Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Kvantitativ mikro-CT analyse av Aortopathy i en musemodell av β-aminopropionitrile-indusert aortaaneurisme og disseksjon

Published: July 16, 2018 doi: 10.3791/57589
Automatic Translation
1, 1, 2, 1, 1, 1,3
1Center for Vascular and Inflammatory Diseases, University of Maryland School of Medicine, 2Department of Diagnostic Radiology and Nuclear Medicine, University of Maryland School of Medicine, 3Division of Vascular Surgery, University of Maryland School of Medicine

Summary

Denne artikkelen beskriver en detaljert metodikk for å bruke en kan lett identifiseres bly-basert silikongummi for å perfuse er murine blodkar for aorta diameter kvantifisering i en musemodell av aortaaneurisme og disseksjon.

Abstract

Aortaaneurisme og disseksjon er knyttet til betydelige sykelighet og dødelighet i befolkningen, og kan være svært dødelige. Mens dyr modeller av aorta sykdom finnes, er i vivo avbilding av er blodkar begrenset. De siste årene, micro-datastyrt tomografi (mikro-CT) har dukket opp som en foretrukket modaliteten for imaging både store og små skip i vivo og ex vivo. I forbindelse med en metode for vaskulær støping, har vi brukt mikro-CT for å karakterisere frekvens og distribusjon av aorta patologi i β-aminopropionitrile-behandlet C57/Bl6 mus. Tekniske begrensninger ved denne metoden inkluderer variasjoner i kvaliteten på perfusjon introdusert av dårlig dyr forberedelse, anvendelsen av riktig metoder for fartøyet størrelse kvantifisering og ikke-survivability av denne prosedyren. Denne artikkelen omhandler en metodikk for den intravascular perfusjonen av bly-basert kan lett identifiseres silikongummi for kvantitative karakterisering av aortopathy i en musemodell av aneurisme og disseksjon. I tillegg til visualisere aorta patologi, kan denne metoden brukes for å undersøke andre vaskulær senger i vivo eller evaluering av vaskulær senger fjernet.

Introduction

Forekomsten av aorta disseksjon er 3 tilfeller pr. 100 000 per år1. Aorta disseksjon og aneurisme sykdommer står for over 10 000 dødsfall i USA hvert år, sto for 1-2% av alle dødsfall i vestlige land2. Aorta disseksjon startes av en tåre i intimal laget av fartøyet med utbredelsen av blod gjennom lag av aorta veggen under fysiologiske press. Forhøyet pasienten puls presset er assosiert med økt forekomst av disseksjon og komplikasjoner. Økt veggen skjæring stress er forbundet med aorta veggen utvidelse fører til en aneurisme formasjon3,4. Konsekvensene av aorta disseksjon inkluderer okklusjon av blodstrømmen til fjerne organer inkludert hjernen, nyrene, tarmer, og lemmer, dannelsen av kronisk aneurismer, brudd eller død5,6,7.

I dag er biokjemiske og cellulær prosessene involvert i oppstart og progresjon av aortaaneurismer og disseksjoner fremdeles dårlig forstått. Reproduserbar dyremodeller aortaaneurisme og disseksjon er nøkkelen til å forstå deres patofysiologi. Β-aminopropionitrile (BAPN) er en lysyl oksidase, som hindrer cross-linking av elastin og kollagen, og har vist betydelig endre strukturen til fartøyet veggen ekstracellulær matrix og dens biomekaniske integritet6, 8. Gnagere behandlet med BAPN har blitt benyttet som vanlige dyr modell av aortaaneurisme og disseksjon9,10.

Vaskulær tenkelig modaliteter er instrumental i å identifisere vaskulær patologi, bekrefter fartøy patency og evaluere organ perfusjon. Nylig blitt mikro-beregnet tomografi (mikro-CT) benyttet for å studere blodkar mus og tilsvarende størrelse dyr. I motsetning til bein er aksial avbilding av blod fartøy av beregnede tomografi begrenset, som intraluminal blod er iboende relativt radiolucent. Kombinert med intravascular kontrast agenter, men kan mikro-CT detaljert tredimensjonal rekonstruksjoner av dyr vasculatures for studier av makro-anatomisk vaskulær patologi11.

