Summary
यहां, एक अफ़ीम वातानुकूलित जगह वरीयता (CPP) प्रोटोकॉल के लिए चूहों में लालसा की गर्मी को मापने के लिए वर्णन किया गया है ।
Abstract
दोहराया पलटा का एक प्रमुख कारण दवा के लिए तरस रहा है । दवा तड़प संयम अवधि के दौरान उत्तरोत्तर बढ़ जाती है, एक घटना दवा लालसा की मशीन का कार्यकाल । यहां, हम चूहों में लालसा की गर्मी को मापने के लिए एक अफ़ीम वातानुकूलित जगह वरीयता (CPP) प्रोटोकॉल का वर्णन । इस प्रोटोकॉल में, एक CPP प्रतिमान मुख्य रूप से somatosensory cues को रोजगार के लिए अफ़ीम की एक लंबी अवधि के इनाम स्मृति स्थापित किया जाता है । चैंबर फ्लोर की बनावट में अलग तीन चैंबर CPP बॉक्स का निर्माण किया है । सबसे पहले, जानवरों को लगातार तीन दिनों के लिए दो पक्ष कक्षों को अपनी आधारभूत वरीयता के लिए परीक्षण कर रहे हैं । फिर, वे अफ़ीम/खारा के साथ intraperitoneally इंजेक्शन और ४५ मिनट के लिए अपने गैर पसंदीदा/ कंडीशनिंग के 6 दिनों के बाद, पक्ष मंडलों को उनकी वरीयता अंतिम कंडीशनिंग सत्र के बाद विभिंन समय बिंदुओं पर 15 मिनट के लिए परीक्षण किया जाता है । इस प्रतिमान के साथ, अफ़ीम के इनाम स्मृति कम से 18 दिनों के लिए पिछले सकता है । का परीक्षण करने के लिए कि क्या उपर्युक्त प्रोटोकॉल लालसा बढ़ मॉडल कर सकते हैं, दो पक्ष कक्षों में प्रवेश की संख्या संयम अवधि के दौरान गिना जाता है । परिणाम बताते है कि प्रवेश द्वार वृद्धि हुई, सुझाव है कि CPP प्रतिमान लालसा की मशीन नकल सकता है । भविष्य के अध्ययन के लिए इस मॉडल को काम करने के लिए तंत्रिका तंत्र दीर्घकालिक स्मृति और तरस की गर्मी अंतर्निहित अध्ययन कर सकते हैं ।
Introduction
नशीली दवाओं की लत एक पुरानी कई विभिंन चरणों2के साथ1 रोग: binge/नशा, वापसी/नकारात्मक को प्रभावित करता है, और परवाना/ दवा की लत चक्र के प्रारंभिक bing/नशा चरण में, विषयों मजबूत प्रभाव2के कारण ड्रग्स ले । वापसी में/नकारात्मक मंच को प्रभावित करते हैं, विषयों नकारात्मक दैहिक और दवा की वापसी के भावनात्मक राज्यों, जो नकारात्मक सुदृढीकरण लत3के विकास के साथ जुड़े तंत्र को बढ़ावा देने के अनुभव । परवार/प्रत्याशा चरण में, विषयों, दवा से जुड़े cues या तनाव से ट्रिगर किया जा सकता है, जो विलुप्त होने के बाद दवा की मांग को बहाल । दवा की लत के पशु अध्ययन में, वातानुकूलित जगह वरीयता (CPP) मानदंड दवाओं के सकारात्मक मजबूत प्रभाव की नकल करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं4,5,6 और, इस प्रकार, यह दवा के प्रारंभिक चरण मॉडल करने के लिए प्रयोग किया जाता है व्यसनी सायकल. अफ़ीम, opioid परिवार के एक सदस्य, मस्तिष्क में opioid रिसेप्टर्स सक्रिय द्वारा एक सकारात्मक मजबूत प्रभाव पैदा करता है7,8.
