Summary
Håndskriftet indeholder en detaljeret kirurgisk totrinsprocedure for at udføre mus 5/6th delvis nephrectomistatus (PNx) med pole ligatur. Fire uger efter operationen, i forhold til sham-drives mus PNx mus udviklet nedsat nyrefunktion, anæmi, hjerte hypertrofi, cardiac fibrose, og nedsat hjertefunktion systolisk og diastolisk.
Abstract
Kronisk nyresygdom (Cementovnstøv) er en stor risikofaktor for hjerte-kar-sygdom begivenheder og dødelighed, og udvikler sig efterhånden til den kliniske fænotype kaldet "uræmisk kardiomyopati". Vi beskriver her en eksperimentel Cementovnstøv musemodel, opkaldt 5/6th delvis nephrectomistatus (PNx) med pole ligatur, som udviklede uræmisk kardiomyopati på fire uger efter operationen. Denne PNx model blev udført af en to-trins kirurgi. I trin-one kirurgi, var begge poler af venstre nyre forbundet. I trin-2 kirurgi, blev opført 7 dage efter trin-en operation, blev den højre nyre fjernet. For sham operation, de samme kirurgi procedurer blev udført, men pole uden ligatur af den venstre nyre eller fjernelse af den højre nyre. De kirurgiske procedurer er lettere og mindre tidskrævende, sammenlignet med andre metoder. Men resten funktionelle renal masse kontrolleres ikke så let som nyrearteriestenose ligatur. Fire uger efter operationen, i forhold til musene sham-opererede PNx mus udviklet nedsat nyrefunktion, anæmi, hjerte hypertrofi, cardiac fibrose, og nedsat hjertefunktion systolisk og diastolisk.
Introduction
CKD, også kendt som kronisk nyresvigt er en fremadskridende tab af nyrefunktion over tid, der efterhånden udvikler sig til permanent nyresvigt. CKD, fra tidlig fase nyresygdom stater til slutstadiet nyresygdom (ESRD), er en stor risikofaktor for hjerte-kar-sygdom begivenheder og dødelighed, og efterhånden udvikler sig til den kliniske fænotype kaldet "uræmisk kardiomyopati"1, 2,3. Den uræmisk kardiomyopati hos patienter med Cementovnstøv eller ESRD er forbundet med hjerte-kar-abnormiteter, først og fremmest skyldes overbelastning af venstre ventrikel (LV) pres og/eller volumen, fører til LV hypertrofi (LVH), LV dilatation og LV systolisk dysfunktion4 ,5,6. Hjerte fibrose er en anden fælles patologiske proces uræmisk kardiomyopati, der reducerer hjertets overholdelse resulterer i LV diastolisk dysfunktion. Alvorlige kardiale fibrose kan føre til pludselig hjertedød selv i dem uden kardiale symptomer7.
5/6th PNx er et almindeligt anvendte Cementovnstøv dyremodel for dyreforsøg med nyresvigt, uræmisk kardiomyopati og hypertension. PNx er opnået ved ablation af 5/6 renal parenkym. Rotte-modellen blev oprindeligt udviklet med de to mest almindelige protokoller ansat kirurgisk resektion eller infarkt. Rotte PNx model er en yderst nyttig model til at studere uræmisk kardiomyopati med betydelige stigninger i blodtryk, hjerte hypertrofi og nedsat diastolisk funktion. Senere, blev mus PNx modeller, drives med de samme teknikker som modellens rotte udviklet på grund af bred tilgængelighed og brugervenlighed gør genetiske manipulationer i mus-system.
Det er veldokumenteret, at systemisk oxidant stress er en konstant funktion af både klinisk og eksperimentel uræmisk kardiomyopati8,9. Derudover oxidant stress bidrager til uræmisk syndrom10, og spiller en afgørende rolle i patogenesen af de hjerte abnormiteter set i uræmisk kardiomyopati11,12,13. Til dette punkt, har vi vist, at for gnavere 5/6th PNx model forårsager fysiologiske, morfologiske og biokemiske funktioner uræmisk kardiomyopati14,15,16, 17. i mus PNx model beskrevet her, PNx-drives mus udviklet betydeligt oxidativt stress, i det mindste delvist medieret af Na, K-ATPase, signalering funktion, som er kritiske i PNx-medieret eksperimentelle uræmisk kardiomyopati. Dæmpning af Na/K-ATPase signalering ikke kun reducerer oxidative forstærkning, men også ameliorates de phenotypical ændringer i PNx-medieret eksperimentelle uræmisk kardiomyopati18.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
alle dyrs pleje og eksperimenter blev godkendt af Marshall University institutionelle dyrs pleje og brug udvalg (IACUC) i henhold til National Institutes of Health (NIH) Guide til pleje og anvendelse af forsøgsdyr. Mandlige C57BL/6 mus (10-12 uger gamle) har været opstaldet i en patogen gratis dyr facilitet i udpegede værelser udstyret med bure, der leverer renset luft under en 12t lys/mørke cyklus. Mad og vand blev leveret ad libitum.
