Summary
Este Protocolo introduce un método de cambio de jaula para ratas mediante clicker formación. Las ratas aprenden el comportamiento deseado no sólo por la formación directa, sino también por aprendizaje observacional. La aplicación de este protocolo rápido y sencillo puede ayudar a mejorar el bienestar y la higiene en las instalaciones de roedores.
Abstract
Limpieza de la jaula es un procedimiento habitualmente realiza cría y se sabe para inducir estrés en ratas de laboratorio. Estrés puede tener un impacto negativo sobre el bienestar y puede afectar a la comparabilidad y reproducibilidad de resultados de investigación, la cantidad de estrés experimentado por los animales de laboratorio debe ser minimizada y evitar cuando sea posible. Además, el contacto directo entre la rata y el animal vigilante durante el cambio de jaula tiene los riesgos de higiene y por lo tanto posiblemente afecta negativamente el bienestar de las ratas y la calidad de la investigación.
Nuestro protocolo tiene como objetivo mejorar la jaula rutinariamente realiza cambio de procedimiento. Por esta razón, presentamos un protocolo viable que permite a las ratas a aprender mediante clicker de entrenamiento y observación para cambiar voluntariamente a una jaula limpia. Este entrenamiento ayuda a reducir el estrés causado por la alteración física y manejo asociado con la estructura cambia y al mismo tiempo permite una reducción en el contacto directo entre animal y animal vigilante una vez finalizada la fase de entrenamiento.
La aplicación de clicker formación a las ratas es rápido y fácil. Las ratas están generalmente interesadas en la capacitación y aprenden eficientemente el comportamiento deseado, lo que conlleva cambio jaulas a través de una tubería. Incluso sin entrenamiento, las ratas aprenden a realizar el comportamiento deseado por la observación, como el 80% del grupo de aprendizaje observacional había cambiado correctamente jaulas cuando se. La formación más ayuda a establecer una relación de confianza entre el entrenador y el animal. Como la higiene y el bienestar son muy importantes en experimentos con animales, este protocolo también puede ayudar a mejorar la investigación de alta calidad.
Introduction
Procedimientos de rutina pueden causar estrés en el laboratorio animales1,2,3,4. Se ha demostrado que el cambio de jaula aumentar parámetros cardiovasculares y actividad general en ratas4,5,6. Estas respuestas de estrés pueden ser por lo menos parcialmente debido a la alteración física y manejo asociados con la jaula cambiar procedimientos más que en el nuevo ambiente desconocido2,4. De particular importancia es el efecto negativo del estrés sobre el bienestar de los animales considerados7. Además, el estrés induce cambios en el comportamiento y en otros parámetros del cuerpo, incluyendo el sistema nervioso autónomo, el sistema neuroendocrino y el sistema inmunológico. Por lo tanto, el estrés se refiere a menudo como una posible fuente de desviaciones inesperadas a través de experimentos con animales y deben evitarse lo más posible en la investigación animal de alta calidad7,8. Una manera de reducir el estrés en animales de laboratorio es por el entrenamiento. Animales formación general puede ser una herramienta muy útil para la gerencia del animal de laboratorio y es, de hecho, exigido por la Directiva 2010/63/UE9. Capacitación puede servir como una forma de enriquecimiento y ayuda a preparar los animales para los experimentos; así, formación contribuye a mantener y mejorar el bienestar en el laboratorio configuración10,11,12. Un método de formación posible es el adiestramiento por refuerzo positivo (PRT). PRT es una forma de condicionamiento operante donde una recompensa (por ejemplo, una recompensa de comida), está vinculada con un comportamiento deseado13. Esta forma de entrenamiento es ya utilizada en el laboratorio de primates no humanos con el fin de reducir el estrés y mejorar el bienestar y ha ganado renombre en varias otras especies de animales10,13, 1415,de,16. Formación del movimiento voluntario es también utilizado para refinación ganadería gestión17,18,19. PRT no es sólo una herramienta útil para la cooperación al trabajar con animales; Además es generalmente beneficioso para bienestar los animales, independientemente de si el comportamiento entrenado es directamente utilizado20. El protocolo de entrenamiento de refuerzo positivo aquí descrito pretende evitar cualquier forma de estrés durante los cambios de jaula rutinariamente realizado dando la rata la oportunidad de voluntariamente participar en el procedimiento.
