Summary
Evalueringen av vev utvikling i brudd callus under endochondral bein healing er viktig å overvåke helbredelsesprosessen. Her rapporterer vi bruk av en magnetisk resonans imaging (MRI)-kompatibel ekstern fixator for musen femur tillate MRI finkjemmer bein gjenfødelse i mus.
Abstract
Endochondral brudd healing er en kompleks prosess som involverer utviklingen av fibrøst cartilaginous og osseous vev i brudd callus. Mengden av ulike vev i callus gir viktig informasjon om brudd healing fremgang. Tilgjengelig i vivo teknikker å overvåke langs callus vev utviklingen i preklinisk brudd-healing studier med liten dyrene inkluderer digital røntgen og µCT bildebehandling. Begge teknikkene er imidlertid bare kunne skille mellom mineralholdig og ikke-mineraliserte vev. Derfor er det umulig å diskriminere brusk fra fibrøst vev. I kontrast, magnetisk resonans imaging (MRI) visualiserer anatomiske strukturer basert på sitt vanninnhold og derfor kunne identifisere noninvasively mykt vev og brusk i brudd callus. Her rapporterer vi bruk av en MRI-kompatibel ekstern fixator for musen femur at Mr skanner under bein regenerasjon i mus. Eksperimenter har vist at fixator og en skreddersydd montering tillater repeterende Mr skanner, dermed muliggjør langsgående analyse av brudd-callus vev utvikling.
Introduction
Sekundær brudd healing er den vanligste formen for bein helbredelse. Det er en kompleks prosess mimicking bestemte aspekter av ontogenic endochondral forbening1,2,3. Tidlig brudd hematom består hovedsakelig av immunceller, korning og bindevev. Oksygen spenning og høy biomekaniske stammer hemme osteoblast differensieringen brudd gapet, men fremme differensiering av progenitor celler i chondrocytes4,5,6. Disse cellene begynner å spre seg på stedet av skade å danne en cartilaginous matrise gir første stabiliteten i fractured benet. Under callus modning, chondrocytes bli hypertrofisk, gjennomgår apoptose, eller trans-skille ut osteoblasts. Neovascularization på brusk-til-Ben overgang zone gir forhøyet oksygen nivåer, slik at dannelsen av bein vev7. Etter benete bygge bro av brudd gapet, biomekaniske stabilitet er økt og osteoclastic ombygging av eksterne brudd callus oppstår for å få fysiologiske bein kontur og struktur3. Derfor inneholder mengder fibrøse cartilaginous og bein vev i brudd callus viktig informasjon om benet helbredelsesprosessen. Forstyrret eller forsinket healing blir synlig ved endringer callus vev utvikling både mennesker og mus8,9,10,11. Tilgjengelig i vivo teknikker langs overvåke callus vev utvikling i preklinisk brudd healing studier med liten dyrene inkluderer digital røntgen og µCT imaging12,13. Men kan begge teknikkene bare forskjellsbehandle mineralholdig og ikke-mineraliserte vev. I kontrast, Mr gir utmerket bløtvev kontrast og derfor kunne identifisere mykt vev og brusk i brudd callus.
Tidligere arbeid viste lovende resultater for post mortem MRI i mus med articular frakturer14 og i vivo MRI i mus under intramembranous bein-defekt helbredende15. Men uttalt både studier også begrenset romlig oppløsning og vev kontrast. Vi viste tidligere muligheten for høy oppløsning i vivo MRI langsgående vurdering av myke callus formasjon under murine endochondral brudd healing16. Her rapportere vi av protokollen for å bruke en MRI-kompatibel ekstern fixator for femur osteotomi i mus for å overvåke callus vev utvikling langs under endochondral brudd helbredelsesprosessen. Utformingen av en skreddersydd montering enhet for innsetting av den eksterne fixator sikret en standardisert posisjon under gjentatt skanner.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
alle dyr eksperimenter overholdt internasjonale regler og bruk av forsøksdyr og ble godkjent av de regionale myndighetene (nr. 1250, Regierungspräsidium Tübingen i Tyskland). Alle mus ble opprettholdt i grupper på to til fem dyr per bur på 14-h lys, 10-h mørke døgnrytmen med vann og mat gitt annonse libitum.
