक उपभेदों में दर्ज किया जा सकता है के लिए बंद करने के लिए रखा जाता है पसंद करते हैं। हम एक दौर के परीक्षण के मैदान का उपयोग कर और वस्तुओं टी से दूर ले जाकर इस confounding चर के लिए सही करने का प्रयासवह दीवारों, एक 10 मिनट की अवधि दशानुकूलन परीक्षण करने से पहले उपयोग करने के अलावा। अन्य संभावित सुधार अन्धेरा की शर्तों के तहत परीक्षण करने के लिए, माउस के घर पिंजरे में या दशानुकूलन समय अलग से हो सकता है। चिंता पहले जांच करने के साथ ही बिना किसी रुकावट के एक ही वस्तु के बार-बार जांच की संख्या को मापने के द्वारा विलंबता को मापने के द्वारा उपन्यास वस्तु अन्वेषण डेटा के भीतर ही मात्रा निर्धारित किया जा सकता है।
विजन और घ्राण घाटे के रूप में अच्छी तरह से इस परख में प्रदर्शन समझौता कर सकता है। असमर्थता बू आ रही है या देखने के उपन्यास वस्तुओं एक विशिष्ट स्वरूप की स्थापना के लिए उदासीनता या अक्षमता का कारण हो सकता है, सुझाव है कि एक माउस उच्च आदेश दोहराए व्यवहार प्रदर्शित नहीं करता है डेटा के लिए अग्रणी करने के लिए। कुछ जन्मजात उपभेदों (विशेष रूप से सूरजमुखी मनुष्य उपभेदों) स्पष्ट रूप से दृश्य तीक्ष्णता समझौता किया है, विशेष रूप से उन्नत उम्र में। यह इस परीक्षण में व्यवहार को प्रभावित करने, वयस्क FVB और C57 चूहों (एक सूरजमुखी मनुष्य और pigmented तनाव, resp के रूप में प्रकट नहीं किया थाectively) (आंकड़े 2 और 3) व्यवहार में कोई सुसंगत अंतर दिखाया। हालांकि, या तो दृष्टि या महक में कोई दोष या असामान्यताएं यथोचित उपन्यास वस्तु अन्वेषण परख में उपयोग किसी भी नई नस्ल के लिए सिफारिश की जाएगी इस परख में माउस तनाव के प्रदर्शन को प्रभावित करने की उम्मीद की जा सकती है और बुनियादी संवेदी क्षमता के लिए स्क्रीनिंग।
क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों अक्सर प्रभावित व्यक्तियों के बचपन के शुरू में उभरने, और जैसे, एक परख है कि युवा चूहों में उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों की उपस्थिति उपाय कर सकता है चेहरे की स्थापना के लिए फायदेमंद हो सकता है और संभावित माउस मॉडल की वैधता का निर्माण होगा। तिथि करने के लिए, इस परख केवल वयस्क चूहों पर प्रयोग किया गया है। के रूप में वे कठिनाई स्वतंत्र रूप से इसके अतिरिक्त लगभग प्रसव के बाद दिन के 10 से पहले चलती है उपन्यास वस्तु अन्वेषण युवा चूहों के लिए मुश्किल हो सकता है, चूहों प्रसव के बाद दिन 14-16 की तुलना में छोटी उपन्यास एरेनास में स्थानांतरित करने के लिए संकोच हो सकता है। नीचे स्केलिंग परीक्षण के आकार के होते हैंna यहां इस्तेमाल किया और क्षेत्र (एक घर पिंजरे का प्रयोग, उदाहरण के लिए) के द्वारा और अधिक परिचित इनमें से कुछ मुद्दों उन्नति हो सकती है कर रही है, लेकिन यह स्पष्ट नहीं है अगर इस उपन्यास वस्तु अन्वेषण परख युवा चूहों के परीक्षण के लिए उपयुक्त है।
सांख्यिकीय विश्लेषण का एक संभावित सेट यहाँ चर्चा की गई। अनुक्रमण डेटा इस परख उत्पन्न की अनूठी प्रकृति को देखते हुए, यह पूरी तरह संभव है कि वैकल्पिक विश्लेषणात्मक रणनीति है कि इस अपेक्षाकृत सरल दृष्टिकोण को उजागर नहीं किया अतिरिक्त जानकारी प्रकट हो सकता है। प्रतिनिधि डेटा कि विश्लेषण किया गया था और यहाँ शामिल नमूनों खोजपूर्ण व्यवहार की मामूली सबूत से पता चला है के रूप में महिला C58 चूहों परिपत्र परीक्षण क्षेत्र (2A चित्रा) में अधिक से अधिक पुनरावृत्ति दिखाया। आयताकार क्षेत्र (चित्रा -2) में C58 की पुनरावृत्ति के स्तर में कोई वृद्धि, साथ ही कोई सबूत नहीं है कि पुरुषों या तो मैदान (चित्रा 2 बी, 2 डी) में किसी भी स्वरूप प्रदर्शन का सुझाव करने के लिए कोई सबूत नहीं था। गुअरे वर्तमान में पुरुष और महिला परीक्षण विषयों के बीच व्यवहार में अंतर के लिए कोई स्पष्टीकरण नहीं है। एक संभावित व्याख्या यह माउस तनाव के निहित व्यवहार हो सकता है। यह पाया गया है कि पुरुष C58 उनकी महिला साथियों की तुलना में अधिक 11 दोहराव और उत्सुक व्यवहार प्रदर्शित करते हैं। उत्सुक व्यवहार में यह अंतर केवल इन संभावित चिंता उपन्यास वस्तुओं उत्प्रेरण की खोज में एक विशेष वस्तु और एक ब्याज के अधिक के लिए एक प्राथमिकता बनाने में कम रुचि हो सकती। यह पूरी तरह संभव है कि अन्य माउस उपभेदों भी इस परख में लिंग भेद दिखा सकते हैं।