Además el posible estrés para los animales, procesos de trabajo en instalaciones siempre proporcionan trampas para el mantenimiento del estado de higiene, sobre todo porque el contacto directo entre animales de laboratorio y cuidadores de animales asume el riesgo de higiene contaminación. En instalaciones especializada en roedores, la transferencia de los animales de sucia en limpiamos jaulas proporciona una carga de trabajo regular y alta. Este procedimiento normalmente incluye el contacto directo entre animales y humanos y así representa un factor de riesgo higiénico debido a la posible transferencia de patógenos en la piel humana21. Además de transferencia de otros vectores animales, organismos patógenos y no patógenos inmiscuyen instalaciones más frecuentemente por los seres humanos22,23. Como salud reducida se asocia con menor bienestar, incluso subclínica infecciones puede ser una causa para nonreproducible resultados experimentales y esto debería ser claramente evita24,25. En esta cuenta, entrenamiento de animales a las jaulas de cambio voluntario más permite la conducción del cambio de jaula después del entrenamiento con apenas cualquier contacto directo entre animal y animal vigilante, reduciendo así un riesgo potencial para la higiene al realizar procedimientos experimentales.
Nuestro protocolo para las ratas de capacitación voluntariamente cambiar jaulas puede ser una herramienta útil para el manejo de la rata de laboratorio, como enlaces el entrenamiento como una forma de enriquecimiento cognitivo con un rendimiento de trabajo de rutina. Por consiguiente, nuestro protocolo es un procedimiento de animales que ayuda a aumentar el bienestar de las ratas en las instalaciones de animales de laboratorio. Como el cambio de jaula después de la fase de entrenamiento se puede realizar con casi cualquier contacto directo entre animal y animal vigilante, podría además ayudar a mantener la higiene a un alto nivel y por lo tanto mejorar aún más la investigación con animales.
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Protocol
El manejo de las ratas y los procedimientos experimentales se llevaron a cabo con arreglo a las directrices europeas, nacionales e institucionales para el cuidado de los animales.
1. aclimatación y habituación
Nota: Si las ratas no fueron transportadas, puede reducirse el tiempo de aclimatación y habituación. Para la identificación no invasiva, color de la cola con piel-amistoso marcador.
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Semana 1: aclimatación
Nota: Dos sesiones deben realizarse durante la primera semana, el día de la llegada y un segundo 2 días después de su llegada.- En el día de la llegada de las ratas:
- La transferencia de las ratas en pares de dos a su nueva jaula casera. Transferir parte de la antigua jerarquización y lecho de material, así como algunos de sus bolitas de comida familiar para facilitar la habituación al nuevo entorno.
- Evite levantar la rata por la cola. Si es posible, colocar una mano debajo del vientre o el pecho y la otra apoyar las patas traseras de ratas para separarlas (figura 1)26.
- Dos días después del día de llegada:
- Abra la casa jaula de las ratas y poner una mano en la jaula. Deja que las ratas oler y explorar la mano. Si las ratas están tratando de salir de la jaula, les estorban presionándolas suavemente en la jaula. Continúe con este procedimiento durante los próximos cuatro minutos.
- Si las ratas tienen miedas y no empezar a explorar su entorno, repita el procedimiento una vez al día hasta que las ratas comiencen a explorar. En este caso, una habituación al clicker puede ser necesaria.
Nota: Las ratas explorar cosas nuevas con todos sus sentidos, así que después de algún tiempo, reconocerá el mismo experimentador como familiar. Puede suceder que la rata no orales exploraciones de las manos, pero no debe ser de una manera invasiva. Si esto ocurre, la mano debe tomarse lentamente para asegurar que los guantes no son destruidos. - Añadir trocitos de la recompensa de alimentos destinados a la estructura de la casa.
Nota: La recompensa de comida deberá ajustarse a los requisitos para el laboratorio de nutrición animal. En este protocolo, se utiliza chocolate blanco (lugar en el extremo de una jeringa), pero otros alimentos, como frutos secos, frutas frescas o cereales, es posible. Si los requisitos de higiene de Animalario exigen condiciones especiales, hay varios proveedores de golosinas para animales de laboratorio. La opción más saludable es preferible, pero una mezcla de azúcar alta en grasa y alta puede dar a los animales una mayor motivación para participar.
