Summary
ويقدم هذا البروتوكول نموذج الفئران في فيفو من اللاصق. ويشمل النموذج تثبيت داخلي من جلينوهوميرال المشترك مع التثبيت خياطة خارج المفصلي لتمديد وقت، أسفر عن مجموعة تناوب انخفاض الحركة (ROM) وزيادة صلابة مشتركة.
Abstract
ويهدف هذا الاقتراح لإنشاء نموذج الفئران في فيفو من اللاصق للبحث عن خيارات العلاج المحتملة لهذا الشرط ومسببات أخرى من أرثروفيبروسيس قابلة للمقارنة. ويشمل النموذج التثبيت خارج مفصلي الكتف في الفئران عن طريق المنكب على خياطة عضدي، أدى انكماش ثانوي دون غزو الفضاء داخل المفصل، ومما أدى إلى تناقص ROM التناوب والمشترك زيادة صلابة.
ونحن تستخدم الفئران سبراغ داولي 10 أغراض هذه الدراسة. أخذ القياسات ROM الأساس قبل تجميد جلينوهوميرال. الفئران تعرضوا لمدة 8 أسابيع للتثبيت قبل إزالة خيوط التثبيت وتم تقييم التغييرات في ROM وتيبس المفاصل. لتقييم ما إذا كان التثبيت أدت إلى انخفاض كبير في ROM، حسبت التغييرات في علم الحركة. وتم قياس في كل نقطة الوقت في فترة المتابعة ROM وتمت مقارنة بخط الأساس القياسات ROM الداخلية والخارجية. من أجل تقييم صلابة، وحركية مشتركة حسبت بتحديد الاختلافات في عزم الدوران (text وتيint ) اللازمة للوصول إلى تناوب 60 ° الأولية الخارجية والداخلية التناوب الأولى من 80 درجة.
بعد إزالة تثبيت خياطة خارج مفصلي في متابعة اليوم 0، وجدنا انخفاض نسبة 63 في المائة في مجموع مدمج بالمقارنة مع خط الأساس. لاحظنا التحسن المستمر حتى الأسبوع 5 للمتابعة، مع التقدم تباطؤ حول تقييد 19%. في الأسبوع 8 للمتابعة، كان لا يزال هناك قيداً 18% من "rom. وبالإضافة إلى ذلك"، في متابعة اليوم 0، وجدنا عزم الدوران بنسبة 13.3 نم عند مقارنة بخط الأساس. في الأسبوع 8، وتم قياس عزم الدوران الإجمالي أن 1.4 ± 0.2 نم أعلى من القياسات الأولية. ويدخل هذا العمل نموذج الفئران من الكتف اللاصق مع دائم ROM انخفاض وزيادة صلابة.
Introduction
اللاصق من على الكتف وكثيراً ما يشار إلى تجميد الكتف أو تقفع الكتف. ويتميز جلينوهوميرال تقييد الحركة والألم، ويفترض أنها نتيجة التليف المتقدم وانكماش المشتركة1،،من23. الشرط ينطوي على تعيين الخلية تنتجها الخلايا الليفية واروميه مع مصفوفة الكولاجين كثيفة الناتجة (أنواع الأول والثالث) في كبسولة مشتركة2،3. وهناك العديد من عوامل الخطر المحتملة لتطوير انكماش مشتركة، بما في ذلك الجنس ومرض البول السكري، وفرط، والإصابات الرضية وتجميد طويلة4،،من56.
