Summary
Bu iletişim kuralı fare tıkırtı terbiye ile kafes değişimin bir yöntem sağlar. Fareler sadece doğrudan eğitim tarafından aynı zamanda gözlemsel öğrenme tarafından istenen davranışı öğrenin. Bu hızlı ve kolay iletişim kuralı uygulanması refahı ve hijyen kemirgen tesisleri geliştirmek için yardımcı olabilir.
Abstract
Kafes temizliği düzenli olarak gerçekleştirilen yetiştiriciliği yordamdır ve laboratuvar sıçanlarda stres neden olduğu bilinmektedir. Stres refahı üzerinde olumsuz bir etkisi olabilir ve karşılaştırılabilir ve tekrarlanabilirlik araştırma sonuçlarının etkileyebilir gibi stres Laboratuvar hayvanları tarafından deneyimli miktar en aza indirgemek ve mümkün olduğunca kaçınılması gerekir. Ayrıca, kafes değişikliği sırasında fare ve hayvan bekçi arasında doğrudan temas hijyen risk taşımaktadır ve bu nedenle muhtemelen olumsuz etkileri fareler ve araştırma kalitesi iyi olmak.
Bizim iletişim kuralı yordamı değiştirme düzenli olarak gerçekleştirilen kafes geliştirmeyi amaçlamaktadır. Bu nedenle, biz fare tıkırtı terbiye ve gönüllü olarak temiz bir kafese değiştirmek için gözlem yoluyla öğrenmek sağlayan uygun protokol mevcut. Bu eğitim tarafından fiziksel rahatsızlık neden stres azaltmak için yardımcı olur ve belgili tanımlık kafes ile ilişkili işleme değiştirir ve aynı anda eğitim aşaması tamamlandıktan sonra hayvan ve hayvan bekçi arasında doğrudan temas bir azalma sağlar.
Tıkırtı terbiye fareler için hızlı ve kolay uygulamasıdır. Fareler genellikle eğitim ilgilenen ve verimli bir şekilde bir borudan değişen kafesleri gerektirdiği istenen davranışı öğrenin. Gözlemsel öğrenme grubunun % 80'i başarıyla test edilirken kafesleri değişmiş olarak bile eğitim olmadan, fareler tarafından gözlem, istenen davranışı gerçekleştirmek bilgi edinin. Eğitmen ve hayvan arasında güven ilişkisi kurmak için eğitim daha fazla yardımcı olur. Hijyen ve esenlik hem hayvan deneylerinde çok önemli olduğundan, bu iletişim kuralını da yüksek kaliteli araştırma geliştirmeye yardımcı olabilir.
Introduction
Rutin prosedürleri laboratuar hayvanları1,2,3,4' te stres neden olabilir. Bu kafes değiştirme kardiyovasküler parametreler ve fareler4,5,6genel etkinliği artmaz gösterilmiştir. Böyle stres yanıt-e doğru en az kısmen fiziksel rahatsızlık ve yeni yabancı çevre2,4yerine yordamları değiştirme kafes ile ilişkili işleme nedeniyle olabilir. Belirli stres olumsuz etkisi kabul hayvan7iyi olması önemlidir. Ayrıca, stres ve otonom sinir sistemi, nöroendokrin sistem ve bağışıklık sistemi de dahil olmak üzere diğer gövde parametrelerini'davranış değişikliği neden olmaktadır. Bu nedenle, stres genellikle beklenmeyen sapmalar olası bir kaynak hayvan deneyleri adlandırılır ve yüksek kaliteli hayvan araştırma7,8' mümkün olduğunca kaçınılmalıdır. Laboratuvar hayvanlarda stres azaltmak için bir yol tarafından eğitiyor. Eğitim hayvanlar genellikle laboratuvar hayvan yönetimi için çok yararlı bir araç olabilir ve hatta Avrupa Birliği Yönetmeliği uyarınca 2010/63/AB9tarafından talep edildiği. Eğitim zenginleştirme ve hayvan deneyleri için hazırlamak için yardımcı olur bir form olarak hizmet verebilir; Böylece, eğitim sürdürülmesi ve esenlik laboratuvar ayarları10,11,12arttırmak için katkıda bulunur. Mutlak güçlendirme eğitimi (İİT) olası eğitim yöntemidir. PRT bir edimsel koşullanma nerede bir ödül (Örneğin, bir gıda ödül), istenen davranışı13ile bağlantılı biçimidir. Zaten genellikle insan dışı primatlar için laboratuvar ayarları stresi azaltmak için ve refahını artırmak için kullanılır ve çeşitli diğer hayvan türlerinin10,13, içinde popülerlik kazanmıştır bu eğitim şeklinde 14,15,16. Eğitim gönüllü hareketinin hayvancılık yönetimi17,18,19rafine için sık sık kullanılır. PRT işbirliği için yararlı bir araç ne zaman hayvanlarla çalışma değildir; Bu aynı şekilde genellikle eğitimli davranışı doğrudan kullanılan20olup olmadığına bakılmaksızın hayvanların iyilik için faydalıdır. Mutlak güçlendirme eğitim protokolü tanımlamak burada sıçan yordamda gönüllü olarak katılma fırsatı vererek düzenli olarak gerçekleştirilen kafes değişiklikleri sırasında stres her türlü önlemek amaçlamaktadır.