1. kirurgi forberedelse
Bemærk: kirurgiske instrumenter og materialer er opnået fra forskellige kilder, der ikke er specifikke for kirurgi operationer. Instrumenter og materialer fra andre kilder kan også bruges til samme formål. Se Tabel af materialer til en liste af kirurgiske instrumenter.
- Forberedelse til kirurgi
- sted følgende inden for rækkevidde af de opererer tabel: opvarmning pad, halogenlampe, ilt tank og isofluran tank, isofluran vaporizer, hårklipper, Hårfjerningscreme, skalaer, steriliseret sæt, steriliseret kirurgisk linned, bomuld svaberprøver, 70% alkohol, polyhydroxydine løsning (indeholdende 1% jod), 0,9% NaCl opløsning, 1 mL sprøjter og kanyler (30 G), 3-0 og 4-0 silke suturer, buprenorphin og penicillin, antibiotisk salve, og smøremiddel øjet salve.
- Rense en buret og placere en varme pude under sengetøj for mus boliger efter kirurgi.
2. Trin-one kirurgi: Pole ligatur af venstre nyre
Bemærk: fastholde sterile forhold under operationen. Dække de autoklaveres kirurgiske instrumenter med en steril pad. Holde mere end én række kirurgiske instrumenter i hånden til mere end én operation for at undgå krydskontaminering under operationen. Hvis instrumenterne, der skal bruges igen, for flere operationer, desinficere instrumenter med betadine løsning og 70% ethanol, og derefter steriliseres i en germinator glas perle sterilizer i 5 min. Desinficer det operationelle område med 70% ethanol. Bærer en kjole, maske (for at dække næse og mund), kasket (til at dække hovedet), og et par af sterile handsker. Ændre handsker efter hver operation.
- Vaske og desinficere hænderne og bære sterile kirurgiske handsker. Bære en hoved cap og en maske.
- Desinficere tabellen med 70% alkohol. Anvende smøremiddel øjet salve på begge øjne af musen til at undgå øjet tørhed under anæstesi.
- Placere musen i en induktion af en isofluran vaporizer system og fremkalde anæstesi med en blanding af 2,5% isofluran med 100% ilt (0,8 - 1,2 L/min) i 1-2 min.
Bemærk: Effekten af anæstesi blev fastsat ved fravær af smerte refleks fremkaldte ved at klemme halen, og i mangel af palpebral refleks ved at trykke på øjenlåget. - Indsprøjtes penicillin (40.000 enhed/kg kropsvægt, IM) og buprenorphin (0,02 mg/kg legemsvægt, SC) for at forhindre infektion og smerter under operationen.
- Placer musen på en opvarmning pad (oprindeligt indstillet på 42 ° C) med en rektal termometer til at vedligeholde og overvåge kropstemperatur omkring 37 ° C under proceduren. Placer musen næsen ind i næsen kegle og ventilere med en blanding af 0,8-1,2% isofluran med 100% ilt (0,8-1,2 L/min.) under operationen.
- Placere musen i højre side. Barbering håret af kirurgisk område med en hårklipper og derefter fjerne med hair removal cream. Desinficere site med polyhydroxydine løsning (indeholdende 1% jod) efterfulgt af 70% ethanol. Juster autoklaveres kirurgisk linned på det kirurgiske område.
- Lave en ~1.0 cm lumbal snit og separat muskel og fascia at udsætte den venstre nyre ved hjælp af en skalpel og pincet ( figur 1a).
- Trækker ud i venstre nyre meget forsigtigt ved at trække på perirenal fedt med lille stump pincet. I processen, for ikke at forstyrre binyrerne, flytte binyrerne opad fra nyrerne med pincet.