تفتقر إلى خيارات العلاج الفعال ومعظمها يشمل العلاج الطبيعي، مع التدخل في شكل الإفراج عن العمليات الجراحية في الحالات القصوى التي لم تتحسن مع الرعاية المحافظين. أن أسلوب العلاج بأفضل ما زال غير محدد وكانت موضع اهتمام كبير لسنوات في المجال الطبي7،8. تطوير خيارات علاجية جديدة يتطلب نموذج قابل لإعادة الإنتاج الحيواني للشرط الذي لا يعتمد على الصدمة المستحثة داخل المفصل. ينبغي أن يشمل النموذج الأمثل اللاصق اثنين من الخصائص الرئيسية لهذا المرض: انكماش الكبسولة الكتف وتخفيض فترات طويلة في نطاق الحركة (ROM). شولميير et al. 9 وصف واحد من النماذج تقفع المشتركة الأولى باستخدام المدلى بها لتطوير انكماش الكتف في الأنياب. وأفادوا أيضا أن التغيرات في الضغط داخل المفصل ومدمج عادت إلى مستوياتها العادية بعد وقف تجميد9. بيد أن قيداً هاما المذكورة في الدراسة هو التباين في موقف أطرافهم بين الحيوانات بسبب استخدام تقنية المدلى بها. للحصول على نموذج أكثر استنساخه، كانو et al. بعد ذلك قدم 10 نموذج الفئران اللاصق باستخدام التثبيت الداخلية جامدة من الكتف. ومع ذلك، على الرغم من أنها حققت انخفاضا كبيرا في ROM مع نموذجهم، أنهم لم تذكر ما إذا كانت هذه التغييرات مؤقتة أو طويلة الأمد. وكان هدف دراستنا لخلق مناسبة في فيفو كتف انكماش الفئران نموذج التحقيق أثر التثبيت المشترك جلينوهوميرال مفصلي خارج فترات طويلة على ROM وتيبس المفاصل.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمت الموافقة على الدراسة برعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجنة في بيت إسرائيل ديكونيس الطبي. وكان الحرص على تجنب التخدير فترات طويلة لا داعي لها، وأيضا لتجنب انخفاض درجة حرارة الجسم. مرجح في كل دورة قياس ROM الحيوانات وترصد لفقدان الوزن.
1-دراسة الموضوعات
- استخدام الفئران سبراغ داولي 10 أسابيع 13 من العمر في ذلك الوقت لعملية جراحية، والتي تتراوح بين 250-300 غرام وزن الجسم.
2-الجراحة
- تحت التخدير وقبل التثبيت الجراحي، قياس عزم الدوران الأساس كدالة لزاوية الدوران بين 60 التناوب الخارجي و 80 درجة الاستدارة الداخلية (راجع الخطوة 5).
-
التخدير مع إيسوفلوراني 5% عن طريق الاستنشاق في دائرة التعريفي لحمل، وإدامة ثم مع إيسوفلوراني 2% من خلال مخروط الآنف طوال عملية جراحية.
- استخدم عنصر تسخين المياه على أساس تحت الحيوان للحفاظ على درجة حرارة الجسم أثناء التخدير.
- غرض السيطرة على الألم، إدارة الإفراج المستدام البوبرينورفين تحت الجلد عند جرعة قدرها 1.2 ملغ/كغ تبعاً لوزن الجسم في الفئران.
-
المفاصل إيموبيليزي جلينوهوميرال اليسرى بزاوية 60 درجة من الاختطاف (الزاوية بين رمح عضدي والعمود الفقري المنكب)10 , 11-
- بدء العملية الجراحية مع شق طولي الخلفي، وبالتوازي مع رمح عضدي. جعل شق الجلد فقط دون جلينوهوميرال المشتركة وتمتد لحوالي 3 سم.
- استخدام خيوط 2 (البوليستر مجدول) إلى شل المشتركة جلينوهوميرال، بثقب عبر الحافة الجانبية للكتف وحوالي ثلثي رمح عضدي البعيدة، وتشديد في وقت لاحق كما هو موضح في الشكل 1A. تتخذ مزيدا من الجهد لتجنب تقيد الهياكل الحيوية مثل شريان عضدي.
ملاحظة: تقنية جراحية له ميزة كونها قادرة على الحد المشترك جلينوهوميرال في 60° الاختطاف (Z) دون التأثير على خطط أخرى (X و Y). عن طريق وضع خيوط حول عظم العضد ومن خلال الحدود الجانبية للكتف، حققت تقريبي للبنيتين والإبقاء على الطائرة بليد المنكب. بعد تشديد خياطة الجروح، الذراع هو ثابتة في موقف يستريح عند النظر في طائرات X و Y وفي 60° لاختطاف عندما يعتبر الطائرة Z. ويعتقد هذا الحد من تقلب بين الحيوانات التي قد تنشأ من عدم ضبط الموقف المشترك في هذه الخطط الثلاث.