Valgte kontrast agent er (se Tabell for materiale) en kan lett identifiseres silikongummi som inneholder bly chromate og bly sulfat. På perfusjon i nærvær av en katalysator, det raskt stivner for å danne en støpt av blodkar med minimale endringer i makro-anatomisk arkitekturen av fartøyene, gjør er blodkar svært kan lett identifiseres i motsetning til bakgrunnen vev når undersøkt radiographically. Dette kontrast agent er en fordel fordi det er lett å håndtere og unngår degradering av vev og fartøy tap på grunn av brudd ofte assosiert med vaskulær kastet korrosjon. Det cures med minimal krymping12, fartøy ryddet av blod være patent og gi en nøyaktig vurdering av er dyr makro-blodkar i ikke-overlevelse eksperimenter. Tidligere arbeid har brukt kan lett identifiseres silikon gummi kontrast i en rekke studier på dyr. Spesielt har anvendelse visualisere koronar, glomerular, placental, og cerebral rundskriv11,12,13,14,15 vist. I dette papiret detalj vi metodikk åpne venstre ventrikkel punktering for den intravascular perfusjonen av bly-basert kan lett identifiseres silikongummi som kvantitativt karakteriserer BAPN-indusert aorta patologi i en musemodell av mikro-CT.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Protokollene for dyr håndtering ble godkjent av institusjonelle Animal Care og bruk komiteen ved University of Maryland, Baltimore (dyr Protokollnummer 0116024) og følge AAALAC internasjonale standarder.

1. forberedelse av reagenser

  1. Heparin
    1. Fortynne 250 µL av 1000 U/mL heparin sulfate i 50 mL av fosfat bufret saline å gjøre en siste konsentrasjon av 5 U/mL.
    2. Varme i heparinized (5 U/mL) fosfat bufret saltvann, som vil erstatte blodet i blodkar i et vannbad satt til 37 ° C.
    3. Forberede press-kontrollerte pumpen ved å koble nødvendig slangen og 2 tom 10-mL sprøyter, 1 for heparinized-saline bufferen og 1 for den kontrast.
    4. Fylle slangen med varm heparinized fosfat bufret saltvann og fjerne luftbobler fra slangen av press pumpen.
  2. Kontrast agent
    Merk: Se Tabell for materiale for kontrast agent kit bestanddeler.
    1. Bland en pigmentert sammensatt med en fortynner å oppnå en 1:6 fargestoff fortynningsmiddel forhold.
    2. Umiddelbart før bruk (trinn 2.3.12), legger du til 200 µL en herding agent til hver 5-mL aliquot av det utvannet pigmenterte sammensatt og bland dem godt (4% av volumet).
      Merk: Produsenten rapporterte arbeidstiden er 40 min. Som silikongummi kontrast agent begynner å danner 20 min etter tillegg av herding agent, er det viktig å forberede løsningen umiddelbart før sin infusjon.
  3. BAPN drikkevann
    1. Oppløse β-aminopropionitrile (BAPN) i drikkevann opprette en siste konsentrasjon av 3 g/L (tilpasset fra protokoller tidligere beskrevet i litteraturen)9,16,17.
    2. Administrere drikkevannet BAPN inneholder en gruppe mus når de er 4 ukens av alderen inntil perfusjon for mikro-CT.