1. forberedelse av kirurgiske materiale og forbehandling av mus
- Sterilize alle kirurgiske materiale. Bruke en autoklavering temperatur på 120-135 ° C for 20-30 min sterilisering tid.
- Kjøp C57BL/6 mus eller mus fra en annen belastning som er mellom 19-35 g av kroppsvekt. Følg passende dyr omsorg og eksperimentelle protokoller nasjonale retningslinjer som er godkjent av etterforskeren ' s dyr institusjon og bruk komiteen. Beregn minst 7 dager Akklimatisering periode før du starter prosedyren.
- Gi analgesi til alle mus via drikkevannet en dag før operasjonen til den tredje postoperativ dagen.
2. Kirurgisk prosedyre og anvendelse av den eksterne Fixator
- sted musen i et rør forhåndslastet med 5-7% isoflurane og 60 mL/min oksygen. Etter tap av postural reflekser, fjerne musen fra anestesi induksjon røret og vedlikehold av bedøvelsen via en innånding maske gir 1-3% isoflurane og 60 mL/min oksygen.
- Skjerm puste mønster og hind labben refleks under anestesi. Kontroller at puste er rundt 100 sykluser/min og det bakben pote refleks er fraværende.
Merk: mengden gass nødvendig er avhengig av alder, kjønn, kroppsvekt og stamme av musen.
- Skjerm puste mønster og hind labben refleks under anestesi. Kontroller at puste er rundt 100 sykluser/min og det bakben pote refleks er fraværende.
- Før kirurgi, injisere musen med en enkelt dose av antibiotika subcutaneously (clindamycin, 45 mg/kg). Videre vedlikehold av fysiologiske væskebalanse, injisere musen med en subcutaneous fluid depot 500 µL saltoppløsning (0,9% NaCl).
- å hindre hornhinnen tørking, bruke øye ointment musen øynene. Plasser musen på en oppvarming plate på 37 ° C i løpet av bedøvelsen og kirurgisk prosedyre for å opprettholde fysiologiske kropp temperatur.
- Fjerne pels fra høyre hind ben og skrubbe kirurgiske området med en alkohol-basert desinfeksjonsmiddel. Dekk rett bakben labben med en liten del av en sterile hansken å unngå unsterile områder. Desinfiser høyre hind lem tre ganger. Plasser en steril drapere over hele musen unntatt det kirurgiske området.
- Incise huden ca 1 cm langs langs fremre høyre femur med skalpell. Separate rett ut m. biceps femoris og m. vastus lateralis med mikro saks og tang. Klipp den sene opprinnelse siden femur-trochanter med en mikro saks å tillate fri tilgang til den anterolaterale delen av benet. Kontroller at sciatic nerve opprettholdes.
- Plasser den eksterne fixator (aksial stivhet 3 N/mm, figur 1 A) parallell til femur. Manuelt bore brønner gjennom cortex med litt 0.45 mm drill og plasser den keramiske montering pinner i brønner. Start med mest proksimale pin, etterfulgt av mest distale pin, og de to pinnene i mellom.
- Kontroller at det er ingen spenning, komprimering, eller skjæring stress på fixator under montering prosedyren, ellers oppnådd osteotomi gapet vil ikke være tilstrekkelig på grunn av fixator.
- Humidify bein med litt sterilt NaCl å unngå dehydration under BT2508RC prosedyren.
- Opprette en 0,4 mm osteotomi gjennom hele benet mellom to stiftene ved hjelp av en 0.4 mm gigli wire sag.
Merk: Hvis en oscillerende mikro så kan brukes til å opprette osteotomi. Sørg for å unngå noen metall sjetonger fra så på området osteotomi. - Rødme osteotomi gapet med 2 mL steril NaCl fjerne bein sjetonger mellom de to brukket halvdelene.