3-إغلاق شق
- بعد الأرقاء السليم، إغلاق شق الجلد باستخدام قصاصات الجلد.
- وقف التخدير، والسماح للحيوان لاسترداد تحت إشراف في بيئة دافئة. بعد الحيوان يستعيد وعيه كافية للحفاظ على ريكومبينسي القصية، العودة إلى قفصة.
- مباشرة بعد هذا الإجراء، السماح للحيوانات بالعودة إلى النشاط العادي. تسمح للحيوانات التحرك دون قيود، تعتمد أساسا على خيوط داخلية لإصلاح المشترك جلينوهوميرال.
- لمراقبة العدوى المحتملة، تفتيش المواقع شق يوميا خلال الأسبوع الأول بعد الجراحة.
- إزالة مقاطع الجرح في اليومال 10 بعد الجراحة.
ملاحظة: كان هناك لا تلاعب العضلات أثناء الإجراء، والأسلوب الذي لا ينطوي على أي صدمة داخل المفصل، ومن ثم الحفاظ على استمرارية الحافظة ومفصلي وسلامة التشريحية. وتلت لا الحد وكبح جماح لا النشاط الخارجي في لدينا بروتوكول. - توفير الحقن تحت الجلد بجرعة 1.2 ملغ/كغ، بدءاً من تحريض التخدير التسكين استخدام البوبرينورفين الإفراج المستدام، وتتكرر كل ح 72 إذا لزم الأمر.
4-خياطة إزالة 8 أسابيع بعد التثبيت
- التخدير مع إيسوفلوراني 5% عن طريق الاستنشاق في دائرة التعريفي لحمل، ثم يستمر مع إيسوفلوراني 2% من خلال مخروط الآنف طوال عملية جراحية. غرض السيطرة على الألم، إدارة الإفراج المستدام البوبرينورفين تحت الجلد عند جرعة قدرها 1.2 ملغ/كغ تبعاً لوزن الجسم في الفئران.
- جعل شق على رأس الندبة من الإجراء السابق.
- قص خياطة الجروح وإزالة من عظم العضد والكتف.
- إغلاق الشق مع مقاطع الجرح.
- بحث في موقع شق يوميا خلال الأسبوع الأول للكشف عن أي علامات للعدوى. رصد الألم والحزن كذلك.
- إزالة مقاطع الجرح في اليومال 10 بعد الجراحة.
5-مجموعة من الحركة وتيبس المفاصل القياسات
-
قياس ميكانيكا الكتف ROM وسلبية قبل وبعد التثبيت باستخدام جهاز مخصص يتألف المشبك ذراع، وجمعية استشعار ومحور العجلة التمحور11. وهذا يتم بريوبيراتيفيلي (خط الأساس) ومستمر بعد إزالة خياطة.
- مقياس مدمج مباشرة بعد إزالة خياطة (يوم المتابعة 0)، وبعد ذلك مرتين في أسبوع.
- خفض القياسات مرة واحدة أسبوعيا، تغيير عند تسجيل أقل من 10% من هذه النقطة الزمنية السابقة.
ملاحظة: بعد إجراء اختبار ROM لأسابيع، جمهورية الجبل الأسود كل حيوان لم تتغير جذريا بين اختبار النقاط الزمنية (تغيير أقل من 10%). جمهورية الجبل الأسود على ما يبدو الهضبة عند هذه النقطة، ولذلك شعرنا أنه يكفي تقليل تكرار الاختبار من مرتين في أسبوع إلى مرة واحدة في أسبوع.
- القيام بقياسات تحت التخدير استخدام isoflurane عبر المبخر الدقة في 5% لتحريض و 2% للصيانة لكامل طول الداخلي (حوالي 5 دقائق)، تيسيرا لقياس كفاءة. استخدم عنصر تسخين المياه على أساس تحت الحيوان للحفاظ على درجة حرارة الجسم أثناء التخدير.
