Summary
이 프로토콜 먼저 외부 요도 괄약근 전극, 그리고 두 번째, 오 줌 방광 및 요도 외부의 함수의 측정 함께 방광 카 테 터의 영구 이식의 수술 절차에 설명 이식된 깨어 동물에 괄약근입니다.
Abstract
더 낮은 요로 함수는 주로 설치류에 cystometric 방광 기능 분석을 통해 평가 됩니다. 기존의 cystometries는 일반적으로 우 레 탄 마 취 터미널 분석으로 수행 됩니다. 그것은 잘 알려진 마 취 약물 방광 기능을 좌우할 수 있다입니다. 따라서,이 기법의 목표 가볍게 절제 된 깨어 쥐에서 방광 및 외부 요도 괄약근의 cystometric 측정을 수행 것입니다. 이 위해 방광 카 테 테 르 방광 돔에 이식 합니다. 그 후, 두 개의 전극 외부 요도 괄약근에 양측 이식 되 고 접지 전극 응답 골격 근육을 봉합. 방광 카 테 터와 3 개의 전극은 마침내 목 지역으로 피하 터널링 고 마구에 부착. 이 기술은 낮은 요로 더 낮은 요로 기능을 평가 하기 위해 같은 동물에 여러 개의 시간 지점에서 측정할 수 있습니다. 이 기술의 주요 응용 프로그램 동시 오 줌 방광 및 외부 요도 괄약근 기능 깨어 건강 한 쥐에는 질병 또는 상해의 유도 후의 후속 이다. 또한, 이후 더 낮은 요로 모니터링 평가 질병/부상 및 치료 효능을 모니터링 하는 동안 수행할 수 있습니다.
Introduction
오 줌 저장 및 무효화 기능 및 역 기능 분석, 대부분 연구 설치류 모델을 사용 했습니다. 반사의 순차적 활성화를 통해 방 생산 됩니다. 이러한 반사의 효율적인 배설1필수적 이다. Cystometric 기록 하는 기술을 신경 제어1방광 기능을 분석 하기 위한 유용한 도구를 제공 합니다.
쥐에 있는 대부분의 전통적인 cystometries에서 마 취, 주로 우 레 탄은2, 단일, 최종 분석으로 행해진다 고 방광에 전적으로 초점. 그러나, neurogenic 더 낮은 요로 기능 장애 (NLUTD) 같은 일부 pathologies에 오 줌 방광 뿐만 아니라 외부 요도 괄약근, 방광 출구는 역 기능3,4. 이것은 NLUTD 후속, 어려운 경우에 단일 cystometric 측정에서 방광 검사 합니다. 인 간에 게 비교는 신뢰할 수 있는 결과를 얻으려면, 방광 외부 요도 괄약근 기능 및 그것의 상호 작용2정확 하 게 측정 하기 위해 필수적 이다. 또한, 그것은 마 취는 방광 기능2,,56변경 가능성이 깨어 쥐에 기능 분석을 수행 하는 중요 한. 깨어 있는 동물에 기록 하는 좋은 cystometric 방광 기능과 오작동7의 식별을 위한 기초 이다.
작은 동물 cystometry 역 사용 (예를 들어, 고양이 cystometry 역 (CCS)) 작은 깨어 동물8cystometric 분석을 수행 하는 단위입니다. 영구 방광 카 테 터 및 이식된 외부 요도 괄약근 전극, 긴 시간 기간2동안 반복 측정을 수행할 수 있습니다. CCS에 대 한 유용한 도구를 제공 하는 따라서, neurogenic 비 및 NLUTD 평가 설치류 모델는 pathomechanisms 짧은 또는 중간 속 행 동안 변경할 수 있습니다. 또한,이 메서드는 restrainer 깨어 있는 쥐가에서 방광 측정을 사용 하 여 인 위 감소 cystometric 분석을 포함 합니다.
이 문서에서 우리 영구적으로 방광 카 테 터와 외부 요도 괄약근 전극, 깨어 있는 쥐에 cystometric 측정 함께 임 플 란 트 수술 접근 방식을 설명 합니다.
