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Behavior

자발적으로 감 금 소를 변경 하는 쥐 가르치는 식자 교육 및 사회적 관찰을 사용 하 여

Published: October 25, 2018 doi: 10.3791/58511

Summary

이 프로토콜 케이지 변화의 쥐 clicker 훈련을 통해 하는 방법을 소개 합니다. 쥐 직접 훈련에 의해 뿐만 아니라 관찰 학습에 의해 원하는 동작을 배울. 이 빠르고 쉬운 프로토콜의 구현 복지 및 설치류 시설에서 위생을 개선 하기 위해 도움이 될 수도.

Abstract

케이지 청소는 정기적으로 수행된 축산 절차 및 실험실 쥐에 게 스트레스를 유발 하 알려져 있다. 와 스트레스 웰빙에 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다 comparability 및 연구 결과의 재현성에 영향을 미칠 수 있는, 경험된 실험실 동물에 의해 스트레스의 양은 최소화와 가능 하면 피할 수 있어야 합니다. 또한, 케이지 변경 동안 쥐과 동물 관리 인 사이 직접적인 접촉 그리고 위생 위험 곰 따라서 가능 하 게 부정적인 쥐 및 연구의 품질의 영향.

우리의 프로토콜 절차를 변경 정기적으로 수행된 케이지를 개선 하는 것을 목표로. 이러한 이유로, 선물이 쥐 clicker 훈련 및 깨끗 한 케이지 자발적으로 바꾸는지 관찰 통해 배울 수 있도록 가능한 프로토콜. 물리적 장애에 의해 발생 하는 스트레스를 줄이는 데 도움이 됩니다이 훈련 및 케이지와 관련 된 처리 변경 동시에 훈련 단계를 완료 한 후 동물 및 동물 관리 인 사이 직접적인 접촉에 있는 감소를 수 있습니다.

식자 쥐에 훈련의 실시는 신속 하 고 쉽게. 쥐는은 일반적으로 훈련에 관심이 있으며 효율적으로 된 파이프를 통해 변화 연습장 원하는 동작을 배울. 훈련 없이 쥐 배워야 관찰, 원하는 동작을 수행 관찰 학습 그룹의 80%는 성공적으로 테스트 했을 때 감 금 소를 변경. 트레이너와 동물 사이의 신뢰의 관계를 설정 하도록 훈련 더 수 있습니다. 위생 및 복지는 모두 동물 실험에서 매우 중요 한,이 프로토콜도 높은-품질 연구 향상을 도울 수도 있습니다.

Introduction

일상적인 절차는 실험실 동물1,2,,34스트레스를 일으킬 수 있습니다. 그것은 그 심장 혈관 매개 변수 및 쥐4,,56에 일반적인 활동 증가 케이지 변경 표시 되었습니다. 이러한 스트레스 응답 적어도 부분적으로 실제 소요 및 케이지 변경 절차 보다는 오히려 새로운 낯선 환경2,4와 관련 된 처리 수 있습니다. 특정 중요성의 간주 동물7에 스트레스의 부정적인 영향이 이다. 또한, 스트레스 유도 동작 및 자율 신 경계, 면역 체계, 신경 내 분 비 시스템 등 다른 본문 매개 변수를 변경 합니다. 따라서, 스트레스는 라고도 예상치 못한 편차 가능한 소스 동물 실험에서 고 양질의 동물 연구7,8에서 가능한 만큼 피해 야 한다. 실험실 동물에 스트레스를 줄이기 위해 한 가지 방법은 훈련입니다. 훈련 동물 일반적으로 실험실 동물 관리를 위한 매우 유용한 도구 일 수 있다 EU 지침 2010/63/유럽9요구 사실, 하 고 있습니다. 훈련 형태의 한 농축 및 동물 실험;에 대 한 준비 하는 데 도움이 될 수 있습니다. 따라서, 훈련 유지 하 고 실험실 설정10,,1112복지 향상에 기여 한다. 가능한 교육 방법은 긍정적인 증강 훈련 (PRT)입니다. PRT는 보상 (예, 음식 보상), 동작13를 연계 기사 조절의 형태입니다. 훈련의이 형태는 이미 상용 nonhuman 영장류 실험실 설정에서 스트레스를 줄이기 위해 복지를 강화 하 고 및 다양 한 다른 동물 종10,13, 에서 인기를 얻고 있다 14,,1516. 자발적인 운동의 훈련 축산 관리17,,1819정제에 자주 사용 됩니다. PRT는 하지만 협력을 위한 유용한 도구 동물; 작업할 때 마찬가지로 동물 들의 복지, 훈련된 동작 직접 사용된20인지에 대 한 일반적으로 도움이 됩니다. 긍정적인 증강 훈련 프로토콜 설명 여기 쥐 절차에 자발적으로 참여 하는 기회를 제공 하 여 일상적으로 수행된 케이지 변경 시 어떤 형태의 스트레스를 방지 하는 것을 목표로 합니다.