- موقف الحيوان بشكل صحيح لقياس مدمج مع المعونة من دليل الليزر. موقف فوريليمب على ذراع المشبك في الانحناء إلى الأمام 90 درجة، مع المحور الاستشعار محاذي للمحور الطويل لعظم العضد. تأمين فوريليمب من المعصم والكوع كما هو موضح في الشكل 1 باء.
- التحكم بالتناوب فوريليمب السلبي بمحرك السائر تقييم مدمج وعزم الدوران بطريقة متسقة. التحكم في المحرك السائر مع متحكم. استخدام مدخلات من الميل، بالتزامن مع تلك من جهاز استشعار عزم للإشارة إلى بداية ونهاية للقياسات.
- قم بتوصيل متحكم دقيق إلى الكمبيوتر والتحكم باستخدام رمز MATLAB نمواً داخليا.
- لقياسات أساسية فقط، دورة الجمعية العامة استشعار 3 مرات بين 60 التناوب الخارجي و 80 درجة الاستدارة الداخلية للحصول على قياسات العزم الأولية (الخارجية: text والداخلية: تيint) للمقارنة فيما بعد.
- لقياسات ROM، استخدام قيم عزم كل الحيوانات في قياسات خط الأساس الخاصة بها (text وتيint) كمتغيرات الإدخال مسبقاً في البرنامج للكشف عن التغييرات في تناوب "استخدام rom." قياسات أساسية كمقارنة وقف نقطة للقياسات ROM اللاحقة. تم الكشف عن التغييرات مع قرار 0.2°.
- لقياسات صلابة، استخدام زوايا التناوب الأصلي 60° التناوب الخارجية والداخلية التناوب 80 درجة كمدخل مسبقاً في البرنامج من أجل الكشف عن التغييرات في عزم الدوران. تم الكشف عن التغييرات بدقة 0.01 نم.
- وزن الحيوانات في اليوم نفسه ككل تقييم ROM. ضع الحيوانات في جداول وسجل بها الجماهير. واستخدمت هذه البيانات كواحدة من الأدوات لتقييم الوضع الصحي للحيوان أثناء الدراسة.
- في أعقاب الانتعاش، تعود الفئران إلى اقفاصها ورصد لعلامات الألم أو المعاناة. في جميع أنحاء هذا الاختبار، تركت لا الحيوان دون حتى قد وعيه كافية للحفاظ على ريكومبينسي القصية.
ملاحظة: قياسات مدمج وعزم الدوران تحققت مع جهاز مخصص، ذكرت سابقا بمجموعتنا {فيلا-كاماتشو 2015}. الجهاز هو رقصة مصنوعة خصيصا يتكون من رمح تدويرها بواسطة السائر موتور والتحكم بواسطة MATLAB برنامج نصي مخصص. تستخدم وحدة قياس القصور الذاتي وعزم الدوران استشعار التقاط عزم الدوران وقم بوضع البيانات أثناء صياغة للعينة.
6-بعد الوفاة إيمونوهيستولوجيك التحليل
- في نهاية فترة 8 أسابيع ROM القياس، euthanize الفئران مع التعرض2 CO.
- تشريح كلا اليسار (معطلة) والحق الكتفين (مراقبة صحية) ديسارتيكولاتينج عظم العضد من الزند، وتقطيع الكتف من الترقوة وتجويف الصدر.
- إصلاح الكتفين قصت في حل من 10% فورمالين مخزنة محايدة لمدة 3 أيام، تليها ديكالسيفيكيشن في إيجاد حل للإيثيلين حمض (يدتا) 10% على درجة الحموضة 7.4 لآخر شهرين.
- أثناء هذه العملية، وضع العينات على شاكر دورة الانفعالات لطيف وتخزينها في 4 درجات مئوية. رصد ديكالسيفيكيشن جلينوهوميرال المشترك مع أسبوعية ميكروكومبوتيد التصوير المقطعي (uCT) مسح.