Özellikle laboratuvar hayvan ve hayvan hademe arasında doğrudan temas hijyen riski taşıyan hayvanlar için olanaklı stres ek olarak, çalışma süreçleri hayvan tesislerinde her zaman tuzaklar hijyen durumu, bakım için sağlar bulaşma. Kemirgen uzmanlaşmış hayvan tesislerinde transfer hayvanlar temiz kafes içine kirli bir düzenli ve yüksek iş yükünü sağlar. Bu yordam genellikle doğrudan temas hayvanlar ve insanlar arasında içerir ve böylece hijyenik risk faktörü nedeniyle insan cilt21tarihinde yerleşmiş patojenler olası transferi temsil eder. Diğer hayvan vektörel çizimler transfer bir yana, patojen ve nonpathogenic organizmalar en sık insanlar22,23üzerinden hayvan imkanları rahatsız. Azaltılmış esenlik, enfeksiyonlar nonreproducible deneysel sonuçlar için bir neden olabilir ve bu açıkça olmalıdır bile subklinik azaltılmış sağlık ile ilgili24,25kaçındı. Bu hesap, hayvanlar için gönüllü değişiklik kafesleri daha fazla eğitim kafesi değişiklik iletim hayvan ve hayvan hademe, böylece gerçekleştirirken bir potansiyel hijyenik risk azaltma arasında neredeyse hiç doğrudan temas ile eğitimden sonra sağlar deneysel prosedürler.
Rutin iş performansı ile bilişsel zenginleştirme biçimi olarak eğitim bağlantıları gibi bizim protokolü için gönüllü olarak kafes değiştirmek eğitim rats laboratuvar sıçan yönetimi için yararlı bir araç olabilir. Buna göre bizim iletişim kuralı sıçan laboratuvar hayvan tesislerinde refahını artırmak için yardımcı olan bir hayvan dostu işlemdir. Eğitim faz bekçi, hayvan ve hayvan arasında neredeyse hiç doğrudan temas ile yapılabilir sonra kafes değiştikçe bu Ayrıca hijyen yüksek düzeyde sağlamak ve bu nedenle daha fazla hayvan araştırma geliştirmek için yardımcı olabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Fareler ve deneysel prosedürler işlenmesi hayvan bakımı için Avrupa, Milli ve kurumsal kuralları uyarınca yürütülen.
1. İklimlendirme ve Habituation
Not: Eğer fareler taşınan değil, iklimlendirme ve habituation zaman azaltılabilir. Noninvaziv kimlik için kuyruk cilt dostu marker ile renk.
-
1. hafta: iklimlendirme
Not: İki oturum ilk hafta, bir gün varış ve bir ikinci sırasında geldikten sonra 2 gün yapılmalıdır.- Sıçan varış gününde:
- Fareler iki onların yeni ev kafes için çiftler halinde aktarın. Bazı eski iç içe ve malzeme gibi bazı yeni ortamına habituation kolaylaştırmak için onların tanıdık gıda Pellet yatak takımları aktarın.
- Sıçan kuyruğunu tarafından kaldırma kaçının. Mümkünse, bir yandan göbek altında veya göğüs çevresi ve onları (Şekil 1)26kaldırın farelerin arka ayakları destekleyen diğer el koyun.
- İki gün sonra gün varış:
- Fareler, eve kafes açın ve bir el koyarlar. İzin vermek rats bulmak ve el keşfetmek. Fareler kafesinden çıkmaya çalışıyorsanız, onlara nazikçe onları kafese geri tuşuna basarak engel. Bu yordama devam edin sonraki 4 dakikadır.
- Fareler korkuyorsun ve çevrelerini keşfetmeye başlamak değil, bir kez günde fareler keşfetmek başlayana kadar yordamı yineleyin. Bu durumda, bir habituation belgili tanımlık tıkırtı için gerekli olabilir.
Not: Fareler tüm duyuları, yeni şeyler keşfetmek yüzden bir süre sonra onlar tanıdık olarak aynı deneyci tanıyacak. Fare el sözlü keşifler yapar ama invaziv bir şekilde olmamalı meydana gelir. Bu durum ortaya çıkarsa, el yavaş yavaş alınması gereken uzak eldivenleri yok emin olmak için. - Küçük parçalar halinde amaçlanan gıda ödül ev kafes ekleyin.
Not: Gıda ödül için laboratuvar hayvan beslenme gereksinimleri olması gerekir. Bu iletişim kuralı ' beyaz çikolata (bir şırınga sonunda düzenlenen) kullanılır, ancak diğer gıda, tahıllar, Kuru meyve, taze meyve gibi mümkündür. Hayvan tesisi hijyen gereksinimleri için özel araçlar talep olup Laboratuvar hayvanları için muamele etmek için çeşitli tedarikçileri. Sağlıklı seçeneği tercih edilir, ancak yüksek yağ ve yüksek şeker karışımı hayvanlar katılmak için büyük bir motivasyon verebilir.