동물에 대 한 가능한 스트레스 뿐만 아니라 동물 시설에서 작업 프로세스 항상 제공 함정 위생 상태, 유지 관리를 위해 특히 실험 동물 및 동물 관리 사이의 직접 접촉 곰 위생의 위험 오염입니다. 설치류에 전문 동물 시설, 깨끗 한 연습장에 더러운에서 동물의 전송 일정 하 고 높은 작업을 제공 합니다. 이 절차는 일반적으로 동물과 인간 사이의 직접 접촉을 포함 하 고 따라서 인간의 피부21에 정착 하는 병원 체의 가능한 전송으로 인해 위생 위험 요소를 나타냅니다. 이외에도 다른 동물 벡터에서 전송, nonpathogenic 병원 성 유기 체 인간22,23를 통해 가장 자주 동물 시설 방해. 로 감소 건강 관련 된 감소 된 웰빙, 심지어 subclinical 감염 nonreproducible 실험 결과 대 한 원인이 될 수 있습니다 그리고이 명확 하 게 해야 피해24,25. 이 계정에서 수행 하는 동안 위생에 잠재적인 위험을 줄여, 동물 및 동물 관리 인 사이 직접적인 접촉 거의 모든 훈련 후 케이지 변경의 전도 수 있도록 자발적인 변화 감 금 소 더 동물을 훈련 실험 절차입니다.

그것은 일상적인 작업의 성능 인지 농축의 형태로 교육을 연결 훈련 쥐 감 금 소를 자발적으로 변경에 대 한 우리의 프로토콜 실험실 쥐 관리를 위한 유용한 도구가 될 수 있습니다. 따라서, 우리의 프로토콜은 동물 친화적인 절차 실험실 동물 시설에 쥐의 증가 하는 데 도움이입니다. 케이지 변경 후 훈련 단계 동물 및 동물 관리 인 사이 거의 모든 직접적인 접촉으로 수행할 수 있습니다 그것은 또한 도움이 될 위생 높은 수준에서 유지 하 고 따라서 동물 연구를 더욱 향상.

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Protocol

쥐 및 실험 절차의 처리는 동물 보호에 대 한 유럽, 국가, 및 기관 지침에 따라 실시 했다.

1. 순응 및 습관 들 임

참고: 경우 쥐 했다 하지, 순응과 요법이 니 시간 줄일 수 있습니다. 비 침범 성 식별을 위해 피부 친화적인 표시와 함께 꼬리를 색상.