CPP प्रतिमान शास्त्रीय (Pavlovian) कंडीशनिंग के सिद्धांत पर आधारित है और सामांयतः दुरुपयोग की दवाओं के पुरस्कृत प्रभाव को मापने के लिए इस्तेमाल किया, जैसे अफ़ीम4,5,9,10, अपने आसान करने के लिए कारण प्रयोगशालाओं में उपलब्धता. एक ठेठ CPP प्रतिमान तीन चरणों के होते हैं: पूर्व कंडीशनिंग, कंडीशनिंग और परीक्षण चरणों । कंडीशनिंग चरण के दौरान, एक दवा के पुरस्कृत गुण (बिना शर्त उत्तेजना) एक या एक से अधिक तटस्थ प्रासंगिक उत्तेजनाओं, जो कई कंडीशनिंग pairings के बाद पुरस्कृत गुण लाभ और वातानुकूलित उत्तेजनाओं के रूप में सेवा के साथ बनती हैं । परीक्षण चरण के दौरान, दवा के लिए जानवरों की वरीयता-युग्मित डिब्बों को मापा जाता है और उनकी पुरस्कार स्मृति के रूप में प्रतिबिंबित होता है । इस कारण से, CPP प्रतिमान भी सीखने और स्मृति के तंत्र की जांच करने के लिए प्रयोग किया जाता है । अफ़ीम की एक लंबी अवधि के इनाम स्मृति स्थापित करने के लिए, चर CPP की स्थापना को प्रभावित है कि समायोजित किया गया है और नीचे वर्णित प्रोटोकॉल11के साथ अनुकूलित । प्रासंगिक उत्तेजनाओं दृश्य, स्पर्श और गंध cues का एक संयोजन कर रहे हैं । प्रासंगिक उत्तेजनाओं और परीक्षण के समय अंक के रूपांतरों विभिंन अनुसंधान प्रयोजनों के अनुसार किए जाते हैं । हमारे पिछले अध्ययन12में उदाहरण के लिए, somatosensory cues (अलग मंजिल textures) मुख्य रूप से प्रासंगिक उत्तेजनाओं के रूप में इस्तेमाल किया गया द्वीपीय प्रांतस्था, somatosensory समारोह के साथ एक मस्तिष्क क्षेत्र, अधिग्रहण में के caudal भाग की भूमिका की जांच और दीर्घकालिक पुरस्कार स्मृति का रखरखाव । तंत्र के डिजाइन और चूहों के काम के लिए पसंदीदा/गैर पसंदीदा पक्षों CPP की स्थापना को प्रभावित करते हैं । एक दो चैंबर उपकरण के बजाय एक तीन चैंबर उपकरण के लिए मजबूर विकल्प से बचने के लिए नीचे प्रोटोकॉल में प्रयोग किया जाता है । दो पक्ष कक्षों और उन में पशुओं के प्रारंभिक काम के शेष CPP4,13के अधिग्रहण को प्रभावित करते हैं । इस प्रकार, साइड चैंबर और पशुओं के पक्षपातपूर्ण काम का एक संतुलित डिजाइन इस प्रोटोकॉल में लागू करने के लिए एक मजबूत जगह वरीयता प्राप्त कर रहे हैं । दीर्घकालिक इनाम स्मृति का रखरखाव कंडीशनिंग चरण के दौरान अधिक कंडीशनिंग परीक्षणों की आवश्यकता है । कंडीशनिंग चरण के दौरान समय की लागत को कम करने के लिए, प्रति दिन दो कंडीशनिंग परीक्षण किए जाते हैं और अफ़ीम/खारा इंजेक्शन counterbalanced में अफ़ीम की तीव्र वापसी के प्रभाव से बचने के लिए होतेहैं ।
बहाली पशु मॉडल14 दवा की लत चक्र के परवार/प्रत्याशा मंच मॉडल के लिए स्थापित किया गया है । CPP भी बहाली का अध्ययन करने के लिए है कि मॉडल नशे की लत व्यवहार को पलटा उपयोग किया जाता है5। पलटा मादक पदार्थों की लत के उपचार में बाधाओं में से एक है । लालसा दोहराया पतन का एक कारण है । दवाओं के लिए तरस संयम अवधि के दौरान लगातार बढ़ जाती है, एक घटना तरस15,16की मशीन का कार्यकाल । लालसा की मशीन व्यापक रूप से दवा स्वयं प्रशासन प्रतिमान नहीं बल्कि CPP प्रतिमान में अध्ययन किया है । CPP प्रतिमान के उपयोग के लिए तरस की गर्मी को प्रतिबिंबित पहले ली एट अल द्वारा प्रस्तावित किया गया था । 