- Sıçan varış gününde:
-
2. hafta: Habituation bilim adamı ve gıda ödül
- Yerleşime el ve önceki hafta içinde başladı yiyecek ödül için devam edin. Günde iki dakika için etkileşim zaman sınırı.
- Fare çok endişeli nerede durumlarda, habituation belgili tanımlık tıkırtı için gerekli olabilir.
- Bu davranış değerlendirilmesi için her beş saniyede 1 gün oturum sonra seçeneğini tıklatın. Eğer fare ile bir korku ile ilgili davranışı tepki verir, belgili tanımlık tıkırtı habituated gerekir.
- İçin belgili tanımlık tıkırtı habituation için fareyi kafeste oturumdan sonra yerleştirilir ödül tüketir beş kez'i tıklatarak. Fareyi artık herhangi bir korku ile ilgili davranışı gösterir göstermez habituation belgili tanımlık tıkırtı için tamamlandı.
-
3. hafta: Habituation yoğun kullanım için
- Gün 1-3, meslek veya fareyi birkaç saniye boyunca okşayarak başlayın ve yavaş yavaş (max. fare başına iki dakika) süresini uzatmak. Fare buz gibi kaçmak veya gizleme gibi itici izlerini gösterir durdurmak.
- Gün üzerinde dört ve beş, sonunda gıdıklıyor içinde işleme Cloutier ve ark. içinde açıklandığı gibi (2012). 27
Not: Başarılı bir habituation göstergelerini, örneğin, el ile sunulursa gıda ödül alarak fare veya el yakın getting fareler keşfetmek veya dokunmadan vardır.
2. tıkırtı eğitim
Not: Bir eğitim oturumu dört dakika sürer ve 15 saniyelik ara tarafından takip eğitim 30 saniye aralıklarla oluşur. Duraklatma sırasında eklenen herhangi bir malzeme çıkarmak. Gözlemci sıçan yapmak ne istiyor, ücretsizdir ve katılmak için ve ödül tüketmeye izin verilir, ancak yalnızca diğer fare üzerinde odaklanmıştır. Bütün fareler bir gün ve gün beş gıdıklayan. Eğitim başarı için deneyci hayvanların davranış önem veriyor ve sakin bir şekilde hareket çok önemlidir. Eğitim güçlü zamanlama deneyci'nın yeteneklerini ve gözlem gücüne bağlıdır. Hiçbir sözlü geribildirim eğitimde oluşur ve hayvanlarla sözlü iletişim oturumları dışında sadece oluşabilir. Davranışı tekrarı istenen davranışı öğrenme için bir göstergedir.
-
Hazırlık
- Ödül, tıkırtı/hedef sopa kombinasyonu, bir zamanlayıcı, temiz bir kafes, metal tüp ve diğer özel eğitim malzemesi gibi gerekli malzeme hazırlamak.
- Eve kafes için sessiz bir ortam aktarın.
- Tüm öğeleri kafes kaldırmak. Sadece iki fareler (eğitimli ve gözlemci) ve yatak malzemesi kafes içinde kalmalıdır.
-
Eğitim gün 1: birincil ve ikincil reinforcer arasında bağlantı kurma
- Kısa bir tünel ev kafese koyun, tercihen bir fare ile tanıdık.
- Fareyi tünelde oturur kadar bekleyin ve sonra fareyi ödül ile beslemek.
Not: Eğer fare eğitim durum şartlar altında besleme değil, habituation faz genişletilmiş ayarlanacağını veya gerekir. - Fareyi ödül ilgi gösterir ve ödül nibbling başlamak üzere en kısa zamanda, tıklayın ve fareyi üzerinde ödül besleme izin. İkiniz eşleştirme pekiştiriyor emin olmak için başarılı, tekrar tıklayarak ve 15 saniye için tatmin edici olduğunu. En az iki kez bu ilk eğitim oturumu sırasında bunu.
- Fare katılmak, birincil ve ikincil reinforcer arasında bir bağlantı kurulması belirtileri için kontrol edin. Bu sınıflandırma için temel kriter sıçan tarafından koklama, çevresinde ve gıda ödül sunar el bakarak veya ödüle (Şekil 2) bakmak için onun arka bacaklarda kaldırma tarafından gösterilen gıda ödül tahmin olduğunu. Bu durumda, sonraki bölüm ile devam; Aksi takdirde, "Training day 1" tekrar
-
2-5 gün eğitim: kısa bir tünelden geçerken
Not: Bir eğitim oturumu eğitim ve ara 15 saniye boyunca dört dakika 30 saniye farklı aşamadan oluşur.- Bu eve kafes iki kafeslerde bağlanacaktır ilk kullanılan/orijinal tünel olarak aynı malzeme kısa bir tünel yerleştirin.
- Sayacı başlatmak ve hemen eğitim ilk 30 saniye ile başlar.