- Brug af stump pincet, drille forsigtigt bindevæv og binyrerne fra den overlegne ende af nyre mod den midterste pylorus i nyrerne hvor blodkarrene ind og ud. Identificere og isolere ureter.
Bemærk: Ureter ligger omkring den ringere halvdel af nyrerne indlejret i bindevæv og klart synlig under lys. - Forsigtigt fat i bindevæv og adskilt fra nyrevæv til at sikre, at ureter ikke er forbundet.
- Før polar ligations, bruge en steril lineal til at identificere den overlegne og underlegne 1/3 del af nyre. Musenyre normalt er omkring 1,25-1,5 cm lang
- Ligate ved hjælp af en 3-0 silke sutur streng og med en ordentlig tvinge, ca. 0,4 cm fra den overlegne del mod midten af pylorus og ligeledes 0,4 cm fra den ringere del mod pylorus ( figur 1a, punkteret linjer).
- Efter ligating begge poler ( figur 1b), tillader en 2-min observation tid for at sikre, at der er ingen blødning.
Bemærk: I processen, det er meget vigtigt at undgå ligatur af binyrerne, nyrearteriestenose og ureter. Hvis venstre ureter er forbundet, vil musen dø efter fjernelse af den højre nyre i skridt-to kirurgi. Ligatur kraft kan begrænse blodtilførslen til polakkerne uden forårsager intra renal blødning. Indenfor 1-2 min efter ligatur, polakkerne er misfarvet på grund af grænsen for blodtilførslen til polakkerne. - Tryk venstre nyre tilbage til det oprindelige sted. Luk muskel og hud med 4-0 og 3-0 silke sutur strygere, henholdsvis. Anvende antibiotisk salve på det kirurgiske område for bedre inddrivelse og desinfektion.
- Efter ligatur, hus musen separat i et bur med en varmelampe over buret så at området sengetøj er tæt på 37 ° C (kontrolleres med et termometer), før du placerer dyrene i individuelle bure.
Bemærk: Overvåge musen, indtil den har genvundet tilstrækkelig bevidsthed for at opretholde brystbenet recumbency. - Giver nem adgang til vand og fødevarer under genoprettelsen. Administrere penicillin og buprenorphin hver 12 timer for de første 3 dage efter operationen til at forhindre infektion og smerter.
Bemærk: Musen skal tilbagesøge traumer af kirurgi inden for 2-3 dage og skulle være tilbage til normal spise, drikke og flytte. På dette tidspunkt, hus musen individuelt for fuld helbredelse. Følgende skal overvåges: drikke, spise, gå mønstre, akavet gangart, krum ryg, okulær og/eller nasal decharge og aggressiv adfærd. Aflive mus, hvis det viser nogen tegn på beslaglæggelse, coma, uhelbredelige infektion, svært ved at gå, tab af gangart, ude af stand til at spise og drikke, og tab af mere end 15% før operation vægt.
3. Trin-to operation: fjernelse af højre nyre
- syv dage senere, udsætte den højre nyre som beskrevet for den venstre nyre i trin 2.1 til 2.10, undtagen Placer musen på sin venstre side.
- Placere den højre nyre på linned og klare omkringliggende fedt og bindevæv med stumpe pincet.
- Identificere renal arterie og vene, og derefter placere to ligaturer (3-0 silke) hver med en enkelt løs knude omkring skibene. Forsigtigt drille bindevæv og adrenal kirtel fra den overlegne ende af nyre mod den midterste pylorus i nyrerne med stumpe pincet. Forsigtigt fortrænge ureter fra ringere slutningen og binde alle de fartøjer sammen (3-0 silke) uden at forårsage blødning.
- Flytte to løs ligatur knuder langs fartøjerne. En retning af abdominale aorta side, og den anden mod nyre.
- Første binde off ligatur knude (mod den abdominale aorta side) med dobbelt knob; en solid knude vil ændre farven på den højre nyre. Tie off ligatur knude (mod nyre side) med dobbelt knob. Levner nok plads mellem disse to dobbelt knob for at mindske fartøjer mellem to knuderne uden at skære ligatur knob.
- Skære de renale fartøjer mellem to knuderne og fjerne den højre nyre. Check for mulige blødning renal fartøjernes.
- Tør den højre nyre ved hjælp af steril gaze og vejer det.
- Luk muskel snit med 4-0 silke sutur streng og luk derefter huden snit med 3-0 silke sutur streng.