2. kirurgisk prosedyre

  1. Dyr forberedelse
    1. Avvenne mus for 3 ukens av alderen, vedlikeholde dem på en 12 h lys/12 h mørke syklus og mate dem standard gnager chow. Den BAPN-behandlet gruppen administrere ferskt tilberedte BAPN drikkevann for 16-26 uker ad libitum. Gir kontroll dyrene med standard drikke vann ad libitum.
  2. Anestesi teknikk
    Merk: 24 timer før CT analysen, fremgangsmåten er utført. Kirurgiske prosedyrer er vedtatt for å forberede prøven en postmortem intracardiac perfusjon.
    1. Indusere en bedøvelse via en induksjon tank med 100% O2 og 3% isoflurane levert via en presisjon vaporizer. Etter anestesi induksjon, avslutte isoflurane og flush til kammeret O2. Opprettholde anestesi med 2-2,5% isoflurane og 1 L/min O2 via en nesen kjegle.
    2. Knytte både induksjon kammeret og ansiktsmaske til en trekull scavenger for avfall gass adsorpsjon å beskytte personell. Sikre en tilstrekkelig bedøvende fly ved å demonstrere at der 's ingen respons på skadelige stimuli (toe knip).
    3. Forberede en operativ felt bestående av et kirurgisk brett og de nødvendige kirurgiske instrumentene.
    4. Overføre dyret til kirurgiske feltet og plasser den i dorsal recumbency.
  3. Operativ teknikk
    1. Bruke saks, lage en midtlinjen snitt gjennom huden og bløtvevet fra midtveis mellom skam symphysis til sternal hakket, utvide gjennom huden og bløtvevet overliggende sternum.
    2. Med saks, lage et hull i pessar xiphoid prosessen å angi bryst hulrom.
    3. Bruk saks for å dissekere membranen av ventrale brystveggen, bilateralt.
    4. Skjære gjennom kyst cartilages skille ribbeina fra sternum på høyre sternal grensen.
    5. Bruke en fin hemostatic klemme på spissen av sternum (nær xiphoid prosessen) og flytter hemostat cranially slik at den er plassert i hodet av musen. Dette vil trekke thymus og sternum fra hjertet, utsette hjertet og store fartøy for ytterligere manipulasjon.
    6. Kraftig dissekere vedlegg mellom hjertet og brystveggen.
    7. 27-gauge IV kateter nålen tilkobles en sprøyte forhåndslastet med 10 mL heparinized fosfat bufret saltoppløsning (5 U/mL) og fylle alle rør med bufferen for å fjerne luftboblene fra rørene av press pumpen.
    8. Vær forsiktig mens du forbereder væsken bobler i væske linjen kan hindre fylling av mindre fartøyer. Begrense antall skip som har blitt skadet under dyr utarbeidelse, da dette vil føre til kontrast agent å lekke ut av kuttet fartøyene, endre volumet kreves for en fullstendig fylle og introdusere gjenstander til siste avbilding.
    9. Punktering venstre ventrikkel med en 27-gauge nål som er stabilisert med en rettvinklet klemme. Umiddelbart incise høyre ventrikkel eller mindreverdig vena cava renne heparin-oppløsningen og blod.
      Merk: Heparin brukes som en antikoagulerende for å hindre blod clotting i fartøyer etter dyrets død.
    10. Perfuse dyr med en konstant hastighet på 2 mL/minutt med en enkelt sprøytepumpe. Merk den synlige blanchering av organer. Fortsett til perfusjon til perfusate drenering fra venøs sirkulasjon er blod (ca 5-6 mL). Stopp pumpen.
    11. Koble IV kateter slangen fra 10-mL sprøyte, ta vare ikke for å forstyrre nålens posisjon i venstre ventrikkel.
    12. Umiddelbart etter fullført exsanguination, separate kontrast agent løsningen i 5-mL dele og legger herding agent til (se trinn 1.2). Bland dem godt. Trekke opp 5 mL av kontrast agent blandingen i en 10-mL sprøyte og perfuse dyr med det.
    13. For en komplett fylling av fartøyene (arteries og årer), fortsette infusjon forbi punktet når det ses avslutter venøs løsningen. Se etter tegn på en vellykket perfusjon inkludert visualisering av en casting agent i koronar arteriene, pulmonary arteriene, tarmen og lever blodkar.
    14. Kontrast agent vil kurere etter ca 20 min ved romtemperatur. På herding, høste organene, etter behov, og fest dem i 10% nøytral bufrede formalin. Fikse hele skrotter Hvis eksemplene ikke brukes for mikro-CT skanning dagen. Hvis skrottene skal brukes påfølgende dag, plasser dem på et metall brett og plassere dem i et kjøleskap på 4 ° C herdes natten.

3. micro-CT skanning og parametere

Merk: Parameterne bestemt bilde oppkjøpet vil være avhengig av maskinen i bruk.

