Summary
Dette manuskriptet gir en detaljert totrinns kirurgisk prosedyre for å utføre musen 5/6th delvis nephrectomy (PNx) med pole hemorroider. Fire uker etter operasjonen med humbug-opererte mus, PNx musene utviklet svekket nyre-funksjon, anemi, hjerte-hypertrofi, hjerte fibrose og redusert hjertefunksjon systolisk og diastolisk.
Abstract
Kronisk nyresykdom (Parallelt) er en stor risikofaktor for hjerte-og karsykdommer hendelser og dødelighet, og utvikler gradvis til kliniske fenotypen kalt "uremisk kardiomyopati". Her beskriver vi en eksperimentell CKD musemodell, kalt 5/6th delvis nephrectomy (PNx) med pole ligation, som utviklet uremisk kardiomyopati på fire uker etter operasjonen. Denne PNx-modellen ble utført av en to-trinns kirurgi. I trinn-ett kirurgi, var begge poler av venstre nyre samskrevet. Trinn to kirurgi, som ble utført 7 dager etter trinn-ett operasjonen, ble høyre nyre fjernet. De samme kirurgi prosedyrene ble utført humbug kirurgi, men uten pole ligation av venstre nyre eller fjerning av høyre nyrene. De kirurgiske prosedyrene er enklere og mindre tidkrevende, sammenlignet med andre metoder. Imidlertid levningen funksjonelle nyre masse kontrolleres ikke like lett som den nyre arterien hemorroider. Fire uker etter operasjonen med humbug-opererte musene, PNx musene utviklet svekket nyre-funksjon, anemi, hjerte-hypertrofi, hjerte fibrose og redusert hjertefunksjon systolisk og diastolisk.
Introduction
Parallelt, også kjent som kronisk nyresvikt, er en progressiv tap av nyrefunksjon over tid etter hvert utvikler seg til permanent nyresvikt. Parallelt, fra tidlig stadium nyresykdom stater til end-stage renal disease (ESRD), er en stor risikofaktor for hjerte-og karsykdommer hendelser og dødelighet, og gradvis utvikler til kliniske fenotypen kalt "uremisk kardiomyopati"1, 2,3. Den uremisk kardiomyopati hos pasienter med Parallelt eller ESRD er assosiert med kardiovaskulær unormalt, hovedsakelig forårsaket av overbelastning av venstre ventrikkel (LV) Trykk og/eller volum, fører til LV hypertrophy (LVH), LV dilatasjon og LV systolisk dysfunksjon4 ,5,6. CARDIAC fibrose er en annen vanlig patologiske prosessen med uremisk kardiomyopati som reduserer hjerte samsvar resulterer i LV diastolisk dysfunksjon. Alvorlige kardiale fibrose kan føre til plutselig hjertestans død selv i de uten kardiale symptomer7.
5/6th PNx er en brukte CKD dyr modell for dyrestudier med nyresvikt, uremisk kardiomyopati og hypertensjon. PNx oppnås ved ablasjon av 5/6 nyre parenchyma. Rotte modell ble opprinnelig utviklet med de to mest vanlige protokoller ansatt kirurgisk resection eller hjerteinfarkt. Rat PNx modellen er en svært nyttig modell å studere uremisk kardiomyopati med betydelige høyder i blodtrykk, hjerte-hypertrofi og svekket diastolisk funksjon. Senere ble musen PNx modeller, drives med lignende teknikker som rotte modell, utviklet på grunn av bred tilgjengelighet og brukervennlighet gjør genetisk manipulasjon i musen systemet.
Det er godt dokumentert at systemisk oksiderende stress er en konstant funksjon i både kliniske og eksperimentelle uremisk kardiomyopati8,9. Videre oksiderende stress bidrar til uremisk syndrom10og spiller en avgjørende rolle i patogenesen av kardial unormalt i uremisk kardiomyopati11,12,13. Til dette punktet, har vi vist at gnagere 5/6th PNx modell forårsaker fysiologiske morfologiske og biokjemiske funksjoner uremisk kardiomyopati14,15,16, 17. i musen PNx modellen beskrevet her, PNx-opererte musene utviklet betydelige oksidativt stress, minst delvis mediert av Na/K-ATPase signalnettverk funksjon, som er avgjørende for PNx-mediert eksperimentell uremisk kardiomyopati. Demping av Na/K-ATPase signalene ikke bare reduserer oksidativt forsterkning, men også ameliorates phenotypical endringene i PNx-mediert eksperimentell uremisk kardiomyopati18.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
alle dyr omsorg og eksperimenter ble godkjent av Marshall University institusjonelle dyr omsorg og bruk Committee (IACUC) i henhold til National Institutes of Health (NIH) Guide og bruk av forsøksdyr. Mannlige C57BL/6 mus (10-12 uker gamle) ble plassert i en patogen gratis dyr anlegg i utpekte rom med bur som leverer renset luften under en 12t lys/mørke syklus. Mat og vann ble levert ad libitum.