- Hus musen separat i en ren ensomme bur med en varmelampe over buret (trin 2.15) med nem adgang til vand og mad til mindst 24 h til recovery. Administrere penicillin og buprenorphin hver 12 timer til 3 dage til at forhindre infektion og smerter.
Bemærk: Musen skal tilbagesøge traumer af kirurgi inden for 2-3 dage, og skulle være tilbage til normal spise, drikke og flytte. - Efter operationen, overvåge mus to gange dagligt i tre dage, og derefter en gang om dagen for varigheden af forsøget. Følg post-operative overvågning og behandling procedurerne beskrevet i trin 2.16.
4. Humbug kirurgi
- til sham operation, udfører de samme kirurgi procedurer, herunder eksponering af nyre, dissektion af væv og sår lukning, men uden pole ligatur af venstre nyre eller fjernelse af højre nyre.
5. evaluering af eksperimentelle uræmisk kardiomyopati
- en dag før offer, udføre en transthoracic ekkokardiografi og fange billeder 18.
Bemærk: Her, den transthoracic ekkokardiografi blev udført med en mus, håndtering af tabel og rektal termometer. Ekkokardiografisk billederne blev fanget ved hjælp af en 18-38 MHz operationelle frekvens transducer knyttet til et billedbehandlingssystem. Relative vægtykkelse (RWT), myokardial budgetoverholdelse (MPI) og venstre hjertekammer masse index (LVMI) blev beregnet som vi beskrevet 18. - På tidspunktet for offer, måle kropsvægten. Måle hæmatokrit (HCT) med en HCT centrifuge ifølge producenten ' s instruktioner. Forberede plasmaprøver ved hjælp af heparin-beklædt rør ved centrifugering blodprøver til 10 min på 1.500 x g ved 4 ° C i en bordplade nedkølet centrifuge. Måle cystatin C, kreatinin og BUN bruge kits efter fabrikanten ' s instruktioner. Udføre målingerne i duplikat.
- i slutningen af forsøget, bedøver mus med ketamin (90 mg/kg, IP) og xylaxine (10 mg/kg, IP) og ofre ved torakotomi. Måle hjerte vægt efter at fjerne det fra brystet. Forberede hjerte (LV) samt nyre homogenater og bestemmelse af Type-1 kollagen (COL-1), fosforylering af c-Src og protein methanolcarbonylering, som beskrevet før 18 , 19.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Data er angivet at det ændrede 5/6th PNx model af pole ligatur er en enkel og effektiv model til at undersøge uræmisk kardiomyopati. På fire uger efter operationen, dette PNx model præsenterer nedsat nyrefunktion, anæmi, hjerte hypertrofi, cardiac fibrose, og nedsat hjertefunktion systolisk og diastolisk. Resultaterne er sammenfattet nedenfor.
På fire uger efter operationen udviklet PNx mus nedsat nyrefunktion ud over hjertets morfologiske og biokemiske ændringer, der er i overensstemmelse med Fænotypen af menneskelige uræmisk kardiomyopati. Disse PNx-medieret ændringer omfatter følgende bemærkninger i forhold til de humbug-drives mus. Først, som forventet, PNx kirurgi forårsaget betydelig forringelse af nyrefunktionen. Som vist i figur 2, PNx kirurgi betydeligt forhøjet plasmaniveauer af Cystatin C (figur 2et, n = 16), kreatinin (figur 2b, n = 16), BOLLER (figur 2c, n = 16), i forhold til simuleret kirurgi. For det andet var der PNx-stimuleret anæmi demonstreret af den betydeligt lavere HCT i PNx mus (figur 2d, n = 8). For det tredje blev PNx-medieret Hjertehypertrofi og diastolisk dysfunktion demonstreret af en øget hjerte vægten/body vægtforhold (figur 3en), og transthoracic ekkokardiografi (ECHO) analyse viser de betydelige stigninger i bageste vægtykkelse (PWT), forreste væg tykkelse (AWT), RWT (fig. 3b), MPI (figur 3c) og LVMI (figur 3d). Var der ingen væsentlige ændringer af uddrivningsfraktion (EF, %). Fjerde, en PNx-medieret hjerte fibrose blev påvist ved PNx-induceret øger i type jeg kollagen udtryk i LV homogeniseret (figur 4en) og venstre rest nyre homogenater (fig. 4b). For det femte spiller oxidant stress en vigtig rolle i eksperimentel uræmisk kardiomyopati. I denne PNx model stimuleret PNx betydeligt direkte protein carbonylering ændring af flere proteiner (fig. 4c) og c-Src aktivering (figur 4d) i LV homogeniseret. PNx kirurgi ikke forårsage betydelige tab af kropsvægt på fire uger efter operationen. PNx model af pole ligatur metode dog ikke fremkalde hypertension. Der var ingen signifikant forskel mellem humbug og PNx mus i systolisk BP, diastolisk BP og gennemsnitlige BP (data ikke vist) målt på både en dag før trin-én operation og en dag før offer, som er i overensstemmelse med den forestilling, at C57BL/6 mus stamme er ikke en etableret hypertensive model20,21. Data også tyder på, at denne PNx model er usandsynligt en model af akut nyresvigt. Derudover blev en PNx-medieret hjerte ændringer, men ikke nedsat nyrefunktion, svækket af blokering af c-Src aktivering eller induktion af hæm oxygenase-1 (HO-1)18.