  1. Hente X-ray beregnet tomografi bilder hver mus dagen etter perfusjon bruker en mikro-CT skanner med en X-ray tube spenning 55 kVp, en strøm av 150 μA, en system Forstørrelsesfaktoren av 2.19 og en CCD kamera pixel binning faktor på 2. Dette gir en effektiv pikselstørrelsen på 29 µm.
    1. Plasser musen carcass supine i tabellen mikro-CT skanner og få en speider X-ray skanning.
    2. Fokusere detektor synsfelt 57.4 mm (aksial) x 37.1 mm (transaxial) på overkroppen å image hele lengden av aorta.
    3. Anskaffe 180 bilde anslag med en rotasjon økning 2 grader og en gang per projeksjon av 2800 ms.
  2. Rekonstruere bilder med en modifisert Feldkamp algoritme; rekonstruert voxel er 29 x 29 x 29 µm3 (skjær tykkelse = 29 µm) bruker flere 3D-visualisering plug-in for programvaren som brukes her.

4. etterbehandling og gjengivelse

  1. Konvertere CT-data til en DICOM-format ved hjelp av riktig programvare.
  2. Analysere bildene for å finne ut om en aneurisme var til stede. Måle lille akse diameter på bredeste av aortabuen, synkende thoracic aorta, og abdominal aorta som tidligere beskrevet18 (figur 1).
    Merk: I vår studie bilder ble analysert av to uavhengige observatører (en blindet) bruker en DICOM-seer å identifisere om aneurisme var til stede. Den lille akse diameteren ble målt på bredeste av aortabuen, synkende thoracic aorta og abdominal aorta som beskrevet tidligere19 (figur 1). Mener ikke-aneurisme arteriell segmenter av BAPN-ubehandlet mus etablert normal fartøyet diameter som alder-matchet kontrollverdiene.
  3. Aneurismer defineres som en lokaliserte eller diffuse utvidelse av aorta segmentene til diameter større enn 50% av referanse diameter. Finn disse basert på ovennevnte målinger.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

For å vurdere denne protokollen, 20 male voksen mus, blandet bakgrunn som beskrevet tidligere19 og 20-30 ukens av alderen, med eller uten BAPN behandling, var parfyme med bly-basert kan lett identifiseres silikongummi (se tabell for materiale ) ved hjelp av protokollen som beskrevet ovenfor. De gjennomgikk mikro-CT skanning dagen (figur 1 og figur 2). Det var ingen vesentlig forskjell i alder av musene blant noen av de forhold.

Mindre aksen diameter deretter kvantifisert i disse musene. Gjennomsnittlig diameter på stigende aorta i BAPN-behandlet mus ble betydelig større enn ubehandlet alder-matchet kontrollene (1.43 ± 0.56 mm g. 0.93 ± 0,11 mm; p = 0.023, unpaired studenter t-test). Hemming av lysyl oksidase med BAPN ikke har en betydelig effekt på gjennomsnittet synkende thorax eller abdominal aorta diameter sammenlignet med alder-matchet kontrollene (p > 0.082, unpaired studenter t-test, Figur 3).

Aneurisme ble definert som 1,5 x betyr diameteren på gruppen ubehandlet. Det var en betydelig økning i antall mus med aneurismer i BAPN-behandlet sammenlignet med BAPN-ubehandlet kontrollene (50% av BAPN-behandlet mus vs 0% av ubehandlet mus; P = 0.042) av Fishers eksakt test. Aneurismer i BAPN-behandlet mus ble identifisert utelukkende i aorta, med de fleste identifisert i thoracic aorta (8 av 10 aneurismer identifisert). 4 musene utviklet mer enn 1 aneurisme med BAPN-behandling (tabell 1).

Figure 1
Figur 1: representant cross-sectional mikro-CT-bilder. A. Dette er en cross-sectional bildebehandling av BAPN-ubehandlet mus. B. Dette er en cross-sectional bildebehandling av BAPN-behandlet mus. Mindre aksen diameter målinger er gjort på nivået av aortabuen.

Figure 2
Figur 2: 3-dimensjonal modell av musen aortaaneurisme og disseksjon identifisert av mikro-CT. A. Dette er en representant 3D rekonstruksjon av en BAPN behandlet mus med en saccular abdominalt aortaaneurisme og aneurisme aortabuen. B. dette panelet viser en representant synkende thoracic aorta disseksjon i en BAPN-behandlet mus. I sann og USANN lumen skilles med intimal klaffen. Den sanne lumen (TL) er normalt passasjen av blod og den falske lumen (FL) er nyopprettede passasjen.