17. उनके परिणाम17 से पता चला कि अफ़ीम की कम खुराक के CPP स्कोर (1 मिलीग्राम/किलोग्राम और 3 मिलीग्राम/लेकिन एक उच्च खुराक नहीं (10 मिलीग्राम/) संयम के पहले 14 दिनों के दौरान उत्तरोत्तर वृद्धि हुई । इसी तरह, चूहों कोकीन की एक कम खुराक के साथ इंजेक्शन समय18से अधिक वृद्धि हुई CPP स्कोर दिखाया. अफ़ीम की कम खुराक की वृद्धि हुई CPP स्कोर को प्रतिबिंबित करने के लिए इस्तेमाल किया गया था मशीन तरस17। दोनों में खर्च की अवधि और दवा में प्रविष्टियों की संख्या जुड़े वातावरण को CPP प्रतिमान19में मजबूत वातानुकूलित प्रतिक्रियाओं को प्रतिबिंबित सुझाव दिया जाता है । हाल के अध्ययनों के अधिकांश CPP स्कोर का उपयोग प्रत्यक्ष या परोक्ष रूप से दवा बनती कक्षों में बिताए समय को प्रतिबिंबित करते हुए एक पैरामीटर के रूप में पक्ष कक्षों के लिए प्रविष्टियों की संख्या अक्सर उपेक्षित है । इन कारणों के लिए, 10 मिलीग्राम/किग्रा की एक अफ़ीम खुराक का इस्तेमाल किया गया था और प्रविष्टियों की संख्या हमारे अध्ययन11में मापा गया था । परिणाम बताते है कि पक्ष कक्षों के लिए चूहों के प्रवेश संयम अवधि11के दौरान काफी वृद्धि हुई । यह इंगित करता है कि दोनों CPP स्कोर और प्रविष्टियों की संख्या दवाओं और CPP प्रतिमान के लिए वृद्धि की लालसा का आकलन करने में उपयोगी मापदंडों को तरस घटना की गर्मी मॉडल के लिए लागू है । हालांकि, आवश्यक पशुओं की संख्या को कम करने के लिए, अफ़ीम के एक समूह-अनुभवी जानवरों का परीक्षण किया जाता है बार; इस प्रकार, विलुप्त होने का प्रभाव विषय डिजाइन के भीतर वर्तमान के साथ बाहर नहीं किया जा सकता है । एक ही प्रोटोकॉल के साथ विषय डिजाइन के बीच इस सीमा को दूर कर सकते हैं ।
निंनलिखित CPP प्रोटोकॉल है कि लंबी अवधि के इनाम की स्थापना की स्मृति और मॉडलिंग की लालसा में वृद्धि का वर्णन । संक्षेप में, तीन पूर्व कंडीशनिंग दिनों के बाद, चूहों को प्रति दिन दो कंडीशनिंग परीक्षणों के साथ छह कंडीशनिंग दिनों के माध्यम से जाना है और फिर विभिंन समय अंकों पर परीक्षण के बाद अंतिम कंडीशनिंग कर रहे हैं । इस CPP प्रतिमान में, एक तीन चैंबर polyvinyl क्लोराइड (पीवीसी) CPP तंत्र के रूप में इस्तेमाल बॉक्स का निर्माण किया है और तंत्र की मंजिल संतुलित है । उपकरण दो बड़े काले पक्ष कक्षों के होते है (30 सेमी × 25 सेमी × 30 सेमी, एल × डब्ल्यू × एच) और एक मध्य सफेद चैंबर (11 सेमी × 25 cm × 30 सेमी, एल × डब्ल्यू × एच) सफेद चिकनी पीवीसी फर्श के साथ । दो पक्ष कक्षों somatosensory cues के रूप में अलग मंजिल textures है: एक ग्रिड सामिल मंजिल, एक मोटा पीवीसी मंजिल के साथ अंय के साथ एक ।
Protocol
प्रायोगिक प्रक्रियाओं में राष्ट्रीय देखभाल और पशुओं के उपयोग के लिए दिशानिर्देश के अनुसार प्रदर्शन किया गया और प्रयोगों को संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया शेन्ज़ेन संस्थानों में उन्नत प्रौद्योगिकी, चीनी विज्ञान अकादमी ।
1. पशु आदी होना
- पशु प्रयोगशाला से पुरुष वयस्क चूहों प्राप्त करने और उंहें एक 12 ज प्रकाश/अंधेरे चक्र के तहत बनाए रखने के लिए (7:00 से 19:00 पर प्रकाश) भोजन और पानी के लिए स्वतंत्र पहुंच के साथ ।
- उन लोगों के साथ खेलने के द्वारा जानवरों को संभाल या दो सप्ताह के लिए उन प्रयोगों से पहले प्रति दिन दो बार ठोक ।
- बेतरतीब ढंग से खारा या अफ़ीम समूहों में पशुओं को आवंटित ।
2. औषध तैयारी
- अफ़ीम हाइडरोक्लॉराइड को 10 मिलीग्राम/एमएल और सुई चूहों intraperitoneally (आईएफसआई) के रूप में तैयार 1 मिलीलीटर/
- एक नियंत्रण के रूप में, खारा के साथ चूहों इंजेक्षन 1 मिलीलीटर की मात्रा में/