Figur 1 : Pole ligatur af venstre nyre. Billederne viste venstre nyre før ligatur (venstre) og efter ligatur (til højre). De doted linjer i den venstre billede viste de anslåede ligatur linjer. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2 : PNx med pole ligatur forårsaget nedsat nyrefunktion og anæmi. På fire uger efter operationen, PNx kirurgi øger plasmaniveauer af (en) Cystatin C (n = 16), (b) kreatinin (n = 16), (c) BOLLER (n = 16), i forhold til sham operation. PNx også markant reduceret (d) hæmatokrit (HCT) i PNx mus (n = 8). Data blev udtrykt i gennemsnit ± SEM. **, p < 0,01, sham-drives mus vs. PNx-drives mus. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3 : PNx med pole ligatur stimuleret Hjertehypertrofi. På fire uger efter operationen, PNx kirurgi øger (en) hjerte vægten/body vægtforhold (et, n = 8), (b) relative vægtykkelse (RWT, n = 1 9-21), (c) Myokardie budgetoverholdelse (MPI, n = 19-21), og (d) venstre ventrikel mass indeks (LVMI, n = 19-21). Data blev udtrykt i gennemsnit ± SEM. **, p < 0,01, sham-drives mus vs. PNx-drives mus. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4 : PNx med pole ligatur stimuleret Skriv jeg kollagen udtryk, protein carbonylering og c-Src aktivisering. På fire uger efter operationen, stimuleret PNx Skriv jeg kollagen udtryk i venstre ventrikel (LV) homogenater (et, n = 11) og venstre rest nyre homogeniseret (b, n = 7-10). Også i LV homogeniseret, PNx stimuleret direkte protein carbonylering (c, n = 6) og c-Src aktivering (d, n = 6). Data blev udtrykt i gennemsnit ± SEM. **, p < 0,01, sham-drives mus vs. PNx-drives mus. Venligst klik her for at se en større version af dette tal.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Rotte 5/6th PNx model har været meget anvendt til at studere Cementovnstøv. På grund af den meget mindre nyre størrelse i mus er klassiske arterie ligatur og pole resektion meget udfordrende i musemodeller med mulige høj dødelighed og uventet blødning/blodtab.
Vi vedtog en mus PNx model med pole ligatur at overvinde blødning/blodtab. Denne PNx model tager mindre tid med forbedret overlevelsesrate og høj reproducerbarhed. Denne pol ligatur model udvikler de fænotypiske forandringer af menneskelige uræmisk kardiomyopati på tidspunktet for fire uger efter operationen, og dermed giver en model for at studere dens mekanismer og terapeutiske målet (r).
5/6th PNx er en tilnærmelsesvis vurdering af renal masse reduktion siden i denne PNx model, og indtil nu, der er ingen metode til præcist beregne rest renal massen af de to nyrer, der har forskellige størrelser/masserne. Imidlertid bør ligation udføres i en meget lignende måde at reducere drift variation. Vi anslår, at holde omkring 40% af den venstre nyre (eller omkring 20% af total renal masse) væsentligt kan nedsætte dødeligheden (med omkring 20%) uden at ofre udviklingen af uræmisk kardiomyopati fænotype. Et andet spørgsmål er kraften af ligatur, der kræver praksis.