Figure 3
Figur 3: effekten av BAPN behandling på aorta diametere. Disse skjermbildene viser betyr mindre aksen fartøyet diameter målt ved mikro-CT i BAPN-ubehandlet og BAPN-behandlet mann mus. De musene fast bestemt på å ha en aneurisme er uthevet i rødt. Gjennomsnittet av ubehandlet gruppen vises som en prikket linje i hvert panel. en. Dette er stigende aorta/buen (AAo/Arch); 0.93 ± 0,11 vs 1,43 ± 0.56 mm; p = 0.023. b. Dette er synkende thoracic aorta (DTA); 0,82 ± 0,04 vs 1.11 ± 0.43 mm; p = 0.0817. c. Dette er abdominal aorta; 0,66 ± 0,11 vs 0.89 ± 0.58 mm; p = 0.296. Alle data presenteres som gjennomsnittlig ± standardavvik. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Ingen BAPN
(n = 8)		 BAPN
(n = 12)
Totalt dyr med aneurisme 0 6 *
Totalt antall aneurismer 0 10
AAO/ARCH 0 5
DTA 0 3
ABD AORTA 0 2

Tabell 1. Anatomisk distribusjon av identifiserte aneurismer i mannlige mus med og uten BAPN behandling. Denne tabellen viser forekomsten av aneurismer identifisert ved mikro-CT (n = 20). AAO = stigende aorta; DTA = synkende thoracic aorta; ABD AORTA = abdominal aorta. p < 0,05.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Mikro-CT bildebehandling kan brukes til å gi svært detaljert og tredimensjonale rekonstruksjoner av vaskulær patologi i dyremodeller. Ved hjelp av intravascular kontrast forbedret media, kan ikke forbedret myke vev, som lumen av en blodåre, være differensiert fra de som forbedrer. Mens laser Doppler, microangiography, magnetisk resonans angiography, histology med AC confocal eller to-fotonet mikroskopi kan brukes til å vurdere vaskulær senger, de vanligvis fokusere på et begrenset område av studiet og/eller begrenset til todimensjonal vurderinger. Mikro-CT gir en kostnadseffektiv måte å få detaljert avbilding av vaskulære strukturer, som kan hjelpe i å få en forståelse av de underliggende angiogenese og vaskulær biologi. Flere metoder Imaging smådyr inkluderer i vivo mikro-CT og digital subtraksjon angiography. I likhet med teknikken er beskrevet her, i vivo mikro-CT avhengig en eksogene kontrast agent øke oppløsningen. Fenestra VC og Isovue-370 er 2 slike blod-pool kontrast agenter som er tilgjengelige for mikro-CT. Fenestra VC er brukt og er rapportert å ha en maksimal mener forbedring av ~ 620 Hounsfield enheter i aorta 20 min etter injeksjon20. Andre hydrogenion-baserte kontrast agenter har også vist i både CT og MRI. Venstre ventrikkel catheterization uten å åpne brystet er en annen metode for hele musen perfusjon for microimaging som er beskrevet21. Ultralyd imaging for langsgående målinger av fartøyet diameter er en endelig metode som kan brukes i overlevelse studier.

Under denne prosedyren krever tilstrekkelig perfusjon en høy grad av oppmerksomhet på detaljer. Det er viktig for blodkar å være helt exsanguinated før perfusjonsmåling med en kontrast agent. Hvis leveren ikke blanch og forblir mørk rød farge, kan ekstra rødme med en heparinized saltvannsoppløsning være nødvendig før perfusjonsmåling med en kontrast. Ufullstendig exsanguination av er blodkar kan påvirke den endelige bildekvaliteten, vises som fyller defekter i er blodkar eller artifactual distale vaskulær occlusions. Videre er innsetting av nålen i venstre ventrikkel en delikat prosedyre som kan rive ventrikkel veggen eller skjære gjennom høyre ventrikkel. Hvis nålen settes inn i høyre ventrikkel, lungene vil være perfused raskt og blir gult tidlig under perfusjon, fører til en ufullstendig vaskulær perfusjon. Et fartøy brudd er et siste komplikasjoner som fører til en ufullstendig perfusjon. Muligheten for et fartøy brudd kan minimeres ved å sikre tilstrekkelig drenering fra venøs sirkulasjon før starte perfusjonsmåling via arteriell treet. Retrograd injeksjon er en alternativ metode å perfusing en vaskulær seng, som har tidligere blitt beskrevet bildet koronar blodkar11. Vi valgte en antegrade metode av perfusjon mer nøyaktig gir fysiologiske blodstrømmen i den thoracic og abdominal aortabuen. Kvaliteten på bildet med mikro-CT begrenser muligheten til å vurdere aorta intramural blodpropp eller hematom. Imidlertid kan bløtvev visualiseres godt avhengig av hvordan CT protokollen er formulert. For våre studier, la vi merke til segmenter av aorta med fylle defekter antagelig på grunn av stenoses fra intraluminal blodpropp. Teknikken som beskrevet er best for å vurdere intravascular plassen.