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Protocol
여기에서 설명한 모든 절차는 동물 연구에 대 한 오스트리아 정부 윤리 위원회에 의해 승인 했다 (Bundesministerium 위한 Wissenschaft, Forschung und 엔터테인먼트, WF / V /3b) 연구소의 평가 대 한 협회 준수 했다 동물 사용에 대 한 동물 치료 지침입니다. 이 접근 방식을 사용 하는 쥐 여성, 12 주 된 루이스 쥐 했다. 프로토콜을 통해 불 임 악기를 사용 합니다.
1. 재료 준비
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카 테 터의 제조
- 동물의 크기에 맞게 적절 한 길이 (20-25 cm)에 카 테 테 르 (폴 리 에틸렌 PE-50 튜브)를 잘라.
참고: 터널링 하 고 쉽게 처리에 대 한 몇 가지 여분의 길이 남겨 주세요. - 플레어 한쪽 둥근된 끝을 라이터. 최종 적절 한와 카 테 터의 무뚝뚝한 끝 확인 하십시오.
- 봉기 끝 바로 아래 거짓말까지 2 m m 긴 실리콘 튜브 카 테 터를 놓습니다.
- 동물의 크기에 맞게 적절 한 길이 (20-25 cm)에 카 테 테 르 (폴 리 에틸렌 PE-50 튜브)를 잘라.
-
전극의 제조
- 20-25 cm는 (동물의 크기에 따라 적절 한 길이)의 소계 코팅 강철 와이어를 준비 합니다.
- 실버 와이어 길이 2 cm를 준비 하 고 작은 루프 남아 때까지 끝을 트위스트. 한쪽 끝에 테 플 론 절연의 2mm 떨어져 스트립. 트위스트 실버 와이어 박탈된 강선에 결말 땜 납.
- 기존의 매니큐어 코팅 영역에 적용 됩니다. 코팅 지구 4 m m 긴 폴 리 에틸렌 튜브를 준비 하 고 압축 집게에 열을 적용 하 여 끝 인감.
2. 동물 준비
-
마 취
- 칵테일 적절 한 마 취를 사용 하 여 마 취를 일반에 대 한 기관에 의해 승인.
- Medetomidine (0.15 mg/kg)와 midazolam (0.08 mg/kg), 펜타닐 (0.01 mg/kg), 마 취 칵테일을 준비 하 고 27 게이지 바늘 1 mL 주사기에 의해 피하 주사.
-
수술 준비
- 전기 면도기, 성 기 영역과 견의 수준에서 다시 지역을 포함 하 여 함께 복 부를 면도.
- 복 부를 소독 하 고 70% 에탄올 첫 번째 및 다음 3 번갈아 스크럽 povidone-요오드 솔루션 영역을 목.
3. 방광 카 테 테 르 주입
- 제 3의 그리고 제 4 젖꼭지 (길이 약 2 ~ 2.5 c m)의 수준에서 낮은 중순 라인 개복 술은 피부와 복 부 근육에 대 한 수술 시저에 대 한 메스를 사용 하 여 수행 합니다.
- Cranio 꼬리 방향으로 복 벽을 안내 하 여 방광을 노출 하 고 다시 위치 피하기 위해 방광 뒤에 집게의 뒷면을 배치 하 여이 위치에 그것을 수정.
- 테이퍼 팁 바늘으로 6-0 비 흡수 monofilament 봉합 사를 사용 하 여 방광 돔 주위 지갑 문자열 봉합을 놓습니다.
- 내 지갑-문자열, 메스 팁 또는 18 G 바늘, 방광 카 테 터를 삽입 하 여 방광 돔 incise (프로토콜 단계 1 참조).
- 멸 균 생리 0.9% 염화 나트륨 해결책 prefilled 카 테 터를 삽입 하 고 신중 하 게 테의 봉기 오프닝 방광 돔 바로 아래 위치까지 방광 카 테 터를 제거.
- 지갑-문자열 봉합 테 주위를 확보 하 고 추가 고정을 위한 카 테 테 르 몸 주위 중지 봉합.
- 천천히 무 균 생리 0.9% 염화 나트륨 해결책으로 카 테 터를 통해 방광을 작성 하 여 방광 돔 통해 누설에 대 한 확인 합니다.
4. 요도 괄약근 전극 이식
- 3 개의 전극 이식에 대 한 준비 (프로토콜 단계 1 참조).
- 하나의 전극 미래 null 전극의 추가 확인을 위해 색된 영구 펠트 펜으로 표시 합니다. 전극 70% 에탄올으로 소독.