  1. 주 1: 순응
    참고: 두 개의 세션이 수행 되어야 한다 첫 주 당일 도착, 하나는 두 번째 동안 도착 후 2 일.
    1. 쥐의 도착 당일:
      1. 그들의 새로운 가정 케이지를 2의 쌍 쥐를 전송 합니다. 일부 오래 된 중첩 및 침구 물자 뿐만 아니라 새로운 환경에 habituation 촉진 하기 위하여 그들의 익숙한 음식 펠 릿의 일부를 전송 합니다.
      2. 쥐 꼬리에 의해 해제 하지 마십시오. 만약에 가능 하다 면, 한 손으로 배꼽 아래 또는 가슴 주위와 다른 한편으로는 그들에 게 (그림 1)26들어 쥐의 뒷 다리를 지 원하는 넣어.
    2. 2 일 날 도착 후:
    3. 쥐의 집 새 장 열고 장에 손을 넣어. 냄새 고 손을 쥐를 보자. 만약 쥐 려 감 금 소에서 부드럽게 다시는 새 장에 그들을 누르면 그들을 방해. 다음 4 분에 대 한이 절차를 계속 합니다.
    4. 쥐 두려워 그들의 환경 탐험을 시작 하지 않는 경우, 하루에 한 번 쥐를 탐험 하기 시작 때까지 절차를 반복 합니다. 이 경우에 리모콘에 habituation 필요할 수 있습니다.
      참고: 쥐 탐험의 그들의 감각, 모든 새로운 것 들 그래서 몇 시간 후, 그들은 친숙 한 것으로 동일한 실험을 인식 합니다. 그것은 쥐의 손, 구강 탐험 않지만 그것은 침략 적 방식으로 해서는 안 발생할 수 있습니다. 이 상황이 발생 하면, 손을 천천히 촬영 해야 장갑이 파괴 하지는 수 있도록 멀리.
    5. 홈 케이지를 원하는 음식 보상의 작은 조각을 추가 합니다.
      참고: 음식 보상 실험실 동물 영양에 대 한 요구 사항에 따라 해야 합니다. 이 프로토콜에서 (주사기의 끝에서 개최), 화이트 초콜릿을 사용 하지만 다른 음식, 건조 과일, 신선한 과일, 시리얼, 등 가능 합니다. 동물 시설 위생 요구 사항 요구 특별 한 조건, 실험실 동물에 대 한 취급에 대 한 다양 한 공급 업체 있습니다. 건강 한 옵션은 바람직, 하지만 높은 지방과 높은 설탕의 혼합 동물 참여에 큰 동기 부여를 줄 수 있습니다.
  2. 주 2: Habituation 과학자와 음식 보상
    1. 계속 손 및 이전 주에 시작 하는 음식 보상에 거주 합니다. 상호 작용 시간 하루 2 분을 제한 합니다.
    2. 쥐 매우 불안 경우에서 리모콘에 habituation 필요할 수 있습니다.
      1. 이 문제를 평가 하려면 하루에 1 세션 후 5 초 마다 한 번을 클릭 합니다. 쥐 공포 관련 행동 반응, 리모콘 익혀 진다 될 해야 합니다.
      2. 리모콘 하 요법이 니, 쥐 세션 후 장에 배치 된 보상을 사용 하는 동안 5 번을 클릭 합니다. 리모콘에 habituation 쥐 더 이상 어떤 공포 관련 동작을 표시 대로 완료 됩니다.
  3. 주 3: Habituation 강렬한 처리
    1. 1 ~ 3 일에 해제 또는 몇 초 동안 쥐를 쓰 다듬어 시작 하 고 천천히 시간 (최대 2 분 쥐 당)를 확장 합니다. 중지는 쥐 동결, 피하고 또는 숨기기 같은 모든 혐오 조짐.
    2. 사이에 4 및 5, 끝 간에 처리 Cloutier 에 설명 된 대로 (2012)입니다. 27
      참고: 성공적인 습관 들 임에 대 한 지표는, 예를 들어 손으로 if 음식 보상을 복용 하는 쥐 또는 쥐를 밝히 려는 손을 탐험, 또는 그것을 만져.

2. 식자 교육

참고: 교육 세션 4 분 걸리며 훈련 뒤 휴식의 15 초 30 초 간격으로 구성 됩니다. 일시 중지 중 추가 자료를 제거 합니다. 관찰자 쥐 원하는, 할 무료 참여 하 고 보상, 소비를 허용 하지만 초점은 전적으로 다른 쥐에. 모든 쥐가 하루에 하루 5 핸드폰 했다. 교육 성공, 그것은 실험 동물의 행동에 관심을 지불 하 고 진정 방식으로 행동 중요 하다. 훈련은 강하게 타이밍의 실험의 능력과 관찰의 힘에 따라 달라 집니다. 구두 피드백 없음, 훈련에서 발생 하 고 동물 구두 통신 세션 밖에 서 그냥 발생할 수 있습니다. 원하는 행동의 학습에 대 한 표시기 동작의 반복입니다.