1. kirurgi forberedelse
Merk: den kirurgiske instrumenter og materialer er innhentet fra ulike kilder som ikke er spesifikke for kirurgi operasjoner. Instrumenter og materiale fra andre kilder, kan også brukes for det likt hensikten. Se Tabellen for materiale for en liste over kirurgiske.
- Forberedelse til operasjonen
- plass på følgende innen rekkevidde operativsystemet tabell: oppvarming pad halogenpære oksygentank og isoflurane tank, isoflurane fordamper, hårklipperen, hårfjerning krem, skalaer, sterilisert sett, sterilisert kirurgisk Lin, bomull vattpinner, 70% alkohol, polyhydroxydine løsning (inneholder 1% jod), 0,9% NaCl løsning, 1 mL sprøyter og sprøytespisser (30 G), 3-0 og 4-0 silke bildet, buprenorfin og penicillin, antibiotikaresistens sårsalve, og smøremiddel øye ointment.
- Rengjør bur og plassere en heten pute under sengetøy for mus boliger etter operasjonen.
2. Trinn-ett kirurgi: Pole Ligation av venstre nyre
Merk: opprettholde sterile forhold under operasjonen. Dekk autoklaveres Kirurgiske instrumenter med en bakteriefri pute. Hold mer enn ett sett av kirurgiske instrumenter i hånden for flere kirurgi å forhindre under operasjonen. Hvis instrumenter må brukes på nytt, ved flere operasjoner, desinfisere instrumenter med betadine løsning og 70% etanol, og deretter steriliseres ved en germinator glass bead sterilisere for 5 min. Disinfect driftsområdet med 70% etanol. Bære en kjole, maske (til dekker nese og munn), cap (for å dekke hodet), og en par av sterile hansken. Endre hansker etter hver operasjon.
- Vask og desinfisere hender og slitasje sterilt kirurgiske hansker. En hodet cap og en maske.
- Desinfiser tabellen med 70% alkohol. Smøremiddel øye ointment gjelder begge øynene på å hindre øye tørrhet under anestesi.
- Plasserer musen i en induksjon kammer av en isoflurane vaporizer system og indusere anestesi med en blanding av 2,5% isoflurane med 100% oksygen (0,8 - 1,2 L/min) i 1-2 min.
Merk: Effekten av anestesi ble bestemt av fravær av smerte refleks elicited knipe halen og fravær av palpebral refleks ved å berøre øyelokket. - Injisere penicillin (40.000 enhet/kg kroppsvekt, IM) og buprenorfin (0.02 mg/kg kroppsvekt, SC) for å hindre infeksjon og smerte under operasjonen.
- Plasserer musen på en oppvarming pad (opprinnelig satt på 42 ° C) med en endetarms termometeret å vedlikeholde og overvåke kroppstemperaturen rundt 37 ° C under prosedyren. Plasser musen nesen i nesen kjegle og ventiler med en blanding av 0,8-1,2% isoflurane med 100% oksygen (0,8-1,2 L/min) under operasjonen.
- Plasserer musen på høyre side. Barbere håret kirurgiske området med en hårklipperen og fjern med hår fjerning krem. Desinfiser området med polyhydroxydine løsning (inneholder 1% jod) etterfulgt av 70% etanol. Justere autoklaveres kirurgisk sengetøy på det kirurgiske området.
- Gjør en ~1.0 cm lumbale snitt og skille muskel og fascia å avsløre venstre nyre skalpell og tang ( figur 1a).
- Trekk ut venstre nyre svært forsiktig ved å trekke på perirenal fett med små sløv tang. I prosessen, for ikke å forstyrre binyrene, flyttes binyrene oppover fra nyre tang.