ملاحظة: يدتا هو عامل شيلاتينغ التي تربط أيونات الكالسيوم من البلورة الاباتيت السطح الخارجي، الحد تدريجيا من كريستال حجم12،،من1314. هذه العملية بطيئة للغاية ولطيف، ويتم استخدامه للكشف عن عناصر محددة من الأنسجة التي يجب الحفاظ عليها لتقنيات مثل إيمونوهيستوتشيميستري (المدينة). المعدل الذي ديكالسيفيس يدتا العينة اعتماداً على درجة الحموضة وتركيز للحل. من حيث درجة الحموضة، تتراوح من 7 إلى 7-4، مع حلول أكثر قلوية التعجيل بسرعة ديكالسيفيكيشن. ومع ذلك، يمكن أن تلحق الضرر الحلول مع أعلى مستويات الحموضة العناصر الرئيسية الأنسجة. وباﻹضافة إلى ذلك، تركيز يدتا المعتادة لمثل هذه التجارب يكمن بين 10 في المائة إلى 14 في المائة، ولكن من المهم جداً أن نتذكر أن يصبح استنفاد عامل نشط مرة واحدة من السندات للكالسيوم، حيث يتطلب هذا استبدال السائل ديكالسيفيكيشن على الأقل من 3 إلى 4 مرات كل أسبوع15. - متى تم إبرام عملية ديكالسيفيكيشن، جبل جلينوهوميرال المفاصل في أكوام البارافين لتقطيع غذائها. توجيه العينات للسماح للشرائح الاكليلية. الشرائح التي تم الحصول عليها على عمق 50% من الرأس عضدي (مركز، ومنتصف-التاج) ويرد في الشكل 1. أداء المناعي تلطيخ استخدام أسلوب البيروكسيديز-مكافحة-البيروكسيديز للدلالة على وجود أنسجة تليفية في المشترك. 4 , 9 , 10 , 16
- إجراء استرداد مستضد باشعاع الموجات الدقيقة بغمر الشرائح في جرة كوبلين بلاستيك في حل المخزن مؤقت سترات الصوديوم (سترات الصوديوم 10 ملم، 0.05% 20 توين، pH 6.0، يسخن لمدة 5 دقائق في 95 – 100 درجة مئوية) ووضع في فرن ميكروويف عادية لمدة 10 دقائق في المتوسط من السلطة. السماح للشرائح لتبرد لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.
- تنفيذ حظر مع مصل الماعز لمدة 30 دقيقة، واحتضان العينات مع ماوس أساسي أحادية الاستنساخ جسم (تخفيف 1: 400) إلى فيبرونيكتين بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية.
- بعد الحضانة مع جسم الأولية، غسل العينات مرتين مع برنامج تلفزيوني (0.5 ميكروغرام/مل) لمدة 10 دقائق؛ واحتضان مع جسم ثانوية، الماعز أنتيموسي IgG-البيروكسيديز المتقارن (تخفيف 1: 400) لمدة 30 دقيقة.
- تغسل العينات مرتين مع برنامج تلفزيوني (2.5 ميكروغرام/مل) في شاكر لمدة 10 دقائق، وفضح إلى 3,30-ديامينوبينزيديني تيتراهيدرو-كلوريد و 30% بيروكسيد الهيدروجين في الظلام لأدنى 10 كونتيرستين مع الهيماتوكسيلين كرزي.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
نطاق الحركة
0 يوم المتابعة، وجدنا انخفاض نسبة 63 في المائة في مجموع مدمج بالمقارنة مع خط الأساس (ف <.001. لاحظنا تحسن تدريجي لجمهورية الجبل الأسود حتى الأسبوع 5 للمتابعة، عندما توقف التقدم في تقييد 19% (ف < 0.001). القيود المتبقية، 18% من مجموع مدمج، كان لا يزال واضحا في 8 أسابيع متابعة (ف < 0.001).
