Introduction
Kalp hastalığı ölüm, dünya çapında 1,2 başta gelen nedenidir. Sadece, ortak bir kardiyak yaralanma sitesi sonrası miyokard infarktüsü 4 tüm vücuda 3 kalpten kan pompalama sorumlu sol ventrikül (LV) en kaslı odası, mesafesindedir. Sol ventrikül doku ölümü genellikle sistolik kalp yetmezliği ile sonuçlanır. kalp hastalığı hayvan modelleri biyomedikal kardiyovasküler araştırma ilerlemesi için zorunludur. farelerin C57BL / 6 suşu nedeniyle hızlı üreme zamanı, düşük maliyetli hayvan modellerinde için popüler bir seçim olmuştur ve genetik değişikliklerin kolaylığı var. kalp hastalığı çalışma için en fare cerrahi modeller sol koroner arterin LAD dalı tıkanıklığı içerir. LAD Sol geniş marjinal 5,6 denir bazen. LAD sol ventrikül anterior ve antero-lateral duvarlar kan tedarik etmektedir. LAD tıkanıklığı çalışmaları bazen ön infarktlar uyaran int uzanan hedefleniyorinferior ve lateral duvar bölgelerinde 7 o.
miyokardiyal enfarktüs çalışmaları için sık kullanılan iki model, kronik tıkanma miyokard enfarktüsü ve miyokardiyal iskemi / reperfüzyon hasarını dahil. Kronik tıkanıklığı cerrahi etrafında dikilmesi ve kalıcı LAD yoluyla kan akışını bloke ederek oluşturulur. iskemi / reperfüzyon hasarı, sadece geçici genellikle 30-60 dakika, iskemik dönem aynı şekilde çok oluşturulur. geçici iskemi elde etmek için, bir reperfüzyon dönemi takip kalbin epikardiyal yüzeyi üzerinde LAD paralel yerleştirilir LAD etrafında tıkayıcı dikiş bağları ve küçük bir PE-10 tüp, boru ve kapatılmasıy dikiş çıkarılır ve kan olduğu bir kez daha arter yoluyla ve miyokard içine akmasına izin verdi. iskemi / reperfüzyon cerrahi nedeniyle balo içeren insan infarkt tedavi paralel reperfüzyon hasarı doğaya klinik olarak anlamlı olduğu görülmüştürnk koroner anjiyoplasti ve stent uygulaması arter veya koroner arter baypas. Tipik haliyle, bu ameliyatlar sırasında, fare kalbinde LV iskemi, miyokard duvarının görebilir solgunluk ile teyit edilir. Ancak, sadece sürekli izleme koşulları altında bir elektrokardiyogram (EKG) pad üzerinde ameliyatlar yaparak, görünür değişiklikler dolayısıyla fare miyokard iskemi ve reperfüzyon teyit EKG dalga görülebilir.
fare kalp dört odacıklı yapısı da dahil olmak üzere pek çok açıdan, insan kalbi benzer olmasına rağmen, kalpler de farklılıklar var. Yetişkin insanların o ise min (bpm) 700 atım ~ 60-100 bpm 8,9 - Bir belirgin fark yetişkin farelerin ortalama istirahat kalp hızı 600 dir. Ayrıca, farelerde repolarizasyon dalgalar, J ve T, sık sık depolarizasyon QRS kompleksi 10 ayırt etmek açık bir ST segment zorlaştırır ile birleşir. electrocardiographicall sürecini zorlaştırmak içinY, T dalgası ve insanlarda iskemi ve miyokardiyal enfarktüs hasarı tanısı için belirteç olarak kullanılan ST segmenti görünüşüdür, miyokard iskemisi teyit klinik I nfarction ya STEMİ yocardial ST E levation m olarak anılacaktır. insan ve fare dalga formları arasındaki temel farklardan biri de S-dalgası hemen negatif T dalgası doğrudan aktaran bir J-dalgası olacak takip olmasıdır. Akut miyokard farelerde iskemi S dalga azalır amplitüd ve sırasında doğrudan anormal J dalga ve ters bir T dalgası 11 tarafından takip edilmektedir. T dalgası fareler 11 repolarizasyon önemli bir bölümünü temsil görünmüyor. İnsan farklılıkları vs terminoloji ve fare rağmen, fare miyokard iskemi ve reperfüzyon EKG onayı hala mümkün ve oldukça basittir. dalga yorumlanmasını basitleştirerek uğruna, SJT arasındaki bölüm ST-BÖLÜMLERE olarak adlandırılırnt, burada.
2013 yılında yayınlanan STEMI kurallar .Bu arterin kadar hastanın koroner arter tıkanıklığı belirlenmesi gelen zaman çerçevesi az 90 dakika olmalıdır yeniden anlamına gelir az 90 dakika 12 hasta kapı-balon zaman tavsiye. Atan kalpte sürekli çalışıyor ve bu nedenle, yüksek oksidatif metabolizmayı ve oksijen tüketimi 3 yüksek düzeyde sahiptir. Bu sağlamak için, kılcal damarların bir ağ her miyosit 3 kullanılabilir. Sadece kendi oksijen ve besin kaynağı tüketmek için bir kalbimi birkaç vuruş alır. Bir 90 dakika penceresinde, bir insanda bir iskemik kalp bölge kalp oksijen açısından zengin kanın değerini yener 5400 ila 9000 almasını bloke edilmiştir olacaktır. Aynı 90 dakika penceresinde, bir fare 54.000 63.000 kalp atım olurdu. Murin iskemi / reperfüzyon hasarı için deneysel zaman noktaları 30 ile 60 dakika arasında, tipik olarak.