- En el día de la llegada de las ratas:
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Semana 2: Habituación a la científica y la recompensa de comida
- Continuar con la morada en la mano y la recompensa de comida en la semana anterior. Limitar el tiempo de interacción a dos minutos por día.
- En casos donde la rata es muy ansiosa, habituación al clicker puede ser necesaria.
- Para evaluar este comportamiento, haga clic en una vez cada cinco segundos después de la sesión el día 1. Si la rata reacciona con un comportamiento relacionado con el miedo, el clicker debe ser habituado.
- Habituación para el clicker, clic cinco veces mientras que la rata consume la recompensa que se coloca en la jaula después de la sesión. La habituación a la clicker se completa tan pronto como la rata ya no muestra ningún comportamiento relacionado con el miedo.
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Semana 3: Habituación al intenso manejo
- En los días de uno a tres, iniciar con levantar o acariciando la rata durante varios segundos y poco a poco ampliar el tiempo (máximo dos minutos por rata). Pare si la rata demuestra signos aversivos como congelación, esquivando o escondido.
- En los días cuatro y cinco, poner fin a la manipulación en cosquillas, como se describe en Cloutier et al. (2012). 27
Nota: Indicadores para una habituación éxito son, por ejemplo, la rata teniendo la recompensa de comida si se ofrece con la mano o las ratas cerca de la mano, explorarlo y tocarlo.
2. clicker formación
Nota: Una sesión de entrenamiento dura cuatro minutos y consiste en intervalos de 30 segundos de entrenamiento seguido por 15 segundos de descanso. Retire cualquier material añadido durante la pausa. La rata de observador es libre de hacer lo que quiera y se permite participar y consumir la recompensa, pero el enfoque es únicamente en la otra rata. Todas las ratas fueron cosquillas en el primer día y quinto día. Para el éxito de la capacitación, es fundamental que el experimentador presta atención al comportamiento de los animales y está actuando de una manera tranquila. La formación depende en habilidades del experimentador de la oportunidad y el poder de observación. No retroalimentación verbal se produce en la formación, y comunicación verbal con los animales sólo puede ocurrir fuera de las sesiones. Un indicador para el aprendizaje de la conducta deseada es la repetición del comportamiento.
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Preparación
- Preparar el material necesario, como la recompensa, la combinación de clicker/target stick, un temporizador, una jaula limpia, el tubo metálico y cualquier otro material de formación específica.
- Transferir la casa jaula a un lugar tranquilo.
- Retire todos los elementos de la jaula. Sólo las dos ratas (entrenados y observador) y el material de cama debe permanecer en la jaula.
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Jornada de formación 1: establecer una conexión entre el reforzador primario y secundario
- Un túnel corto en la jaula de casa, preferiblemente uno la rata está familiarizado con.
- Espere hasta que la rata se encuentra en el túnel y entonces alimentar la rata con la recompensa.
Nota: Si la rata no se alimenta en las circunstancias de la situación de la formación, la fase de habituación debe ser extendida o ajustada. - Tan pronto como la rata muestra interés en la recompensa y está a punto de empezar a mordisquear en la recompensa, haga clic en y luego, que la rata se alimentan de la recompensa. Para asegurarse de que el emparejamiento de los dos refuerza es éxito, repetir haciendo clic y luego premiar durante 15 segundos. Para ello al menos dos veces durante esta primera sesión de entrenamiento.
- Si la rata participar, verificar si hay signos de la creación de una conexión entre el primario y el secundario reforzador. El principal criterio para esta clasificación es la estimación de la recompensa de la comida, que se muestra por la rata oliendo, mirando alrededor y en la mano que presenta la recompensa de comida o levantando a sus extremidades posteriores para buscar la recompensa (figura 2). Si esto ocurre, seguir adelante con la siguiente parte; en caso contrario, repetir la "Jornada de formación 1"
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Días 2 a 5 de entrenamiento: pasar por un túnel corto
Nota: Una sesión de entrenamiento consiste en alternadas fases de 30 segundos de entrenamiento y 15 segundos de descanso para cuatro minutos.- Coloque un túnel corto del mismo material que el primer túnel usado/original que unirá las dos jaulas en la casa jaula.