- Tilpasse musklene ved hjelp av en Sutur kontinuerlig med en resorbable Sutur (se Tabell for materiale). Deretter tilpasse huden ved hjelp av avbrutt ikke-resorbable suturer (se Tabell for materiale). For å unngå såret bite, må ikke plassere suture helt til skallen såret.
Merk: Ikke bruk huden lim eller klipp siden mus vanligvis fjerne det fra såret forårsaker ytterligere skade huden. - Ren kirurgiske området med en desinfiserende og plassere musen i dens bur. skjermen musen og tilførsel tilstrekkelig varme (f.eks av infrarødt lys) til det er fullt våken. overvåke vann, matinntaket og kroppsvekt etter operasjonen til Kontroller at dyret ikke er i smerte og lidelse. Gi analgesi til alle mus via drikkevannet til den tredje postoperativ dagen.
Merk: Mus kan være plassert i grupper på opptil fire dyr. - Dataskjerm musen ' s aktivitet på 1 til 5 dager etter operasjonen. Under denne tiden kurs, skal musen bære vekten på styres lem. Ellers musen utelates fra videre analyse.
3. Mr prosedyre og bildeanalyse
- før Mr skanning prosedyren anaesthetize musen i henhold til protokollen i trinn 2.1 og 2.3, og holde respirasjonsfrekvens rundt 100 sykluser/min. sett den eksterne fixator på høyre hind ben i den musen forsiktig inn i en skreddersydd montering enhet ( figur 1 B, C).
- Sørg for å unngå bøying eller komprimering av fixator under dette trinnet siden dette kan forstyrre brudd healing.
Merk: Mr skanner kan gjennomføres så tidlig som 3 dager etter operasjonen, avhengig av dyr omsorg og eksperimentelle protokollen.
- Sørg for å unngå bøying eller komprimering av fixator under dette trinnet siden dette kan forstyrre brudd healing.
- Plasserer musen på temperaturstyrt holder for innføring i Mr enheten. Koble montering enheten strengt til fire element hodet spolen.
- Kjøpe Mr data ved hjelp av en dedikert høy-feltet liten-dyr MRI system opererer på 11,7 T.
Merk: The MRI data oppkjøpet geometri er på linje med det femur Ben, ortogonalt til skruene.- Hent data ved å bruke en proton tetthet fett-undertrykkes multi skive TSE sekvens (PD-TSE) med oppkjøpet parameterne: echo/repetisjon tiden TE = 5,8 ms/St = 2500 ms, oppløsning Δr = 52 × 52 × 350 µm³, felt-of-view (FOV) = 20 × 20 mm² og båndbredde Δω = 150 KHz.
- Merk: den totale anskaffelseskosten 22 stykker er 36 min.
- Åpne ervervet dataene med analyseprogramvare. Angi voxel størrelsen som 0,05 x 0,05 x 0,35 mm 3. Segmentering av ulike vev i brudd callus (bein, brusk, fibrøst vev/benmarg) basert på deres intensitet halvautomatisk terskelverdi som følger.
- Klikk på " redigere nye etikettfeltet ", klikk " legge materiale ", og endre materialet " callus ". Skille callus området fra omkringliggende vev basert på hypo-intens signalet fra periosteum ved hjelp av " Lasso " verktøyet.
- Klikk " legge til materiale ". Klikk " legge materiale " og endre materialet " brusk ". Segmentere brusken ved hjelp av den " terskelen " verktøyet og " velger bare gjeldende materialet " fra " callus ". Klikk " brusk " og " legge til materiale ". Gjenta disse trinnene med " Ben " og " benmarg/fibrøst vev ".
- Genererer 3D rekonstruksjoner av i fractured femurs basert på vev segmentering bruker analyseprogramvare. Klikk " generere overflaten ", bruke " ingen " for " utjevning Type " og klikk " overflaten visningen ".
Merk: Lite, hyperrealistiske intens området rundt enDS i fractured halvdelene er sannsynligvis gjenstander på grunn av overgangen fra benete til bløtvev. Disse områdene bør bli ekskludert fra videre analyse. Hyper-intens områder i sprekken callus i endochondral-fasen av brudd healing representerer cartilaginous vev. Hypo-intens områder på brudd callus distale fra osteotomi gapet på den endochondral forbening fasen og med samme intensitet gjennom hele brudd callus på helbredelse senere stadier representerer nyopprettede benete callus vev. Selv om disse områdene har en hypo-intens signal, er signalet intensiteten fra modne bein (cortex) enda lavere. Etter terskelverdi signal intensiteten for benete vev og cartilaginous vev i brudd callus, merke den gjenværende vev som bein margtransplantasjon og bindevev. Verdiene for vev segmentering: benete vev (inkludert eldre cortex, trabekulært bein og benete callus vev) er segmentert innen 1 3,3 (normalisert signal intensitet til modne cortex), benmarg/bindevev innen 3.4-5.4, og cartilaginous callus vev i størrelsesorden 5.5-6.2. - Om nødvendig gjenta MRI-skanning langs under brudd helbredelsesprosessen. Overvåke cartilaginous callus utvikling, skanne musene på dager 10 og 14 21 etter operasjonen.
Merk: Tidspunkt kan avhenge dyr omsorg og eksperimentelle protokollen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Først kan suksessen til den kirurgiske prosedyren bekreftes ved analyse av Mr skanner (se eksemplet i figur 2). Alle de fire trådene bør være plassert midt i femur akselen. Størrelsen på osteotomi gapet bør være mellom 0,3 til 0.5 mm. Hvis størrelsen på osteotomi gapet varierer mye fra disse verdiene, bør musen bli ekskludert fra videre analyse.
Dernest gir evalueringen av langsgående skanner under brudd healing prosessen i samme dyret informasjon om callus vev utvikling. Hvis mus skannes på dag 10 og 14 21 (se eksemplet i Figur 3), cartilaginous vev er synlig i brudd callus på dag 10 (relativ brusk området = 30,8%) og dag 14 (relativ brusk området = 29.0%), og reduseres til dag 21 etter kirurgi (relativ brusk området = 10,5%) (Figur 3). Bein vev er synlig i utkanten av brudd callus på dag 10 (relativ Ben område = 7,2%), øker inntil dag 14 (relativ Ben område = 15.6%), og kroppen bygge bro til dag 21 (relativ Ben område = 45,7%).
For det tredje, etter segmentering av ulike vev i brudd callus bruker analyseprogramvare, 3D-bilder fra brukket femur og brudd callus kan genereres. I eksemplet i Figur 4, skannet en hel femur på dag 26 etter brudd vises. Eldre cortex er markert med grått, keramiske pinnene er merket med gult, callus bløtvev er merket i grønt, brusk vev er merket i rødt og callus benete vev markeres i lilla.