3. CPP उपकरण
- दो पक्ष कक्षों को अलग स्पर्श (मंजिल) cues और परीक्षण चूहों प्रारंभिक वरीयता के साथ एक तीन चैंबर CPP उपकरण का निर्माण । उपकरण दो बड़े काले पक्ष कक्षों के होते है (30 सेमी × 25 सेमी × 30 सेमी, एल × डब्ल्यू × एच) और एक मध्य सफेद चैंबर (11 सेमी × 25 cm × 30 सेमी, एल × डब्ल्यू × एच) सफेद चिकनी पीवीसी फर्श के साथ । दो पक्ष कक्षों somatosensory cues के रूप में अलग मंजिल textures है: एक ग्रिड सामिल मंजिल, एक मोटा पीवीसी मंजिल के साथ अंय के साथ एक ।
- तंत्र निष्पक्ष है कि सुनिश्चित करने के लिए स्पर्श cues के संयोजन में भिंनता है, एक पक्षपाती तंत्र के बाद से झूठी सकारात्मक परिणाम4उपज के लिए अतिसंवेदनशील है ।
नोट: CPP तंत्र के डिजाइन में एक महत्वपूर्ण methodological मुद्दा यह है कि क्या तंत्र "पक्षपातपूर्ण" या "निष्पक्ष"4है । अप्रशिक्षित चूहों का एक समूह एक ओर चैंबर के लिए कोई प्रारंभिक वरीयता दूसरे से पता चलता है, तो तंत्र "निष्पक्ष" माना जाता है । अंयथा, यह "पक्षपाती"13के रूप में विचार करें ।
4. CPP प्रक्रिया
- अफ़ीम प्रेरित CPP प्रतिमान की स्थापना मुख्य रूप से पिछले अध्ययन के अनुसार21,कंडीशनिंग समय अंक, कंडीशनिंग सत्र की संख्या के संशोधन के साथ22 , कंडीशनिंग परीक्षण अवधि और परीक्षण समय अंक20 . एक संक्षिप्त विवरण नीचे दिया गया है, जिसमें से प्रयोगात्मक अनुसूची चित्रा 1में दिखाया गया है ।
- प्री कंडीशनिंग फेज
- इस चरण के दौरान (दिन 1 से 3), गिलोटिन दरवाजे हटाने के लिए पूरे तंत्र के लिए स्वतंत्र पहुंच की अनुमति है और मध्य कक्ष में पशु जगह है ।
- 15 मिनट के लिए जानवरों की गतिविधि रिकॉर्ड ।
- आधार रेखा के रूप में 3 दिन पर दो पक्ष कक्षों में बिताए समय की गणना और टी0 के रूप में यह उल्लेख ।
- चूहों कि एक से कम चार बार दर्ज करें प्रयोग23 से साइड चैंबर के लिए के रूप में इन चूहों सामांय में अच्छी तरह से किया जा रहा समस्याओं की संभावना है (जैसे, गंदे फर और ट्यूमर होने) । पूरे प्रायोगिक अवधि के दौरान पशुओं की स्वास्थ्य स्थिति की जांच करें ।
- कंडीशनिंग चरण
नोट: कंडीशनिंग चरण में 6 दिन (दिन 4 से 9) शामिल होते हैं.- अफ़ीम-वातानुकूलित विषयों के लिए, अफ़ीम के साथ चूहों आईएफसआई इंजेक्षन (10 मिलीग्राम/किग्रा) या खारा (1 मिलीलीटर/) एकांतर से सुबह (9:00) और शाम (19:00) सत्र (10 एच के अलावा) ।
- सीमित चूहों तुरंत अपनी दवा के लिए प्रत्येक इंजेक्शन के बाद (गैर पसंदीदा) या खारा-युग्मित (पसंदीदा) ४५ मिनट के लिए चैंबर (आंकड़ा 1b) ।
- वीडियो रिकॉर्डिंग सिस्टम पर रखें ।
नोट: हमारे अनुभव के अनुसार, चूहों के लगभग 5% अफ़ीम के पहले इंजेक्शन के बाद श्वसन अवसाद है (10 मिलीग्राम/ ऐसी स्थिति में, श्वसन उदास चूहों के जीवित रहने की दर बढ़ाने के लिए, बाहर कंडीशनिंग चैंबर के चूहे हो, अपनी जीभ बाहर खींच और अपने घर पिंजरे में एक सफेद ऊतक कागज पर डाल दिया । - खारा-वातानुकूलित नियंत्रण के लिए, चूहों खारा इंजेक्शन (1 मिलीलीटर/CPP तंत्र के एक पक्ष कक्ष के लिए सुबह के सत्र के दौरान और दूसरी तरफ करने के लिए ४५ मिनट के लिए शाम सत्र के दौरान अफ़ीम समूह के साथ लाइन में/ 1C) ।
- परीक्षण चरण
- इस चरण के दौरान, गिलोटिन दरवाजे हटाने के लिए पूरे तंत्र के लिए स्वतंत्र उपयोग की अनुमति और मध्य कक्ष में पशु जगह उंहें स्वतंत्र रूप से 15 मिनट के लिए पूरे तंत्र का पता लगाने ।
- इस 15 मिनट के दौरान अपनी गतिविधि रिकॉर्ड ।