- Bruke sløv tang, erte forsiktig bindevev og binyrene fra overlegen slutten av nyre mot den midterste pylorus av nyrene der blodkar inn og ut. Identifisere og isolere ureter.
Merk: Ureter ligger rundt den underlegne halvparten av nyrene i connective vev og synlig under lys. - Forsiktig ta connective vev og skille fra den nyre vev for å sikre at det ikke er samskrevet ureter.
- Før polar ligations, bruk en steril linjal til å identifisere delen opphøyd og 1/3 av nyre. Mus nyre er vanligvis rundt 1.25-1,5 cm lang
- Ligate bruker en 3-0 silke Sutur streng og med riktig kraft, ca 0,4 cm fra overlegen delen mot midten av pylorus og tilsvarende 0,4 cm fra underlegne delen mot pylorus ( figur 1a, prikkete linjer).
- Etter ligating begge polene ( figur 1b), tillate en 2-min observasjon å sørge for at det er ingen blødning.
Merk: I prosessen er det svært viktig å unngå ligation av binyrene, nyre arterien og ureter. Hvis venstre ureter er samskrevet, vil musen dø etter fjerning av høyre nyrene i trinn to kirurgi. Hemorroider styrken kan begrense blodtilførsel til polakkene uten forårsaker intra nyre blødninger. Innen 1-2 min etter hemorroider, polakkene er misfarget på grunn av begrensning av blodstrøm til polakkene. - Trykk venstre nyre tilbake til det opprinnelige stedet. Lukke muskler og hud med 4-0 og 3-0 silke Sutur strenger, henholdsvis. Antibiotikaresistens sårsalve gjelder det kirurgiske området for bedre utvinning og desinfisering.
- Etter hemorroider, huset musen separat i et bur med en varmelampe over buret slik at sengetøy området ligger 37 ° C (overvåket med et termometer), før du plasserer dyrene i individuelle bur.
Merk: Overvåke musen før det har gjenvunnet tilstrekkelig bevissthet for å opprettholde sternal recumbency. - Gir enkel tilgang til vann og mat under gjenoppretting. Administrere penicillin og buprenorfin hver 12 h for den første 3 dager etter operasjonen å hindre infeksjon og smerte.
Merk: Musen bør komme fra traumer av operasjonen innen 2-3 dager og skal være tilbake til normal spise, drikke og flytte. Foreløpig huset musen for fullstendig gjenoppretting. Følgende må overvåkes: drikke, spise, gå mønstre, vanskelig gangart, bøyd tilbake, okulær og/eller nasal utslipp og aggressiv atferd. Euthanize musen hvis det viser noen tegn til beslag, coma, botemiddel infeksjon, vanskeligheter med å gå, tap av gangart, ikke spise og drikke, og tap av mer enn 15% før operasjon vekt.
3. Trinn to kirurgi: fjerning av høyre nyre
- syv dager senere, utsette høyre nyre som venstre nyre i trinn 2.1 å 2.10, bortsett fra plasserer musen på venstre siden.
- Plasser høyre nyre på Lin og fjerne omkringliggende fett og bindevev med sløv tang.
- Identifiserer nyre arterien og venen og deretter plassere to ligaturer (3-0 silke) hver med en enkelt løs knute rundt fartøyene. Forsiktig erte bindevev og adrenalin kjertel fra overlegen slutten av nyre mot den midterste pylorus av nyrene ved hjelp av sløv pinsett. Forsiktig fortrenge ureter fra underlegne slutten og knytte alle fartøyene sammen (3-0 silke) uten forårsaker blødninger.
- Flytte to løs ligatur knuter sammen fartøyene. En mot abdominal aorta og den andre en mot nyre.
- Først knytte av ligatur knuten (mot abdominal aorta siden) med dobbel knop, en solid knute endres fargen på høyre nyrene. Tie av ligatur knuten (mot nyre) med dobbel knop. La nok plass mellom disse to doble knop så å klippe fartøyene mellom to knop uten å kutte ligatur knuter.
- Skjær nyre fartøyene mellom to knuter og fjern høyre nyrene. Sjekk for mulige blødning av nyre fartøyene.
- Tørr rett nyre bruker sterilt gasbind og veie det.
- Stenger incision muskler med 4-0 silke Sutur streng og Lukk den hud snittet med 3-0 silke Sutur streng.