- Iniciar el temporizador y comenzar inmediatamente con los primeros 30 segundos de la formación.
- La primera vez que la rata entra en el túnel, actualmente la recompensa al final del túnel. Tan pronto como la rata entra en el túnel, haga clic y deje que la rata a comer la recompensa.
- Quitarle la recompensa de comida y esperar a que la rata demuestra interés por el túnel una vez más. Haga clic en como la rata entra en el túnel y presente la recompensa al final del túnel (figura 3).
- Después de 30 segundos de entrenamiento, añadir un salto de segundo 15 (quitar el túnel).
- Repetir los 30 segundos de entrenamiento con un posterior segundo 15 rompen durante cuatro minutos.
- Si la rata demuestra el comportamiento deseado más de cuatro veces por minuto, parada de clic y recompensa justa con el reforzador primario.
- Parar después de cuatro minutos.
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Semana de formación 2: tocar un palo blanco
- Iniciar el temporizador y comenzar inmediatamente con los primeros 30 segundos de la formación. Añadir un descanso cada 15 segundos y luego con el entrenamiento.
- Coloque el globo del palo blanco cerca de la rata.
- Tan pronto como la rata demuestra interés en el mundo, haga clic y recompensa la rata. Repetir esta operación varias veces.
- Si la rata demuestra interés en el mundo más de cuatro veces por minuto, el siguiente comportamiento para reforzar es "tocar el globo con la nariz".
- Si la rata repite ese comportamiento durante más de cuatro veces por minuto, deje de clic y justa recompensa con el reforzador primario.
- Parar después de cuatro minutos.
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Entrenamiento semana 3 (cinco días) y 4 (tres días): cambiar la jaula a través de un túnel
Nota: Aquí, sólo pasando por el túnel hacia la jaula limpia se ve reforzada. El entrenamiento en la semana 4 se ha reducido a tres días de entrenamiento. Esta vez ya es suficiente para el éxito de la formación y da la oportunidad de un día adicional para evaluación o para experimentos adicionales de registro de datos.- Crear una conexión entre la jaula casera y una jaula limpia de nuevo por un túnel introduciendo una versión más larga del túnel ya están familiarizado a la rata.
- El primer día, no realizar ningún entrenamiento y dejar que las ratas inspeccionar el túnel. Hay muchas posibilidades de que incluso se transfieren a él por su propia cuenta.
- En el día dos, dar la rata dos minutos para transferir a través del túnel por cuenta propia de la sucia al lado limpio. Si la rata se transfiere libremente a través del túnel, vaya al paso 2.5.8.
- En caso contrario, iniciar el primer segundo 30 sesiones (suplente entre 30 segundos de entrenamiento y un descanso 15 segundo) durante cuatro minutos de entrenamiento.
- Haga clic y recompensa la rata como muestra interés en el túnel.
- Ir hacer clic y recompensa la entrada en el túnel.
- Ir a click y recompensa si la rata es más profunda en el túnel.
- Continúe de manera similar hasta que la rata corre por el túnel entero. Tan pronto como la rata comienza leerlo al final del túnel en la jaula limpia, actualmente el mundo del palo blanco, haga clic y recompensa para tocar el mundo.
- Por último, orientar la rata para salir del túnel. Para este proceso, utilizar el mundo del palo blanco. Presentar el mundo delante del túnel y haga clic en y recompensar a la rata en cuanto camina en la jaula de nuevo y esté en contacto con el mundo.
- La rata de transferencia hacia la jaula casa "sucia". Poner una mano debajo del vientre o el pecho y la otra apoyar las patas traseras de ratas para separarlas (figura 1). Actualmente el mundo del palo blanco en el centro de la jaula limpia. Haga clic y recompensa como la rata corre a través del túnel y es tocar el palo blanco (figura 4).
- Si la rata repite el comportamiento de más de cuatro veces por minuto, deje de clic y justa recompensa con el reforzador primario.
- Parar después de cuatro minutos.