참고:는 카 테 터는 열 및 화학 살 균 절차에 적합 합니다. 대신 감기 24 h에 대 한 전극 소독. - 복 부 절 개 수술가 위 치 골까지 확장 하지만 음모 관절을 잘라 하지 마십시오.
- 요도 식별 하 고 무딘 주머니는 요도의 양쪽에 미세 집게를 사용 하 여 만들지만 혈관 또는 신경의 외상을 방지.
- 이 창에서 요도 가까이 적절 한 지방 주머니를 식별 합니다.
- 6-0 비 흡수 monofilament 봉합 사를 사용 하 여 적절 한 지방 주머니에 양측 전극 수정.
참고: 전극의 최종 위치는 요도의 중간 영역에서 양자 해야 합니다. - 묶어 6-0 비 흡수 monofilament 봉합 함께 2 개의 전극.
- 요도의 거리 내에서 복 벽 근육을 표시 null 전극 봉합 모든 3 개의 전극 하나의 봉합 사를 함께 묶어.
5. 터널링
- 터널링에 대 한 견 사이 작은 피부 절 개를 확인 합니다.
- 목에 전극 와이어를 터널 정확한 위치에 대 한 최종 점검을 할 고 터널링 후 전극의 위치를 확인 합니다.
- 터널 방광 카 테 터 견 수준-방광 왜곡을 피하기 위해 카 테 터를 터널링 하는 동안 방광에 주의. 이 위해 방광의 왜곡을 피하기 위해 방광 돔 들어가면서 테를 잡으십시오.
- 4-0 polyfilament 흡수 봉합으로 연속 또는 중단 바늘으로 복 부 근육을 닫습니다. 중단된 매트리스 봉합 하 여 피부 절 개를 닫습니다.
- 전극 와이어 및 카 테 터의 최대한 팽창 하 그것의 전체 길이에 동물을 스트레칭.
- 어깨 근육 봉합 침 몰 하 여 카 테 터 및 전극 와이어를 해결.
- 4-0 봉합으로 단일 스티치에 의해 피부를 닫습니다.
6. 마구 피팅
- 동물의 머리 위로 마구 당겨 동물을 마구 하 고 두 개의 실리콘 스트립 사이 끝 위치를 앞 발을 당겨 있습니다. 배포자와 수술 전에 동물의 무게에 의해 마구 크기를 확인 합니다.
- 전극 와이어의 크기를 조정 하는 드릴으로 마구 및 주문 품 구멍을 통해 전극의 중앙 구멍을 방광 카 테 터 터널.
- 실리콘 스트립을 당겨 하네스를 조정 합니다. 그것은 너무 느슨한 하네스를 조정 하지만 일부 공간 쥐의 이동 능력을 유지 하기 위해 유지.
- 케이블 스트랩 실리콘 스트립을 해결 하기 위해 사용 합니다.
- 3 cm 위의 방광 카 테 터의 길이 잘라 하네스, 23-G 마 개에 연결 하 고 마지막으로 프로그램을 수정.
7. 전극 커넥터의 제조
- 3 개의 작은 열 수축 튜브 (null 전극에 대 한 다른 색)을 준비 합니다. 적절 한 큰 크기에서 두 개의 추가 열 수축 튜브를 준비 합니다.
- 나중에 연결할 여성 플러그 없이 너무 느슨하거나 너무 짧은 수 최적의 길이로 전극 와이어의 길이 단축. 3 개의 와이어 (약 2 m m), 테 플 론 절연을 벗기십시오 고 문자열로 강철 와이어 트위스트.
- 모든 와이어에 큰 열 수축 튜브를 놓고 개별적으로 모든 3 개의 와이어에 대 한 작은 튜브 놓고 null 전극에 대 한 컬러 튜브를 사용 합니다.
- 남성 3-연결-플러그 전극 땜 납. 중간에 null 전극 배치 하 고 3 개의 작은 개별 튜브 위의 납땜 영역 축소.
- 남성 플러그 테두리를 개별 튜브 엔딩의 끝에 큰 튜브와 마지막 큰 튜브의 첫 번째를 축소 합니다.
- 암 커넥터 하네스, 그리고 수정에 더 안전에 대 한 테이프의 조각을 고정 하 남성 플러그를 연결 합니다.
8. 수술 후 관리
- 외과 영역을 청소 하 고 povidone-요오드 소독.