I forhold til 5/6th PNx modeller af pole resektion eller nyrearteriestenose ligatur15,20, pole ligatur metode er nem, hurtig og mindre instrumentalt krævende. De mulige fordele ved denne PNx model omfatter følgende: 1) at undgå muligt blod blødning som ses i modellens PNx ved pole resektion eller arterie ligatur, 2) nedsat nyrefunktion med stigning i oxidativ stress forårsaget af betændelse svar på pole ligatur, 3) lavere dødelighed (ca 20%), og 4) hurtig udvikling af uræmisk kardiomyopati fænotype. En vellykket pole ligatur viser en gradvis irreversibel skade og nedbrydning af de sammenskrevne polakker. De sammenskrevne polakker er synligt på to uger efter operationen (figur 4), og for det meste forsvinder på fire uger efter operationen (figur 5). Sammenligning af de sammenskrevne polakker på to uger og fire uger efter operationen, angiver den betændelse reaktion at reagere på pole ligatur.
Denne PNx model kan være nyttige at studere mekanismer af stofvirkningen og terapeutiske stof screening. Vi har for nylig bruge denne PNx model til at undersøge rollen, som Na/K-ATPase signalering og oxidativt stress i udviklingen af uræmisk kardiomyopati. Administration af pNaKtide, en specifik antagonist af Na/K-ATPase signalering, ikke kun forhindrer udviklingen af uræmisk kardiomyopati men også vender udbrud af uræmisk kardiomyopati18.
Kritiske trin i protokollen er som følger: 1) en mere aggressiv ligatur (rest venstre nyre masse er mindre end 30%) vil øge dødelighed (ca. 50%). 2) kraft af ligatur kræver øvelse at nå punktet, at ligation begrænser blodtilførslen til polakkerne uden at bryde kapsel og nyre væv. Bryde nyre væv fører til intra renal blødning, som kan medføre døden efter fjernelse af den højre nyre. En vellykket sammenskrevne pole er misfarvet indenfor 1-2 min efter ligatur, på grund af grænsen for blodtilførslen til stangen. 3) særlig opmærksomhed er påkrævet for at undgå ligating ureter af venstre nyre eller skadelige ureter, når ligating polakkerne. En mus med sammenskrevne eller beskadigede urinleder overlever ikke efter fjernelse af den højre nyre. Dette er muligvis den mest mærkbar ulempe ved pole ligatur metode. 4) vedligeholdelse af kropstemperaturen under kirurgi proces og efter operationen pleje. 5) kontrol af mulig infektion hjælp af antibiotika.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ikke noget at oplyse.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af NIH R15 1R15DK106666-01A1 (til J. Liu) og NIH RO1 HL071556 (til J.I. Shapiro).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Iris Scissors, 11.5 cm, Straight | World Precision Instruments | 501758 | |
| WPI Swiss Tweezers #5 11 cm, 0.1x0.06 mm Tips | World Precision Instruments | 504506 | |
| Jewelers #5 Forceps, 11cm, Straight, Titanium | World Precision Instruments | 555227F | |
| Iris Forceps, 10cm, Straight, Serrated | World Precision Instruments | 15914 | |
| Tweezers #3, 11cm, 0.2x0.4mm Tips | World Precision Instruments | 501976 | |
| Medesy Iris 4.5" Curved Scissors, Stainless Steel | Net23 | 3512 | www.Net32.com |
| Dr. Slick Iris Scissors; 3.5" | Avid Max | 220-1-965-IrisScsrs-P | www.Avid Max.com |
| Miltex Iris Scissors 4 1/8" Curved | 4mdmedical | V95-306 | www.4mdmedical.com |
| 5" Hemostat clap, curved jaw | PJTool | 4355 | www.pjtool.com |
| sklar Knapp Iris scissors, straight and sharp/blunt 4" | Medical Device depot | 64-3430 | www.medicaldevicedepot.com |
| Kelly Hemostatic Forceps straight 5.5" | Pilgtimmedical | FA710-50 | www.pilgtimmedical.com |
| C57BL/6 mice | Hilltop Lab Animals Inc. | ||
| Mouse Handling Table and rectal thermometer | Visualsonics | ||
| MicroScan transducer | Vevo 1100 | MS400 | |
| Vevo 1100 Imaging System | FUJIFILM VisualSonics Inc. | ||
| Cystatin C ELISA kit and mouse creatinine kit | Crystal Chem. Inc. | ||
| Mouse BUN ELISA kit | MyBioSource Inc |
References
- Sarnak, M. J., et al. Kidney Disease as a Risk Factor for Development of Cardiovascular Disease: A Statement From the American Heart Association Councils on Kidney in Cardiovascular Disease, High Blood Pressure Research, Clinical Cardiology, and Epidemiology and Prevention. Circulation. 108 (17), 2154-2169 (2003).