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Representative Results
El entrenamiento se realizó sobre una cohorte de diez ratas Lister con capucha (LD). Diez inexpertas pero con cuidado manejadas LD ratas sirvieron como grupo control. Manipulación suave significa que las ratas fueron levantadas solamente por su cuerpo y no levantadas en la base de la cola. Para evaluar el aprendizaje por observación, hemos añadido un grupo de más de 10 ratas LD, que no entrenaron pero eran compañeros de la jaula de las ratas entrenadas y fueron capaces de observar el entrenamiento. Todas las ratas terminó la aclimatación y habituación a la dirección. La formación compuesta por mudarse a una nueva jaula a través de un tubo metálico (figura 4). Fue premiado la demostración de la conducta deseada (figura 4). Se evaluó cada sesión de entrenamiento, y el éxito de la capacitación se analizó en tres categorías: participación, no participación y el comportamiento exploratorio. Las ratas entrenadas eran generalmente interesadas en la formación pero también demostraron una alta motivación para explorar el nuevo ambiente. Especialmente durante los primeros días de entrenamiento, el comportamiento exploratorio era muy prominente (figura 5). Después de sólo tres días de entrenamiento, la mayoría de las ratas muestra el comportamiento deseado y cambia la jaula a través de la pipa del metal (figura 5). Después de completar cinco días de entrenamiento, todas las ratas entrenadas demostraron el comportamiento (figura 5). El entrenamiento fue continuado por cuatro semanas, con cinco días de entrenamiento cada una. Después de cuatro semanas de ver el "estado de formación" del grupo de entrenamiento observacional, estas ratas se evaluaron. Para esta evaluación, contamos el número de veces que las ratas corrieron por el túnel en la jaula limpia durante un entrenamiento. En general, el 80% de las ratas aprendieron el comportamiento deseado viendo (figura 6).
Examinamos además si el entrenamiento tuvo un efecto positivo sobre las ratas entrenadas. Por lo tanto, se evaluaron los comportamientos relacionados con el miedo de la rata durante la moderación después de cuatro semanas de entrenamiento. Micción, defecación y vocalizaciones fueron grabadas y se calculó una puntuación aversiva (ningún comportamiento relacionado con el miedo = 0, un comportamiento de miedo = 1, dos comportamientos relacionados con el miedo = 2, tres comportamientos relacionados con el miedo = 3). El grupo mostró un notable incremento en las puntuaciones de comportamiento relacionadas con el miedo (figura 7).
Figura 1 : Suave elevación de la rata. Una mano se coloca debajo del vientre o el pecho, y la otra mano apoya las patas traseras de la rata. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2 : Oler y la cría de. La rata demuestra interés en la recompensa de comida oliendo, mirando a su alrededor, o levantando sus extremidades traseras. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3 : Túnel corto. Después de pasar por un túnel corto premiando a una rata. La rata de observador demuestra interés en el procedimiento. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 4 : Recompensa después del cambio de jaula. Una rata es recompensada después de mudarse a una jaula limpia a través de un tubo metálico. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 5 : Días hasta aprendizaje. Un grupo de diez ratas Lister con capucha fueron capacitados para cambiar de jaula a través de un tubo metálico por el uso del clicker formación. La capacitación se evaluó en tres categorías: participación, no participación y el comportamiento exploratorio (nd: no detectado: ninguna de las ratas mostraron el comportamiento respectivo). Todas las ratas adquirieron el comportamiento entrenado después de cinco días de entrenamiento. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 6 : Aprendizaje observacional. Un grupo de diez mujeres Lister con capucha a las ratas que fueron compañeros de jaula de ratas entrenadas no experimentaron formación pero se les permitió observar la formación. Después de cuatro semanas de observación, las ratas se evaluaron para jaula voluntaria de cambio de comportamiento. En general, el 80% del grupo de aprendizaje observacional cambiar jaulas a través de la pipa del metal. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 7: relacionado con el miedo puntuación comportamiento. Después de cuatro semanas de entrenamiento, todas las ratas a través de los 3 grupos (aprendizaje observacional, entrenado, grupo de control no entrenado) fueron refrenadas, y vocalizaciones, defecación y micción se registran y posteriormente utilizados para calcular un puntaje de comportamiento relacionadas con el miedo por cada rata (ningún comportamiento relacionado con el miedo = 0, un comportamiento de miedo = 1, dos comportamientos relacionados con el miedo = 2, tres comportamientos relacionados con el miedo = 3). Los comportamientos relacionados con el miedo se describen como la media ± SEM. Para el análisis estadístico, se realizó un ANOVA unidireccional con la prueba de comparaciones múltiples de Tukey posterior. El grupo mostró que una partitura comportamiento relacionadas con el miedo creciente respecto a que de la formación y observación grupos de aprendizaje. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Discussion
El protocolo descrito anteriormente es útil extendida aplicación de nuestro protocolo de entrenamiento de clicker descrita para ratones de laboratorio10. La aplicación requiere sólo unos minutos al día sobre un total de siete semanas, incluyendo aclimatación, habituación y entrenamiento de clicker. Viabilidad, este protocolo fue limitado a días de la semana con sesiones de aproximadamente diez minutos por cada par de ratas. El protocolo puede aparecer ser desperdiciador de tiempo establecer en las colonias de ratas grandes, pero si los animales se señalan para los experimentos a largo plazo o como criadores, pueden ayudar a mejorar el proceso de cambio a largo plazo de la jaula. Además, un disturbio menor al realizar experimentos puede mejorar la calidad de los resultados. Además, todos los tiempos en este protocolo son recomendaciones y puede modificarse para adaptarse a los requisitos específicos de cualquier laboratorio. Palmos de tiempo pueden ser acortados si los animales aprenden rápidamente las tareas o si las ratas ya han habituado. Generalmente, las ratas están interesadas en la formación y requieren sólo unas pocas repeticiones para adquirir el comportamiento deseado "cambia la jaula a través de un tubo". Incluso sin entrenamiento, las ratas aprendidas a realizar el comportamiento deseado por la observación, mientras el 80% del grupo de aprendizaje observacional con éxito en voluntario cambio de jaula cuando está probado. Aquí, presentamos un método para capacitado jaula cambiar porque es un procedimiento rutinario con frecuencia en la ganadería y se sabe que causan estrés en los animales. Esta tensión es al menos parcialmente debido al disturbio físico durante el cambio de jaula2,4. Formación da a las ratas una opción colaborar voluntariamente en la realización de este procedimiento de cría. Tener una opción de participar en una tarea se sugiere para tener efectos beneficiosos sobre los animales y por lo tanto puede ayudar a reducir el estrés28. Formación también es beneficiosa en otras formas, que sirven como una forma de enriquecimiento cognitivo. El efecto positivo en las ratas se convirtió en claramente visible por una reducción en el comportamiento relacionado con el miedo a ser refrenado. No sólo formación directa pareció ser beneficioso para la posterior manipulación de estas ratas, pero aprendizaje observacional redujo la calificación de comportamiento relacionados con miedo también. Nuestras ratas se mantuvieron en entornos estándar, enriquecidos con un túnel de PVC y papel de tejido. Además de la formación, todas las ratas a través de los tres grupos fueron sometidas a un ensayo de cosquillas. Por consiguiente, no detectamos ningún déficit en bienestar en cualquiera de los grupos, como no hubo diferencias en la preferencia de sacarosa o madriguera comportamiento entre los tres grupos (datos no mostrados). Sin embargo, la formación parece ser beneficioso para las ratas, como demostraron comportamiento relacionado con el miedo reducido mientras que siendo refrenado.
