Kronisk okulær hypertensjon er indusert ved å bruke en circumlimbal Sutur i rotter og mus, fører til funksjonelle og strukturelle forringelse av netthinnen ganglieceller konsekvent med glaukom.
Det circumlimbal suture er en teknikk for å indusere eksperimentelle glaukom i gnagere av kronisk heve intraokulært trykk (IOP), en kjent risikofaktor for glaukom. Denne protokollen demonstrerer en trinnvis veiledning på denne teknikken i lang Evans rotter og C57BL/6 mus. Under narkose brukes en “vesken-streng” Sutur på Konjunktiva, rundt ekvator og bak limbus av øyet. Andre øyet fungerer som en ubehandlet kontroll. Over varigheten av vår studie, som var en periode på 8 uker for rotter og 12 uker for mus, forble IOP opphøyet, målt regelmessig ved etterpå tonometry i bevisst dyr uten aktuell bedøvelse. I begge arter viste sutured øynene electroretinogram funksjoner samsvar med fortrinnsrett indre retinal dysfunksjon. Optical coherence tomografi viste selektiv fortynning av netthinnen nerve fiber laget. Histology av rotte netthinnen tverrsnitt funnet redusert celle tetthet i ganglion celle laget, men ingen endring i andre cellulære lag. Farging av flat-montert musen retinae med en ganglion celle spesifikk markør (RBPMS) bekreftet ganglion celle tap. Det circumlimbal suture er en enkel, minimal invasiv og kostnadseffektiv måte å indusere okulær hypertensjon som fører til ganglion celle skade både rotter og mus.
Dyremodeller gir en viktig plattform for laboratoriet undersøkelse av mobilnettet behandler underliggende glaukom patogenesen, samt for å vurdere potensielle terapeutiske tiltak. Flere induserbart modeller er utviklet for å produsere vedvarende intraokulært trykk (IOP) høyde, viktigste risikofaktor for glaukom. Metodene som er brukt for å heve IOP omfatter: hypertonic saltvann injeksjon i episcleral vener1, laser photocoagulation av trabekulært meshwork2 eller limbal årer3og intracameral injeksjon av stoffer som Ghost røde blodlegemer4, microbeads5,6 og viskoelastiske agenter7. Begge fremgangsmåtene har sine fordeler og begrensninger.
En god modell for glaukom bør etterligne sykdommen prosessen, med minimal complication som traumer, betennelse og media tetthet. Disse komplikasjonene er ofte forbundet med fremgangsmåtene brukes å indusere IOP høyde, og kan skamme tolkning av resultatene. For eksempel har paracentesis av fremre kammer, selv når utenlandske stoffer ikke er innført, vist seg å forårsake traumer og betennelse som ikke er representative for typiske glaucomatous endre8,9. I tillegg til betydningen av unngå betennelse, forenkler opprettholde optisk klarhet i vivo bildebehandling og elektrofysiologi overvåke sykdomsprogresjon. Uklart i hvilken grad disse komplikasjonene kan påvirke sykdom undersøkelser, kan det være bedre å unngå gjennomtrengende øyet under modell Innledning. Circumlimbal Sutur tilnærming unngår penetrasjon av verden og forenkler i vivo langsgående vurdering av netthinnen struktur og funksjon. Enda viktigere, denne modellen er forskjellig fra de i sin evne til å returnere IOP til opprinnelige verdier ved fjerning av suture etter behov. IOP normalisering kan være nyttig for å studere mobilnettet og molekylære korrelerer reversible og irreversible ganglion celle skade,10,,11,,12,,13,,14.
Denne artikkelen fokuserer på teknikken for modell induksjon. Karakteristikk av retinal skade forårsaket av denne modellen i rotter og mus kan finnes andre steder nærmere15,16,17,18,19.
Det circumlimbal suture er en ny modell av kronisk okulær hypertensjon. I tillegg til studiene som representant resultatene er Hentet fra16,18, blitt denne dyremodell benyttet i en rekke nyere studier15,23,24,25 ,26. Sammenligninger mellom disse tidligere rapporter viser at metoden gir repeterbare re…
The authors have nothing to disclose.
Dette arbeidet er finansiert av National Health and Medical Research Council of Australia prosjekt stipend (1046203), australsk Research Council fremtiden Fellowship (FT130100338).
normal saline | Baxter International Inc | AHB1323 | Maintain corneal hydration during surgery |
Chlorhexadine 0.5% | Orion Laboratories | 27411, 80085 | Disinfection of surgical instrument |
Isoflurane 99.9% | Abbott Australasia Pty Ltd | CAS 26675-46-7 | Proprietory Name: Isoflo(TM) Inhalation anaaesthetic. Pharmaceutical-grade inhalation anesthetic mixed with oxygen gas for suture procedure |
ocular lubricant | Alcon Laboratories | 1618611 | Proprietory Name: Genteal, ocular lubricant to keep the other eye moist |
Needle holder (microsurgery) | World Precision Instruments | 555419NT | To hold needle during ocular surgery |
Proxymetacaine 0.5% | Alcon Laboratories | CAS 5875-06-9 | Topical ocular analgesia |
Scissors (microsurgery) | World Precision Instruments | 501232 | To cut excessive suture stump during ligation |
Surgical drape | Vital Medical Supplies | GM29-612EE | Ensure sterile enviornment during surgery |
Suture needle for rats (microsurgery) | Ninbo medical needles | 151109 | 8-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm |
Suture needle for mice (microsurgery) | Ninbo medical needles | 160905 | 10-0 nylon suture attached with round needle, cutting edge 3/8, dual-needle, suture length 30cm |
Tweezers (microsurgery) | World Precision Instruments | 500342 | Manipulate tissues during ocular surgery |
rebound tonometer | TONOLAB, iCare, Helsinki, Finland | TV02 | for intraocular pressure monitoring |