  1. 준비
    1. 보상, 리모콘/대상 스틱 조합, 타이머, 깨끗 한 케이지, 금속 관 및 다른 특정 교육 자료 등 필요한 자료를 준비 합니다.
    2. 홈 케이지 조용한 곳에 전송.
    3. 감 금에서 모든 항목을 제거 합니다. 만 두 쥐 (훈련 및 관찰자) 침구 물자는 감 금 소에 남아 있어야 하 고.
  2. 교육 주 1: 기본 및 보조 reinforcer 간에 연결을 설정
    1. 집 안의 짧은 터널, 선호 하나 쥐 잘 알고 있다.
    2. 쥐 터널에 앉아 때까지 기다려 하 고 보상으로 쥐를 피드.
      참고: 경우 쥐 하지 훈련 상황의 상황에서 수 유, 습관 들 임 단계 해야 수 확장 또는 조정.
    3. 쥐 보상에 관심 하 고 보상에 연못을 시작 하는, 클릭 한 다음 보상에 피드 쥐를 보자. 그 강화 두의 페어링이 성공, 반복을 클릭 하 고 다음 15 초 동안 보람 합니다. 이 첫 번째 훈련 세션 동안 두 번 이상 이렇게.
    4. 쥐 않았다 참여 하는 경우 기본 및 보조 reinforcer 사이 연결의 설립의 표시를 확인 합니다. 이 분류에 대 한 주요 표준은 스니핑, 주위와 손에 음식 보상을 제공 하는 보고 또는 보상 (그림 2)에 대 한 보고 하기 위하여 그것의 뒷 다리 사지에 드는 쥐에 의해 표시 되는 음식 보상의 추정 이다. 이 경우, 이동 다음 부분; 그렇지 않으면, 반복 "교육 주 1"
  3. 교육 일 2-5: 짧은 터널을 통해 전달
    참고: 훈련 교육의 30 초, 15 초 휴식의 4 분의 교체 단계 이루어져 있다.
    1. 홈 장에 두 케이지 연결 됩니다 첫 번째 사용/원래 터널의 동일한 물자의 짧은 터널을 배치 합니다.
    2. 타이머를 시작 하 고 즉시 훈련의 처음 30 초 시작.
      1. 쥐가 터널을 입력 하는 처음으로 현재는 터널의 끝에 보상. 최대한 빨리 쥐 터널을 입력 하면, 클릭 하 고 보상을 먹는 쥐를 보자.
      2. 음식 보상 려 고 쥐 터널에 대 한 관심을 한 번 더 표시 될 때까지 기다립니다. 최대한 빨리 쥐 터널을 입력을 클릭 하 고 (그림 3) 터널의 끝에 보상을 제시.
      3. 훈련의 30 초 후 15 초 휴식 (제거 터널)을 추가 합니다.
    3. 반복 훈련의 30 초 이후 15 번째 4 분 동안 휴식 합니다.
    4. 만약 쥐 분에 4 배 이상, 중지를 클릭 하 고 기본 reinforcer 함께 그냥 보상 동작을 보여 줍니다.
    5. 4 분 후 중지 합니다.
  4. 교육 주 2: 감동 대상 스틱
    1. 타이머를 시작 하 고 즉시 훈련의 처음 30 초 시작. 매 15 초 휴식을 추가 하 고 훈련가 서.
    2. 쥐 근처 표적 지팡이의 세계를 놓습니다.
    3. 쥐 세계에 관심을 보여줍니다, 최대한 빨리 클릭 하 고 쥐를 보상. 반복이 여러 번.
    4. 쥐 분에 4 회 이상 세계에 관심을 표시 하는 경우 다음 동작을 강화 "감 동적 이다 코와 함께 세계".
    5. 쥐 1 분에 4 번 이상 그 동작을 반복, 기본 reinforcer 함께 클릭 하 고 그냥 보상을 중지.
    6. 4 분 후 중지 합니다.
  5. 주 3 (5 일)와 (3 일) 4 주 훈련: 케이지를 터널을 통해 변경
    참고: 여기만 깨끗 한 케이지 쪽으로 터널을 통과 강화 했다. 4 주 훈련 3 훈련 일 단축 이 시간 이미 훈련 성공에 대 한 충분 한 고 추가 하루 평가 또는 추가 실험에 대 한 기록 데이터에 대 한 기회를 제공 합니다.
    1. 쥐에 게 이미 친숙 한 터널의 더 긴 버전을 삽입 하 여 갱도 홈 장과 새로운 깨끗 한 케이지 사이의 연결을 구축.
    2. 첫날에 수행 훈련, 그리고 그냥 터널을 검사 하는 쥐. 그들 자신에 그것에 그들은 심지어 옮길 것 이다 좋은 기회가 있다.
    3. 2 일에 게는 쥐 2 분 깨끗 한 쪽으로 더러운에서 자체에 터널을 통해 전송. 쥐 터널을 통해 자유롭게 전송, 단계 2.5.8 건너뜁니다.
    4. 그렇지 않으면, 세션 (교육의 30 초 및 15 초 휴식 사이 대체) 4 분을 훈련 첫 번째 30 초 시작.
    5. 클릭 하 고 가능한 빨리 그것은 터널에 대 한 관심을 보여준다는 쥐를 보상.
    6. 이동 클릭 하 고 터널으로 입구를 보상 합니다.
    7. 쥐가 깊은 터널에서 클릭 하 여 보상 이동 합니다.
    8. 비슷한 방식으로 계속 쥐 전체 터널을 통해 실행 될 때까지. 최대한 빨리 쥐 시작 엿보기는 터널의 끝에 깨끗 한 케이지로, 대상 스틱, 클릭, 그리고 세계를 감동에 대 한 보상의 세계를 제시.
    9. 마지막으로, 터널을 두고 쥐 가이드. 이 프로세스에 대 한 표적 지팡이의 세계를 사용 합니다. 터널 앞 세계를 제시 하 고 클릭 하 고 새 장에 단계 하 고 세계에 닿아 쥐를 보상.
    10. "더러운" 홈 케이지 다시 쥐를 전송. 한 손으로 배꼽 아래 또는 가슴 주위와 그들 (그림 1)을 들어 쥐의 뒷 다리를 지 원하는 다른 손을 넣어. 깨끗 한 감 금 소의 중앙에 표적 지팡이의 세계를 제시. 클릭 및 쥐로 보상 터널을 통해 실행 하 고 대상 스틱 (그림 4)을 만지고 있다.
    11. 쥐 1 분에 4 번 이상에 대 한 동작을 반복, 기본 reinforcer 함께 클릭 하 고 그냥 보상을 중지.
    12. 4 분 후 중지 합니다.

