Мы описываем методы в разработке экспериментальной модели диета индуцированной метаболического синдрома (Мец) в кроликов, с помощью диеты высоким содержанием жиров, высоким сахарозы. Животные разработали Центральное ожирение, мягкой гипертензии, заранее диабет и дислипидемия, таким образом воспроизводить основные компоненты человеческого Мец. Эта хроническая модель позволит приобретение базовых знаний механизмов прогрессирования заболевания.
В последние годы ожирение и метаболический синдром (Мец) стали растущей проблемой для общественного здравоохранения и клинической практике, учитывая их увеличение распространенности за ростом сидячий образ жизни и нездорового питания. Благодаря Животные модели фундаментальные исследования можно изучить механизмы, лежащие в основе патологических процессов, таких как Мец. Здесь мы описываем методы, используемые для разработки экспериментальных кролик модель диета индуцированной Мец и его оценки. После периода acclimation животные питаются высоким содержанием жира (10% гидрогенизированные кокосовое масло и сало 5%), высоким сахарозы (15% сахарозы, растворенных в воде) диета для 28 недель. В этот период, были выполнены несколько экспериментальных процедур для оценки различных компонентов Мец: Морфологические и измерения артериального давления, определение толерантности глюкозы и анализ нескольких маркеров плазмы. В конце экспериментального периода, Центральное ожирение развитых животных, мягкой гипертензии, преддиабет и дислипидемия с низкой ЛПВП, высокой LDL и увеличение уровня триглицеридов (ТГ) таким образом воспроизводить основные компоненты человеческого Мец. Эта хроническая модель позволяет новые перспективы для понимания основополагающих механизмов в прогрессирование болезни, выявление доклинических и клинических маркеров, которые позволяют выявление пациентов риску, или даже испытания новых терапевтических подходы для лечения этой сложной патологии.
Ожирение и метаболический синдром (Мец) стали растущей проблемой для общественного здравоохранения и клинической практике, учитывая их увеличение распространенности за ростом сидячий образ жизни и нездоровой еде привычки1. Существует несколько определений Мец, но большинство из них описывают его как кластер сердечно-сосудистые и метаболические изменения, такие как абдоминальное ожирение, снижение ЛПВП и повышенный уровень холестерина ЛПНП, повышенные триглицериды, нетерпимость глюкозы и гипертонии2 ,3,4. Диагноз требует, что три из этих пяти критериев присутствуют.
Благодаря Животные модели фундаментальные исследования удалось изучить механизмы, лежащие в основе патологических процессов, таких как Мец. Были использованы несколько животных моделей, но это важно что модель выбора воспроизводит основные клинические проявления патологии человека (рис. 1). С этой целью были разработаны Животные модели, считается похож на людей, главным образом собак и свиней, (см. Verkest5 и6 Чжан и Лерман для обзора). Однако собак модели не показывать все компоненты Мец, учитывая, что развитие атеросклероза или гипергликемии у собак с помощью диеты является сомнительной5. Свиней модели представляют наиболее анатомические и физиологические сходство с людьми и таким образом предлагают значительные прогностической силой для выяснения механизмов лежащие в основе Мец, но их содержание и сложность экспериментальных процедур делают использование Эта модель очень труда интенсивной и дорогостоящих6.
С другой стороны, модели грызунов (мыши и крысы), диета индуцированной спонтанное и трансгенных, широко используются в литературе для изучения ожирение, гипертензия и Мец и его патологических последствий в различных органах и системах (см. Вонг и др. 7 для обзора). Хотя использование этих моделей является более доступным, чем собак или свиней, они имеют важные недостатки. Действительно в зависимости от штамма, животные разработать некоторые компоненты Мец, тогда как другие, такие как гипертония, гипергликемия и гиперинсулинемия отсутствуют7. Кроме того одним из основных компонентов Мец, ожирения, некоторых генетически модифицированных штаммов, зависит не только факторы, связанные с питанием, скорее было показано, что некоторые животные становятся ожирением с нормальным или даже снижение питания потребление8. Наконец мышей и крыс показать естественный недостаток в cholesteryl эфира передачи белка (ПООППО) и использовать HDL в качестве основных средств транспорта холестерина, что делает их относительно устойчив к развитию атеросклероза. Это важное отличие метаболизма липидов с людьми, которые выражают ПООППО и перевозить их холестерина, главным образом в ЛПНП9.