Por un lado, las ratas de entrenamiento puede llevar a una interacción nonstressful entre los seres humanos y animales, de que los animales benefician claramente. Por otro lado, sin embargo, el contacto entre los seres humanos y animales lleva siempre un riesgo de contaminación de higiene. En particular, el contacto entre los animales y la piel al descubierto de los resultados de sujetos vigilante experimentador o animales en una tasa más alta de la infección en ratas24. Por lo tanto, dependiendo del nivel de higiene, los animales deben ser cuidadosamente entrenados y entrenadores debe usar ropa protectora con las adaptaciones necesarias para el protocolo según el requisito de la instalación. Por ejemplo, el tubo metálico puede omitirse si limpiar suficientemente la tubería no es factible o demasiado desperdiciador de tiempo de trabajo diario. Se utilizó la tubería ya que permite una fácil medición del éxito de la formación y también evita que las ratas espontáneamente alternando entre jaulas. Sin embargo, también es posible entrenar ratas cambiar jaulas moviendo las paredes de la jaula de la vieja a la nueva estructura. Este proceso podría incluso acelerar el procedimiento si cambio de jaula se produce con frecuencia porque las ratas son muy curiosa y exploratoria. En la selección de la tubería y la recompensa con respecto a higiene, asegurar que ambos son fáciles de limpiar, desinfectar, o autoclave. El protocolo puede ajustarse a una gama de contextos de investigación. Por ejemplo, pueden utilizarse puentes, que permiten a las ratas a cambio jaulas sin riesgo físico o disturbio de las heridas después de intervenciones quirúrgicas. En el largo plazo, este protocolo permite contacto menos directo entre los animales entrenados y poseedor de lo animales. Así, los animales están expuestos a una menor carga del germen. Además, debido al éxito aprendizaje observacional de las ratas, no todas las ratas requieren formación. Este aprendizaje observacional puede ser particularmente útil en la crianza de jaulas, que las crías sean capaces de aprender el comportamiento de la madre. Reducir el contacto directo pero no general entre ratas y cuidadores de animales puede ayudar a reducir el riesgo de contaminación mientras que al mismo tiempo establecer una relación de confianza a través de la formación. Nivel de higiene es de gran importancia porque intercurrente infecciones que ocurren durante las fases de cría y experimentales pueden limitar significativamente la importancia científica de los experimentos con animales; así, este protocolo puede ayudar a mejorar aún más el bienestar y la ciencia29.
Para la aplicación exitosa de este protocolo, varios puntos deben tomarse en consideración. Un periodo de aclimatación para las ratas debe ser mantenidos si han sido transportados antes del entrenamiento. La duración de la aclimatación debe ser adaptada a la pregunta de la investigación científica. Estudios anteriores han demostrado que un tiempo de duración de tres días puede ser suficiente para ciertos experimentos30,31, mientras que otro estudio demostró plasma los glucocorticoides siguen siendo mayor en dos semanas32. En el presente estudio, se escogieron un periodo de aclimatación de 14 días después del transporte del criador comercial al centro de animales. Cada rata debe ser vigilado para detectar cualquier signo de malestar antes de la formación. Si el experimentador no está familiarizado con las ratas, se pueden utilizar herramientas como la escala de la mueca de rata para referencia33. Sin estas consideraciones, podría reducirse la tasa de éxito del entrenamiento. Ratas pueden ser intrínsecamente muy ansiosas y pueden requerir etapas adicionales de la habituación. Tratar de entrenar un animal temeroso, obtendrá éxito limitado. Menos tensionado y temerosa de que los animales al principio del experimento, más rápida será la formación se completará.
El final de la fase de habituación es el punto óptimo tiempo registro base de datos para otros experimentos. Si métodos invasivos son necesarios para el experimento, el protocolo debe ser pausado. Un método invasivo denota cualquier método que es igual o por encima de severidad leve establecidos en el anexo VIII «Clasificación de severidad de los procedimientos» de9de la Directiva 2010/63/UE.
Para la sesión de entrenamiento, un plan de entrenamiento puede ser una herramienta útil para asegurar que el protocolo se realizará sistemáticamente en la manera deseada. Esta planificación es especialmente importantes cuando diferentes experimentadores o controladores están involucrados.
Tomados en conjunto, este protocolo muy fácil, orientada a la aplicación puede no sólo reducir el estrés durante los procedimientos de cría y contextos de investigación sino también tener efectos beneficiosos sobre higiene de los animal. Por lo tanto, cambio de jaula en ratas puede facilitar la investigación de alta calidad y el bienestar de los animales de investigación.
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Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Acknowledgments
Los autores son Thomas Wacker muy agradecidos por su apoyo técnico. Además agradecemos a Dr. Mirjam Roth por su apoyo.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Target Stick with Clicker | Trixie | 2282 | |
| Metal Pipe (Alu Flexrohr nw 100) | Rotheigner | available in construction marktes | |
| White Chocolate/ white chocolate cream | Company doesn't matter, preferable organic quality | ||
| Prism Version 6.0 for Mac | GraphPad Software |
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