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Representative Results

훈련은 10 여성 리스 터 후드 (LD) 쥐의 코 호트에 실시 되었다. 10 일반인 하지만 부드럽게 처리 여성 LD 쥐 제어 그룹으로 제공 됩니다. 부드러운 처리 쥐만 그들의 몸에 의해 해제 되었고 꼬리의 기지에서 해제 하지 의미 합니다. 관찰 학습을 평가, 우리 10 여성 LD 쥐를 훈련 했다 하지만 훈련 된 쥐의 감 금 소 동료 훈련을 관찰할 수 있었다 1 개의 추가 그룹 추가. 모든 쥐 순응 및 습관 들 임 처리 완료. 훈련 구성 (그림 4) 금속 파이프를 통해 새로운 케이지로 이동. 원하는 행동의 보상을 했다 (그림 4). 모든 훈련, 평가 및 훈련 성공 세 가지 범주에 분석: 참여, 참여 및 탐험 행동. 훈련 된 쥐 일반적으로 훈련에 관심이 있었지만 새로운 환경을 탐구 하는 높은 동기 부여 했다. 특히 첫 번째 훈련 일 동안 탐험 행동 매우 저명한 (그림 5) 했다. 만 3 일 후 훈련의, 쥐의 대부분 원하는 동작을 표시 하 고 (그림 5) 금속 파이프를 통해 감 금 소를 변경. 5 일 훈련을 완료 한 후 모든 훈련된 쥐 시연 동작 (그림 5). 훈련 4 주, 각 훈련의 5 일 동안 계속 되었다. 4 주 후 관측 훈련 그룹의 "훈련 상태"를 보고,이 쥐 평가 했다. 이 평가 대 한 우리 쥐 한 교육 세션 동안 깨끗 한 케이지를 터널을 통해 실행 하는 횟수를 계산. 전반적으로, 80%의 쥐 (그림 6)를 보면서 원하는 동작을 배웠다.

우리는 더 훈련 훈련 된 쥐에 긍정적인 영향을 미쳤다 여부 검사. 따라서, 우리는 훈련의 4 주 후 자제 중 암흑의 공포 관련 동작 평가. 배 뇨, 배변 및 발성 기록 했다, 그리고 혐오 점수를 계산 (공포 관련 동작 없음 = 0, 한 공포 관련 동작 = 1, 2 개의 공포 관련 동작 = 2, 3 공포 관련 동작 = 3). 일반인된 그룹 공포 관련 동작 점수에 주목할 만한 증가 보였다 (그림 7).

Figure 1
그림 1 : 쥐의 부드러운. 한 손으로 배꼽 아래 또는 가슴 주위 배치 되 고 다른 한편으로는 쥐의 뒷 다리를 지원. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 2
그림 2 : 스니핑 및 양육. 쥐 스니핑, 둘러보고, 또는 그것의 뒷 다리 사지를 해제 하 여 음식 보상에 대 한 관심을 보여줍니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 3
그림 3 : 짧은 터널. 짧은 터널 통과 후 쥐를 보람. 관찰자 쥐 절차에 대 한 관심을 보여줍니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 4
그림 4 : 케이지 변경 후 보람. 쥐 금속 파이프를 통해 깨끗 한 새 장으로 이동 후 보상 된다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 5
그림 5 : 학습까지 일. 10 여성 리스 터 두건이 있는 쥐의 그룹 금속 파이프를 통해 감 금 소를 변경 하려면 식자 훈련의 사용에 의해 훈련을 했다. 훈련은 세 가지 범주에서 평가 되었다: 참여, 참여 및 탐험 행동 (nd: 인식 되지 않음: 쥐의 각 동작을 보였다). 모든 쥐 훈련의 5 일 후 훈련 된 행동을 취득. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 6
그림 6 : 관찰 학습. 10 여성 리스 터의 그룹 후드 쥐 감 금 소 동료 훈련 된 쥐의 스스로 훈련을 받아야 하지 않았다 하지만 훈련을 관찰 하는 것이 허용 되었다. 관찰의 4 주 후 쥐 자발적인 케이지 동작 변경에 대 한 평가 했다. 전반적으로, 관찰 학습 그룹의 80%는 금속 파이프를 통해 감 금 소를 변경. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 7
그림 7: 공포 관련 동작 점수. 훈련의 4 주 후 모든 쥐 3 그룹 (훈련, 관찰 학습, 연습을 쌓지 않은 제어 그룹)를 통해 제 지 되었다, 및 발성 법, 배변 및 배 뇨 기록 되었고 이후 공포 관련 행동 점수를 계산 하는 데 사용 각 쥐 (공포 관련 동작 없음 = 0, 한 공포 관련 동작 = 1, 2 개의 공포 관련 동작 = 2, 3 공포 관련 동작 = 3). 공포 관련 동작 평균 ± SEM.로 표시 됩니다. 통계 분석에 대 한 후속 Tukey의 다중 비교 테스트와 일방통행 ANOVA는 수행 되었다. 일반인된 그룹을 훈련 하 고 관측의 그룹 학습에 비해 증가 공포 관련 행동 점수를 보여주었다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