- तीन के बाद कंडीशनिंग परीक्षण, अर्थात्, 1 परीक्षण (T1), 2 टेस्ट (टी 2) और 3 टेस्ट (T3), 2 दिन, 10 दिन और 18 दिन एक अफ़ीम मुक्त राज्य में अंतिम कंडीशनिंग सत्र के बाद, क्रमशः (आंकड़ा 1a) ले ।
- विभिंन प्रायोगिक लक्ष्यों के लिए परीक्षण समय अंक बदलती हैं ।
नोट: आवश्यक चूहों की संख्या को कम करने के लिए, एक के भीतर विषय डिजाइन कार्यरत है. हालांकि, विलुप्त होने प्रभाव को बाहर करने के लिए, एक विषय के बीच डिजाइन की आवश्यकता है ।
चित्रा 1: प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं । (क) सम्पूर्ण CPP प्रक्रिया की प्रायोगिक प्रक्रियाएँ. (ख) अफ़ीम समूह के कंडीशनिंग चरण की प्रायोगिक अनुसूची. (ग) खारा समूह के कंडीशनिंग चरण का प्रायोगिक अनुसूची. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
5. डेटा विश्लेषण
- के रूप में अफ़ीम (खारा) समूह में CPP स्कोर की गणना: CPP स्कोर = दवा बनती में समय बिताया (गैर पसंदीदा) चैंबर/कुल समय दोनों कंडीशनिंग चैंबर में बिताया ।
- SPSS का उपयोग कर उपयुक्त सांख्यिकीय तरीकों के साथ CPP स्कोर और प्रवेश द्वार के साथ मंडलों के लिए डेटा विश्लेषण करते हैं ।
- वर्तमान सभी व्यवहार डेटा के रूप में मतलब ± sem, जहां sem मतलब की मानक त्रुटि है । मान के रूप में p < 0.05 के मानों पर विचार करें और आंकड़े में तारांकन (*) और octothorpesin (#) द्वारा इंगित करते हैं ।
Representative Results
निंनलिखित प्रतिनिधि परिणाम बताते है कि एक अफ़ीम CPP सफलतापूर्वक ऊपर वर्णित प्रोटोकॉल द्वारा स्थापित किया जा सकता है और दीर्घकालिक अफ़ीम इनाम स्मृति (चित्रा 2) बनाए रखा जा सकता है । पक्ष कक्षों के लिए प्रविष्टियों की संख्या, स्व-प्रशासन प्रतिमान में सक्रिय प्रतिक्रियाओं की संख्या के अनुरूप, अफ़ीम की मजबूत संपत्ति को दर्शाता है । प्रविष्टियों की वृद्धि की संख्या (चित्रा 3), लालसा की गर्मी का संकेत है, इस अफ़ीम CPP प्रतिमान का उपयोग कर मनाया गया ।
CPP स्मृति अंतिम कंडीशनिंग सत्र के कम से 18 दिन बाद अंतिम सकता है ।
अफ़ीम समूह में इक्कीस चूहे और खारा समूह में १० चूहे लंबे समय तक पुरस्कृत स्मृतियों की अभिव्यक्ति का परीक्षण करते थे. एक मिश्रित ANOVA समूह और परीक्षण के बीच बातचीत में महत्वपूर्ण अंतर का पता चला (एफ (3, 87) = ४.९७३, पी = ०.००३), परीक्षण (एफ 3, 87) = १८.२३७, पी < ०.००१) और समूह (एफ (1, 29) = ११.४१३, पी = ०.००२) । परीक्षणों के बीच महत्वपूर्ण अंतर (f (3, 60) = ४६.६२८, p < ०.००१) अफ़ीम समूह में नहीं, लेकिन खारा समूह (f (3, 27) = १.५७६, p = ०.२१८) एक-तरफ़ा दोहराया ANOVA द्वारा पाया गया । Bonferroni समायोजन के साथ एकाधिक तुलना विश्लेषण अफ़ीम समूह में तीन परीक्षणों और टी0 के बीच महत्वपूर्ण अंतर दिखा । के रूप में चित्रा 2में दिखाया गया है, अफ़ीम इनाम स्मृति कम से कम 18 दिनों तक चली और एक समय पर निर्भर प्रवृत्ति में कमी आई । डेटा पिछले प्रकाशित अध्ययन11से प्राप्त कर रहे हैं ।
अफ़ीम ग्रुप में साइड कंपार्टमेंट के लिए प्रवेश द्वार उत्तरोत्तर बढ़ा
अफ़ीम समूह