- 생리대까지 깨어에 동물을 놓고 물 대체, 동안에 그리고 수술 후 현지 동물 보호 지침에 따라 0.9% 염화 나트륨 해결책을 제공 합니다.
- 진통제를 관리 (meloxicam 1 mg/kg)과 항생제 (sulfadoxinum 200 mg, trimethoprimum 40 mg, 15 mg/kg) 결합 된 주입 솔루션으로 피하. 매일 두 번 (아침과 저녁), 진통제를 주고 5 연속적인 일 동안 항생제, 하루에 한 번 줄.
- 주당 2 ~ 3 주사에 모든 후속 기간 동안 동일한 복용량에 항생제를 계속.
- 마구의 적절 한 피팅을 위해 매일 확인 하 고 특히 목의 수술 필드 검사 수행. 면 그것은 너무 꽉 실리콘 스트립에서 신중 하 게 당겨 하네스를 조정 합니다.
- 봉쇄를 피하기 위해 주에 한 번씩 정기적으로 테를 플러시.
9입니다. Cystometric 측정을 위한 준비
- 수술 후 6 일 후 첫 번째 cystometric 측정을 수행 합니다.
참고: 이전 측정 카 테 테 르 주입 때문에 진통 약물 및/또는 urothelial 자극에 의해 좌우 될 수 있다. - 메인 스위치, 컴퓨터, 그리고 EMG 앰프를 켭니다.
- 주사기 펌프를 실내 온도 따뜻하게 0.9% 염화 나트륨을 채우십시오. 3 방향 커넥터 하나 다른 펌프에서 시작 내림차순 방식으로 열고 튜브를 플러시.
참고: 확인 신중 하 게 나머지 공기 거품으로 거품 cystometric 측정을 변경할 것입니다.
10입니다. 교정
- 프로그램 uroflowmeter 소프트웨어를 시작 하 고 교정에가 서.
- 펌프와 동물에 대 한 3 방향 커넥터를 닫습니다.
- 연결 된 압력 계 밸브 열고 프로그램에서 0을 누릅니다.
- 100 mmHg로 압력 계에 압력을 조정 하 고 프로그램에서 100 mmHg 버튼을 누릅니다. 보도 교정 조정을 하기 확인 합니다. 창이 자동으로 닫힙니다.
- 밸브는 압력 계를 닫고 측정을 위한 준비를 동물에 펌프에서 3 커넥터를 엽니다.
11. 동물 데이터베이스 (DB 동물)
- 동물을 등록 하 게 동물 간결한 id입니다.
- 스키, 치료의 시작, 카 테 테 르 주입, 실험적인 그룹, 및 동물의 생년월일의 날짜의 날짜와 같은 추가 데이터를 입력 합니다.
- 데이터를 마지막으로 로그를 "기록 저장"을 눌러 하 고 파일을 저장 합니다.
12. 녹음 전에 측정 설정
- 시작 버튼을 눌러 소프트웨어 프로그램을 시작 합니다.
- 동물을 선택 하 고 자체 규모와 제로 압력을 누릅니다.
참고: 주의 restrainer에 동물을 배치 하는 동안 케이블 붙어 그런 EMG 케이블의 와이어의 제거 발생할 수로.
13. 동물 준비
- 카 테 터 플러그를 제거 하 고 마구에서 EMG 플러그를 분리 하십시오.
- restrainer에 쥐를 넣어. restrainer 닫고 마구 클램프 잠금.
- 카 테 터와 EMG는 restrainer에서 플러그를 얻을.
- 고양이 단위로 restrainer 장소입니다. 튜브를 통해 꼬리를 넣고 움직임을 피하기 위해 테이프와 튜브를 수정.
- 녹음 여성 EMG 커넥터 남성 EMG 플러그를 연결 합니다.
- 0 압력을 한 번 더 누르고 작성/기록 관 카 테 터를 연결할. 소프트웨어에서 압력을 확인 하십시오.
참고: 압력 긍정적인, 5-10 cm H2O 기준선에 주위 해야 합니다. 압력 부정적인 경우에, 카 테 터는 정 맥에서 분리, 제로 압력 누르고 카 테 터를 다시 연결.
14입니다. 녹음
- 카 테 터와 EMG 케이블 연결 실행된 펌프와 녹음을 누릅니다.
- 충전 속도 μ/분에서 실험 요구에 적응.
