Summary

Yüksek frekans ultrason Fetal ve plasental geliştirme Vivo içinde analizi için

Published: November 08, 2018
doi:

Summary

Burada biz fetusa farelerde vivo çözümlenmesi için yüksek frekans ultrason tekniği tarif. Bu yöntem, fetusa takibi ve plasental parametreleri hem de gebelik boyunca maternal ve fetal kan akışı analizi sağlar.

Abstract

Ultrason görüntüleme organ anomalileri ve tümör insan ve hayvan dokularda algılamak için kullanılan yaygın bir yöntemdir. Non-invaziv, zararsız ve ağrısız yöntemidir ve uygulama kullanımı kolay, hızlı ve her yerde, hatta mobil cihazlar ile yapılabilir. Gebelikte, ultrason görüntüleme size fetal gelişim yakından izlemek için kullanılır. İntrauterin büyüme kısıtlama (IUGR), kısa ve uzun vadeli sağlık sonuçları ile anne ve fetüs için gebelik komplikasyonu değerlendirmek önemli bir tekniktir. IUGR süreci anlamak etkili tedavi stratejileri geliştirmek için vazgeçilmezdir.

Bu el yazması kullanılan ultrason sistemi küçük hayvanlar analiz için üretilen bir ultrason cihazı ve gebelik araştırma dahil olmak üzere çeşitli araştırma alanlarında kullanılabilir. Burada doğal öldürücü (NK) hücre/mast hücresi (MC) gelen fetusa vivo içinde analiz için sistem kullanımını açıklamak-büyüme tarafından kısıtlanmış pups Doğum eksik anneler. Fareler daha önce ve ölçümleri ve B-mod kullanımı sırasında işleme, renkli doppler modu ve darbe-wave doppler modu, protokolü hazırlama sistemi içerir. Fetal boyutu, plasental boyutu ve fetus için kan akımı analiz edildi. Azaltılmış implantasyon boyutları ve daha küçük plasenta orta gebelik itibaren gelen NK/MC-eksik farelerde bulduk. Buna ek olarak, MC/NK-eksikliği yok ile ilişkili ve fetal Arteria umbilicalis(UmA) ve yüksek direnç dizin son diyastolik akımını ters. İletişim kuralında tanımlanan yöntemleri kolayca ilgili ve ilgili olmayan araştırma konuları için kullanılabilir.

Introduction

Ultrason frekansları yukarıda insan kulağının, yaklaşık 20 kHz1‘ den daha yüksek sesli aralığı ile ses dalgaları var. Hayvanlar gibi yarasalar, Galler, yunuslar2,3, fareler4, fareler5ve fare maymunları6 tüm yönlendirme veya iletişim için ultrason kullanın. İnsanlar çeşitli teknik ve tıbbi uygulamalar için ultrason avantajlarından yararlanın. Bir ultrason cihazı ses dalgası oluşturma ve dağıtma ve sinyal gösterme yapabiliyor. Ultrason bir engel karşılaşırsa, ses absorbe yansıtılır veya üzerinden gidebilirsiniz. Ultrason uygulama ultrason, adlı bir görüntüleme yöntemi olarak Organik dokular insan veya hayvan hastalıklarıyla ilgili ilaç kalp (ekokardiyografi)7,gibi8, akciğer9, tiroid bezi10 analizi için kullanılır , böbrekler11ve idrar ve üreme yolları12,13; safra taşı14 ve tümör15algılama; ve kan damarları veya organları16,17perfüzyon değerlendirilmesi. Ultrason için standart bir yol Doğum öncesi bakım hamilelik sırasında ve fetal gelişimsel engelli veya bozuklukları erken kabul edilebilir. Özellikle, cenin gelişimini yakından mümkün IUGR tanımak için düzenli aralıklarla kontrol edilmektedir. Bu büyüme kısıtlamaları18,19,20,21işaret edebilir gibi sonunda, fetal kan akımı izlenebilir.

Ultrason görüntüleme radyografi sesin zararsızlık dokuların analiz edilecek gibi diğer yöntemlerine göre önemli bir avantajı. Bu kolay ve hızlı yöntem, non-invaziv, ağrısız ve -ebilmek var olmak birkaç kez kullanılan. Bir ultrason cihazı ilk harcama pahalıdır; Ancak, gerekli tüketim malzemeleri ucuz. Bu el yazması kullanılan ultrason sistemi hayvan modelleri aralığı için uygundur (yani, fareler ve balık) insanlar için bir ultrason cihazı 3-15 mHz frekans gerektirir iken 15-70 mHz frekans fareler için gereklidir.