تصلب
في اليوم 0 من المتابعة، وجدنا زيادة قدرها 13.3 نم في عزم الدوران الإجمالي بالمقارنة مع خط الأساس (ف < 0.001)؛ 8.9 نم خارجياً (P =.002) ونم 4.4 داخليا (ف < 0.001) وأسفرت عن زيادة 138.8% في عزم دوران خارجي، 159.6% زيادة في عزم الدوران الداخلي وإجمالي 149.2% زيادة عزم الدوران الإجمالي. الأسبوع 8 للمتابعة، وجدنا عزم الدوران يقاس المجموع أن 1.4 ± 0.2 نم أعلى من خط الأساس (ف = 0.115)، مع زيادة نم 0.6 ± 0.1 من عزم الدوران الخارجي (ف = 0.369) و 0.7 ± 0.2 نم زيادة عزم الدوران الداخلي (P = 0.036). وهذا يشير إلى عزم دوران يزيد 10% خارجياً و 25.7% داخليا، بزيادة 17.9 في المائة العام. في بداية الأسبوع بعد العمليات الجراحية 3، استقرت تحسين صلابة.
نتائج نسيجية
كما يظهر في الشكل 2 أ، عرض مجموعة سليمة الفصل السليم بين الكبسولة وسطح مفصلي منظمة الخلوية العادية ورأس الفخذ. وبالإضافة إلى ذلك، لوحظ أيضا المنظمة الخلوية العادية في الأنسجة الزليلي والغضروف المفصلي. ومع ذلك، الفريق المعطل تداولها جراحيا يظهر أدلة التصاقات الحافظة في الجانب السفلي من جلينوهوميرال المشتركة. وعلاوة على ذلك، تظهر الأنسجة المحيطة لتكون أكثر كثافة بالمقارنة مع أكتاف سليمة، مما يؤدي إلى تشديد كبسولة مع انخفاض مساحة مشتركة (الشكل 2). إظهار الشرائح الملون فيبرونيكتين زيادة سمك الحافظة في الفريق الجراحي المتعاقد عليها (الشكل 2). بالمقارنة مع ضوابط صحية (الشكل 2A). يتم الاتفاق مع سبق الإبلاغ عن الأدب في نماذج حيوانية للتثبيت المشترك10 هذه النتائج ودعم إنشاء نموذج تقفع السليم.
رقم 1: اختبار الجهاز. (أ) التثبيت من جلينوهوميرال المشترك مع خيوط البوليستر مجدول 2، مرت بشدة بين الحافة الجانبية المنكب والعضد؛ (ب) جهاز مخصص لقياس الكتف ROM والسلبية؛ أ) رصد السائر. تشكل جمعية استشعار تتكون من ب) استشعار العزم رد فعل) و (ج) جهاز استشعار توجه. د) المشبك ذراع. الداخلية (ج) أو (د) التناوب الخارجي المشترك جلينوهوميرال11. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
رقم 2: شرائح الاكليلية رئيس عضدي. صورة ملطخة فيبرونيكتين (المدينة) التي تم الحصول عليها في 40 X التكبير. شريط المقياس = 200 ميكرومتر. (A) صحية عنصر التحكم. (ب) مراقبة العمليات الجراحية. مخطط الأسهم الحمراء سمك الحافظة المشتركة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 3: نطاق الحركة مقابل تطبيع عزم الدوران لكل المفاصل جلينوهوميرال الفئران صحية وتقييد جراحيا. يتم الرمز إلى التناوب الداخلية كما تناوب الخارجية الإيجابية، والسلبية. المنطقة المظللة تبين 95% "فاصل الثقة" (CI). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
تقدم هذه الدراسة نموذج الفئران من اللاصق من الكتف من خلال التثبيت الداخلي المشترك جلينوهوميرال. وعلاوة على ذلك، فإنه يظهر إلى تخفيض مجموع ROM موسعة لمدة 8 أسابيع على الأقل بعد إزالة تثبيت البرنامج. ولحساب التعديلات في ROM في نقاط زمنية مختلفة، تم مقارنة القياسات الحيوان خطوط محددة. وفي المقابل، كانو et al. 10 المستخدمة عزم موحد لجميع الحيوانات من أجل تحديد التغييرات السابقين فيفو مدمج.