- Levey, A. S., et al. Controlling the epidemic of cardiovascular disease in chronic renal disease: what do we know? What do we need to learn? Where do we go from here? National Kidney Foundation Task Force on Cardiovascular Disease. Am J Kidney Dis. 32 (5), 853-906 (1998).
- Schiffrin, E. L., Lipman, M. L., Mann, J. F. E. Chronic Kidney Disease. Effects on the Cardiovascular System. 116 (1), 85-97 (2007).
- Foley, R. N., et al. Clinical and echocardiographic disease in patients starting end-stage renal disease therapy. Kidney Int. 47 (1), 186-192 (1995).
- Foley, R. N., et al. The prognostic importance of left ventricular geometry in uremic cardiomyopathy. J Am Soc Nephrol. 5 (12), 2024-2031 (1995).
- Alhaj, E., et al. Uremic cardiomyopathy: an underdiagnosed disease. Congest Heart Fail. 19 (4), 40-45 (2013).
- Gulati, A., et al. Association of fibrosis with mortality and sudden cardiac death in patients with nonischemic dilated cardiomyopathy. JAMA. 309 (9), 896-908 (2013).
- London, G. M., Parfrey, P. S. Cardiac disease in chronic uremia: pathogenesis. Adv Ren Replace Ther. 4 (3), 194-211 (1997).
- Mohmand, B., Malhotra, D. K., Shapiro, J. I. Uremic cardiomyopathy: role of circulating digitalis like substances. Front Biosci. 10, 2036-2044 (2005).
- Himmelfarb, J., McMonagle, E.
- Okamura, D. M., Himmelfarb, J. Tipping the redox balance of oxidative stress in fibrogenic pathways in chronic kidney disease. Pediatr Nephrol. 24 (12), 2309-2319 (2009).
- Himmelfarb, J., Stenvinkel, P., Ikizler, T. A., Hakim, R. M. The elephant in uremia: oxidant stress as a unifying concept of cardiovascular disease in uremia. Kidney Int. 62 (5), 1524-1538 (2002).
- Becker, B. N., Himmelfarb, J., Henrich, W. L., Hakim, R. M. Reassessing the cardiac risk profile in chronic hemodialysis patients: a hypothesis on the role of oxidant stress and other non-traditional cardiac risk factors. J Am Soc Nephrol. 8 (3), 475-486 (1997).
- Drummond, C. A., et al. Reduction of Na/K-ATPase affects cardiac remodeling and increases c-kit cell abundance in partial nephrectomized mice. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 306 (12), 1631-1643 (2014).
- Kennedy, D. J., et al. Partial nephrectomy as a model for uremic cardiomyopathy in the mouse. Am J Physiol Renal Physiol. 294 (2), 450-454 (2008).
- Haller, S. T., et al. Monoclonal antibody against marinobufagenin reverses cardiac fibrosis in rats with chronic renal failure. Am J Hypertens. 25 (6), 690-696 (2012).
- Tian, J., et al. Spironolactone attenuates experimental uremic cardiomyopathy by antagonizing marinobufagenin. Hypertension. 54 (6), 1313-1320 (2009).
- Liu, J., et al. Attenuation of Na/K-ATPase Mediated Oxidant Amplification with pNaKtide Ameliorates Experimental Uremic Cardiomyopathy. Sci Rep. 6, 34592 (2016).
- Yan, Y., et al. Involvement of reactive oxygen species in a feed-forward mechanism of Na/K-ATPase-mediated signaling transduction. J Biol Chem. 288 (47), 34249-34258 (2013).
- Leelahavanichkul, A., et al. Angiotensin II overcomes strain-dependent resistance of rapid CKD progression in a new remnant kidney mouse model. Kidney Int. 78 (11), 1136-1153 (2010).
- Ma, L. J., Fogo, A. B. Model of robust induction of glomerulosclerosis in mice: importance of genetic background. Kidney Int. 64 (1), 350-355 (2003).