- Tünel fare girdiği ilk kez ödül tünelin sonundaki mevcut. En kısa zamanda fare tünele girer, tıklayın ve fareyi ödül yemek izin.
- Gıda ödül götürün ve fareyi bir kez daha tünel için ilgi gösterir kadar bekleyin. En kısa zamanda fare tünele girer tıklatın ve tünel (Şekil 3) sonunda ödül sunuyoruz.
- Eğitim 30 saniye sonra 15 ikinci mola (Kaldır tünel) ekleyin.
- Tekrar eğitim 30 saniye ile bir sonraki 15 dakika için dört dakika mola.
- Fareyi dört katından fazla bir dakika, dur tıklayarak ve sadece ödül birincil reinforcer ile istenen davranışı gösteriyorsa.
- Dört dakika sonra kes.
-
Eğitim hafta 2: hedef sopa dokunmadan
- Sayacı başlatmak ve hemen eğitim ilk 30 saniye ile başlar. Her 15 saniyede bir sonu ekleme ve sonra eğitim ile devam et.
- Fareyi yakınındaki hedef sopa'nın küre yerleştirin.
- En kısa zamanda fare dünyanın ilgi gösterir,'ı tıklatın ve fareyi ödül. Bu birkaç kez yineleyin.
- Fareyi dört katından fazla bir dakika dünyanın ilgi gösteriyorsa, güçlendirmek için sonraki davranış "dünyanın burun dokunaklı".
- Fareyi dört katından fazla bir dakikalığına bu davranışı yinelenirse, birincil reinforcer tıklayarak ve sadece ödül durdurmak.
- Dört dakika sonra kes.
-
3 (beş gün) ve haftalık 4 (üç gün) Eğitim: kafes bir tünel üzerinden değiştirme
Not: Burada, yalnızca doğru temiz kafes tünelinden geçen takviye edilmiştir. Eğitim haftada 4 üç eğitim günleri için kısaltılmıştır. Bu sefer zaten eğitim başarı için yeterli ve değerlendirme veya veri daha fazla deneyler için kayıt için bir ek gün için fırsat verir.- Eve kafes ve yeni bir temiz kafes arasında bir bağlantı tarafından bir tünel tünel fare zaten tanıdık uzun bir versiyonu ekleyerek oluşturmak.
- Bir gün, herhangi bir eğitim gerçekleştirmek ve sadece izin vermek rats tünel incelemek. Onlar bile transfer olacak iyi bir şans ki bunu kendi vardır.
- İki günde, fareyi tünelden, kendi kirli temiz tarafa aktarmak için iki dakika veriyorum. Eğer fare özgürce tünelden aktarır, 2.5.8 adıma atlayın.
- Aksi takdirde, ilk 30 saniye oturum (alternatif eğitim 30 saniye arasında 15 ikinci mola) dört dakika için eğitim başlayın.
- ' I tıklatın ve tünel ilgi gösterir fare ödül.
- ' I tıklatın ve giriş tünele ödüllendirmek için gidin.
- Sıçan tünelde derin giderse tıklayın ve ödül için gidin.
- Fare tüm tünelden çalıştırır kadar benzer bir şekilde devam edin. Fareyi bakmak tünelin sonunda temiz kafesin içine başlar en kısa zamanda dünyanın hedef sopa, tıklama ve dünya dokunmak için ödül sunuyoruz.
- Sonunda, tünel bırakmak fare kılavuzu. Bu işlem için hedef sopa'nın küre kullan. Tünelin önünde dünya sunmak ve'ı tıklatın ve en kısa zamanda yeni kafeste adımlar ve dünya çok dokunaklı sıçan ödül.
- Fareyi "kirli" ev kafese geri aktarın. Bir yandan göbek altında veya göğüs çevresi ve onları (Şekil 1) kaldırın farelerin arka ayakları destekleyen diğer el koydu. Hedef sopa temiz kafes merkezinde Dünya mevcut. Tıklayın ve ödül olarak fare tünel üzerinden çalışır ve hedef sopa (Şekil 4) dokunuyor.
- Fare davranışı biraz dört katından fazla devam ederse, birincil reinforcer tıklayarak ve sadece ödül durdurmak.