- 참고 시간 녹음 시작 및 로그도 서에 실내 온도.
- Cystometric 녹음을 중지 하려면 실행을 누르면 펌프 펌프를 중지 하 고 다시 한 번 녹음을 누릅니다.
참고: 펌프 해제 되며 펌프에 녹색 표시등이 꺼져. - 테 고 23 G 마 개 플러그를 사용 하 여 카 테 터 끝을 닫습니다. EMG 케이블을 분리 합니다.
- restrainer의 전면 열고는 restrainer에서 쥐를 안내 합니다.
참고: 신중 하 게, 쥐를 처리 하 고 전선 케이블의 모든 잠금을 모니터링 합니다. - 테 하네스 다시 연결 합니다. 하네스, EMG 플러그를 다시 연결 하 고 플러그 주위에 테이프의 조각을 넣어.
참고: 경우 동물 병 적인 낮은 요로 상태, 방광의 overdistention를 방지 하려면 수동으로 끝에 방광을 표현 한다. - 동물의 집으로 다시 놔입니다.
- 눌러 종료 하 여 프로그램을 닫습니다.
- 청소 restrainer와 비 커.
- 펌프와 동물 콘센트에 3 방향 커넥터를 닫습니다.
- 컴퓨터, EMG 단위와 메인 스위치를 통해 시스템을 종료 합니다.
참고: 데이터 측정된 쥐 ID의 하위 폴더 파일 "로그 데이터" 별도 폴더에 저장 됩니다. 단일 녹음 단일 쥐 ID 폴더에 날짜별으로 정렬 됩니다.
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Representative Results
깨어 cystometric 측정의 과정을 보여주는 회로도 그림 1 에서 제시 하 고 방광 카 테 테 르 주입에 대 한 내부 해부학 그림 2에 표시 됩니다. 수술 수술 후 진통 약 2 헤 고 항생제, 프로토콜에 설명 된 대로 커버 통증과 감염 수술 후 5 일 이상. 통증의 흔적 그 후 발견 되었다. 복 부, 복 부 봉합, 그리고 목 봉합의 두 번 매일 주의 검사는 동물의 건강을 유지 하는 데 필요한. 마구 제어 (위치 및 견고) 일단 매일 첫 번째 5 일 및 나중에 정기적으로 실시 되어야 한다. 복 부 봉합 10일 수술 날에 제거할 수 있습니다.
우리는 염증 방지 하려면 수술 후 처음 10 일 동안 소프트, 비 우 디 침구를 사용 합니다. 침구 추가 낮은 염증의 위험을 일주일에 두 번 이상 변경 됩니다. 동물 감 금 소 동료 여 물고 마구, 카 테 터, 또는 전극 케이블의 위험을 증가 하는 그룹 주택으로 단일 주택에 보관 됩니다.
카 테 터는 적어도 한 번 / 주, cystometric 측정 과정에서 또는 수동으로 멸 균 0.9% 염화 나트륨 낮은 주입 속도 (그림 3)에서 1-3 mL와 카 테 터를 홍 조에 의해 플러시됩니다 한다. 일반 항생제 범위 더 동물의 감염 및 오 줌 돌 대형의 위험을 줄여줍니다. 모니터링 유체 통풍 관 오 줌 돌 대형을 방지 하기 위해 추가 주요 포인트입니다. 낮은 농도 (2-3%)에서 연산 관리 중 intravesically 카 테 터를 통해 또는 calculi 형성을 방지 하기 위해 식 수로.
그대로 방광 카 테 터 및 전극 유지 관리 뿐만 아니라, 수술의 성공률은 약 80%. 나머지 20%의 경우, 주요 문제는 플러그에서 전극 와이어의 초연 했다. 따라서, 하네스를 전극 와이어의 주의 첨부 파일은 전극의 손실을 방지 하기 위해 중요 합니다.
Cystometric 측정은 3 연속 배설 주기 불안 및 처리는 쥐의 상태에 따라 20 ~ 40 분 사이 측정 당 기록 됩니다 때까지 일반적으로 수행 됩니다. 첫 번째 cystometric 측정 일반적으로 카 테 터 이식 수술 후 1 주 이루어집니다.