- Huset musen separat i en ren ensom bur med en varmelampe over buret (trinn 2,15) med lett tilgang til vann og mat for minst 24 timer til utvinning. Administrere penicillin og buprenorfin hver 12 h for 3 dager å hindre infeksjon og smerte.
Merk: Musen bør komme fra traumer av operasjonen innen 2-3 dager, og skal være tilbake til normal spise, drikke og flytte. - Etter operasjonen, overvåke musene to ganger daglig i tre dager, og deretter en gang i dag for varigheten av eksperimentet. Følg etter kirurgiske overvåking og behandling fremgangsmåten beskrevet i trinn 2,16.
4. Humbug kirurgi
- humbug kirurgi, utføre de samme kirurgi prosedyrene, inkludert eksponering av nyre, Disseksjon av vev, og såret lukking, men uten pole ligation av venstre nyre eller fjerning av høyre nyre.
5. evaluering av eksperimentell uremisk kardiomyopati
- dagen før offer utføre en transthoracic echocardiography og ta bilder 18.
Merk: Her transthoracic echocardiography ble utført med musen tabell og endetarms termometeret. Echocardiographic bildene ble tatt med en 18-38 MHz drift klokkefrekvensen svinger knyttet til en tenkelig system. Relativ veggtykkelse (RWT), ytelsesindeks for hjerteinfarkt (MPI) og venstre ventrikkel masse indeks (LVMI) ble beregnet som vi beskrev 18. - Ved offer, måle kroppsvekten. Måle hematocrit (HCT) med en HCT sentrifuge som produsenten ' s instruksjoner. Forberede plasmaprøver med heparin-belagt rør ved sentrifugering blodprøver for 10 min 1500 x g på 4 ° C i en tabletop nedkjølt sentrifuge. Måle cystatin C, creatinine og BUN med kits etter produsenten ' s instruksjoner. Utføre målinger i duplikat.
- På slutten av eksperimentet, bedøve mus med ketamin (90 mg/kg, IP) og xylaxine (10 mg/kg, IP) og ofre for thoracotomy. Måle hjertet vekt etter fjerner det fra brystet. Forberede hjerte (LV) og nyre homogenates, i tillegg til fastsettelse av Type-1 kollagen (COL-1), fosforylering av c-Src og protein carbonylation, som beskrevet før 18 , 19.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Dataene viser at dette endret 5/6th PNx modell av pole hemorroider er en enkel og effektiv modell å undersøke uremisk kardiomyopati. På fire uker etter operasjonen, denne PNx modellen presenterer svekket nyre-funksjon, anemi, hjerte-hypertrofi, hjerte fibrose og redusert systolisk og diastolisk hjertefunksjon. Resultatene er oppsummert nedenfor.
På fire uker etter operasjonen utviklet PNx musene svekket nyre-funksjon i tillegg cardiac morfologiske og biokjemiske endringene som samsvarer med fenotypen av menneskelig uremisk kardiomyopati. Disse PNx-mediert endringer inkluderer følgende observasjoner sammenlignet med humbug-opererte musene. Først, som forventet, PNx operasjonen forårsaket betydelig svekkelse av nyre funksjon. Som vist i figur 2, PNx kirurgi betydelig økt Plasmanivåer av Cystatin C (figur 2en, n = 16), kreatinin (figur 2b, n = 16), BUN (figur 2c, n = 16), sammenlignet med humbug kirurgi. Det andre var PNx-stimulert anemi demonstrert av den betydelig lavere HCT i PNx mus (figur 2d, n = 8). Tredje ble PNx-mediert hjerte-hypertrofi og diastolisk dysfunksjon vist av en økt hjertet kamerahus/vekt-forhold (Figur 3et), og transthoracic echocardiography (ECHO) analyse viser de betydelige økninger i bakre veggtykkelse (PWT), anterior vegg tykkelse (AWT), RWT (Figur 3b), MPI (Figur 3c) og LVMI (Figur 3d). Det var ingen betydelig endring utstøting brøkdel (EF, %). Fjerde, den PNx-mediert cardiac fibrose ble demonstrert av PNx-indusert økning i type jeg kollagen uttrykk i LV homogenates (Figur 4en) og rest nyre homogenates (Figur 4b). Femte spiller oksiderende stress en viktig rolle i eksperimentell uremisk kardiomyopati. I denne PNx modellen stimulert PNx betydelig direkte protein carbonylation endring av flere proteiner (Figur 4c) og c-Src aktivering (Figur 4d) i LV homogenates. PNx kirurgi forårsake ikke betydelig tap av kroppsvekt på fire uker etter operasjonen. Men PNx modellen av pole ligation metode ikke få hypertensjon. Det var ingen signifikant forskjell mellom humbug og PNx mus i BP systolisk, diastolisk BP og mener BP (data ikke vist) målt både en dag før trinn-ett operasjonen og en dag før offer, som samsvarer med ideen om at C57BL/6 musen belastningen er ikke etablert Hypertensiv modell20,21. Dataene foreslår også at denne PNx modellen er neppe en modell av akutt nyresvikt. Videre ble PNx-mediert cardiac endringene, men ikke svekket nyre-funksjon, oppveid av blokkering av c-Src aktivisering eller induksjon måltema oxygenase-1 (HO-1)18.
Figur 1 : Pole ligation av venstre nyre. Bildene viste venstre nyre før ligatur (venstre) og etter ligatur (høyre). Doted linjene i venstre bildet viste anslagsvis ligation linjene. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : PNx med pole hemorroider forårsaket svekket nyre funksjon og anemi. På fire uker etter operasjonen, PNx kirurgi øker Plasmanivåer av (en) Cystatin C (n = 16), (b) creatinine (n = 16), (c) BUN (n = 16), sammenlignet med humbug kirurgi. PNx også betydelig redusert (d) hematocrit (HCT) i PNx mus (n = 8). Dataene ble uttrykt som gjennomsnittlig ± SEM. **, p < 0.01, humbug-opererte mus vs PNx-opererte mus. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3 : PNx med pole ligation stimulert hjerte-hypertrofi. På fire uker etter operasjonen, PNx kirurgi øker (en) hjertet kamerahus/vekt-forhold (en, n = 8), (b) relative veggtykkelse (RWT, n = 1 9-21), (c) hjerteinfarkt kostnadsresultat (MPI, n = 19-21), og (d) venstre ventrikkel masse indeks (LVMI, n = 19-21). Dataene ble uttrykt som gjennomsnittlig ± SEM. **, p < 0.01, humbug-opererte mus vs PNx-opererte mus. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4 : PNx med pole ligation stimulert skriver jeg kollagen uttrykk, protein carbonylation og c-Src aktivisering. På fire uker etter operasjonen, PNx stimulert skriver jeg kollagen uttrykk i venstre ventrikkel (LV) homogenates (en, n = 11) og rest nyre homogenates (b, n = 7-10). Også i LV homogenates, PNx stimulert direkte protein carbonylation (c, n = 6) og c-Src Aktivisering (d, n = 6). Dataene ble uttrykt som gjennomsnittlig ± SEM. **, p < 0.01, humbug-opererte mus vs PNx-opererte mus. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Rotta 5/6th PNx modellen har vært mye brukt til å studere Parallelt. På grunn av den mye mindre nyre størrelsen i mus er klassisk arterien ligatur og pole reseksjon svært utfordrende i musen modeller med mulig høy dødelighet og uventet blødning/blod tap.
Vi vedtatt en mus PNx modell med pole hemorroider å overvinne blødning/blod tap. Denne PNx modellen tar mindre tid med bedre overlevelse og høy reproduserbarhet. Denne pole ligation modellen utvikler fenotypiske endringer av menneskelig uremisk kardiomyopati ved fire uker etter operasjonen, og dermed gir en modell for å studere sin mechanism(s) og terapeutiske målet (r).
I dette PNx modell, 5/6th PNx er en omtrentlig vurdering av nyre masse reduksjon siden og frem til nå, det finnes ingen metode til å beregne nøyaktig rest nyre masse to nyrene som har ulike størrelser/massene. Men skal ligation utføres i en veldig lignende måte å redusere operasjonen variasjon. Vi anslår at holde ca 40% av venstre nyre (eller omtrent 20% av totale nyre) kan betydelig redusere dødelighet (ved 20%) uten å ofre utviklingen av uremisk kardiomyopati fenotypen. Et annet problem er kraften av hemorroider som krever praksis.
Med 5/6th PNx modeller av pole resection eller nyre arterien ligation15,20, pole ligation metode er enkel, rask og mindre instrumentalt krevende. De mulige fordelene med denne PNx modellen inkluderer følgende: 1) unngå mulig blod blødning sett i PNx modell av pole resection eller arterien ligation, 2) svekket nyre funksjon med økning i oksidativt stress som er forårsaket av betennelse svaret pole ligation, 3) lavere dødelighet (ca 20%) og 4) rask utvikling av uremisk kardiomyopati fenotypen. En vellykket pole ligation viser en progressiv irreversibel skade og nedbrytning av ligated polakkene. Ligated polakkene er synlige på to uker etter operasjonen (Figur 4), og det meste forsvinner på fire uker etter operasjonen (figur 5). Sammenligning av ligated polakkene på to uker og fire uker etter operasjonen, indikerer betennelse reaksjonen svarer på polet hemorroider.
Denne PNx-modellen kan være nyttig å studere mechanism(s) av stoffet handling og terapeutisk medikament screening. Vi har nylig bruker denne PNx modellen undersøke rollen Na/K-ATPase signal og oksidativt stress i utviklingen av uremisk kardiomyopati. Administrasjon av pNaKtide, en bestemt antagonist Na/K-ATPase signalnettverk, ikke bare hindrer utvikling av uremisk kardiomyopati men tilbakefører også utbruddet av uremisk kardiomyopati18.
De avgjørende skritt i protokollen er som følger: 1) en mer aggressiv ligation (rest venstre nyre masse er mindre enn 30%) øker betydelig dødelighet (ca 50%). 2) kraft av hemorroider krever praksis å nå et punkt som ligation begrenser blodtilførselen til polakkene uten å bryte capsule og nyre vev. Bryte nyre vev fører til intra nyre blødninger som kan føre til døden etter fjerning av høyre nyrene. En vellykket ligated stang er misfarget innen 1-2 min etter hemorroider, på grunn av begrensning av blodstrøm til Polen. 3) spesiell oppmerksomhet er nødvendig for å unngå ligating ureter i venstre nyre eller ødeleggende ureter når ligating polakkene. En mus med samskrevet eller skadet ureter vil ikke overleve etter fjerning av høyre nyrene. Dette kan være den mest merkbare ulempen av pole ligation metode. 4) vedlikehold av kroppstemperatur kirurgi prosessen og etter operasjonen omsorg. 5) kontroll av mulig bruk av antibiotika.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne ikke avsløre.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av NIH R15 1R15DK106666-01A1 (til J. Liu) og NIH RO1 HL071556 (å Ji Shapiro).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Iris Scissors, 11.5 cm, Straight | World Precision Instruments | 501758 | |
| WPI Swiss Tweezers #5 11 cm, 0.1x0.06 mm Tips | World Precision Instruments | 504506 | |
| Jewelers #5 Forceps, 11cm, Straight, Titanium | World Precision Instruments | 555227F | |
| Iris Forceps, 10cm, Straight, Serrated | World Precision Instruments | 15914 | |
| Tweezers #3, 11cm, 0.2x0.4mm Tips | World Precision Instruments | 501976 | |
| Medesy Iris 4.5" Curved Scissors, Stainless Steel | Net23 | 3512 | www.Net32.com |
| Dr. Slick Iris Scissors; 3.5" | Avid Max | 220-1-965-IrisScsrs-P | www.Avid Max.com |
| Miltex Iris Scissors 4 1/8" Curved | 4mdmedical | V95-306 | www.4mdmedical.com |
| 5" Hemostat clap, curved jaw | PJTool | 4355 | www.pjtool.com |
| sklar Knapp Iris scissors, straight and sharp/blunt 4" | Medical Device depot | 64-3430 | www.medicaldevicedepot.com |
| Kelly Hemostatic Forceps straight 5.5" | Pilgtimmedical | FA710-50 | www.pilgtimmedical.com |
| C57BL/6 mice | Hilltop Lab Animals Inc. | ||
| Mouse Handling Table and rectal thermometer | Visualsonics | ||
| MicroScan transducer | Vevo 1100 | MS400 | |
| Vevo 1100 Imaging System | FUJIFILM VisualSonics Inc. | ||
| Cystatin C ELISA kit and mouse creatinine kit | Crystal Chem. Inc. | ||
| Mouse BUN ELISA kit | MyBioSource Inc |
References
- Sarnak, M. J., et al. Kidney Disease as a Risk Factor for Development of Cardiovascular Disease: A Statement From the American Heart Association Councils on Kidney in Cardiovascular Disease, High Blood Pressure Research, Clinical Cardiology, and Epidemiology and Prevention. Circulation. 108 (17), 2154-2169 (2003).