- Dört dakika sonra kes.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Eğitim bir kohort on kadın başlıklı Lister (LD) fareler üzerinde yapılmıştır. On eğitimsiz ama nazikçe işlenmiş dişi LD rats bir kontrol grubu görev yaptı. Nazik işleme fareler sadece kendi vücut tarafından kaldırdı ve kuyruk tabanında kaldırdı değil anlamına gelir. Öğrenme tarafından gözlem değerlendirmek için değil eğitilmiştir ama kafes-arkadaşları eğitimli sıçan ve eğitim gözlemlemek mümkün 10 kadın LD Rat bir başka grup eklendi. Bütün fareler iklimlendirme ve habituation işleme için tamamlandı. Eğitim için yeni bir kafes metal boru (Şekil 4) üzerinden hareket oluşur. İstenen davranışı gösteri ödüllendirdi (Şekil 4). Her eğitim oturumu değerlendirildi ve eğitim başarı üç kategoride analiz edildi: katılım, katılım ve yönler davranış. Eğitimli fareler eğitim genellikle ilgi vardı ama aynı zamanda yeni çevre keşfetmek için yüksek bir motivasyon gösterdi. Özellikle ilk eğitim gün boyunca, yönler davranış çok önemli (Şekil 5) yapıldı. Sadece üç gün sonra eğitim, fareler bir çoğunluğu istenen davranışı göstermek ve belgili tanımlık kafes metal boru (Şekil 5) üzerinden değişti. Eğitim beş gün tamamladıktan sonra tüm eğitimli rats (Şekil 5) davranış gösterdi. Eğitim her eğitim beş gün ile 4 hafta boyunca devam edildi. Gözlemsel eğitim grubu "eğitim durumunu" izlerken dört hafta sonra Bu sıçanlar değerlendirildi. Bu değerlendirme için Biz fareler tünelden temiz kafesin içine bir antrenman sırasında koştu kaç kez sayılır. Genel olarak, fareler % 80'i (Şekil 6) izleyerek istenen davranışı öğrendim.
Biz daha fazla eğitim eğitimli fareler üzerinde olumlu bir etkisi vardı incelenmiştir. Bu nedenle, biz eğitim dört hafta sonra kısıtlama sırasında fare korku ile ilgili davranışlarını değerlendirildi. İdrara çıkma, dışkılama ve seslendirme kaydedildi ve caydırıcı bir puanı hesaplanmıştır (hiçbir korku ile ilgili davranış = 0, bir korku ile ilgili davranış = 1, iki korku ile ilgili davranışları = 2, üç korku ile ilgili davranışı = 3). Eğitimsiz grup içinde korku ile ilgili davranış puanları dikkate değer bir artış gösterdi (Şekil 7).
Resim 1 : Fare kaldırma nazik. Bir yandan göbek altında veya göğüs çevresi yerleştirilir ve öte yandan farenin arka ayakları destekler. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 : Koklama ve yetiştirme. Fare algılaması, etrafa veya kendi arka bacaklarda kaldırma gıda ödül ilgi gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3 : Kısa tünel. Bir sıçan kısa bir tünel üzerinden geçtikten sonra ödüllendirici. Gözlemci sıçan yordamı ilgi gösterir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 4 : Kafes değişiklikten sonra ödüllendirici. Bir sıçan metal bir borudan temiz bir kafes içine taşıdıktan sonra ödüllendirilir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 5 : Öğrenme kadar gün. Bir grup on kadın Lister kukuletalı fare tıkırtı terbiye kullanımı ile kafes metal bir boru ile değiştirmek için eğitilmiştir. Eğitim üç kategoride değerlendirilmiştir: katılım, katılım ve yönler davranış (nd: tespit: fareler hiçbiri ilgili davranış gösterdi). Bütün fareler eğitimli davranış eğitim beş gün sonra satın aldı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 6 : Gözlemsel öğrenme. On kadın Lister bir grup eğitimli sıçan kafes arkadaşları kendilerini eğitim geçmesi değil ama eğitim gözlemlemek için izin verildi edildi fareler kapşonlu. Gözlem dört hafta sonra fareler için gönüllü kafesi davranış değiştirme değerlendirildi. Genel olarak, gözlemsel öğrenme grubunun % 80'i kafes metal boru ile değişti. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 7: korku ile ilgili davranış puanı. Dört hafta sonra eğitim, tüm rats (eğitimli, gözlemsel öğrenme, eğitimsiz kontrol grubu) 3 grup arasında ölçülü ve vocalizations, dışkılama ve işeme kaydedilir ve daha sonra bir korku ile ilgili davranış puanı hesaplamak için kullanılan her fare için (hiçbir korku ile ilgili davranış = 0, bir korku ile ilgili davranış = 1, iki korku ile ilgili davranışları = 2, üç korku ile ilgili davranışı = 3). Korku ile ilgili davranışları ortalama ± SEM tasvir edilir İstatistiksel analiz için bir tek yönlü ANOVA sonraki Tukey'nın birden fazla karşılaştırma testi ile gerçekleştirildi. Eğitimsiz grup gruplar öğrenme eğitimli ve gözlemsel bir artan korku ile ilgili davranış puanı karşılaştırıldığında gösterdi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Yukarıda açıklanan protokol yararlı bir uygulama bizim yukarıda açıklanan clicker eğitim protokolü laboratuvar fareler10için genişletilmiş olmasıdır. Uygulama yalnızca birkaç dakika günlük toplam yedi hafta, iklimlendirme, habituation ve tıkırtı terbiye gibi