И наоборот кролик лаборатория представляет промежуточный этап между крупных животных и грызунов экспериментальные модели. Таким образом кролик может быть легко передан различных типов протоколов с минимальными требованиями персонала и технического обслуживания, чем больше животных моделей более легко обрабатывается в экспериментальных процедур. Кроме того сообщалось, что кролики, кормили с высоким содержанием жиров диеты имеют аналогичные изменения гемодинамики и нейрогуморальные как ожирением люди8,10,11. Записки, касающиеся метаболизма липидов кролик имеет обильные ПООППО в плазме и их профиль липопротеидов ЛПНП богатые12, что является также похожи на людей. Кроме того кролики развивать гиперлипидемии довольно быстро, учитывая, что, как травоядных животных, они очень чувствительны к диетического жира13.
Рисунок 1: сравнение животных моделей Мец. Verkest5, Чжан и Лерман6и Wong et al. 7 для обзора. «» указывает на преимущества и «» указывает на недостаток. *спорным, зависит исследования, *как указал вне Carroll et al. 8, некоторые генетически модифицированных штаммов становятся ожирением независимо от приема пищи. ЕКПТ: cholesteryl эфира передачи белка. ГЦГ: тест на переносимость глюкозы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Для того, чтобы разъяснить основные механизмы, лежащие в основе патологического реконструкции производства Мец в различных органах и системах и получить представление об этой сложной патологии, выбор Экспериментальная модель, которая воспроизводит основные компоненты Мец человека имеет важное значение. Кролик может предоставить множество преимуществ, учитывая ее сходство с человеческой физиологии и доступность использования в хронический протоколы и измерения. В этой строке несколько кролик диета индуцированной модели с помощью диеты высоким содержанием жиров и высоким сахарозы были использованы14,,1516,,1718,19 (Таблица 1) и характеристика различных компонентов Мец имеет большое значение при связанных фенотип с реконструкции органа. Таким образом основная цель этой статьи является описать методы для разработки модели диета индуцированной Мец в кроликов, что позволяет изучение его патофизиологии и влияние в реконструкции органа.
Исследование | Диета | Продолжительность | Порода | Мец компоненты | |||
Обь | HT | HG | DL | ||||
Инь et al. (2002)14 | · 10% жирности | 24 недели | · Мужской NZW | – | |||
· 37% сахарозы | · 2 кг | ||||||
Чжао et al. (2007)15 | · 10% жирности | 36 недель | · Мужчин JW | ||||
· 30%-ая сахароза | · 16 недель | ||||||
Helfestein et al. (2011)16 | · 10% жирности | 24 недели | · Мужской NZW | – | |||
· 40%-ая сахароза | · 12 недель | ||||||
· 0,5-0,1 холестерина | |||||||
Нин et al. (2015)17 | · 10% жирности | 8-16 недель | · Мужской WHHL | – | |||
· 30% фруктозы * | · 12 недель | ||||||
Лю et al. (2016)18 | · 10% жирности | 48 недель | · Мужской NZW | – | |||
· 30%-ая сахароза | · 12 недель | ||||||
Ариас Мутис et al. (2017)19 | · 15% жирности | 28 недель | · Мужской NZW |
Таблица 1: диета индуцированной Мец кролик модели с помощью высоким жира, высокой сахароза. Символ ««указывает на отсутствие,»» присутствие, и «-» не оценены. * ограничено. WHHL, Ватанабэ наследственные hiperlipidemic кроликов. JW, японский белого кролика. Обь, ожирение. HT, гипертонии. HG, гипергликемия. DL, дислипидемии.