- Levey, A. S., et al. Controlling the epidemic of cardiovascular disease in chronic renal disease: what do we know? What do we need to learn? Where do we go from here? National Kidney Foundation Task Force on Cardiovascular Disease. Am J Kidney Dis. 32 (5), 853-906 (1998).
- Schiffrin, E. L., Lipman, M. L., Mann, J. F. E. Chronic Kidney Disease. Effects on the Cardiovascular System. 116 (1), 85-97 (2007).
- Foley, R. N., et al. Clinical and echocardiographic disease in patients starting end-stage renal disease therapy. Kidney Int. 47 (1), 186-192 (1995).
- Foley, R. N., et al. The prognostic importance of left ventricular geometry in uremic cardiomyopathy. J Am Soc Nephrol. 5 (12), 2024-2031 (1995).
- Alhaj, E., et al. Uremic cardiomyopathy: an underdiagnosed disease. Congest Heart Fail. 19 (4), 40-45 (2013).
- Gulati, A., et al. Association of fibrosis with mortality and sudden cardiac death in patients with nonischemic dilated cardiomyopathy. JAMA. 309 (9), 896-908 (2013).
- London, G. M., Parfrey, P. S. Cardiac disease in chronic uremia: pathogenesis. Adv Ren Replace Ther. 4 (3), 194-211 (1997).
- Mohmand, B., Malhotra, D. K., Shapiro, J. I. Uremic cardiomyopathy: role of circulating digitalis like substances. Front Biosci. 10, 2036-2044 (2005).
- Himmelfarb, J., McMonagle, E.
- Okamura, D. M., Himmelfarb, J. Tipping the redox balance of oxidative stress in fibrogenic pathways in chronic kidney disease. Pediatr Nephrol. 24 (12), 2309-2319 (2009).
- Himmelfarb, J., Stenvinkel, P., Ikizler, T. A., Hakim, R. M. The elephant in uremia: oxidant stress as a unifying concept of cardiovascular disease in uremia. Kidney Int. 62 (5), 1524-1538 (2002).
- Becker, B. N., Himmelfarb, J., Henrich, W. L., Hakim, R. M. Reassessing the cardiac risk profile in chronic hemodialysis patients: a hypothesis on the role of oxidant stress and other non-traditional cardiac risk factors. J Am Soc Nephrol. 8 (3), 475-486 (1997).
- Drummond, C. A., et al. Reduction of Na/K-ATPase affects cardiac remodeling and increases c-kit cell abundance in partial nephrectomized mice. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 306 (12), 1631-1643 (2014).
- Kennedy, D. J., et al. Partial nephrectomy as a model for uremic cardiomyopathy in the mouse. Am J Physiol Renal Physiol. 294 (2), 450-454 (2008).
- Haller, S. T., et al. Monoclonal antibody against marinobufagenin reverses cardiac fibrosis in rats with chronic renal failure. Am J Hypertens. 25 (6), 690-696 (2012).
- Tian, J., et al. Spironolactone attenuates experimental uremic cardiomyopathy by antagonizing marinobufagenin. Hypertension. 54 (6), 1313-1320 (2009).
- Liu, J., et al. Attenuation of Na/K-ATPase Mediated Oxidant Amplification with pNaKtide Ameliorates Experimental Uremic Cardiomyopathy. Sci Rep. 6, 34592 (2016).
- Yan, Y., et al. Involvement of reactive oxygen species in a feed-forward mechanism of Na/K-ATPase-mediated signaling transduction. J Biol Chem. 288 (47), 34249-34258 (2013).
- Leelahavanichkul, A., et al. Angiotensin II overcomes strain-dependent resistance of rapid CKD progression in a new remnant kidney mouse model. Kidney Int. 78 (11), 1136-1153 (2010).
- Ma, L. J., Fogo, A. B. Model of robust induction of glomerulosclerosis in mice: importance of genetic background. Kidney Int. 64 (1), 350-355 (2003).