üzerinde gerektirir. Fizibilite için bu protokolü hafta gün oturumları fareler çifti başına yaklaşık 10 dakika ile sınırlı. Protokol büyük sıçan kolonilerde kurmak zaman alıcı gibi görünür ama hayvanlar uzun süreli deneyler için veya doğurmak olarak belirlenmiş ise, uzun vadede değiştirme kafes sürecini geliştirmek için yardımcı olabilir. Buna ek olarak, deney gerçekleştirirken azaltılmış bir karışıklık sonuçları kalitesini artırabilir. , Bu protokol için kaydetti açıklıklı öneriler ve belirli gereksinimleri herhangi bir laboratuvar sığacak şekilde değiştirilmiştir her zaman daha fazla. Zaman açıklıklı hayvanlar görevleri hızlı bir şekilde bilgi yoksa fareler zaten habituated kısaltılabilir. Genel olarak, fareler eğitim ilgilenen ve istenen davranışı elde etmek için sadece birkaç tekrarlama "kafes değiştirmek bir boru aracılığıyla" gerektirir. Hatta eğitim olmadan, gözlemsel öğrenme grubunun % 80'i başarılı bir şekilde meşgul gözlem tarafından istenen davranışı gerçekleştirmek için öğrendim fareler test edilirken değiştirme kafes gönüllü. Burada, eğitimli kafes hayvan yetiştirme, sık gerçekleştirilen rutin bir işlem olduğundan ve hayvanlarda stres neden olduğu bilinen değiştirme için bir yöntem mevcut. Bu stres fiziksel rahatsızlık kafes değişiklik2,4sırasında en azından kısmen kaynaklanmaktadır. Eğitim fareler gönüllü olarak bu yetiştirme yordamı gerçekleştirmede işbirliği için bir seçenek verir. Bir görevde dikkat çekici bir seçim olan hayvanlar üzerinde yararlı etkiler için önerilen ve bu nedenle stres28azaltmaya yardımcı. Eğitim, diğer yolları olarak bilişsel zenginleştirme biçimi olarak hizmet vermektedir ayrıca yararlıdır. Fareler üzerinde olumlu etkisi bir azaltma tarafından varlık ölçülü üzerine korku ile ilgili davranış açıkça görünür oldu. Sadece doğrudan eğitim bu fareler daha sonra işlemek için yararlı olacağı ortaya çıktı ama gözlemsel öğrenme korku ilgili davranış puanı de azalır. Bizim fareler bir PVC-tünel ve kağıt mendil ile zenginleştirilmiş standart ortamlarda tutuldu. Eğitim ek olarak üç grup arasında tüm rats bir gıdıklama tahlil tabi tutuldu. Olduğu gibi hiçbir farkı yoktur sükroz tercih veya davranış (veri gösterilmez) üç grup arasında burrowing buna göre biz herhangi bir açıkları esenlik herhangi grupların içinde tespit etmedi. Yine de, eğitim gibi ölçülü süre azaltılmış korku ile ilgili davranışı gösterdiler fareler için yararlı olduğu ortaya çıktı.
Bir yandan, fareler eğitim insanlar ve hayvanlar, hangi hayvanlar açıkça yarar arasında nonstressful bir etkileşim yol açabilir. Öte yandan, ancak, insanlar arasında iletişim ve hayvanlar her zaman hijyen bulaşma riskini taşımaktadır. Özellikle, hayvanlar ve fareler24daha yüksek enfeksiyon oranı deneyci veya hayvan hademe konular sonuçlar ortaya çıkarılan deri arasında bağlantı kurun. Bu nedenle, hijyen düzeyine bağlı olarak hayvanlar dikkatli bir şekilde eğitilmesi ve koruyucu giysi ile gerekli uyarlamaları tesis gereksinimi bağlı olarak protokol yapılan eğitmenler tarafından giyilmelidir. Yeterince boru temizleme uygulanabilir ya da günlük iş için çok zaman alıcı değil, metal boru atlanabilir. Bu eğitim başarı kolay bir ölçüm sağlar ve aynı zamanda kendiliğinden kafesler arasında değişen fareler önler çünkü biz boru kullanılır. Ancak, eski yeni kafes kafes duvarlar hareket ettirerek kafesleri değiştirmek için fare eğitmek mümkündür. Çünkü fareler çok meraklı ve yönler kafes değiştirme sık sık oluşuyorsa bu işlem bile kadar prosedürü hızlandırmak. Boru ve hijyen açısından ödül seçerken, her ikisi de temiz, dezenfekte, kolay olduğundan emin olun veya basınçlı kap. Protokol çeşitli araştırma ayarlar için ayarlanabilir. Örneğin, köprüler, izin olan fareler kafesleri fiziksel risk ya da cerrahi girişimler sonrası yaraların karışıklık olmadan değiştirmek yararlı olabilir. Uzun vadede, bu iletişim kuralını eğitimli hayvanlar ve hayvan bakıcısı arasında daha az doğrudan temas sağlar. Böylece, hayvanlar için daha düşük bir mikrop yükü maruz kalır. Ayrıca, fareler yüzünden başarılı gözlemsel öğrenme tüm fareler eğitim gerektirir. Belgili tanımlık çoluk çocuk davranışı doğrudan anneden öğrenmek mümkün olsa da bu gözlemsel öğrenme kafesleri, ıslahı özellikle yararlı olabilir. Fareler ve hayvan hademe arasında doğrudan ama değil genel teması azaltarak aynı anda güven eğitim yoluyla bir ilişki kurulması sırasında bulaşma riskini azaltmaya yardımcı olabilir. Hijyenik seviyesidir açısından çünkü intercurrent enfeksiyonlar sırasında meydana gelen ıslahı ve deneysel aşamalarında önemli ölçüde hayvan deneyleri; bilimsel önemi sınırlamak Böylece, bu iletişim kuralı daha fazla su kuyusu-varlık ve bilim29geliştirmek için yardımcı olabilir.