I sammendraget gir denne protokollen en sikker teknikk for høyoppløselig undersøkelse av blodkar en murine modell aortaaneurisme og disseksjon. Kvantitative analyser kan enkelt oppnås ved hjelp av mikro-CT-bilder, som kan gi en presis kastet av i blodkar. Anvendelsen av eksperimenter illustrert i denne publikasjonen, valgte vi å måle største aorta diameter å etterligne måling av aortaaneurismer i klinisk praksis. En kombinasjon av anatomiske landemerker og skive plassering avstander kan utnyttes for å måle spesifikke segmenter av aorta eventuelt. Det vises også at er perfused dyr blodkar kan avbildes og digitalt skilt fra skjelettlidelser bakgrunnen til ønsket mengde til å lage en tredimensjonal fremstilling av store blodkar og dens mindre distale forgreninger. Denne protokollen beholder vaskulær vev av interesse, som kan bygges inn i parafin og brukes til snitting av histologiske for videre undersøkelse.

Mikro-CT er en lovende tenkelig modalitet for studier av vaskulær biologi. Med dens høy romlig oppløsning tilbyr det en mulighet til å evaluere strukturen, organiseringen og patologi av blod fartøy. Fremgangsmåten som er beskrevet i dette manuskriptet krever flere ferdigheter og teknikker som dyr håndtering og forberedelse, bildeopptak og kvantifisering av resultatene. Denne artikkelen har vist en anvendelse av vaskulær perfusjon å identifisere aortopathies i mus. Videre studier er nødvendig for å vurdere brukbarheten i andre dyremodeller og sykdom prosesser.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne ikke avsløre.

Acknowledgments

Vi vil gjerne takke Mark Smith for hans hjelp med røntgen bildebehandling. Dette arbeidet er støttet av NIH T32 tilskudd for tverrfaglig forskning i hjerte sykdom (BOA), American Heart Association (SMC) og NIH R35 Grant (DKS).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Microfil Flow Tech, Inc MV-122 We use yellow, a different color can be ordered as desired. Kit includes MV-Compound, MV-Diluent, and MV-Curing Agent.
Heparin (1000 U/mL) Sagent Pharmaceuticals 25021-400-10
Phosphate buffered saline Corning 21-031-CV
Isoflurane Vet One, MWI 502017
3-Aminopropionitrile fumarate salt Sigma-Aldrich A3134
Single syringe pump Fisher Scientific 14-831-200
27-gauge scalp vein set needle Exel Int 26709 27G x 3/4", 12" tube
Inveon Micro-CT scanner Siemens Medical Solutions
Osirix MD Pimxmeo SARL Version 8.0.2
Inveon Research Workplace Siemens Medical Solutions Version 4.2
Rodent Chow Harlan Teklad 2018sx