Создание соответствующей экспериментальной модели может обеспечить более последовательный и надежный метод для изучения развития Меца, и это также необходимо понимать основные механизмы, которые лежат в основе органов и систем ремоделирования. Здесь мы описываем методы, используемы…
The authors have nothing to disclose.
Эта работа была поддержана генералитета Valenciana (GV2015-062), Университат де Валенсия (УФ-INV-PRECOMP14-206372) к MZ, генералитета Valenciana (PROMETEOII/2014/037) и Институт де Salud Карлоса III-ФЕДЕР фондов (CIBERCV CB16/11/0486) для FJC.
Veterinary scale | SOEHNLE | 7858 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Shovel for aluminum feed | COPELE | 10308 | Shovel for aluminum feed http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html |
Balance | PCE Ibérica | PCE-TB 15 | Balance http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm |
Strainer (20 cm diam.) | ZWILLING | 39643-020-0 | Strainer https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html |
Bowl | ZWILLING | 40850-751-0 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Funnel | BT Ingenieros | not available | Funnel http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE |
Introcan Certo 22G blue | B Braun | 4251318 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
Propofol Lipuro 10 mg/ml vial 20 ml | B Braun | 3544761VET | General intravenous anesthetic http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1- |
FisioVet serum solution 500ml | B Braun | 472779 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Askina Film Vet 1,25cm x 5m | B Braun | OCT13501 | Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet |
Askina Film Vet 2,50cm x 5m | B Braun | OCT13502 | Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet |
Injekt siringe 10ml luer | B Braun | 4606108V | Injection-aspiration syringe of two single-use bodies http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt- |
Seca 201 | seca | seca 201 | Ergonomic tape for measuring perimeters https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred |
Sterican 21Gx1" – 0,8x25mm verde | B Braun | 4657543 | Single Use Hypodermic Needle http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican- |
CONTOURNEXT-Meter | BAYER | 84413470 | Blood glucose analysis system http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2 |
CONTOUR NEXT test strips | BAYER | 83624788 | Blood glucose test strips http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package |
MICROLET NEXT LANCING DEVICE | BAYER | 6702 | Lancing device http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device |
MICROLET 2 Colored Lancets | BAYER | 81264857 | Ultra-thin sterile lancet for capillary puncture http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s |
Injekt 20ml luer siringe | B Braun | 4606205V | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Askina Mullkompressen 7,5×7,5cm – sterile | B Braun | 9031219N | Sterile gauze packets in envelopes http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril |
Emla lidocaine/prilocaine | AstraZeneca | not available | Local anesthetics https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html |
Introcan Certo 18G short | B Braun | 4251342 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
Introcan Certo 20G | B Braun | 4251326 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
Blood Pressure Transducers-MA1 72-4497 | Harvard Apparatus | 724497 | Transducer for monitoring blood pressure http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html |
PowerLab 2/26 | AD Instruments | ML826 | Amplifier https://www.adinstruments.com/products/powerlab |
LabChart ver. 6 | AD Instruments | not available | Acquisition software https://www.adinstruments.com/products/labchart |
Animal Bio Amp | AD Instruments | FE136 | Amplifier https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136 |
K2EDTA 7.2mg | BD | 367861 | Blood collection tubes http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861 |
Centrifuge | SciQuip | 2-16KL | Centrifuge http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/ |
Eppendorf Reference 2, 100 – 1000 μL | Eppendorf | 4920000083 | Pipette https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html |
Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0.5 mL | Eppendorf | 30121023 | Tubes https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html |
NZW rabbits (16-18 weeks old) | Granja San Bernardo | not available | New Zealand White rabbits http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/ |
Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Sucrose for drinking solution http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es®ion=ES |
Rabbit maintenance control diet | Ssniff | V2333-000 | Control diet http://www.ssniff.com/ |
Rabbit high-fat diet | Ssniff | S9052-E020 | High-fat diet http://www.ssniff.com/ |
Rabbit rack and drinker | Sodispan | not available | Rack for rabbits https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/ |
Rabbit restrainer | Zoonlab | 3045601 | http://www.zoonlab.de/en/index.html |