Figur 1 : Eksterne fixator med keramiske montering pinner og MRI monteringsutstyr. (A) plast kroppen av det eksterne fixator vises, samt fire keramiske montering pinner som er kompatibel med Mr skanner. Skala bar: 1 cm. (B) av dataassistert tegning av skreddersydde montering enheten for innsetting av den eksterne fixator under Mr skanner vises. Den eksterne fixator på høyre femur museklikk settes inn i lindring av montering enheten. Deretter er enheten koblet på fire element hodet spolen før skanning. Skala bar: 0,4 cm. (C) musen plassert i montering enheten (blå), knyttet til 4-element hodet spolen (hvit). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2 : PD-TSE MRI bildet av en brukket femur 3 dager etter operasjonen. En sentral del av en brukket femur skannet på dag 3 etter kirurgi er vist. BM: benmarg; B: benet; FX: brudd gapet. Skala bar: 0,5 mm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3 : Langsgående overvåking av brudd callus utvikling med Mr teknikk. Sentrale Mr skiver fra brukket femur en mus skannet på (A) dag 10, (B) dag 14, og (C) dag 21 etter kirurgi vises. Hyper-intens cartilaginous vev er synlig i brudd callus på dag 10 og dag 14, og synker til dag 21 etter operasjonen. Hypo-intens bein vev er synlig i utkanten av brudd callus på dag 10, øker inntil dag 14, og kroppen bygge bro oppstår før dag 21. BM: benmarg; CG: cartilaginous vev; B: benete vev. Skala bar: 0,5 mm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4 : 3D rekonstruksjon fra en brukket femur skannet på dag 26 etter kirurgi. Eldre cortex er markert med grått, keramiske pinnene er merket med gult, callus bløtvev er merket i grønt, brusk vev er merket i rødt og callus benete vev markeres i lilla. Bildet ble generert ved hjelp av analyseprogramvare. Skala bar: 0.4 mm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Endringer og feilsøking:
Hovedmålet med denne studien var å beskrive en protokoll for bruk av en MRI-kompatibel ekstern fixator for femur osteotomi musen muligheten til å overvåke callus vev utvikling langs under endochondral brudd-healing prosessen. Utformingen av en skreddersydd montering enhet for innsetting av den eksterne fixator sikret en standardisert posisjon under gjentatt skanner. Halvautomatisk vev segmentering tillater analyse av mengder fibrøse cartilaginous og bein vev i brudd callus. Videre kan 3D rekonstruksjoner av Mr bildene visualisering av endochondral brudd helbredende prosess i hver enkelt mus.
Avgjørende skritt i protokollen:
De viktigste trinnene av kirurgiske prosedyren bruker MRI-kompatibel ekstern fixator er: (1) unngå noen skade på sciatic nerve under operasjonen, ellers musen vil ikke kunne vekt Bjørn innen 5 dager etter osteotomi og utelates fra videre analyse. (2) unngå spenning, komprimering eller skjær stress på fixator under montering prosedyren, ellers osteotomi gapet vil ikke ha en standardisert størrelse og form. Videre må du montere fixator parallelt med den langsgående aksen av femur, sikre en stabil fiksering av osteotomi. (3) unngå metall sjetonger fra så hvis bruker en gigli wire så, siden de vil forstyrre Mr skanning prosedyren.
De viktigste trinnene av Mr skanning prosedyren er: (1) sikre unngå bøying eller komprimering av fixator under innsetting og fjerning av montering enheten som dette kan forstyrre brudd healing. (2) sikre riktig temperaturkontroll under skanning prosedyren å opprettholde fysiologiske kroppstemperatur.
Betydning når det gjelder eksisterende metoder og begrensninger av teknikken:
Forrige studier viste lovende resultater for post mortem Mr i mus med articular frakturer14 og i vivo MRI i mus med intramembranous bein-defekt helbredende15. Men uttalt både studier også begrenset romlig oppløsning og vev kontrast. Vi viste tidligere gjennomførbarhet og nøyaktigheten av høy oppløsning i vivo MRI for langsgående analyse av myke callus formasjon under tidlig og middels faser av brudd i mus ved å sammenligne den nye MRI teknikken med den gull standarder µCT og histomorphometry16. Men fant vi også at romlig oppløsning av Mr er betydelig lavere enn oppløsningen på ex vivo µCT. Dette er en klar begrensning av Mr teknikken sammenlignet med konkurrerende teknikker, inkludert eks vivo , men også i vivo µCT.
Fremtidige programmer:
Framtidsperspektiver for bruk av Mr under murine brudd-healing studier er: (1) kombinasjon av Mr skanner med bruk av kontrast agenter å måle blodstrømmen gjennom skadet lem. (2) kombinasjon av Mr og PET-skanner, og merking av celler med superparamagnetiske partikler av jernoksid for cellen menneskehandel eksperimenter17,18,19,20.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatteren Romano Matthys er ansatt i RISystem AG Davos, Sveits som produserer implantater og implantat konkrete instrumenter brukes i denne artikkelen. Alle andre forfattere har ingen konkurrerende økonomiske interesser.
Acknowledgments
Vi takker Sevil Essig, Stefanie Schroth, Verena Fischer, Katja Prystaz, Yvonne Hägele og Anne Subgang utmerket kundestøtte. Vi takker også tysk Research Foundation (CRC1149, INST40/499-1) og AO traumer Foundation Tyskland for finansiering denne studien.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Anaesthesia tube | FMI, Seeheim, Germany | ZUA-82-ANA-TUB-Mouse | |
| Anaesthetic machine | FMI, Seeheim, Germany | ZUA-82-GME-MA | |
| Artery forceps | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BH104R | |
| Autoclave | Systec, Wettenberg, Germany | DX-150 | |
| Autoclaving packaging | Stericlin, Feuchtwangen, Germany | 2301-04/06/10/12/16 | |
| Avizo software | FEI, Burlington, USA | - | Version 8.0.1 |
| BioSpec 117/16 magnetic resonance imaging system | Bruker Biospin, Ettlingen, Germany | 117/16 | |
| Bulldog clamp | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BH 021R | |
| Carbon steel scalpel no. 11/15 | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BA211/215 | |
| Ceramic mounting pin 0.45 mm | RISystem, Davos, Switzerland | HS691490 | |
| Clindamycin (300 mg / 2ml) | Ratiopharm, Ulm, Germany | - | |
| Dressing forceps 115 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BD210R | |
| Dressing forceps 130 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BD025R | |
| Drill bit coated 0.45 mm | RISystem, Davos, Switzerland | HS820420 | |
| Durogrip needle holder 125 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BM024R | |
| Foliodrape | Hartmann, Heidenheim, Germany | 2513026 | |
| Frekaderm | Fresenius, Bad Homburg, Germany | 4928211 | |
| Gigli saw 0.44 mm | RISystem, Davos, Switzerland | RIS.590.110.25 | |
| Hand drill | RISystem, Davos, Switzerland | RIS.390.130-01 | |
| Heating plate | FMI, Seeheim, Germany | IOW-3704 | |
| Hygonorm gloves | Hygi, Telgte, Germany | 2706 | |
| Isoflurane | Abbot, London, UK | Forene | |
| Micro forceps 155 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BD343R | |
| Micro scissors 120 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | FD013R | |
| Mouse FixEx L 0.7 mm | RISystem, Davos, Switzerland | RIS.611.300-10 | |
| Needle case for drills | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BL911R | |
| Needle holder | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BB078R | |
| Octenisept | Schülke, Norderstedt, Germany | 121403 | |
| Osirix software | Pixmeo SARL, Bernex, Switzerland | - | Version 4.0 |
| Oxygen, medical grade | MTI, Ulm, Germany | - | |
| Resolon 5/0 | Resorba, Nürnberg, Germany | 88143 | |
| Saline 0.9% | Braun, Melsungen, Germany | 3570350 | |
| Scalpel handle 125 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BB073R | |
| Scissors 150 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BC006R | |
| Sealer for autoclave packaging | Hawo GmbH, Obrigheim, Germany | HM500 | |
| Sterican 27 G | Braun, Melsungen, Germany | 4657705 | |
| Sterile surgical blades no. 11/15 | Aesculap, Tuttlingen, Germany | BB511/515 | |
| Surgical gloves | Hartmann, Heidenheim, Germany | Peha-micron 9425712 | |
| Surgical light | Maquet SA, Ardon, France | Blue line 80 | |
| Syringes 5 ml | Braun, Melsungen, Germany | Injekt 4606051V | |
| Tissue forceps 80 mm | Aesculap, Tuttlingen, Germany | OC091R | |
| Tramadol 25 mg/l | Grünenthal, Aachen, Germany | 100mg/ml | |
| Vasofix Safety | Braun, Melsungen, Germany | 4268113S-01 | |
| Vicryl 5-0 | Ethicon, Norderstedt, Germany | V30371 | |
| Visdisic eye ointment | Bausch & Lomb, Berlin, Germany | 3099559 |
References
- Claes, L., Recknagel, S., Ignatius, A. Fracture healing under healthy and inflammatory conditions. Nat Rev Rheumatol. 8 (3), 133-143 (2012).