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Discussion

위에서 설명한 프로토콜 유용는 실험실 쥐10에 대 한 우리의 앞에서 설명한 clicker 훈련 프로토콜의 응용 프로그램을 확장 합니다. 구현 순응, 습관 들 임 및 식자 훈련을 포함 하 여 7 주, 총 1만 분을 요구 한다. 타당성,이 프로토콜 주 일 쥐의 쌍 당 약 10 분의 세션으로 제한 했다. 프로토콜 큰 쥐 식민지에서 설정 수를 나타날 수 있지만 동물 장기 실험 또는 종 축으로 지정 되어, 케이지 긴 기간에 변경의 과정을 개선 하기 위해 도울 수 있다. 또한, 실험을 수행 하는 동안 감소 소요는 결과의 품질을 개선할 수 있습니다. 또한,이 프로토콜에 걸쳐 권장 하 고 어떤 실험실 특정 요구 사항에 맞게 수정 될 수 있습니다 모든 시간. 동물 작업을 신속 하 게 배울 또는 쥐가 이미 길 들 여 시간 단축 될 수 있습니다. 일반적으로, 쥐 훈련에 관심을 "감 금 소는 파이프를 통해 변경" 원하는 행동을 얻으려고만 몇 번 반복 해야. 훈련 없이 쥐에 성공적으로 종사 관찰 학습 그룹의 80%로 관찰, 원하는 동작을 수행 하기 위해 배운 케이지 변경 테스트 했을 때 자원 봉사. 여기, 우리는 훈련 된 케이지 축산에 자주 수행된 되는 일상적인 절차 이며 동물에 스트레스를 일으키는 것으로 알려져 있기 때문에 변경 하는 방법 제시. 이 스트레스는 적어도 부분적으로 케이지 변경2,4동안 실제 장애 때문입니다. 훈련 쥐가 축산 절차 수행에 자발적으로 협조 하는 옵션을 제공 합니다. 작업에 참여 선택 동물에 유익한 효과를 제안 되 고 따라서 스트레스28을 줄이는데 도움이 될 수 있습니다. 교육 또한 그것 방법 인지 농축의 형태로 제공 하는 다른 사람에 도움이 됩니다. 쥐에 긍정적인 효과 절제 되 고 시 공포 관련 동작에서 감소에 의해 명확 하 게 보이게 되었다. 뿐만 아니라 않았다 직접 훈련 나중이 쥐의 처리에 도움이 될 나타나지만 관찰 학습 공포 관련된 동작 점수 또한 감소. 우리의 쥐 PVC 터널 및 휴지와 풍부한 표준 환경에 유지 했다. 훈련, 뿐만 아니라 모든 쥐 3 그룹 tickling 분석 결과를 받게 했다. 따라서, 우리 검색 하지 못했습니다 어떤 적자는 그룹에서 웰빙으로 자당 기본 설정 또는 동작 3 그룹 (데이터 표시 되지 않음) 사이 내에 차이가 있었다. 그럼에도 불구 하 고, 훈련 그들은 구속 되 고 있는 동안 감소 된 공포 관련 동작을 보여준는 쥐에 대 한 도움이 될 것 처럼 보였다.

한편으로, 쥐를 교육 인간과 동물, 동물이 명확 하 게 혜택 사이 nonstressful 상호 작용을 발생할 수 있습니다. 그러나 다른 한편으로,, 인간 사이 연락 하 고 동물 항상 위생 오염 위험을 맺는 다. 특히, 동물 실험 또는 동물 관리 인 과목 결과 쥐24에서 더 높은 감염 율의 발견된 피부 사이 문의. 따라서, 위생 수준에 따라 동물을 신중 하 게, 훈련 한다 그리고 보호 시설 요구 사항에 따라 프로토콜에 필요한 적응을 트레이너에 의해 착용 되어야 한다. 예를 들어 충분히 파이프를 청소 하지 않으면 가능 또는 너무 시간이 많이 걸리는 일상 업무에 대 한 금속 파이프를 생략할 수 있습니다. 우리는 훈련 성공의 쉬운 측정을 허용 하 고 또한 자발적으로 감 금 소를 교대로에서 쥐를 방지 하기 때문에 파이프를 사용 합니다. 그러나, 그것은 또한 이전부터 새 케이지 케이지 벽을 이동 하 여 감 금 소를 변경 하는 쥐를 훈련 수 있습니다. 케이지 변경 쥐는 매우 호기심과 탐험 때문에 자주 발생 하면이 프로세스 수 있습니다 프로시저를 속도. 파이프 및 위생 관련 보상 선택에서 모두 하기 쉬운 청소, 소독, 확인 또는 오토 클레이 브. 프로토콜은 연구 설정의 범위를 조정할 수 있습니다. 예를 들어, 교량 수 활용 물리적 위험 또는 외과 개입 후 상처의 방해 없이 연습장을 변경 하려면 쥐를 허용 하는. 긴 기간이이 프로토콜 훈련 동물과 동물 골키퍼 사이 덜 직접 접촉을 허용 한다. 따라서, 동물 낮은 세균 부하에 노출 됩니다. 또한, 쥐의 성공적인 관찰 학습 때문에 모든 쥐 훈련을 요구할 것 이다. 이 관측 학습 자손 어머니 로부터 직접 동작을 배울 수 있을 수 있습니다 특히 감 금 소, 번 식에 도움이 됩니다. 쥐과 동물 관리 사이 직접만 하지 전반적인 접촉을 줄이는 동시에 훈련을 통해 신뢰 관계를 설정 하는 동안 오염의 위험을 줄이기 위해 도울 수 있다. 위생 수준이 매우 중요 하기 때문에 intercurrent 동안 발생 하는 감염 사육과 실험 단계 크게; 동물 실험의 과학적 의미를 제한할 수 있습니다 따라서,이 프로토콜 추가 복지 및 과학29를 개선 하기 위해 도움이 됩니다.