Mevcut el yazması B-mod, renkli doppler modu ve darbe-wave doppler modu kullanımı için bir protokol açıklar. Tanım hazırlık fareler gibi performans, veri toplama ve depolama içerir. Bu yöntem başarıyla uygulanan farklı fare suşları hiç gebelik gün oldu ve fetal ve plasental geliştirme yanı sıra maternal ve fetal kan parametreleri araştırmak için kullanılır. Burada, tüm uygulamalar tabanlı çalışmalarımız hamile MC/NK-eksik ve kontrol fareler istihdam açıklanmıştır.

Protocol

Tüm yöntem tanımlamak burada tarafından onaylanmış olan “Landesverwaltungsamt Sachsen Anhalt: 42502-2-1296UniMD.” 1. deneysel bir işlem Dostum 6-8-hafta-yaşlı kadın MC-eksik C57BL/6J-Cpa3Cre /+ (Cpa3Cre /+) fareler ve MC yeterli C57BL/6J-Cpa3+/+ (koloni denetimleri; Cpa3+/+) BALB/c erkekler. Kadın hemen tak onay alındıktan sonra tedavi ve gebelik gün (…

Representative Results

Bu el yazması kullanılan ultrason sisteminin bileşenleri tek tek Şekil 1′ de gösterilmiştir. Şekil 2 temsilcisi ultrason görüntüleri B-modunda gd5, 8, 10 ve 12 (B) ve karşılık gelen implantasyon alan ölçüm sonuçları (A)bir önemli Azaltılmış implantasyon bölgesinde gösteren, elde gösterir Anti-CD122-tedavi Cpa3Cre / + gd10 itibaren gelen fareler. <p class="j…

Discussion

Ultrason sistemimizi kullanarak, biz fetal büyüme kısıtlama MC/NK-eksik annelerinde gd10 üzerinde gösterdi. Ayrıca, gd10 ve 12, biz indirimli plasental boyutları, gözlenen ve gd14, yokluğu veya bazı fetusa uMC/uNK-eksik farelerin UMASâ son diyastolik akım reversion. Zavallı vaskülarizasyon bu iz IUGR gösteren arterler önemli direnç dizini ile ilişkili. Sonuçları uMCs ve uNKs önemli rolü gebelik ve fetal iyilik ve IUGR seyri anlamak onaylamak.

Protokol gebelik güne gd5 i…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Çok görüntüleme aracı şirkete (özellikle Magdalena Steiner, Katrin Suppelt ve Sandra Meyer) hoş ve hızlı destek ve derhal ve tamamen görüntüleme sistemi ve kullanım ile ilgili tüm sorulara cevap için teşekkürler. Cpa3 koloni sağlamak için Prof. Hans-Reimer Rodewald ve Dr. Thorsten Feyerabend (DKFZ Heidelberg, Almanya) için minnettarız. Ayrıca, Stefanie fare kolonileri sorumlu kimdi ve kim resimleri Şekil 1’de oluşturulan Langwisch, teşekkür ederim.

İş ve görüntüleme sistemi projeleri DFG öncelik programı 1394 “Mast hücreleri sağlık ve hastalığında.” gömülü olan hibe Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) üzerinden A.C.Z. (ZE526/6-1 ve AZ526/6-2) tarafından finanse edilmiştir

Materials

LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb) BioLegend 123204 Klon TM-β1; 500 µg
Vevo 2100 System  FujiFilm VisualSonics Inc. Transducer MS550D-0421
Vevo LAB Software  FujiFilm VisualSonics Inc.
Isoflurane Baxter PZN: 6497131
Electrode gel Parker 12_8
Surgical tape 3M Transpore 1527-1
Eye cream Bayer PZN: 1578675
Cotton tipped applicators Raucotupf 11969 100 pieces
Depilatory cream Reckitt Benckiser 2077626
Compresses Nobamed Paul Danz AG 856110 10 x 10 cm
Ultrasound gel Gello GmbH 246000