- Einhorn, T. A. The cell and molecular biology of fracture healing. Clin Orthop Relat Res. (355), Suppl S7-S21 (1998).
- Einhorn, T. A., Gerstenfeld, L. C. Fracture healing: mechanisms and interventions. Nat Rev Rheumatol. 11 (1), 45-54 (2015).
- Augat, P., et al. Local tissue properties in bone healing: influence of size and stability of the osteotomy gap. J Orthop Res. 16 (4), 475-481 (1998).
- Claes, L. E., Heigele, C. A. Magnitudes of local stress and strain along bony surfaces predict the course and type of fracture healing. J Biomech. 32 (3), 255-266 (1999).
- Claes, L. E., et al. Effects of mechanical factors on the fracture healing process. Clin Orthop Relat Res. (355), Suppl 132-147 (1998).
- Hu, D. P., et al. Cartilage to bone transformation during fracture healing is coordinated by the invading vasculature and induction of the core pluripotency genes. Development. 144 (2), 221-234 (2017).
- Hankenson, K. D., Zimmerman, G., Marcucio, R. Biological perspectives of delayed fracture healing. Injury. 45, Suppl 2 8-15 (2014).
- Meyer, R. A., et al. Age and ovariectomy impair both the normalization of mechanical properties and the accretion of mineral by the fracture callus in rats. J Orthop Res. 19 (3), 428-435 (2001).
- Nikolaou, V. S., Efstathopoulos, N., Kontakis, G., Kanakaris, N. K., Giannoudis, P. V. The influence of osteoporosis in femoral fracture healing time. Injury. 40 (6), 663-668 (2009).
- Haffner-Luntzer, M., Kovtun, A., Rapp, A. E., Ignatius, A. Mouse Models in Bone Fracture Healing Research. Current Molecular Biology Reports. 2 (2), 101-111 (2016).
- Garcia, P., et al. Rodent animal models of delayed bone healing and non-union formation: a comprehensive review. Eur Cell Mater. 26, 1-14 (2013).
- Histing, T., et al. Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting. Bone. 49 (4), 591-599 (2011).
- Zachos, T. A., Bertone, A. L., Wassenaar, P. A., Weisbrode, S. E. Rodent models for the study of articular fracture healing. J Invest Surg. 20 (2), 87-95 (2007).
- Taha, M. A., et al. Assessment of the efficacy of MRI for detection of changes in bone morphology in a mouse model of bone injury. J Magn Reson Imaging. 38 (1), 231-237 (2013).
- Haffner-Luntzer, M., et al. Evaluation of high-resolution In Vivo MRI for longitudinal analysis of endochondral fracture healing in mice. PLoS One. 12 (3), 0174283 (2017).
- Beckmann, N., Falk, R., Zurbrugg, S., Dawson, J., Engelhardt, P. Macrophage infiltration into the rat knee detected by MRI in a model of antigen-induced arthritis. Magn Reson Med. 49 (6), 1047-1055 (2003).
- Al Faraj,, Shaik A, S. ultana, Pureza, A., A, M., Alnafea, M., Halwani, R. Preferential macrophage recruitment and polarization in LPS-induced animal model for COPD: noninvasive tracking using MRI. PLoS One. 9 (3), 90829 (2014).
- Rolle, A. M., et al. ImmunoPET/MR imaging allows specific detection of Aspergillus fumigatus lung infection in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A. 113 (8), 1026-1033 (2016).
- Niemeyer, M., et al. Non-invasive tracking of human haemopoietic CD34(+) stem cells in vivo in immunodeficient mice by using magnetic resonance imaging. Eur Radiol. 20 (9), 2184-2193 (2010).