प्रवेश द्वार की प्रवृत्ति का परीक्षण करने के लिए, समूह (खारा-युग्मित और अफ़ीम-युग्मित) के बीच के रूप में विषयों कारक और परीक्षण (टी0, T1, टी 2 और T3) के भीतर के रूप में विषयों कारक एक मिश्रित ANOVA के लिए निर्धारित किए गए थे. समूह और परीक्षण के बीच बातचीत में कोई महत्वपूर्ण अंतर (एफ (2.311, 92.449) = १.९१५, p = ०.१४७) और समूह (f (1, 40) = ०.८९८, p = ०.३४९), लेकिन परीक्षण में महत्व (f (2.311, 92.499) = २४.२४३, p < ०.००१), का पता लगाया गया । एकाधिक तुलना विश्लेषण कम महत्वपूर्ण अंतर (एलएसडी) परीक्षण के साथ T1 और टी0 के बीच महत्वपूर्ण अंतर (p < 0.001), टी 2 और टी0 (p < ०.००१) और T3 और टी0 (p < ०.००१) अफ़ीम में अफ़ीम-युग्मित प्रवेश द्वार दिखाया । खारा युग्मित डिब्बों के विषय में, सांख्यिकीय महत्व टी 2 और टी0 (पी = ०.००२) और T3 और टी0 (पी = ०.००३) के बीच मौजूद है, लेकिन नहीं T1 और टी0 (पी = ०.२४६), जो हेरोइन की गर्मी के पैटर्न के समान है तरस24। सामांय में, अफ़ीम समूह में पक्ष कक्षों के लिए प्रवेश द्वार समय-निर्भर वृद्धि हुई है ।
चूहों अधिक बार अफ़ीम-युग्मित डिब्बे से खारा-T1 पर डिब्बा जोड़ा (टी (1 में प्रवेश किया, 21) =-२.८३३, पी = ०.०१०) और टी 2 (t (1, 21) =-४.४५८, पी = ०.०००२) लेकिन नहीं T3 (टी (1, 21) =-०.४७१, पी = ०.६४२) (दो पूंछ युग्मित टी परीक्षण) ।
खारा समूह
अफ़ीम समूह के साथ इसी तरह, एक मिश्रित ANOVA लागू किया गया था और समूह और परीक्षण (एफ 3 के बीच बातचीत में कोई महत्वपूर्ण अंतर का पता चला, 54) = ०.३४५, पी = ०.७९३), परीक्षण (एफ 3, 54) = १.७९३, पी = ०.१५९) और समूह (एफ (1, 18) = ०.१५१, पी = ०.७०२) । इस प्रकार, खारा समूह में पक्ष कक्षों के लिए प्रवेश द्वार समय के साथ स्थिर थे ।
चित्रा 2: CPP स्मृति कम से 18 दिन पिछले कर सकते हैं, लेकिन समय के साथ गिरावट आती है. अफ़ीम समूह में CPP की स्मृति अवधारण (n = 21) और खारा समूह (n = 10) पिछले कंडीशनिंग (T1, 2 दिनों के बाद कई समय अंक के लिए CPP स्कोर को मापने के द्वारा मूल्यांकन किया गया था; टी 2, 10 दिन और T3, 18 दिन) । CPP स्कोर के सभी मूल्यों ± SEM मतलब है । # # # इंगित करता है p < 0.001 और # # का अर्थ है p < ०.०१ खारा समूह के साथ तुलना की गई है; अफ़ीम समूह में टी0 के साथ p < ०.००१ की तुलना में इंगित करता है । यह आंकड़ा सन एट अल., २०१७11से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 3: अफ़ीम और खारा समूहों में पक्ष-मंडलों के लिए प्रवेश द्वार । अफ़ीम समूह (n = 21) और खारा समूह (n = 10) में दो पक्ष कक्षों के लिए प्रवेश अंतिम कंडीशनिंग (T1, 2 दिनों के बाद कई समय बिंदुओं पर मूल्यांकन किया गया; टी 2, 10 दिन और T3, 18 दिन) और टी0 के साथ तुलना में । प्रवेश द्वार के सभी मूल्यों का मतलब है ± SEM । अफ़ीम समूह (क) में, अफ़ीम के लिए प्रवेश द्वार-T1 से बहुत काफी वृद्धि हुई है जबकि खारा-युग्मित चैंबर के प्रवेश ही टी 2 से काफी वृद्धि हुई है । अफ़ीम-युग्मित डिब्बे और खारा-युग्मित डिब्बे के साथ युग्मित टी परीक्षणों दोनों T1 और टी 2 में बहुत महत्वपूर्ण वृद्धि दिखाई । खारा समूह (ख) में, दोनों पक्षों के लिए प्रवेश द्वार में कोई महत्वपूर्ण परिवर्तन कर रहे हैं । यह आंकड़ा सन एट अल., २०१७11से संशोधित किया गया है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
Discussion
यहां, एक विधि एक अफ़ीम CPP प्रतिमान का उपयोग करने के लिए दीर्घकालिक संदर्भ के रूप में somatosensory cues के साथ चूहे में दीर्घकालिक इनाम स्मृति स्थापित करने के लिए वर्णित है । इस तरह के एक दीर्घकालिक पुरस्कार स्मृति का निर्माण करने के लिए, एक संतुलित CPP तंत्र के साथ एक पिछले प्रोटोकॉल21 संशोधित किया गया है और खारा और अफ़ीम सत्र के अलग से कम 10 एच सेट कर रहे हैं । इसके अलावा, साहचर्य सीखने को बढ़ाने के लिए कंडीशनिंग चरण के दौरान अधिक कंडीशनिंग सेशन जोड़े जाते हैं । CPP स्कोर के अलावा, दो पक्ष कक्षों के लिए प्रवेश द्वार मापा जाता है और वृद्धि की ओर कक्षों के लिए प्रवेश द्वार के पैटर्न स्वयं में वृद्धि हुई सक्रिय प्रतिक्रियाओं के साथ समान है-प्रशासन प्रतिमान ।
