Method Article

Ultrasuono ad alta frequenza per l'analisi dello sviluppo fetale e placentare In Vivo

DOI:

10.3791/58616

⸱

November 8th, 2018

 ,  , 
1Experimental Obstetrics and Gynecology, Medical Faculty, Otto-von-Guericke University, 2Institute of Molecular and Clinical Immunology, Medical Faculty, Otto-von-Guericke University

In This Article

Summary

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Qui descriviamo la tecnica degli ultrasuoni ad alta frequenza per l'analisi in vivo dei feti in topi. Questo metodo consente il follow-up dei feti e l'analisi dei parametri placentari come pure il flusso di sangue materno e fetale durante la gravidanza.

Abstract

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Formazione immagine di ultrasuono è un metodo diffuso usato per rilevare anomalie organo e tumori in tessuti umani e animali. Il metodo è non invasiva, innocua e indolore, e l'applicazione è facile, veloce e può essere fatto ovunque, anche con dispositivi mobili. Durante la gravidanza, l'imaging ad ultrasuoni come standard viene utilizzato per monitorare attentamente lo sviluppo del feto. La tecnica è importante valutare la restrizione della crescita intrauterina (IUGR), una complicazione della gravidanza con breve e lungo termine conseguenze di salute per la madre ed il feto. Comprensione del processo di IUGR è indispensabile per lo sviluppo di strategie terapeutiche efficaci.

Il sistema a ultrasuoni utilizzato in questo manoscritto è un apparecchio a ultrasuoni prodotto per l'analisi di piccoli animali e può essere utilizzato in vari campi di ricerca, compresa la ricerca di gravidanza. Qui descriviamo l'utilizzo del sistema per l'analisi in vivo dei feti da natural killer (NK) delle cellule/delle cellule di albero (MC)-carenti le madri che partoriscono cuccioli crescita-limitata. Il protocollo comprende la preparazione del sistema, manipolazione dei topi prima e durante le misurazioni e l'utilizzo di B-mode, doppler modalità colore e modo di doppler di onda di impulso. Dimensione fetale, placentare e rifornimento di sangue al feto sono stati analizzati. Abbiamo trovato l'impianto ridotte dimensioni e più piccole placente in topi NK/MC-carenti da metà gestazione in poi. Inoltre, MC/NK-carenza è stata associata all'assenza e invertito il flusso diastolico fine il fetale umbilicalis di Arteria(UmA) e un indice di elevata resistenza. I metodi descritti nel protocollo possono essere utilizzati facilmente per argomenti di ricerca correlati e non correlati.

Introduction

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L'ultrasuono è le onde sonore con frequenze di sopra della gamma udibile dell'orecchio umano, superiore a circa 20 kHz1. Animali come i pipistrelli, Galles, delfini2,3,4di topi, ratti5e mouse lemuri6 tutti utilizzare gli ultrasuoni per orientamento o comunicazione. Gli esseri umani prendono vantaggio degli ultrasuoni per diverse applicazioni tecniche e mediche. Un apparecchio a ultrasuoni è in grado di creare l'onda sonora e distribuire e rappresentano il segnale. Se l'ultrasuono incontra un ostacolo, il suono si ri....

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Protocol

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Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal "Landesverwaltungsamt Sachsen Anhalt: 42502-2-1296UniMD."

1. procedura sperimentale

  1. Compagno di 6 a 8-settimana-vecchio femmina MC-carenti C57BL/6J-Cpa3Cre /+ (Cpa3Cre /+) topi e MC-sufficiente C57BL/6J-Cpa3+/+ (controlli di Colonia; Cpa3+/+) con i maschi BALB/c.
  2. Definire il giorno di gestazione (gd) 0 dopo la conferma della spina vaginale e trattare le femmine immediatamente dopo la conferma di spina.
    Nota: Una spina è lo sperma del maschio nell'orifizio v....

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Results

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Singoli componenti del sistema ad ultrasuoni utilizzati in questo manoscritto sono mostrati nella Figura 1. La figura 2 Mostra rappresentante immagini ecografiche acquisite in B-mode a gd5, 8, 10 e 12 (B) e misura di zona corrispondente impianto risultati (A), dimostrando una zona significativa riduzione impianto di anti-CD122-trattati Cpa3Cre / + topi da gd10 in poi.

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Discussion

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Utilizzando il nostro sistema di ultrasuono, abbiamo dimostrato la restrizione della crescita fetale nelle madri MC/NK-carenti da gd10 su. Inoltre, a gd10 e 12, abbiamo osservato ridotte dimensioni placentari e alle gd14 l'assenza o la reversione del flusso diastolico fine in UmAs di alcuni feti dei topi uMC/uNK-carenti. Questo segno di scarsa vascolarizzazione è stato associato con un indice di resistenza significativa delle arterie che indica IUGR. Risultati confermano il ruolo importante di uMCs e uNKs in gravidanza e.......

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Disclosures

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Gli autori non hanno nulla a rivelare.

Acknowledgements

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Molte grazie per l'azienda di Imaging dello strumento (soprattutto a Magdalena Steiner, Katrin Suppelt e Sandra Meyer) per il loro supporto piacevole e veloce e per rispondere a tutte le nostre domande riguardanti il sistema di Imaging e il suo utilizzo subito e completamente. Siamo grati al Prof Hans-Reimer Rodewald e Dr. Thorsten Feyerabend (DKFZ Heidelberg, Germania) per fornire la colonia di Cpa3. Inoltre, ringraziamo Stefanie Langwisch, chi era incaricato delle colonie di mouse e chi ha generato le immagini nella figura 1.

Il lavoro e il sistema di Imaging sono stati finanziati mediante sovvenzioni dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
FOGLIA anti-Maus CD122 (IL-2Rb)BioLegend123204Klon TM-β 1; 500 & micro; g
Sistema Vevo 2100  FujiFilm VisualSonics Inc.Trasduttore  MS550D-0421
Vevo LAB Software  FujiFilm VisualSonics Inc.
IsofluranoBaxterPZN: 6497131
Gel per elettrodiParker12_8
Nastro chirurgico3M Transpore1527-1
Crema per gli occhiBayerPZN: 1578675
Applicatori con punta in cotoneRaucotupf11969100 pezzi
Crema depilatoriaReckitt Benckiser
CompresseNobamed Paul Danz AG85611010 x 10 cm
Gel per ultrasuoniGello GmbH246000
2077626

References

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  1. Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der Fötus die Ultraschallwelle hören und die Hitze spüren? Ultraschall in der Medizin. 33 (3), Stuttgart, Germany. 215-217 (1980).
  2. Jones, G. Echolocation. Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).
  3. Simmons, J. A.

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High Frequency UltrasoundFetal DevelopmentPlacental AnalysisIn Vivo ImagingB Mode ImagingColor DopplerPulse Wave DopplerResistance IndexUmbilical ArteryGestational Measurement

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