이 프로토콜의 성공적인 적용에 대 한 고려 사항으로 몇 가지 포인트를가지고 한다. 쥐에 대 한 순응 기간 해야 유지 훈련 이전의 수송 해 왔다. 순응 기간 과학 연구 질문에 적응 해야 합니다. 이전 학문은 3 일의 범위는 충분 한 수 특정 시간30,31실험 설명 했다, 반면 다른 연구 시연 glucocorticoids 남아 그 플라즈마 증가 2 주32. 현재 연구에서 우리가 동물 시설에 상업적인 종 축에서 전송 후 14 일의 순응 기간을 선택합니다. 훈련 전에 불편의 어떤 표시 든 지에 대 한 모든 쥐를 모니터링 해야 합니다. 실험 쥐에 잘 알고 하지 않으면 참조33쥐 얼굴을 찡 그리기 규모와 같은 도구를 사용할 수 있습니다. 이러한 고려 사항 없이 훈련 성공률 감소 될 수 있습니다. 쥐는 본질적으로 매우 불안 할 수 있고 추가 habituation 단계가 필요할 수 있습니다. 무서운 동물을 훈련 하려고 하는 것은 제한 된 성공을 얻을 것입니다. 덜 강조 하 고 무서운 동물 들이 실험의 시작 부분에 빨리 훈련 완료 됩니다.

Habituation 단계의 끝 기록 기준 데이터 추가 실험에 대 한 최적의 시간 이다. 침략 적 방법을 실험을 위해 필요한 경우 프로토콜을 일시 중지 해야 합니다. 침략 메서드를 해당 메서드를 나타냅니다 또는 가벼운 심각도 위의에서 명시 된 부속 서 VIII "심각도의 분류 절차" 지침 2010/63/유럽9의.

훈련 기간, 훈련 계획 하는 프로토콜 일관 되 게 원하는 방식으로 수행 될 것입니다 유용한 도구 될 수 있습니다. 이러한 계획은 다른 경우에 특히 중요 한 경험 또는 처리기 관련.

함께 결합이 매우 쉽고, 응용 프로그램 지향 프로토콜 수 축산 절차 및 연구 설정 하는 동안 스트레스를 줄일 뿐만 아니라 또한 가능 하 게 동물 위생에 유익한 효과가지고. 따라서, 수준 높은 연구와 연구 동물의 케이지 변화 쥐에서 훈련 촉진 수 있습니다.

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Disclosures

저자는 공개 없다.

Acknowledgments

저자는 그의 기술 지원에 대 한 토마스 웨 커에 가장 감사. 우리가 더 감사 박사 Mirjam 로스 그녀의 종류 지원.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Target Stick with Clicker Trixie 2282
Metal Pipe (Alu Flexrohr nw 100) Rotheigner available in construction marktes
White Chocolate/ white chocolate cream Company doesn't matter, preferable organic quality
Prism Version 6.0 for Mac GraphPad Software

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동작 문제 140 케이지 변경 식자 훈련 긍정적인 보강 훈련 구체화 위생 웰빙
자발적으로 감 금 소를 변경 하는 쥐 가르치는 식자 교육 및 사회적 관찰을 사용 하 여
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Leidinger, C. S., Kaiser, N.,More

Leidinger, C. S., Kaiser, N., Baumgart, N., Baumgart, J. Using Clicker Training and Social Observation to Teach Rats to Voluntarily Change Cages. J. Vis. Exp. (140), e58511, doi:10.3791/58511 (2018).

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