कई कारकों CPP ऊपर उल्लेख किया प्रतिमान की स्थापना को प्रभावित करते हैं । एक प्रमुख कारक उपकरण के डिजाइन है: सामांय में चूहों दोनों पक्ष मंडलों को समान वरीयता होनी चाहिए सुनिश्चित करने के तंत्र संतुलित है । एक असंतुलित उपकरण एक ओर चैंबर13के लिए प्रारंभिक उच्च वरीयता के कारण CPP के अधिग्रहण मुखौटा कर सकते हैं । इसलिए, एक तरफ चैंबर को अति वरीयता (दो पक्ष कक्षों में से किसी में कुल समय की ९०% से अधिक) जब फर्श या अंय प्रासंगिक cues की बनावट को चुनने से बचा जाना चाहिए । विभिन्न प्रायोगिक प्रयोजनों के लिए, experimenters प्रासंगिक उत्तेजनाओं को संशोधित करके CPP तंत्र संतुलन कर सकते हैं । संतुलित तंत्र के लिए, प्रयोगात्मक डिजाइन के दो तरीके सामांयतः4इस्तेमाल कर रहे हैं । एक पक्षपाती तरीका गैर के साथ दवाओं जोड़ी है सभी विषयों के साथ पसंदीदा चैंबर; एक निष्पक्ष तरीका गैर पसंदीदा चैंबर में दवाओं के साथ जानवरों की आधी जोड़ी है, पसंदीदा चैंबर के साथ दूसरे आधे । दोनों तरीकों CPP13 लेकिन अध्ययन17,25 उत्तरार्द्ध डिजाइन के साथ हमेशा एक तरफ चैंबर के लिए अपने मजबूत वरीयता के कारण कई विषयों को बाहर करने के लिए स्थापित कर सकते हैं । दवा की लत के लिए व्यक्तिगत भेद्यता के रूप में26,27,28 मौजूद है, एक पक्षपातपूर्ण डिजाइन स्वस्थ विषयों के बहिष्कार से बचने के लिए इस अध्ययन में चुना गया था । पक्षपातपूर्ण डिजाइन की एक सीमा की ओर कक्षों को असंगत वरीयता का प्रभाव है । चित्रा 2में दिखाया गया है, खारा समूह में चूहों प्रारंभिक गैर वरीय चैंबर के लिए लगातार कम CPP स्कोर है. इस प्रकार, संभावना है कि पक्ष कक्षों को असंगत वरीयता अफ़ीम समूह में CPP स्कोर को प्रभावित कर सकता है खारा नियंत्रण स्थापित करने से बाहर रखा गया है । पसंदीदा चैंबर की छत प्रभाव से बचने के लिए, हम अफ़ीम युग्मित चैंबर के रूप में प्रारंभिक गैर वरीय चैंबर का उपयोग करें । साइड चैंबर के लिए आधारभूत वरीयता पर नवीनता और तनाव के प्रभाव से बचने के लिए, तीन पूर्व कंडीशनिंग सत्र प्रदर्शन कर रहे हैं, और तीसरे सत्र के आधार रेखा के रूप में प्रयोग किया जाता है । चौथा कारक अफ़ीम और खारा सत्र के बीच अंतराल है । हमारे प्रतिमान में, हम खारा कंडीशनिंग अवधि में निकासी प्रभाव से बचने के लिए कम से कम 10 घंटे के अंतराल का चयन करें । अफ़ीम की खुराक भी एक महत्वपूर्ण कारक है । अफ़ीम की अत्यंत कम खुराक, जैसे ०.०१ मिलीग्राम/6, जगह वरीयता प्रेरित नहीं किया । 10 मिलीग्राम/किलो की एक खुराक चूहों में उच्चतम CPP स्कोर17 प्रेरित और सामांयतः चूहे अफ़ीम CPP अध्ययन17,21,23में प्रयोग किया जाता है । हालांकि, 10 मिलीग्राम/kg अफ़ीम (आईएफसआई) चूहों के आसपास 5% में श्वसन अवसाद पैदा कर सकता है । अफ़ीम की कम खुराक, जैसे कि 5 मिलीग्राम/किग्रा, भविष्य के अध्ययन में इस्तेमाल किया जा सकता है । ऐसे वृक्ष छछूंदर के रूप में अंय प्रजातियों के लिए, दवाओं के लिए सहिष्णुता जब CPP प्रतिमान निर्माण पर विचार किया जाना चाहिए । के बाद से पेड़ छछूंदर अफ़ीम के लिए तेजी से सहिष्णुता विकसित, अफ़ीम की खुराक में वृद्धि की कंडीशनिंग चरण29,30के दौरान इस्तेमाल किया जाना चाहिए ।