Bu protokolü başarılı uygulanması için birkaç nokta dikkate alınmalıdır. Bir iklimlendirme dönemi fareler için olmalıdır onlar eğitim öncesinde taşınan Eğer yapılmaktadır. İklimlendirme süresinin uzunluğu bilimsel araştırma sorusuna adapte olmalıdır. Önceki çalışmalarda üç gün span kesin yeterli olabilir bir süre30,31deneyler göstermiştir, bir başka çalışmada ise gösterdiği sebepler kalır bu plazma iki hafta32arttı. Bu da çalışmanın, biz hayvan tesisine ticari Yetiştiricisinden taşıma sonra 14 gün bir iklimlendirme süre seçin. Her fare eğitim öncesinde rahatsızlık belirtileri için izlenmesi gerekir. Deneyci farelerle tanıdık değilse, alet öyle aynı derecede fare yüz buruşturma ölçek başvuru33için kullanılabilir. Bu noktalar eğitim başarı oranı azaltılmış olabilir. Fareler ve doğal olarak çok endişeli olabilir ek habituation aşamaları gerektirebilir. Korkunç bir hayvan tren çalışılıyor sınırlı başarı ortaya çıkarır. Daha az stresli ve korkunç hayvanlar deneme, başlangıçta daha hızlı eğitim tamamlanacaktır.
Habituation faz sonu kayıt temel verileri daha fazla deneyleri için uygun zaman noktasına geldi. İnvaziv yöntemler deneme için gerekliyse, protokol duraklatıldı. İnvaziv bir yöntem eşittir herhangi bir yöntemi gösterir veya ek VIII "yönergesi 2010/63/AB9" sınıflandırma prosedürleri önem hafif önem yola çıktı.
Eğitim oturumu için bir eğitim planı Protokolü sürekli olarak istenilen şekilde yapılacaktır emin olmak için yararlı bir araç olabilir. Bu tür planlama özellikle önemli farklı zaman Denemecileri ya da işleyicileri katılmaktadırlar.
Birlikte ele alındığında, bu çok kolay, uygulama odaklı iletişim kuralı sadece Hayvancılık yordamları ve araştırma ayarları sırasında stresi azaltmak ama da muhtemelen hayvan hijyen üzerinde olumlu etkileri vardır. Bu nedenle, kafes değişiklik de, fareler eğitim yüksek kaliteli araştırma ve araştırma hayvanların esenlik kolaylaştırabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Yazarlar en teknik desteği Thomas Wacker için minnettarız. Daha fazla doktor Mirjam Roth onu tür destek için teşekkür ediyoruz.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Target Stick with Clicker | Trixie | 2282 | |
| Metal Pipe (Alu Flexrohr nw 100) | Rotheigner | available in construction marktes | |
| White Chocolate/ white chocolate cream | Company doesn't matter, preferable organic quality | ||
| Prism Version 6.0 for Mac | GraphPad Software |
References
- Balcombe, J. P., Barnard, N. D., Sandusky, C. Laboratory routines cause animal stress. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 43 (6), 42-51 (2004).
- Sharp, J., Zammit, T., Azar, T., Lawson, D. Stress-like responses to common procedures in individually and group-housed female rats. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 42 (1), 9-18 (2003).
- Sharp, J. L., Zammit, T. G., Lawson, D. M. Stress-like responses to common procedures in rats: effect of the estrous cycle. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 41 (4), 15-22 (2002).
- Duke, J. L., Zammit, T. G., Lawson, D. M. The effects of routine cage-changing on cardiovascular and behavioral parameters in male Sprague-Dawley rats. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 40 (1), 17-20 (2001).
- Saibaba, P., Sales, G. D., Stodulski, G., Hau, J. Behaviour of rats in their home cages: Daytime variations and effects of routine husbandry procedures analysed by time sampling techniques. Laboratory Animals. 30 (1), 13-21 (1996).
- Sharp, J. L., Zammit, T. G., Azar, T. A., Lawson, D. M. Stress-like responses to common procedures in male rats housed alone or with other rats. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 41 (4), 8-14 (2002).
- Pekow, C. Defining, measuring, and interpreting stress in laboratory animals. Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 44 (2), 41-45 (2005).
- Wilson, L. M., Baldwin, A. L. Effects of environmental stress on the architecture and permeability of the rat mesenteric microvasculature. Microcirculation. 5 (4), 299-308 (1998).
- The European Union European Parliament and the Council of the European Union. Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22. Official Journal of the European Union. , The European Union European Parliament and the Council of the European Union Directive 2010/63/EU of the European Parliament and of the Council of 22 33-79 (2010).
