Her presenterer vi en kombinasjon av laser Doppler perfusjon imaging (LDPI) og laser Doppler perfusjon overvåking (LDPM) for å måle spinal cord lokale blodet flyter og oksygenmetning (SO2), samt en standardisert prosedyre for å innføre ryggmargen Trauma på rotte.
Laser Doppler flowmetry (LDF) er en noninvasive metode for blodet flyt (BF) måling, som gjør det best for å måle microcirculatory endringer i ryggmargen. I denne artikkelen var målet å bruke både Laser Doppler avbildning og overvåking analysere endring av BF etter ryggmargsskade. Både laser Doppler skanner og sonde/skjermen var blir brukt for å få hver avlesning. Dataene for LDPI gitt en lokal distribusjon av BF, som ga en oversikt over perfusjon rundt skaden nettstedet og gjort det tilgjengelig for komparativ analyse av BF blant ulike steder. Ved å måle intenst prøvende området over en periode, ble en kombinert sonde brukt til å måle samtidig BF og oksygen metning i ryggmargen, viser samlede ryggmargen perfusjon og oksygentilførsel. LDF selv har noen begrensninger, for eksempel relativ flux følsomhet for bevegelse, og biologiske null signal. Men har teknologien vært brukt i kliniske og eksperimentelle studier pga enkelt oppsett og rask måling av BF.
Vevet i ryggmargen er svært Stangeriaceae og svært følsomme for hypoksi indusert av ryggmargsskade (SCI). Våre tidligere studier viste at blodstrøm i ryggmargen ble betraktelig redusert etter hjernerystelse skade1,2, som kan være relatert til underskuddet av motorikk. Nyere studier har vist at integriteten til blodårene etter SCI er godt korrelert med forbedring av sensoriske funksjon3. Det har blitt rapportert at forbedret vascularity kan redde hvit substans, indirekte fører til forbedret funksjon4. Derfor syntes vedlikehold av etter skade ryggmargen perfusjon å være av primær betydning for å bevare levedyktighet og funksjonalitet.
Effekten av ulike behandlinger på perfusjon etter SCI har blitt undersøkt av mange etterforskere bruker en rekke teknikker i eksperimentelle modeller SCI5,6,7. Laser Doppler, som en veletablert teknikk, var utvilsomt en nyttig metode for å kvantifisere perfusjon i flere dyr og menneskelige studier8,9,10,11. Teknikken er basert på måling Doppler Skift12 indusert ved å flytte røde blodlegemer belyst lys. Siden kommersialisering av teknikken i 1980, har stor fremgang blitt gjort i laserteknologi, fiberoptikk og signalbehandling for måling av perfusjon av laser Doppler instrumenter13, som gjorde LDF til en pålitelig teknologi.
I denne studien, ble begge metodene laser Doppler måling brukt for å evaluere blodstrøm (BF) i spinal snorer av concussive rotter. På grunn av noninvasive natur teknologien og dens enkel setup gir våre protokollen en følsom, rask og pålitelig metode for BF målinger i ryggmargen. Enda viktigere, tillater denne metoden langtidsstudie av BF innlegg concussive SCI uten dyr offer på hvert punkt.
Fordi evnen å taksere BF av vev og raske endringer av perfusjon under stimulering, er det mulig å bruke denne protokollen for å evaluere cerebral BF14,15 , samt måle andre vev som leveren16, 17, hud18,19og tarm20. I en rotte modell av midlertidig okklusjon av arterien cerebri, ble laser Doppler målingene brukt for å sikre riktig reduksjon av BF hastigheten til nivåer som er forventet i den iskemiske penumbra14. I rotter som har gjennomgått kritiske lem iskemi (CLI) induksjon, ble Doppler laserskanning brukt til å observere hind lem BF før og etter CLI prosedyren og ulike perioder etter behandling21. I tillegg avhengig bioavailability og metabolske klarering av enkelte stoffer hepatic BF, som ble oppdaget av LDF16. Derfor kan LDF bli mye brukt i eksperimentell modell, Farmakodynamiske og farmakokinetiske evaluering.
Noen detaljer bør bli lagt merke til når du utfører denne protokollen. Først bør anestesi og kirurgi gjennomføres så raskt og elegant som mulig for å minimere introdusert stress til dyret. For å redusere forstyrrelsene til resultatene, holde dyr i en relativt fredelig og stabilt tilstand. Dernest bør mer oppmerksomhet vies til blødning under målingen bruker laser Doppler utstyr, siden blod kan forstyrre lesingen. Til slutt, under data innspillingen, dyr bør holdes i temperaturkontrollerte omgivelser å unng?…
The authors have nothing to disclose.
Forfatterne har ingen takk.
Laser Doppler Line Scanner | Moor Instruments | moorLDLS2 | |
Laser Doppler Monitor | Moor Instruments | moorVMS-LDF | |
Probe for Monitor | Moor Instruments | VP3 | Blunt needle end delivery probe |
Impactor | Precision Systems and Instrumentation | IH-0400 | |
Phenobarbital sodium | Sigma-Aldrich | P3761 | |
Buprenorphine | Sigma-Aldrich | B-908 | |
Syringe | Becton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd | 300841 | |
Surgical suture needles with thread | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 18T0329 (batch number) /4-0 | |
Scalpel | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J11030 4# | |
Scalpel blade | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J12130 20# | |
Ophthalmic forceps | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | JD1040 | |
Hemostatic forceps | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J31050 | |
Benzyl penicillin sodium | North China Pharmaceutical Co., Ltd | F6072116 (batch number) | |
75% alcohol | Dezhou Anjie Gaoke disinfection products Co., Ltd | 150421R (batch number) | |
Iodine | Shandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd | 20170102 (batch number) | |
Rat | Laboratory Animal Center, The Academy of Millitery Medical Sciences | Sprague-Dawly (rat strain) |