संशोधित प्रोटोकॉल के साथ, एक लंबी अवधि के इनाम स्मृति के लिए स्थापित किया गया है कम से कम 18 दिन कंडीशनिंग के 6 दिनों के बाद11 (चित्रा 2) । भविष्य के अध्ययन के उपाय करना चाहिए कि क्या CPP एक लंबे समय के लिए बनाए रखा जा सकता है । दोहराया पलटा मादक पदार्थों की लत के इलाज में प्रमुख बाधा है । तनाव, पर्यावरण cues और दवाओं पतन पैदा सकता है । CPP स्मृति के विलुप्त होने के बाद, इस मॉडल तनाव या दवाओं द्वारा प्रेरित पतन मॉडल के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है ।
अफ़ीम समूह में दवा युग्मित कक्षों के प्रवेश द्वार संयम अवधि11 (चित्रा 3) है, जो स्वयं प्रशासन प्रतिमान में वृद्धि हुई सक्रिय प्रतिक्रियाओं के साथ समान है में वृद्धि हुई है । हालांकि, खारा-युग्मित चैंबर के प्रवेश द्वार भी दोनों चूहों और पेड़ shrews11, जो स्वयं प्रशासन प्रतिमान की निष्क्रिय प्रतिक्रियाओं से अलग है में CPP प्रतिमान के साथ वृद्धि हुई है । यह अंतर दो मानदंड के विभिंन अंतर्निहित सिद्धांतों के कारण हो सकता है: एक शास्त्रीय कंडीशनिंग है, दूसरे operant कंडीशनिंग है । इसके अलावा फूड CPP अनुभवों के साथ ट्री shrews30के बढ़े हुए प्रवेश द्वारों का ऐसा पैटर्न नहीं दिखा पाई । इसलिए, अफ़ीम में दोनों ओर कक्षों के लिए बढ़ा प्रवेश द्वार-अनुभवी जानवरों के लिए दवाओं की मशीन तरस का प्रतिनिधित्व करने लगा रहे हैं । हालांकि एक विषय में दोहराया उपायों का उपयोग करने की सीमा बाहर रखा जा सकता है, वृद्धि की प्रविष्टियों का पैटर्न चूहों11में संरक्षित किया गया था, पेड़ shrews11,30 और बंदरों31. बहरहाल, संयम अवधि के दौरान विषय डिजाइन के बीच अत्यधिक भविष्य के अध्ययन के लिए सिफारिश की है दोहराया माप के विलुप्त होने के प्रभाव को बाहर ।
बढ़ी हुई प्रवेश द्वारों के अलावा, अफ़ीम की कम खुराक के साथ CPP स्कोर (1 मिलीग्राम/किलोग्राम और 3 मिलीग्राम/संयम अवधि17के दौरान उत्तरोत्तर वृद्धि हुई । इन परिणामों का सुझाव है कि CPP प्रतिमान भी तरस घटना की गर्मी मॉडल सकता है । हालांकि, एक वृद्धि हुई CPP स्कोर भी वातानुकूलित उत्तेजना के लिए एक वृद्धि की स्मृति का प्रतिनिधित्व हो सकता है । इस पहलू में, एक तीन चैंबर उपकरण है, जो स्वयं प्रशासन प्रतिमान में सक्रिय प्रतिक्रियाओं के समान है में पक्ष कक्षों के लिए प्रवेश द्वार, अधिक बारीकी से दवाओं के लिए खोज या दवाओं के पुरस्कृत प्रभाव सदृश । यह अफ़ीम की कम खुराक के चूहे CPP मानदंड में संयम अवधि के दौरान पक्ष कक्षों के लिए प्रवेश द्वार के रुझान की जांच करने के लिए दिलचस्प होगा । अंय दवाओं और चूहों के साथ भविष्य के अध्ययन की पुष्टि करने के लिए किया जाना चाहिए कि इस घटना के दुरुपयोग की दवाओं में संरक्षित है/
Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
इस काम को नेशनल नेचुरल साइंस फाउंडेशन ऑफ चाइना (NSFC) 31741058 (Y.Z.), शेन्ज़ेन अशासकीय अनुदान (JCYJ20170818162613877 और JCYJ20170818163217196) और चाइना Postdoctoral साइंस फाउंडेशन ग्रांट 2017M622826 (K.Z.) ने समर्थन दिया था ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Morphine | Shenyang First Pharmaceutical Factory | ||
| CPP apparatus/Camera | Anlai Technology Company | ||
| SPSS | IBM Inc |
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