- Leidinger, C., Herrmann, F., Thöne-Reineke, C., Baumgart, N., Baumgart, J. Introducing Clicker Training as a Cognitive Enrichment for Laboratory Mice. Journal of Visualized Experiments. 2017 (121), 1-12 (2017).
- Westlund, K. Training is enrichment-And beyond. Applied Animal Behaviour Science. 152, 1-6 (2014).
- Laule, G., Desmond, T. Positive reinforcement training as an enrichment strategy. Second Nature: Environmental Enrichment for Captive Animals. , 302-313 (1998).
- Laule, G. E., Bloomsmith, M. A., Schapiro, S. J. The Use of Positive Reinforcement Training Techniques to Enhance the Care, Management, and Welfare of Primates in the Laboratory. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 163-173 (2003).
- Kogan, L., Kolus, C., Schoenfeld-Tacher, R. Assessment of clicker training for shelter cats. Animals. 7 (10), 1-11 (2017).
- Miller, R., King, C. E. Husbandry training, using positive reinforcement techniques, for Marabou stork Leptoptilos crumeniferus at Edinburgh Zoo. International Zoo Yearbook. 47 (1), 171-180 (2013).
- Vertein, R., Reinhardt, V. Training female rhesus monkeys to cooperate during in-homecage venipuncture. Laboratory Primate Newsletter. 28, 1-3 (1989).
- Bloomsmith, M. A., et al. Positive reinforcement training to elicit voluntary movement of two giant pandas throughout their enclosure. Zoo Biology. 22 (4), 323-334 (2003).
- Bloomsmith, M. A., Stone, A. M., Laule, G. E. Positive reinforcement training to enhance the voluntary movement of group-housed chimpanzees within their enclosures. Zoo Biology. 17 (4), 333-341 (1998).
- Veeder, C. L., Bloomsmith, M. A., McMillan, J. L., Perlman, J. E., Martin, A. L. Positive reinforcement training to enhance the voluntary movement of group-housed sooty mangabeys (Cercocebus atys atys). Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 48 (2), 192-195 (2009).
- Coleman, K., Maier, A. The use of positive reinforcement training to reduce stereotypic behavior in rhesus macaques. Applied Animal Behaviour Science. 124 (3-4), 142-148 (2010).
- Newcomer, C. E., Fox, J. G. Zoonoses and other human health hazards. The Mouse in Biomedical Research, Vol. II, Diseases. , 719-745 (2007).
- Boot, R., Koopman, J. P., Kunstýl, I. Microbiological standardization. Principles of Laboratory Animal Science. , 143-165 (1993).
- Nicklas, W. Possible routes of contamination of laboratory rodents kept in research facilities. Scandinavian Journal of Laboratory Animal Science. 20, 53 (1993).
- FELASA working group on revision of guidelines for health monitoring of rodents and rabbits et al. FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units. Laboratory Animals. 48 (3), 178-192 (2014).
- Nicklas, W., et al. Implications of infectious agents on results of animal experiments. Laboratory Animals. 33, 39-87 (1999).
- Tierärztliche Vereinigung für Tierschutz e.V. Merkblatt Nr. 160. Heimtiere: Ratten. , (2014).
- Cloutier, S., Panksepp, J., Newberry, R. C. Playful handling by caretakers reduces fear of humans in the laboratory rat. Applied Animal Behaviour Science. 140 (3-4), 161-171 (2012).
- Bassett, L., Buchanan-Smith, H. M., McKinley, J., Smith, T. E. Effects of Training on Stress-Related Behavior of the Common Marmoset (Callithrix jacchus) in Relation to Coping With Routine Husbandry Procedures. Journal of Applied Animal Welfare Science. 6 (3), 221-233 (2003).
- Baker, D. G. Natural pathogens of laboratory mice, rats, and rabbits and their effects on research. Clinical Microbiology Reviews. 11 (2), 231-266 (1998).
- van Ruiven, R., Meijer, G. W., Wiersma, A., Baumans, V., Van Zutphen, L. F. M., Ritskes-Hoitinga, J. The influence of transportation stress on selected nutritional parameters to establish the necessary minimum period for adaptation in rat feeding studies. Laboratory Animals. 32 (4), 446-456 (1998).
- Capdevila, S., Giral, M., Ruiz de la Torre, J. L., Russell, R. J., Kramer, K. Acclimatization of rats after ground transportation to a new animal facility. Laboratory Animals. 41 (2), 255-261 (2007).
- Arts, J. W. M., Kramer, K., Arndt, S. S., Ohl, F. The impact of transportation on physiological and behavioral parameters in Wistar rats: implications for acclimatization periods. ILAR journal / National Research Council, Institute of Laboratory Animal Resources. 53 (1), 82-98 (2012).
- Sotocina, S. G., et al. The Rat Grimace Scale: A Partially Automated Method for Quantifying Pain in the Laboratory Rat via Facial Expressions. Molecular Pain. 7, (2011).