geliştirmek önemibir murin modelinde miyokardiyal iskemi ve reperfüzyon doğrulayan bir ek yöntem ing miyokardiyal iskemi / reperfüzyon çalışmalarında veri kıvam ve yeniden yapılabilmesi üzerinde önemli sonuçları vardır. görsel doku renk değişikliği için kalbi gözlemleyerek mevcut uygulama tek başına bir tanı olarak yeterli değildir. Buna ek olarak, boru çıkarılması ve ameliyat dikiş ipliğinin sonrası reperfüzyon garanti edilmez. arter artık kapalı bağlı olmasına rağmen, arter prosedürü sırasında sürekli zarar görebilir ve reperfüzyonu imkansız hale gelebilir. Oldukça miyokard solgunluk ve Rubor (kırmızı renk) gözlemleri güvenmek yerine reperfüzyon onaylamak için elektrokardiyografik değişikliklerin kaydını olması yararlı olacaktır. iskemi / reperfüzyon hasarı belirteçleri görünmüyor Kalpler ardından hızla bayraklı olabilir ve devam etmek için nasıl bir karar araştırmacılar tarafından yapılabilir.
Son olarak, EKG kaydını kuran th boyunca bazal değişiriskemik ve reperfüzyon dönemleri e araştırmacılar, ilk ameliyattan sonra kalbi izlemeye devam etmenizi sağlar. ameliyat tamamlanır tamamlanmaz Müfettişler şu anda en kısa sürede kalp gözden kaçırmamalıyız. EKG ameliyat sonrası gün miyokard saat meydana gelen değişiklikler hakkında fikir edinmek için basit bir yoludur. Ameliyat geç gelişen Q dalgalar devam gösteren veya doku ölümü kötüleşen ortaya koyabilir sonra EKG zaman noktalarında kaydetti. Ancak, etkili bir şekilde temel EKG karşılaştırma için kullanılabilir olmalıdır, yeni ya da kötüleşen elektrokardiyografik işaretlerini Gage.
12 haftalık erkek C57BL / 6 fareler - Bu protokol hazırlamak, elde etmek ve 8 kullanarak fare kalp iskemi ve reperfüzyon onaylamak için EKG yorumlama nasıl gösterecektir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Hayvanlar üzerinde yapılan tüm cerrahi prosedür Bakımı ve Kullanımı Laboratuar Hayvanlarının 13 ya da başka uygun etik kılavuzların için Kılavuz uygun olarak yapılmalıdır. Protokoller devam etmeden önce uygun kurumda hayvan koruma kurulu tarafından onaylanmış olması gerekir.
1. EKG için hazırlanıyor
NOT: Başlamadan önce, eldiven, gözlük ve temiz bir laboratuvar ceket veya tek elbisesi dahil olmak üzere kişisel koruyucu ekipman yok.
- olmayan alkol ve sigara çamaşır suyu bazlı dekontaminasyon solüsyonu kullanılarak EKG pedi temizleyin. Yavaşça elektrot pedi hasar olmadığından emin olmak için fazla bir çözüm kapalı örtecek silin hassas bir görevi kullanın.
- EKG pad ısıtma özelliği varsa, bunu kullanın. Anestezi fareler hızla vücut ısısını kaybetmek eğilimindedir. Cerrahi 14 boyunca 37 ° C normotermik vücut ısısını korumak için 40-42 ° C'ye kadar pedi ısıtın. vücut öfke Monitörrektal termometre ile çalıçtırdıgınızda. vücut ısısını ~ 37 ° C korumak için gerekli ped sıcaklığını ayarlamak.
- En torakotomilerin fare sırtında (sırtüstü) yatarken ile yapılır gibi, geçiş "yatar" ayarına saygısız olduğundan emin olun. Birçok EKG pedler yüzüstü ve sırtüstü pozisyonlar arasında geçiş yapmak için bir işlevi var. Sağ yönünü seçmek için başarısızlık elektrokardiyografik olayların yanlış neden olabilir.
- % 5 inhale izofluran ve 1 L / dk oksijen kullanarak fare anestezisi. Fare uyuşturulduktan sonra, EKG pad transfer fare anestezi burun konisi ile donatılmış ve% 2 ve 1 L / dk oksijen izofluran azaltır. Farenin ayak forseps ile sıkışmak olduğunda tepki vermiyor fareyi sağlayarak uygun anestezi onaylayın.
- anestezi sırasında kuruluk ve kornea hasarı önlemek için farenin gözleri üzerine göz yağlama merhem ince bir tabaka sürün.
- Tüm görünür yatak kaldırmak için mendil ıslak olan farenin pençeleri temizleyinBu pençeleri yapışmış olabilir veya EKG pad pençeleri gelen elektriksel uyarıların iletimi ile müdahale edebilir. silin bir ile Kuru pençeleri.
- EKG pad üzerinde dört metalik elektrotlar her birine son derece iletken elektrolit jel (USD dime biraz daha küçük) küçük bir miktar uygulanır.