Cystometric 기록의 주요 밖으로 읽기 매개 변수는 기준 압력, 임계값 압력, 최대 detrusor 압력, 폴된 볼륨, 평균 흐름, 배설 시간, 평균 압력, 오 줌 방광의 준수와의 동시 읽기는 외부 요도 괄약근 근 전도 활동 (그림 4)
수술 후 적어도 4 주 동안 후속 기간에 연속 cystometric 측정을 수행할 수 있습니다. 카 테 터 라인을 플러시 정기적으로 하는 경우 카 테 터 막힘 문제입니다. 정기 처리 및 광 제어는 쥐의 모든 후속 기간 동안 밖으로 실행 되어야 한다.
테 눌릴 차단 경우 intravesical 압력 (100 cm H2O) 위의 매우 높은 압력까지 선형으로 증가 합니다. 이 경우 충전을 중단 해야한다 고 보이는 카 테 테 르 끝 비틀면 확인 되어야 합니다. 없는 비틀면 볼 경우 차단된 콘센트에 대 한 카 테 터를 확인 한다. 이 위해 카 테 터 수 수동으로 통해 테 플러시. 액체는 쉽게 나오지 방광으로, 다시 앞으로 가볍게 당기 수 수 시도 합니다. 한 마지막 시도 대 한 테 내 방해 영역 선택을 취소 하려고 하는 산 성 홍 조 솔루션 (연산 2-3%)를 사용할 수 있습니다. 이 솔루션 봉쇄, 해산 하는 더 높은 기회가 있을 아직 성공적인 플러시 후 방광을 자극 것입니다 하 고 연속 측정만 수행 해야 산 성 솔루션 플러싱 후 2 일. 없는 유체는 방광으로 플러시 수 있습니다, 경우 테 영구적으로 차단 하 고 아니 더 측정은 가능, 고 동물 후속 손실 됩니다.
그림 1: 깨어 있는 쥐에 cystometric 측정의 그리기 도식. 이 그림2에서 적응 되었습니다. (한) 요 류 동태 설치의 그림. (b) 요 류 동태 검사 연구소 역. (c) 외부 요도 괄약근 전도의 주입 전극을 요도, 자가 보기에 측면. (d) 자가 방광 카 테 테 르 주입의 순간에 방광 돔의 보기 보기. (e) 후 전극 및 카 테 터, 쥐의 이식 플러그 및 커넥터를 안전 하 게 저장 하 마구와 맞을 것 이다. (f) 인간의 urodynamics입니다. B- e에서 숫자에 는전설에 관계. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: 방광 카 테 테 르 주입에 쥐의 내부 해부학. 이 그림8에서 수정 되었습니다.
그림 3: 쥐의 테 라인의 플러싱. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4: 동물 카 테 테 르 주입 후 12 주에에서 요 류 동태 경시. 순진한 쥐에서 (한) 대표 요 류 동태 추적 상단에 표시 됩니다 방광 압력 추적 중간 소변 분 비 무게 추적에서에서 하단의 외부 요도 괄약근 EMG 추적. (b) 60의 순진한 동물에서 확대/축소 창 s, (a)에서 촬영. 중요 한 발언 voiding 전후 보다 무효화 하는 동안 덜 외부 요도 괄약근 EMG 활동이입니다. 상단에 표시 됩니다 방광 압력 추적 중간 소변 분 비 무게 추적에서에서 하단의 외부 요도 괄약근 EMG 추적. 하단에서 열 작 일치 시간 주파수 스펙트로그램 (현재 시간 시점에서 주파수에 해당)와 함께 표시 됩니다. 레드는 고성능 나타내고 블루 저전력을 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 프로토콜 영구 카 테 터와 요도 괄약근 전극 이식 기술 깨어, 가볍게 절제 된 쥐 오 줌 방광의 동시 분석 모두를 포함 하 여 기록 하는 cystometric의 수술 절차에 설명 하 고 외부 요도 괄약근입니다.
수술 하는 동안 중요 한 단계는 주의 방광 카 테 터, 누설 및 광범위 한 조작을 피하 이식 합니다. 또한, 요도 외부 괄약근에 양측 전극의 정확한 주입은 외부 요도 괄약근의 사운드 측정에 대 한 중요 합니다. 이식 후 수술 분야의 가까운 검사는 또한 동물의 건강 유지에 필수적 이다. 후속 동안 항생제 범위 테 라인으로 요로 감염의 발생에 따라 감염 예방에 도움이 됩니다.