في عام 2008، سارفير et al. 17 تقريرا عن تيبس المفاصل الكتف الناتجة عن تثبيت خارجي غير الجراحية. الدراسة أظهرت زيادة عابرة في تيبس المفاصل بعد التثبيت من جروح وتعامل الكتفين، التي تم حلها بالأسبوع 8 للمتابعة. ومع ذلك، في هذه الدراسة، لم نجد علاقة خطية بين عزم الدوران وزاوية، بل متعدد حدود تناسب (الشكل 3). وعلاوة على ذلك، فقط وجدنا اختلاف مهم إحصائيا في تيبس المفاصل بالمقارنة مع خط الأساس خلال التقييم الداخلية التناوب، حيث استمرت زيادة 25.7 في المائة في صلابة بعد 8 أسابيع التثبيت.
استخدمنا القياسات مدمج وصلابة خط الأساس لكل الحيوانات كالمراقبة الداخلية الخاصة بها. نظراً للاختلاف المحتملة بين الحيوانات18، استخدام الكتف كونترالاتيرال للحيوان نفسه كالمراقبة الداخلية يزيد من صحة الداخلية ويساعد على تقليل عدد الحيوانات اللازمة.
واحد أوجه قصور دراستنا أن الجهاز الذي يستخدم لقياس ROM عدم استقرار الكتف. بيد كتف الفئران تتجه أكثر منحرف بالتناوب إلى أعلى أكثر مما في البشر. وجود الفئران في موقف ضعيف ينبغي نظرياً التحكم لإمالة المنكب كما تقع على الكتف ضد لوحة الراسخ للرقصة الاختبار. تحديد مزيد من الدراسة أن نقيم فقط التناوب الداخلية والخارجية-تناوب جلينوهوميرال المشتركة. وهذا جزئيا إلى أن الاختطاف والانحناء والأنشطة العامة تتطلب تثبيت خارجي شامل أو تقييد سكابولوثوراسيك المشتركة أثناء اختبار ROM، الأمر الذي يتطلب نظاما مختلفاً من بلدنا.
المرضية والعلاج من اللاصق ما زال ينبغي أن يفهم على نحو كاف. بغض النظر عن المسببات، فقد ثبت فإن انكماش الكبسولة التي تسبب الألم ويحد من جلينوهوميرال حركة1،،من311. وعلاوة على ذلك، أشير إلى أن هناك مشغلات التحريضية التي تسفر عن التليف المشتركة، مما تسبب في انكماش10. على الرغم من أن لدينا نموذج الفئران لا تقليد إهانة التحريضية الأولى دوبوترين الأولية، على الرغم من ذلك، فإنه كاف يتطابق حركية مميزة اللاصق وبه10،باثولوجي التغييرات19. باستدعاء هذا النموذج تخفيض دائم في ROM وزيادة صلابة مشتركة، مما يسمح بإجراء تقييم شامل للعلاجات العلاجية الحالية والمحتملة لانكماش الكتف.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
لا شيء
Acknowledgments
المؤلف يود أن ينوه السيد والسيدة توم و Froeschle فيليس لتوفير الدعم المالي لهذا المشروع.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sprague-Dawley rats | Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA | 250-300 g | |
| Surgical tool: | |||
| Injection needle | BD 1' 30 guage | ||
| Needle holder | |||
| 5% isoflurane | |||
| 2% isoflurane | |||
| Nose cone | |||
| Skalpel and skalpel holder | No. 11 scalpel | ||
| Curved hemostat forceps | |||
| Staright hemostat forceps | |||
| Tissue retractor | |||
| Toothed tissue forceps | |||
| Plain tissue forceps | |||
| Dissecting scissors | |||
| Suture scissors | |||
| Skin clip applicator | Any standard staples for wound closure | ||
| Immobilization material | Ethicon | No. 2-0 braided polyester ethibond suture was used for immobilization | |
| Other materials: | |||
| Costumized device for ROM: 1)Sensor assembly, 2)pivoting axle, 3)arm clamp | Assembly that is described in relaxin paper and adhesive capsulitis paper | ||
| Orientation sensor (part of sensor assembly) | MicroStrain Inc., Williston, VT, USA | 3DM-GX3-15 | |
| Reaction torque sensor (part of sensor assembly) | Futek Inc., Irvine, CA, USA | TFF400 | |
| Stepper Motor | SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 | https://www.sparkfun.com/products/13656 | |
| Microcontroller | Torino, Italy). | Arduino UNO, R3 | |
| MATLAB code | MATLAB 7.13.0.564, Natick, Ma, USA | ||
| Weight Scale | Ohaus |
References
- Bunker, T. D. Time for a new name for 'frozen shoulder'. British medical journal. 290 (6477), 1233-1234 (1985).