Not: Yalnızca jel küçük bir miktar uygulamak için emin olun çok fazla jel zor bandı kullanarak pad pençeleri dizginlemek için yapar. Ayrıca, pençeleri de bant uygulamadan önce ıslak olsaydı ameliyat sırasında kısıtlama dışarı kayma muhtemeldir. - Yatar pozisyonda fare ile, karşılık gelen elektrot (Şekil 1) Her pençe dizginlemek için net tıbbi bant kullanın. Ilk basın her banda kendi parçasına pençe ve ardından EKG pad bant yapıştırın. Her ölçülü pençe elektrolit jel ve elektrod ile temas halinde olduğundan emin olun.
2. EKG Kazanılması
- EKG edinimi, conf için kullanılan ekipmana bağlı olarakEKG dalga formu gerçek zamanlı olarak görüntülenmiştir böylece makineyi ŞEKIL. Bir ekokardiyografi makinede fizyolojik izleme ayarlarını kullanarak EKG kayıtları için, canlı B-mod görüntü ekranın alt kısmındaki çalışan EKG dalga biçimine sahip olacaktır.
Not: En iyi o ekipmanı nasıl yapılandırılacağı belirlemek için bireysel makine kullanıcı kılavuzlarına bakın. - Bir ekokardiyografi makinede B-mod anahtarı veya diğer EKG kayıt cihazlarında eşdeğer basarak EKG dalga gerçek zamanlı görselleştirme etkinleştirin.
- genlik farklılıkları hesaba çözünürlüğünü ayarlayın. Q dalgasının R-dalgası ya da çukur (vadinin) tepe görsel çerçevenin dışına ise dalga tüm yüksekliği görülebilir kadar çözünürlüğünü ayarlayın.
Not: Bu bir ekokardiyografi makinede fizyolojik ayarlar sekmesi altında yapılabilir. artış tıklayın veya tüm dalga görünene kadar okları azaltın.
- genlik farklılıkları hesaba çözünürlüğünü ayarlayın. Q dalgasının R-dalgası ya da çukur (vadinin) tepe görsel çerçevenin dışına ise dalga tüm yüksekliği görülebilir kadar çözünürlüğünü ayarlayın.
- Bir görüntü obt olmaktır Her zamanained, araçların EKG pad temizleyin. forseps veya parmak ile EKG kaydı sırasında fareye dokunmaktan dalga biçimi rahatsız edecektir. Fare herhangi EKG'leri kaydetmeden önce EKG pad üzerinde hala ve bakir olduğundan emin olun.
- fare üzerinde herhangi bir cerrahi kesiler yapmadan önce makinenin "kayıt" veya "depo" özelliğini kullanın. Bu görüntü daha sonra karşılaştırma için bir temel olarak kullanılır.
3. Cerrahi Prosedür ve Kayıt EKG
- başlamadan önce (buprenorfin 1.5 ug, intraperitoneal) analjezik ile anestezi fare enjekte edilir. Iskemi / reperfüzyon cerrahi işlem ayrıntıları da başka bir yerde 5 bulunabilir.
- kimyasal ya da mekanik cerrahi site çevresinde saç çıkarın ve betadin solüsyonu ile bölgeyi dezenfekte edin. özofagus ve trakea dikey bir kesi paralel hale getirmek için bir neşter kullanın. Yavaşça trakea örten ince doku kadar kesi her tarafına lenf düğümleri taşımakmaruz. trakea beyaz kıkırdak halkaları görünür olana kadar forseps kullanarak, hafifçe doku ayırın.
Not: Genellikle Nair epilasyon losyonu kullanın. Losyon ~ 1 dakika için cerrahi bölgeye tatbik edilir. Nair sonra iyice tuz ya da su ile yıkanır. yüksek çözünürlüklü ekokardiyografi (saç köklerinin algılayabilir olan) ameliyat öncesi ve sonrası gerçekleştirilen çünkü bu yöntem bizim laboratuvarda tercih edilir. Ancak, dikkatli bu tür genital gibi hassas alanlarda önlemek için alınması gereken ve sonra iyice potansiyel cilt yanıkları önlemek için kapalı Nair yıkama. - Hızla burun-koni farenin burnunu kaldırmak ve fare ağzına ve boğaz doğru havalandırma hortumunu takın. Havalandırma boru ucu açık boyun alanı üzerinden görünür olduğunda, trakea başlaması ile tüp hizalayın. Yavaşça t görsel teyit edilebilir trakea içine boru slaytlar kadar yukarı yönlü bir baskı uygularken yan tüp yan kıpırdatmaksaydam trakea hrough.
- Fare entübasyon işlemi sırasında anestezi kalmasını sağlamak. entübasyon gelen Pause ve karıştırın başlarsa burun-koni fareyi dönün.
- dize bir döngü kullanarak, döngü farenin iki ön diş kanca ve dize fare başını kararlı ve cerrahi esnasında hareket etmez havalandırma hortumunu sağlamak için EKG yastığına biter bantlayın. Hızla kemirgen ventilatör havalandırma hortumunu takın ve fare ağırlığına göre havalandırma ayarlarını. yerinde bant havalandırma hortumu.
- kurumasını doku tutmak için ılık serum fizyolojik ile ıslatılmış bir gazlı bez ile farenin maruz trakea örtün.
- sternum sol tarafındaki bir neşter kullanılarak dikey bir kesi yapmak.
- Forseps kullanarak, yavaşça kas tabakasından fasya tabakası ayırın. Dikkatle görünür kan damarları kesmeden yatan kas katmanları kesti.
- forseps kullanarak, üçüncü kaburga kapmak ve çekinyukarı nazikçe. tek elle kaburga kavrama korumak ve dikkatli bir şekilde üçüncü ve dördüncü kaburga arasında interkostal doku kesmek için cerrahi makas kullanın. Akciğerler zarar görmemesine dikkat ediniz.