References

  1. Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der Fötus die Ultraschallwelle hören und die Hitze spüren?. Ultraschall in der Medizin. 33 (3), 215-217 (1980).
  2. Jones, G. Echolocation. Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).
  3. Simmons, J. A. The sonar receiver of the bat. Annals of the New York Academy of Sciences. 188, 161-174 (1971).
  4. Zala, S. M., Reitschmidt, D., Noll, A., Balazs, P., Penn, D. J. Sex-dependent modulation of ultrasonic vocalizations in house mice (Mus musculus musculus). Public Library of Science ONE. 12 (12), e0188647 (2017).
  5. Wöhr, M., Seffer, D., Schwarting, R. K. W. Studying Socio-Affective Communication in Rats through Playback of Ultrasonic Vocalizations. Current Protocols in Neuroscience. 75, 1-8 (2016).
  6. Hasiniaina, A. F., et al. High frequency/ultrasonic communication in a critically endangered nocturnal primate, Claire’s mouse lemur (Microcebus mamiratra). American Journal of Primatology. , e22866 (2018).
  7. Yeo, L., Romero, R. Color and power Doppler combined with Fetal Intelligent Navigation Echocardiography (FINE) to evaluate the fetal heart. Ultrasound in Obstetrics & Gynecology. 50 (4), 476-491 (2017).
  8. Teichholz, L. E. Echocardiography in valvular heart disease. Progress in Cardiovascular Diseases. 17 (4), 283-302 (1975).
  9. Zechner, P. M., et al. Lungensonographie in der Akut- und Intensivmedizin. Der Anaesthesist. 61 (7), 608-617 (2012).
  10. Blank, W., Schuler, A. Sonografie der Schilddrüse – Update 2017. Praxis. 106 (12), 631-640 (2017).
  11. Hansen, K. L., Nielsen, M. B., Ewertsen, C. Ultrasonography of the Kidney: A Pictorial Review. Diagnostics. 6 (1), (2015).
  12. Older, R. A., Watson, L. R. Ultrasound anatomy of the normal male reproductive tract. Journal of Clinical Ultrasound. 24 (8), 389-404 (1996).
  13. Reeves, J. J., Rantanen, N. W., Hauser, M. Transrectal real-time ultrasound scanning of the cow reproductive tract. Theriogenology. 21 (3), 485-494 (1984).
  14. Sharma, M., Somani, P., Sunkara, T. Imaging of gall bladder by endoscopic ultrasound. World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 10 (1), 10-15 (2018).
  15. Weskott, H. -. P. Ultraschall in der Diagnostik maligner Lymphome. Der Radiologe. 52 (4), 347-359 (2012).
  16. Shirinifard, A., Thiagarajan, S., Johnson, M. D., Calabrese, C., Sablauer, A. Measuring Absolute Blood Perfusion in Mice Using Dynamic Contrast-Enhanced Ultrasound. Ultrasound in Medicine & Biology. 43 (8), 1628-1638 (2017).
  17. Quaia, E. Assessment of tissue perfusion by contrast-enhanced ultrasound. European Radiology. 21 (3), 604-615 (2011).
  18. Saw, S. N., Poh, Y. W., Chia, D., Biswas, A., Zaini Mattar, C. N., Yap, C. H. Characterization of the hemodynamic wall shear stresses in human umbilical vessels from normal and intrauterine growth restricted pregnancies. Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. , (2018).
  19. Kessler, J., Rasmussen, S., Godfrey, K., Hanson, M., Kiserud, T. Fetal growth restriction is associated with prioritization of umbilical blood flow to the left hepatic lobe at the expense of the right lobe. Pediatric Research. 66 (1), 113-117 (2009).
  20. Laurin, J., Lingman, G., Marsál, K., Persson, P. H. Fetal blood flow in pregnancies complicated by intrauterine growth retardation. Obstetrics and Gynecology. 69 (6), 895-902 (1987).
  21. Arduini, D., Rizzo, G., Romanini, C., Mancuso, S. Fetal blood flow velocity waveforms as predictors of growth retardation. Obstetrics and Gynecology. 70 (1), 7-10 (1987).
  22. Meyer, N., et al. Chymase-producing cells of the innate immune system are required for decidual vascular remodeling and fetal growth. Scientific Reports. 7, 45106 (2017).
  23. Meyer, N., Schüler, T., Zenclussen, A. C. Simultaneous Ablation of Uterine Natural Killer Cells and Uterine Mast Cells in Mice Leads to Poor Vascularization and Abnormal Doppler Measurements That Compromise Fetal Well-being. Frontiers in Immunology. 8, 1913 (2017).
  24. Evans, D. H., Jensen, J. A., Nielsen, M. B. Ultrasonic color Doppler imaging. Interface Focus. 1 (4), 490-502 (2011).

Play Video

Cite This Article
Meyer, N., Schüler, T., Zenclussen, A. C. High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo. J. Vis. Exp. (141), e58616, doi:10.3791/58616 (2018).

View Video