- Bunker, T. D., Anthony, P. P. The pathology of frozen shoulder. A Dupuytren-like disease. The Journal of bone and joint surgery. British volume. 77 (5), 677-683 (1995).
- Kilian, O., et al. The frozen shoulder. Arthroscopy, histological findings and transmission electron microscopy imaging. Chirurg. 72 (11), 1303-1308 (2001).
- Wang, K., et al. Risk factors in idiopathic adhesive capsulitis: a case control study. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 22 (7), e24-e29 (2013).
- Milgrom, C., et al. Risk factors for idiopathic frozen shoulder. The Israel Medical Association Journal. 10 (5), 361-364 (2008).
- Huang, S. W., et al. Hyperthyroidism is a risk factor for developing adhesive capsulitis of the shoulder: a nationwide longitudinal population-based study. Scientific Reports. 4, 4183 (2014).
- Struyf, F., Meeus, M. Current evidence on physical therapy in patients with adhesive capsulitis: what are we missing. Clinical Rheumatology. 33 (5), 593-600 (2014).
- Song, A., Higgins, L. D., Newman, J., Jain, N. B. Glenohumeral corticosteroid injections in adhesive capsulitis: a systematic search and review. Journal Of Physical Medicine And Rehabilitation. 6 (12), 1143-1156 (2014).
- Schollmeier, G., Sarkar, K., Fukuhara, K., Uhthoff, H. K. Structural and functional changes in the canine shoulder after cessation of immobilization. Clinical Orthopaedics and Related Research. 323 (323), 310-315 (1996).
- Kanno, A., Sano, H., Itoi, E. Development of a shoulder contracture model in rats. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 19 (5), 700-708 (2010).
- Villa-Camacho, J. C., et al. In vivo kinetic evaluation of an adhesive capsulitis model in rats. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 24 (11), 1809-1816 (2015).
- Liu, H., et al. Evaluation of Decalcification Techniques for Rat Femurs Using HE and Immunohistochemical Staining. BioMed Research International. 2017, 9050754 (2017).
- Gonzalez-Chavez, S. A., Pacheco-Tena, C., Macias-Vazquez, C. E., Luevano-Flores, E. Assessment of different decalcifying protocols on Osteopontin and Osteocalcin immunostaining in whole bone specimens of arthritis rat model by confocal immunofluorescence. International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 6 (10), 1972-1983 (2013).
- Sanjai, K., et al. Evaluation and comparison of decalcification agents on the human teeth. Journal of Oral and Maxillofacial Pathology. 16 (2), 222-227 (2012).
- Rolls, G. An Introduction to Decalcification. , (2013).
- Burry, R. W. Controls for immunocytochemistry: an update. Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 59 (1), 6-12 (2011).
- Sarver, J. J., et al. After rotator cuff repair, stiffness--but not the loss in range of motion--increased transiently for immobilized shoulders in a rat model. Journal of Shoulder and Elbow Surgery. 17 (1 Suppl), 108S-113S (2008).
- Macbride, M. Variations within Outbred Strains: Know Your Strains and Stocks | Taconic Biosciences. , Available from: https://www.taconic.com/taconic-insights/quality/variations-within-outbred-strains-know-your-strains-and-stocks.html (2016).
- Liu, Y. L., Ao, Y. F., Cui, G. Q., Zhu, J. X. Changes of histology and capsular collagen in a rat shoulder immobilization model. Chinese Medical Journal. 124 (23), 3939-3944 (2011).