Not: Akciğerler nedeniyle basınç gradyanı kaybı hemen göğüs boşluğu cerrahi kesi ile delinirse sonra derin göğüs boşluğuna geri çekilecektir. Akciğerler devam etmeden önce geri kadar bekleyin. - kapmak ve yavaşça kalbi saran perikard ince bir tabaka ayırmak için forseps kullanabilir.
- retraktörler takın veya elle kalp kaburga arasında görünür bir konuma kaburga taşımak için kaburga retraktörlerin olarak forseps kullanabilir.
Not: O ligature yerleştirilmesi sırasında sağ alt pençe örtüşen böylece farenin sol alt pençe taşımak için yaygın bir uygulamadır. Bu, sol atriyal apendiks veya kulak kepçesi, dikilen yerleştirilmesi sırasında kolayca görülebilecek şekilde kalbi konumlandırmak için yardımcı olur. w geçerli EKG farkında olunAlt sol pençe elektrot kapalıyken aveforms elde edilmez. nedenle dikiş bağ miyokard dokusu ile değil bir düğüm sıkılır önce geçirilir sonra elektrot pençe dönmek için tavsiye edilir. - Sol kulak kepçesi altında, görsel LAD bulun. Hızla LV boşluğu nüfuz olarak LAD altında geçmek için yeterince derin ama çok derin değil miyokard içine bir 7-0 ipek konik dikiş iğne takın. sütür ligature serbest (non-iğne) ucunda sol dikiş ipek yaklaşık 4 cm kalmayıncaya kadar doğru sütür bitişik harfleri çekin.
- Basit bir dikiş düğüm başlayın. sütür ipek serbest ucu düğüm oluşturacak şekilde döngüler çekilir edildikten sonra, duraklatmak.
- forseps ile sütür ipek özgür ve iğne uçlarını tutarak, şekillendirme düğüm altında ve epikardiyal yüzeyi üstünde PE-10 boru bir ~ 1 cm bölümü yerleştirin.
- farenin sol pençe geçti ise, kendi pro pençe dönmekelektrot başına. PE-10 tüplerinin kalp sütüre şekilde düğüm sıkın. EKG kaydedilecek izin vermek için fare ile tüm fiziksel temas bırakın.
- ~ 10 sn arasında geçiş yapmak için EKG dalga formunu izin verin. "Oklüzyonu Time" olarak görsel EKG dalga formunu ve kayıt dalga formunu kontrol edin. T-dalgası 1 dakika içinde genlik artmaz ise, dikilen yerleştirme yeniden değerlendirin.
- T-dalga genliği artırmak, ya çalışmaya gelen hayvan atmak veya bağ yerleştirme düzeltmeye kalkmayın yoksa.
- Görme LV iskemik Sararma onaylamak için miyokardın rengini kontrol edin.
- PE-10 boru etrafında EKG değişiklikleri ve miyokard renk değişimleri iskemi gösteriyorsa, çift düğüm dikiş.
- ılık tuzlu su gazlı bez ile açık göğüs boşluğunu örtün.
- Kayıt EKG iskemik süresi boyunca her 5-10 dk.
EKG Kullanılması REPERFÜZYONUNDA 4. Onay
- tuzlu gazlı bez koy kaldırgöğüs boşluğunu halka ve kalbi görselleştirmek.
- PE-10 boru üstüne dikiş ipek kesmek için bir bıçak kullanın. bağ kesildiğinde, PE-10 boru bölümü kaldırmak ve yavaşça miyokardiyumundan dikiş bitişik harfleri çıkarın.
- fare ile tüm fiziksel temas bırakın ve ~ döngüsü 10 sn EKG dalga formu sağlar. olarak kayıt dalga "REPERFÜZYONUNDA Time." İstenilen deneysel zaman noktası ulaşana kadar EKG dalga şekilleri her 5-10 dakikada bir kaydetmeye devam.
- gerektiği gibi genlik değişiklikleri için çözünürlüğünü ayarlayın. T dalgası PE-10 tüplerinin ve ligasyonu uzaklaştırılması ile değişmezse, reperfüzyon doğrulanmamıştır.
- T-dalgası boru kaldırılması üzerine değiştirmek, ya çalışmaya gelen hayvan atmak veya bağ yerleştirme düzeltmeye kalkmayın yoksa.
- Görme ayrıca kırmızı renge dönüş ile reperfüzyon onaylamak için miyokard kontrol edin.
- Bir 5-0 ile interkostal boşluk dikilmesi ile yakın göğüs boşluğuipek sütür ameliyat sırasında girmiştir fazla havayı dışarı atmak için farenin göğsüne hafif bir basınç uygularken. Sonra kas katmanları ve nihayet, cilt sütür. Not: göğüs boşluğuna basınç uygulanması, tüm farelerin hava göğüs boşluğunu boşaltmak için yeterli olmayabilir. Bu nedenle, boşaltma şırınga ve iğne yöntem tüm havanın dışarı edilmiş olmasını sağlamak için kullanılması gerekmektedir.
- elektrotlar farenin pençeleri solunan anestezi kapatmadan ve çıkarmadan önce son EKG kaydediniz. 2 L / dk oksijen artırmak ve fare bilinç kavuşur kadar havalandırma korumak.
- Fare infarkt değişkenliği önlemek için sabit sıcaklık kontrollü çevre, örneğin ısıtma pedi ya da sıcak inkübatör, kurtarmak için izin verin. Fare face ölçeği ile belirtildiği gibi gerektiği gibi daha sonra ameliyat sonrası buprenorfin 24 saat ile fare tedavi ve.
Not: reperfüzyon için prosedür, Xu ve arkadaşları tarafından ayrıntılı olarak ele alınmıştır 5.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Normal bir fare EKG elektriksel olayların P, Q, R, S, ve J ve T. P alfabetik işaretleri ile, Şekil 2'de görüntülenen, ilk atriyal depolarizasyon. QRS ventriküllerin üzerinden depolarizasyon dalgasıdır. J erken repolarizasyon ve T de kurtarma 11 olarak da bilinen heterojen repolarizasyonu temsil eder. Birçok laboratuvar ST-segment 10,15-17 olarak SJT-segment bakın yerine J-dalga isimlendirme kullanmak ve yok unutulmamalıdır. Burada, sonuçları ve analizler temsilcisi ve 40 farelerin laboratuvar gözlemleri kapalı dayalı bulunmaktadır. Çoğu fareler cerrahi boyunca benzer dalga ilerlemeler sergiledi. benzer dalga formları sergilemek vermedi Fareler daha fazla analiz için bayraklı ve olmayan infarkt hayvanlar kabul edildi. Benzer dalga sonuçlar, Jong ve ark., 15 tarafından rapor edilmiştir.
Murin kalpler suBölgesel iskemi nedeniyle LAD tıkanıklığı tipik artan R dalgasının genlik hem de ST-segment nihai yüksekliği ardından JT-segment hiperakut pik olarak göstermek ffering Şekil 3 gösterir akut miyokard iskemi ilk işareti.; T dalgasının hiperakut pik. Bu şekilde görüldüğü gibi, T-dalga taban koşullarından genlik artmıştır. Ancak, bu temel dalga üzerinde yaptığı gibi S-dalgası hala derinden ve olumsuz çıkıntı nedeniyle ST segment yükselmesi henüz değil.
Baseline EKG konfigürasyonu olumsuz çıkıntı S-dalgası (Şekil 2) gösterir. Zaman ilerledikçe, EKG değişiklikleri belirtilmiştir. ST S-dalga sonu ve T dalgasının başından bölümü olarak tanımlanır. Bu ST-segment insanlarda açıktır. Yüksek olması nedeniyle kalp hızı, bu segment farelerde birleştirilir ve ek erken repolarizasyon "J-dalga" EylülS ve T-dalgaları arates. Bu nedenle, izoelektrik hat ya da daha yüksek bir S-dalga yüksekliği ST yükselmesi sıçangil versiyonu olarak kabul edilmelidir. Şekil 4'te erken enfarktüs için iskemi ilerlemesi ST-segment yükselmesi görülebilir. İşte S-dalgası izoelektrik çizgi üstü, yüksek genlik görüntülüyor. J-dalgası da temel dalga (Şekil 2) ile karşılaştırıldığında, özellikle yükselir. Bu nedenle, ST yaralanması / enfarktüs 10 gösterge olan yükselir.
Şekil 5 başlangıca bir fare ilerlemesini reperfüzyon üzerinden tüm yol izler. İlk dalga kaydedilen temel bir normal sinüs ritmi gösterir. bağ bağladı ve arter tıkalı oldu sonra ikinci dalga EKG 1 dk görüntüler. Bu hat üzerinde kırmızı daire hiperakut T-dalgası piki gösterir. karşılaştırıldığında wi Eğerinci "Baseline," T-dalga yüksek olduğu açıktır. Üçüncü dalga 5 dakika zaman noktasında tam ST kademeli olarak göstermektedir. "1 dk iskemi" görüntüde, S-dalgası hala izoelektrik çizgi geçerek, olumsuz yansıtarak oldu. Ancak, 5 dk kompleksin S kısmı kadar negatif olması gerektiği gibi J ve T dalgaları içine ilerlediğini önce bulmuyor. S- ve T-dalgaları arasındaki segmenti izoelektrik hattan yükselir, çünkü bu ST-segment yükselmesi olarak tarif edilir. Bölgesel iskemi başka elektrofizyolojik işaretleyici QRS kompleksinin başlangıcından itibaren uzanır ve T dalgasının sonuna kadar devam QT-interval 16 genişliyor. iskemi 20 dakikada, QT-aralık büyümüştür ve ST segment hala yükselir. iskemi 45 dakika sonra, QT-interval kalıntılar genişledi ve ST segment yüksek kalır.
sahip miyokard reperfüzyon30 dakika veya daha az iskemik olmuş bir fare başlangıç koşullarının geri dönen EKG yol açmalıdır. Preda ve Burlacu fare elektrokardiyografik değişiklikler, iskemik süre ve infarkt şiddeti 17 arasında bir bağlantı kurmuştur. Bu 1 saat iskemik dönemleri kalıcı EKG değişikliklerine neden oysa 30 dakika iskemik dönemleri kalıcı EKG değişiklikleri neden olmadığı gözlenmiştir. Ayrıca, iskemi 24 saat sonra tıkalı arter reperfüzyon hiçbir kurtarma etkisi 17 vardı. Normalde, Q dalgalar hemen önce depolarizasyon QRS kompleksi hafif bir düşüş projeksiyon olarak tespit edilebilir. Önemli kas ölüm 10'da ayarlamak başlar gibi önemli, ya da patolojik Q dalgaları miyokard iskemi başlangıcından kısa bir süre sonra gelişebilir. Belirgin Q dalgalar geniş Q dalgasının sonuçlanan karşılık gelen R-dalgası yüksekliğinin en az 1/3 veya bunların uzun süre ile tanımlanır. Ölü miyokard saptırma Electrica bir bölgeden önemli Q dalgası sonuçlarıuzakta elektrotun 7'den l akımları. Takılmasından sonraki 5 dakika, derin kanıtı sonra, önemli Q dalgalar (Şekil 5) görünmeye başlar. Ayrıca, T dalga izoelektrik çizgi (Şekil 5) döner. reperfüzyon 30 dakika sonra, negatif Q dalgalar kalır ve büyük olasılıkla kalıcı hasara gösteriyor. Bu zaman noktasında, Q dalgalar Geniş ve derin ve boyama kalp dokusu hasar alan (Şekil 5) çevresinde en elektrik akımı saptırıcı olduğunu göstermektedir.
Sürekli iskemi sonrasında yaralanma ve enfarktüs ilerleme gelişmiş negatif T-dalga projeksiyon (Şekil 5, 30 dakika reperfüzyon, ikinci kırmızı daire) yol açar. Nedeniyle gerçek bir enfarktüs Bu gelişmiş T-dalgası projeksiyon genellikle 7 kalıcı olacaktır. 30 dakika reperfüzyon dalga ikinci kırmızı daire ters T dalga (Şekil 5) gibi görünen gösterir. 5 a isend 30 dakika T-dalgaları T dalga daha olumsuz çıkıntı olduğu açıktır karşılaştırılır. önemli Q-dalgalar ile birleştiğinde Bu, bu kalpte kalıcı doku hasarı için kanıt sağlar. Inhale izofluran anestezi kalp hızını azaltır ve bu nedenle, QT aralığını arttırır unutulmamalıdır. Ancak, kurtarma T-dalgaların genlik 18 etkilenmez.
Söz konusu değişiklikler, kantitatif gerilim açısından analiz edilebilir. .csv Dosyası olarak fizyolojik verilerini dışa veri çok büyük miktarda sağlayacak 6 gösterir Şekil. fraksiyonlar-of-milisaniye hızlarında EKG değerleri (genlikleri) sunmanın yanı sıra orada çok istenirse respirations, sıcaklık probları, kan basıncı manşet vb diğer verileri dahil seçenekleri olabilir. Şekil 7'de gösterildiği gibi bu nicel veriler grafikle gösterilebilir. P-dalgası P-dalga dalga bir dizi Grafikleme bir EKG görselleştirmek yardımcı olurYapılandırma eğilim. 500 ms süresi daha az bir zaman yeterli dalga formları neden olmayabilir ve grafik yapacak herhangi bir ek süre standart bir bilgisayar monitöründe bakıldığında darmadağın ve elektrofizyolojik olaylar gözden kaçabilir ya da zor tanımak için görünür beri görselleştirmek için iyi bir zaman çerçevesi .
Şekil 1:. EKG Pad Mouse Doğru Yerleştirme Bu fare yatar pozisyonda konumlandırılmış. Farenin pençeleri her biri EKG yüzey pad üzerinde gelen elektrotlar bantlanmış. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 2: Normal Fare BaselineEKG Dalga. Normal fare bazal EKG kalpteki elektriksel olayları açıklamak için kullanılan harfler P, Q, R, S, J ve T ile etiketlenir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 3:. T-dalgası Yükseklik Ayrıca hiperakut T dalgası veya pik olarak da bilinir. T-dalgası yükseltilir ve bazal T dalgası (Şekil 2) daha yüksek. Olan bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 4:. ST-segment yükselmesi Bu rakam displST-segment olarak görülebilir ays ST-segment yükselmesi izoelektrik noktası daha yüksektir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 5:. Bir iskemi / reperfüzyon Cerrahi Kursu üzerinde tipik EKG değişiklikleri Bu rakam miyokard iskemi / reperfüzyon ameliyat süresi boyunca bir fare izler. İlk dalga kaydedilen taban çizgisi (Baseline) idi normal sinüs ritmi gösterir. bağ bağladı ve arter tıkalı oldu sonra ikinci dalga (1 dk iskemi) dalga 1 dk görüntüler. Bu hat üzerinde kırmızı daire hiperakut T-dalgası piki gösterir. Üçüncü dalga (5 dk iskemi) kırmızı çember tamamlandı ST-segment yükselmesi görüntüler. fou kırmızı daire rinci dalga (20 dk iskemi) genişletilmiş QT-interval ve S-dalgası hala yükselir görüntüler. Beşinci dalga üzerinde kırmızı daire (45 dk iskemi) görüntüler QT-segmenti genişledi ve ST-segmenti yükselmiş. Altıncı dalga (1 dk reperfüzyon) yedinci dalga (5 dk reperfüzyon) derin, anlamlı Q dalgası formunu görüntüler 45 dk ischemia.The kırmızı dairenin karşısında önemli bir değişiklik gösterir. Sekizinci dalga (30 dk reperfüzyon) birinci kırmızı daire ikinci kırmızı daire olası T-dalgası geliştirme görüntüler ise., Anlamlı Q-dalgalar görüntüler bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 6:. O elektronik tabloya .csv dosyası olarak dışa gibi fizyolojik Veri Bu rakam fizyolojik verileri gösterir.ref = "https://www.jove.com/files/ftp_upload/54814/54814fig6large.jpg" target = "_ blank"> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 7:. MV değerleri grafikle bu şekilde görüntülenen grafik fizyolojik veri dosyası (Şekil 6) kullanarak üç ardışık ve tam dalga formlarından mV değerleri gösterir. Grafik fizyolojik veri dosyasından noktalarını kullanarak basit bir çizgi grafiktir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
miyokard iskemisi ve reperfüzyon teyit için ek bir yöntem tıkayıcı ligasyonu doğru yerleştirilmesini sağlar olarak EKG değişiklikleri kullanma. bağ yerleştirme doğruluğu hayvanlar arasında veri değişkenliğini azaltmak için çok önemlidir. Bir fare kalbinde LAD görselleştirmek için zor bir arter olduğunu. Bu nedenle, elektrokardiyografik değişiklikler ile görsel solgunluk tamamlayan bağ ve elde edilen doku hasarının doğru yerleştirilmesini sağlamaya yardımcı olur.
EKG ped kalbin bir non-invaziv bir görünüm sunuyor yana, çoklu EKG çalışma sırasında elde edilebilir. Bu ameliyat sırasında ve sonrasında meydana gelen kardiyak değişikliklerin daha iyi anlaşılmasını sağlamak yardımcı olabilir. Cerrahi işlem sonrası karşılaştırma için kullanmak üzere bir temel EKG elde etmek önemlidir. Daha sonra sahne doku ölümü ve hatta ventrikül anevrizması elektrofizyolojik sinyaller ve EKG yapılandırma değişiklikleri deplasmanlar tarafından görülebilir. Bu bilgiler sağlayabilirkalp yetmezliği ilerlemesi halinde.
ekokardiyografik makinesi kullanılarak ECG ölçüm avantajları önce ya da işemi / reperfuzyon ameliyat sonrası kalp yapısal ve işlevsel parametreleri ölçümünü içerir. kayıt EKG sistemin sınırlamaları bir ekokardiyografi makine satın almak için yüksek maliyeti içerir. Deneyler birden fazla gün boyunca sürekli EKG kontrol edilmesi gereken, ancak eğer kayıt ve çeşitli zaman aralıklarında dalga analizi için programlanmış olabilir yazılım karşılık gelen uzaktan telemetrik EKG birimleri dahil EKG kaydı için kullanılabilir aparatların çeşitli vardır. Ancak, EKG telemetri birimlerinin çok bir implantasyon prosedürünü veya özel yaşam alanları gerektirir. Ayrıca, birçok değiştirici elektrot seçenekleri elektrot klipleri ve iğneler de dahil olmak üzere mevcuttur. torakotomi ile İskemi / reperfüzyon cerrahi oldukça invaziv bir işlemdir. Bir ekokardiyografi mac ile EKG takımını kullanarak Avantajlarıhine ameliyat sırasında hayvana bağlı herhangi teller ve hiçbir ekstra cerrahi prosedür ile non-invaziv prosedür bulunmaktadır. Ancak, araştırmacılar kendi laboratuar ve deneysel ihtiyaçları için en iyi ekipman belirlemelidir.
Daha önce belirtildiği gibi, izofluran anestezi kalp hızını azaltır. Buna ek olarak, izofluran KATP kanallarının aktivasyonu yoluyla kardiyoprotektif olabilir ve köpeklerde 19 bulunmuştur Bu nedenle, enfarktüs boyutunu azaltır. Farelerde genel anestezi enjekte edilebilir maddeler kullanılarak indüklenebilir. Soluma anestezi özellikle uzun süreli işlemler için, daha fazla güvenlik sağlıyor. Ancak, inhalasyon anestezi gibi hassas püskürteç ve debimetreler, özel solunum sistemleri ve kirliliğinin önlenmesi için etkili tahliye sistemleri gibi karmaşık ve pahalı ekipman gerektirir. Enjekte anestezik dezavantajları bir başlangıç dozu, doğru uzamış ane derinliğini modüle şansı seçiminde zorluk dahilsthesia, uzun süreli geri kazanımı, narkoza seçimi Çalışma 20 prosedürüyle ve AIM uzunluğuna göre uyarlanmalıdır.
infarktlarının tutarlılık ve tekrarlanabilirlik geliştirmemize yardımcı olacaktır farelerde iskemi / reperfüzyon hasarını doğrulanması için bir tamamlayıcı bir yöntem olarak EKG kullanarak değil, aynı zamanda nicel trendleri kurarak tekniğin gelecekteki uygulamalar için olasılığını açar. Müfettişler, belirli deney grupları içinde benzer EKG yapılandırmaları görebilirsiniz. vahşi tip ile karşılaştırıldığında, örneğin, bir genetik olarak tadil edilmiş bir hayvan grubunun ameliyat sonrası Alışılmadık QT aralığını sergileyebilir. Araştırmacılar iskemi ve reperfüzyon hasarı bir tek teyidi olarak miyokard renk değişiklikleri kullanırsanız, bu bilgilendirici veriler cevapsız olurdu. vahşi tip ve transgenik fareler arasında karşılaştırmalı çalışmalar için, Lambeth Sözleşmeleri kılavuzlara hususlar da özellikle yaş, cinsiyet açısından, değerli olabilir, Körleme ve hayvanların 21 randomizasyon.
Sonuç olarak, miyokard iskemi / reperfüzyon hasarının ek onay birden çok yarar vardır. bir ek teknik olarak EKG kullanılarak cerrahi tutarlılık kurmak yardımcı olabilir. Bu yüksek kaliteli veri sağlarken, kullanılan hayvanların sayısını azaltmaya yardımcı olabilir. Ayrıca araştırmacılar kalp yaralanması, doku ölümü ve / veya zamanla non-invaziv biçimlenme izlemenize olanak sağlar. Son olarak, miyokard iskemi / reperfüzyon bir teyidi olarak EKG kullanılarak kantitatif elektrofizyolojik trendleri kurma imkanı sunuyor.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Vevo 1100 | Fujifilm Visual Sonics |
Echocardiography Machine | |
| Mouse Handling Plate | Fujifilm Visual Sonics |
Heated ECG plate | |
| Signa-Gel | Highly Conductive Multi- | ||
| Electrode Gel | Parker | 15-25 | Purpose Electrolyte |
| Transpore Medical Tape | 3M | 1527-0 | |
| PI-Spray II | Pharmaceutical Innovations | NDC 36-2013-25 | Cleaning agent for ECG plate |
| C57Bl6 Mice | The Jackson Laboratory | 000664 | Male, 8 - 12 wk |
| IsoThesia-Isoflurane | Henry Schein | NDC 1169-0500-1 | |
| Excel | Microsoft | ||
| Systane Nighttime Lubricant Eye Ointment | Alcon | 65050935 | |
| 7-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | 640.O32 | |
| 5-0 Perma-Hand Silk Sutures | Ethicon | K809.O32 | |
| Surgical Scissors | ROBOZ | RS-5881 | |
| Forceps | Fine Science Tools | 11052-10 | |
| Gauze | Bio Nuclear Diagnostics Inc | DIS-022B | |
| Needle Holder | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| Buprenex CIII | Patterson Veterinary | 0-891-9756 | Buprenorphine Hydrochloride Analgesic |
| Betadine | Purdue Products | 67618-150-08 | |
| Nair | Church and Dwight Co. | NRSL-22339-05 |
References
- Kochanek, K. D., Murphy, S. L., Xu, J. Deaths: Final Data for 2011. Natl Vital Stat Rep. 63 (3), 1-120 (2015).
- World Health Organization. The 10 leading causes of death in the world. , Available from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs310/en/ (2012).
- Klabunde, R. E. Cardiovascular Physiology Concepts 2edn. , Wolters Kluwer Health Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. 243 (2012).
- Bhardwaj, R., Kandoria, A., Sharma, R. Myocardial infarction in young adults-risk factors and pattern of coronary artery involvement. Niger Med J. 55 (1), 44-47 (2014).
- Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery. J Vis Exp. (86), (2014).
- Fernández, B., et al. The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models. J Anat. 212 (1), 12-18 (2008).
- Thaler, M. S. The Only EKG Book You'll Ever Need. , Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. 4 edn (2003).
- Poirier, P. Exercise, heart rate variability, and longevity: the cocoon mystery? Circulation. 129 (21), 2085-2087 (2014).
- Boudoulas, K. D., Borer, J. S., Boudoulas, H. Heart Rate, Life Expectancy and the Cardiovascular System: Therapeutic Considerations. Cardiology. 132 (4), 199-212 (2015).
- Wehrens, X. H., Kirchhoff, S., Doevendans, P. A. Mouse electrocardiography: an interval of thirty years. Cardiovasc Res. 45 (1), 231-237 (2000).
- Boukens, B. J., Rivaud, M. R., Rentschler, S., Coronel, R. Misinterpretation of the mouse ECG: 'musing the waves of Mus musculus. J Physiol. 592 (21), 4613-4626 (2014).
- O'Gara, P. T., et al. ACCF/AHA guideline for the management of ST-elevation myocardial infarction: executive summary: a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on Practice Guidelines: developed in collaboration with the American College of Emergency Physicians and Society for Cardiovascular Angiography and Interventions. Catheter Cardiovasc Interv. 82 (1), E1-E27 (2013).
- Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , National Academies Press. Washington DC. 8 edn (2011).
- Gao, S., Ho, D., Vatner, D. E., Vatner, S. F.
- Jong, W. M., et al. Reduced acute myocardial ischemia-reperfusion injury in IL-6-deficient mice employing a closed-chest model. Inflamm Res. 65 (6), 489-499 (2016).
- Nadtochiy, S. M., et al. In vivo cardioprotection by S-nitroso-2-mercaptopropionyl glycine. J Mol Cell Cardiol. 46 (6), 960-968 (2009).
- Preda, M. B., Burlacu, A. Electrocardiography as a tool for validating myocardial ischemia-reperfusion procedures in mice. Comp Med. 60 (6), 443-447 (2010).
- Speerschneider, T., Thomsen, M. B. Physiology and analysis of the electrocardiographic T wave in mice. Acta Physiol (Oxf. 209 (4), 262-271 (2013).
- Kersten, J. R., Schmeling, T. J., Pagel, P. S., Gross, G. J., Warltier, D. C. Isoflurane mimics ischemic preconditioning via activation of K(ATP) channels: reduction of myocardial infarct size with an acute memory phase. Anesthesiology. 87 (2), 361-370 (1997).
- Gargiulo, S., et al. Mice anesthesia, analgesia, and care, Part I: anesthetic considerations in preclinical research. ILAR J. 53 (1), E55-E69 (2012).
- Curtis, M. J., et al. The Lambeth Conventions (II): guidelines for the study of animal and human ventricular and supraventricular arrhythmias. Pharmacol Ther. 139 (2), 213-248 (2013).