Cystometric 측정, 동안 처리 쥐 조용한 하 고 이전 처리 되지 않은 쥐 보다 더 편안 하 게 될 것입니다. 따라서, cystometric 기록의 결과에 달라질 수 있습니다. 또한,는 restrainer 쥐를 더 어두운 앞 면적 confining 공간을 제공 하 고 따라서 스트레스 수준을 감소. 다른 게시 된 깨어 cystometric 측정에서 쥐 측정 장에 자유롭게 이동할 수 있습니다. 그러나,이 측정 하는 동안 높은 인 위 위험을 맺는 다 고 녹음, 그리고 또한 동물에서 스트레스 수준을의 시간을 늘릴 수 있습니다. 건강 한 쥐, 후속 동안 여러 측정 시간 점에서 최적의 cystometric 측정을 복제할 수 있습니다. Cystometric 측정 하는 동안 일반적으로 발생 하는 문제는 꼬인된 카 테 터 또는 프로토콜의 단계별 전도에 실수. 기술 또는 소프트웨어 오류가 발생 하는 경우 다시 초기화 cystometric 측정 및 프로토콜의 stepwise 반복의 문제 해결을 위해 좋습니다.
이 기술의 한계는 cystometric 녹음의 간 동물 다양성,이 조직의 조직학 또는 분자 생물학 시험을 방해 수도, 이식된 테 인해 방광 조직에 구조적인 변화 그리고 속 행 기간 동안 동물의 단일 주택. 또한,이 기술은 여성 쥐에서 테스트 되었습니다만, 적용 및 남성 쥐에 대 한 결과 하지 아직 검사.
이 기술의 주요 장점은 깨어 측정 설정 뿐 아니라 외부 요도 괄약근 및 방광의 동시 측정. 따라서, 깨어 동물에 더 낮은 요로 더 많은 변환 검사는 마 취5,6,,910의 단일, 터미널 cystometric 분석에 비해 사용할 수 있습니다. 또한,이 방식으로는 더 낮은 요로 장애 또는 병 리의 진행 다음 수 있습니다 같은 동물에 시간, 뿐만 아니라 치료 성공. 특히, NLUTD 일반적인 cystometric 기술2전체 범위를 불가능 시간 과정에서 시험 될 수 있다.
결론적으로, 제시 수술 및 cystometric 측정 깨어 쥐에서 방광 및 외부 요도 괄약근의 상호 작용을 포함 하 여 더 낮은 요로 여러 유물 감소 분석에 사용 됩니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
저자는 어떤 승인 필요가 없습니다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Polyethylene tubing PE 50 | Becton Dickinson | 427411 | Catheter |
| Prolene 6-0 (BV-1, 9.3 mm, 3/8c) | Ethicon | EH7403H | Suture |
| Teflon coated steel wire | Cooner wire | AS631 | Electrode material |
| Silver wire 0.250 mm | World Precision Instruments | AGW1030 | Electrode material |
| Rotilabo - PVC tube | Carl Roth | 97241 | Harness |
| Vicryl rapide 4-0 (P-3, 13 mm, 3/8c) | Ethicon | V4940H | Suture |
| Quick Connect Single Harness | SAI Infusion Technologies | QCH-23CW | Harness |
| Shrinking tubes | ChiliTec | 17894 | Electrode soldering |
| Soldering wire Pb60 Sn40 | Stannol | LD0029 | Electrode soldering |
| Fluxing agent 157 | Castolin Eutectin | 157 0150 | Electrode soldering |
| Conn Unshrouded Header HDR 3 POS, 2.54mm Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 801-87-050-10-001101 | Electrode soldering |
| Conn Socket Strip SKT 50 POS 2.54mm, Solder ST Thru-Hole Box | Preci-dip | 890-18-003-10-001101 | Electrode soldering |
| Rat Cystometry Package (contains pump, scale, pressure transducer, hardware for cystometric analysis) | Catamount Research and Development Inc. | CAT-CYT-R | |
| Differential amplifier with active headstage | AD instruments | DP-311 | EMG amplifier |
| Restrainer Medium size for rats 200-300 g | emka Technologies | HLD-RM | |
| Uro Dyn Software | Zürich of University | MTA-based | |
| Female rats (Strain Lewis) 12 weeks of age | Charles River, Sulzfeld, Germany | animals |
References
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