दोनों पुरुष और महिला C58 चूहों परिपत्र परीक्षण के मैदान के भीतर विशिष्ट वस्तु वरीयता दिखाया के रूप में वे अपने पसंदीदा उपन्यास वस्तु अधिक बार दोबारा गौर करने के साथ ही दौरा उनकी कम से कम पसंदीदा वस्तु काफी कम बार की तुलना में अन्य नस्लों (चित्रा 3 ए, 3 बी)। C58 तनाव भी अन्य मैं ऊपर एक वस्तु के लिए वरीयता प्रदर्शित कियाn परिपत्र अखाड़ा, लेकिन आयताकार क्षेत्र (चित्रा -3 सी, 3 डी) में नहीं है। इस तरह के कोनों की कमी है, बड़ा सतह क्षेत्र अन्वेषण या दीवारों से वस्तुओं की दूरी बढ़ के लिए उपलब्ध के रूप दौर के परीक्षण क्षेत्र के कुछ प्रमुख विशेषता के कारण होने की संभावना है। इस परख पर भविष्य के काम माउस के अन्वेषण पर इन चर के प्रभाव की जांच करनी चाहिए।
प्राथमिक ध्यान केंद्रित यहां उच्च आदेश दोहराए व्यवहार पर किया गया है, लेकिन यह देखते हुए कि उपन्यास वस्तु परख में सभी व्यवहार वीडियो दर्ज की गई है, यह भी अन्य व्यवहार को मापने के लिए संभव है। इस तरह, पालन कूद, संवारने और खुदाई के रूप में निचले क्रम के दोहराव व्यवहार आमतौर पर इस तरह के एक के रूप में खुले मैदान assays में देखा जाता है। कुछ चूहों के साथ, इन कार्यों उच्च आदेश दोहराए व्यवहार की उपस्थिति के साथ प्रतिस्पर्धा कर सकते हैं और मापने के लिए और दोनों दशानुकूलन और परीक्षण अवधि के दौरान यों के लिए महत्वपूर्ण होगा।
इस तथ्य के बावजूद है कि केवलचूहों में उपन्यास वस्तु अन्वेषण का उपयोग करते हुए दो अध्ययनों तारीख 17,22 करने के लिए प्रकाशित किया गया है, इस परख संभावित एक परख है कि उच्च आदेश दोहराए व्यवहार के उपाय जल्दी और कम से कम confounding चर के साथ के लिए एक मौजूदा जरूरत को भरने के लिए है। इस तरह की एक परख अच्छी तरह से इस तरह के छेद बोर्ड अन्वेषण और उत्क्रमण सीखने के रूप में उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के मौजूदा परीक्षण के पूरक हैं। क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों एएसडी की एक प्रमुख विशेषता हैं और संभावित प्रभावित व्यक्तियों के जीवन के लिए दुर्बल। निचले और उच्च आदेश क्षेत्रीय ग्रामीण बैंकों के लिए मान्य माउस मॉडल संभावित औषधीय और व्यवहार उपायों के परीक्षण के लिए अत्यंत मूल्यवान होगा। उपन्यास वस्तु अन्वेषण परख यहाँ वर्णित बुनियादी जैव चिकित्सा अनुसंधान में एक बहुत ही महत्वपूर्ण आवश्यकता की सेवा के लिए क्षमता है।
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Acknowledgments
लेखकों ग्रीष्मकालीन अंडर ग्रेजुएट रिसर्च प्रोग्राम, शैक्षणिक प्रौद्योगिकी उपयोगकर्ता समूह, डिजिटल लर्निंग के लिए केंद्र, और Redlands विश्वविद्यालय में विज्ञान केंद्र को स्वीकार करना होगा।
लेखकों लो Yango की स्मृति को इस पत्र समर्पित करना चाहते हैं।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Standard Polycarbonate Rodent Cage (45 cm x 24 cm x 20 cm) | Multiple cages are desirable to facilitate testing of multiple mice | ||
| Plastic Opaque Circular Testing Arena (41 cm base diameter) | United States Plastic Corp. | 13931 | Multiple arenas are desirable to facilitate testing of multiple mice |
| Standard Corn-Cob Rodent Bedding | |||
| Novel Object - red monkey | Hasbro, Pawtucket RI | from Barrel of Monkeys | |
| Novel Object - rectangular 2 x 4 LEGO | |||
| Novel Object - tile | Thinkfun Inc., Alexandria VA | from Toot and Otto | |
| Novel Object - standard white die | |||
| Video Camera | |||
| Behavioral Logging Software - The Observer | Noldus, Wageningen, The Netherlands | other programs may be used | |
| Video Tracking Software - EthoVision | Noldus, Wageningen, The Netherlands | other programs may be used | |
| X-Keys input keyboard | P.I. Engineering, Williamstown MI | 829484 | |
| MacroWorks II | P.I. Engineering, Williamstown MI |
References
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