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Meszaros, I., et al. Epidemiology and clinicopathology of aortic dissection. CHEST. 117 (5), 1271-1278 (2000).
  2. Kochanek, K. D., et al. Deaths: final data for 2009. National Vital Statistics Reports. 60 (3), 1-116 (2011).
  3. Li, J. S., Li, H. Y., Wang, L., Zhang, L., Jing, Z. P. Comparison of beta-aminopropionitrile-induced aortic dissection model in rats by different administration and dosage. Vascular. 21 (5), 287-292 (2013).
  4. Huffman, M. D., Curci, J. A., Moore, G., Kerns, D. B., Starcher, B. C., Thompson, R. W. Functional importance of connective tissue repair during the development of experimental abdominal aortic aneurysms. Surgery. 128 (3), 429-438 (2000).
  5. Wu, D., Shen, Y. H., Russel, L., Coselii, J. S., LeMaire, S. A. Molecular mechanisms of thoracic aortic dissection. Journal of Surgical Research. 184 (2), 907-924 (2013).
  6. Bruel, A., Ortoft, G., Oxlund, H. Inhibition of cross-links in collagen is associated with reduced stiffness of the aorta in young rats. Atherosclerosis. 140 (1), 135-145 (1998).
  7. Martinez-Revelles, S., et al. Lysyl oxidase induces vascular oxidative stress and contributes to arterial stiffness and abnormal elastin structure in hypertension: Role of p38MAPK. Antioxidants & Redox Signaling. 27 (7), 379-397 (2017).
  8. Kumar, D., Trent, M. B., Boor, P. J. Allylamine and beta-aminopropionitrile induced aortic medial necrosis: Mechanisms of synergism. Toxicology. 125 (2-3), 107-115 (1998).
  9. Ren, W., et al. β-Aminopropionitrile monofumarate induces thoracic aortic dissection in C57BL/6 mice. Scientific Reports. 6, 28149 (2016).
  10. Kanematsu, Y., et al. Pharmacologically-induced thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice. Hypertension. 55 (5), 1267-1274 (2010).
  11. Weyers, J. J., Carlson, D. D., Murry, C. E., Schwartz, S. M., Mahoney, W. M. Jr Retrograde Perfusion and Filling of Mouse Coronary Vasculature as Preparation for Micro Computed Tomography Imaging. J Vis Exp. (60), e3740 (2012).
  12. Cortell, S. Silicone rubber for renal tubular injection. Journal of Applied Physics. 26 (1), 158-159 (1969).
  13. Bentley, M. D., Ortiz, M. C., Ritman, E. L., Romero, J. C. The use of microcomputed tomography to study microvasculature in small rodents. American Journal of Physiology - Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 282 (5), R1267-R1279 (2002).
  14. Marxen, M., et al. MicroCT scanner performance and considerations for vascular specimen imaging. Medical Physics. 31 (2), 305-313 (2004).
  15. Yang, J., Yu, L. X., Rennie, M. Y., Sled, J. G., Henkelman, R. M. Comparative structural and hemodynamic analysis of vascular trees. American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology. 298 (4), H1249-H1259 (2010).
  16. Jia, L. X., et al. Mechanical stretch-induced endoplasmic reticulum stress, apoptosis, and inflammation contribute to thoracic aortic aneurysm and dissection. The Journal of Pathology. 236 (3), 373-383 (2015).
  17. Kurihara, T., et al. Neutrophil-derived matrix metalloproteinase 9 triggers acute aortic dissection. Circulation. 126 (25), 3070-3080 (2012).
  18. Dillavou, E. D., Buck, D. G., Muluk, S. C., Makaroun, M. S. Two-dimensional versus three-dimensional CT scan for aortic measurement. Journal of Endovascular Therapy. 10 (3), 531-538 (2003).
  19. Muratoglu, S. C., et al. LRP1 protects the vasculature by regulating levels of connective tissue growth factor and HtrA1. Arterioclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 33, 2137-2146 (2013).
  20. Badea, C. T., Dragova, M., Holdsworth, D. W., Johnson, G. A. In vivo small animal imaging using micro-CT and digital subtraction angiography. Phys Med Biol. 53 (19), R319-R350 (2008).
  21. Zhou, Y. Q., et al. Ultrasound-guided left-ventricular catheterization: A novel method of whole mouse perfusion for microimaging. Laboratory Investigation. 84, 385-389 (2004).

Tags

Medisin problemet 137 aortaaneurisme aorta disseksjon dyr modeller for menneskelig sykdom β-aminopropionitrile i vivo bildebehandling micro-datastyrt tomografi
Kvantitativ mikro-CT analyse av Aortopathy i en musemodell av β-aminopropionitrile-indusert aortaaneurisme og disseksjon
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Aicher, B. O., Mukhopadhyay, S., Lu, … More

Aicher, B. O., Mukhopadhyay, S., Lu, X., Muratoglu, S. C., Strickland, D. K., Ucuzian, A. A. Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of β-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection. J. Vis. Exp. (137), e57589, doi:10.3791/57589 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter