Summary
Hier beschrijven we de protocollen voor het toepassen van gedefinieerde mechanische ladingen op muis kalveren en voor het bewaken van de gelijktijdige intramusculaire drukveranderingen. De experimentele systemen die we hebben ontwikkeld kunnen nuttig zijn voor het onderzoek van het mechanisme achter de gunstige effecten van lichaamsbeweging en massage.
Abstract
Massage wordt over het algemeen erkend als gunstig voor het verlichten van pijn en ontsteking. Hoewel eerdere studies hebben gemeld anti-inflammatoire effecten van massage op skeletspieren, de moleculaire mechanismen achter zijn slecht begrepen. We hebben onlangs een eenvoudig apparaat ontwikkeld om lokale cyclische compressie (LCC) toe te passen, die intramusculaire drukgolven kan genereren met variërende amplituden. Met behulp van dit apparaat hebben we aangetoond dat LCC inflammatoire reacties van macrofagen in situ moduleert en de immobilisatie-geïnduceerde spieratrofie verlicht. Hier beschrijven we protocollen voor de optimalisatie en toepassing van LCC als een massage-achtige interventie tegen immobilisatie-geïnduceerde ontsteking en atrofie van skeletspieren van muis achterpoten. Het protocol dat we hebben ontwikkeld kan nuttig zijn voor het onderzoek van het mechanisme onderliggende gunstige effecten van lichaamsbeweging en massage. Ons experimentele systeem biedt een prototype van de analytische benadering om de mechanische regulatie van spier homeostase te verheldering, hoewel verdere ontwikkeling moet worden gemaakt voor uitgebreidere studies.
Introduction
Massage is over het algemeen erkend als gunstig voor zowel pijnverlichting en verbetering van de fysieke prestaties onder competitieve atleten en niet-atleten gelijk1,2. In feite, eerdere studies hebben aangetoond dat massage onderdrukt lokale ontsteking3 en vraagt herstel van de post-oefening spier schade4,5. Moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de gunstige effecten van massage blijven grotendeels onbekend.
Een van de moeilijkheden met het mechanistische onderzoek naar massage heeft betrekking op de reproduceerbaarheid van experimentele technieken waarmee massage-achtige interventies worden getest. In eerdere studies betrekken experimentele procedures die massage nabootsen voornamelijk de toepassing van fysieke ingrepen met lichaamsdelen van de beoefenaren, zoals palmen en vingers6,7,8. Dit maakt het moeilijk om precies te reproduceren hun magnitude, frequentie, duur, en modus.
Veel apparaten zijn ontwikkeld om gedefinieerde mechanische belastingen toe te passen op de doelweefsels. Bijvoorbeeld, Zeng et al. hebben een pneumatisch systeem ontwikkeld voor de lengte-Wise mechanische belasting van ratten ' achterledematen9 en Wang et al. hebben een mechatronisch apparaat ontwikkeld dat massage-achtige mechanische ladingen kan toepassen op achterpoten van ratten en konijnen met Real-time feedback controle10. In vergelijking met hen, onze lokale cyclische compressie (LCC) systeem is veel eenvoudiger, veeleisende veel minder kosten voor de bouw. Niettemin, we kunnen reproduceren de intramusculaire drukveranderingen die worden gegenereerd tijdens de milde spiercontractie. Met behulp van dit apparaat, we hebben met succes aangetoond dat de massage-achtige mechanische interventies moduleren lokale interstitiële vloeistof dynamiek en verlichten immobilisatie-geïnduceerde spieratrofie11.
Hier beschrijven we de details van ons apparaat en het Protocol, die kunnen helpen bij het verkennen van de moleculaire mechanismen achter de positieve effecten van oefeningen en massages. De schema's van het protocol worden gepresenteerd als aanvullend figuur 1.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dierproeven werden uitgevoerd onder de goedkeuring door het institutioneel Dierenzorg-en gebruiks Comité van het nationaal revalidatiecentrum voor personen met een handicap.
1. immobilisatie van de muis bilaterale achterpoten
Opmerking: mannelijke C57BL/6 muizen werden gebruikt voor experimenten op de leeftijd van 11-12 weken na acclimatie gedurende ten minste 7 dagen.
- Voldoende anesthetiseren een muis met behulp van natrium pentobarbital (50 mg/kg i.p.). Zorg ervoor dat muizen niet reageren op een hindledemaat teen knijpen.
Opmerking: Voer de procedure van immobilisatie tussen 10 uur en 7 p.m. uit om de mogelijke effecten op de toevoer activiteit van muizen te minimaliseren. - Breng chirurgische tapes op de bilaterale achterbenen van de muis gelegd in een rugligging met de kniegewrichten verlengd en enkelgewrichten plantar-flexed.
- Plaats een aluminium draad (Zie tabel met materialen) op de romp op L4-5 wervelkolom niveau en spoel de draad in een spiraalvormige configuratie rond de achterpoten met 5 mm openingen tussen elke draai van de spiraal laag (Figuur 1a). Zorg ervoor dat u de draad niet te strak in de spoel en Vermijd het verstoren van de lokale bloedtoevoer.
- Om de mogelijkheid van het ontsnappen van de bedrading te minimaliseren, immobiliseer de heupgewrichten op de positie van 90 ° ontvoering door het handmatig aanpassen van de configuratie van aluminium draad.
- Keer de muizen terug naar hun oorspronkelijke kooien. 3 h later, zorg ervoor dat ze herstellen van anesthesie en toegang tot voedsel en water zoals gebruikelijk.
- Huis 3-6 geïmmobiliseerde muizen per kooi als vóór immobilisatie.
2. meting van de intramusculaire druk van de muis gastrocnemius spieren
Opmerking: verschillende gewichten van cilindrische eenheden (36 g, 66 g en 200 g) werden getest in de drukbewakings experimenten gecombineerd met LCC. Deze meting werd afzonderlijk uitgevoerd van de experimenten om spier ontsteking en atrofie te analyseren (zie stap 3-5 voor meer details) d.w.z. dat de muizen die aan de drukmeting onderworpen zijn, niet werden gebruikt voor histologische analyses.
- Omdat drukmeting leidt tot meer invasieve ingrepen (bijv. huid incisie en naald inbrengen) in vergelijking met de bedrading van de achterledematen en LCC, gebruikt u een mengsel van drie verdovingsmiddelen (Medetomidine 0,75 mg/kg, midazolam 4,0 mg/kg en butorphanol 5,0 mg/kg, i.p.). Zorg ervoor dat muizen niet reageren op de hindledemaat teen pinch.
- Leg de muis in een liggende positie, maak een 2-mm incisie met een scalpel op het achterste kalf na ontharing met een elektrisch scheerapparaat en semi-steriliseren van het huidoppervlak met 70% ethanol-en chloorhexidine-geweekte absorberend katoen.
- Steek een 20 G inwoning naald in de gastrocnemius spier met een stompe hoek (150 ° – 170 °) op het huidoppervlak.
- Gebruik de plastic schede van de naald als een geleider, plaats een sensor van de bloeddruk Telemeter (Zie tabel van de materialen) in het midden van de buik van gastrocnemius spier, en verwijder vervolgens de schede van de spier.
- Nadat u de huid met 4-0 nylon hecht, past u LCC toe met verschillende gewichten van cilindrische eenheden op het kalf in de muizen (zie stap 3 voor meer informatie) en bewaakt u de intramusculaire druk met behulp van software voor biologische signaalanalyse (Zie tabel van Materialen).
- Keer de muizen terug naar hun oorspronkelijke kooien. 3 h later, zorg ervoor dat ze herstellen van anesthesie/analgesie en hebben toegang tot voedsel en water zoals gebruikelijk.
3. lokale cyclische compressie (LCC) op muis kalveren
- Met uitzondering van de intramusculaire drukmeting en euthanatatie (dat wil zeggen, cervicale dislocatie), gebruik natrium pentobarbital (50 mg/kg i.p.) voor anesthesie.
- Demonteer de muis van de bedrading van de achterledematen en leg deze in een liggende positie met de kniegewrichten verlengd en de enkelgewrichten plantar-flexed zodat de kalveren naar boven. Bevestig de muis achterpoten niet op het podium.
- Breng LCC aan op het kalf door verticaal een cilindrische gewichtseenheid (Figuur 1b) te verplaatsen die bedekt is met een kussenpad (figuur 1c) bij 1 Hz gedurende 30 minuten per dag, 7 dagen.
- Na elke aanval van de dagelijkse LCC, re-Wire de muis achterpoten.
4. immunohistochemische analyse van gastrocnemius
- Euthanctie de muis door cervicale dislocatie onder adequate anesthesie/analgesie door intraperitoneale injectie van een mengsel van drie verdovingsmiddelen (Medetomidine 0,75 mg/kg, midazolam 4,0 mg/kg, en butorphanol 5,0 mg/kg).
- Na het ontharen van het achterste kalf oppervlak, maak een huid incisie, en ontleden gastrocnemius spieren door scheiding van tibio-fibulaire bot met behulp van een chirurgische schaar en snel bevriezen ze in een optimale snijtemperatuur samengestelde oplossing.
- Bereid met behulp van een cryostat Cryo-sectie monsters van gastrocnemius-spieren op glazen dia's. Bewaar de monsters in een vriezer van 80 °C tot de analyse.
- Neem de monsters van de gastrocnemius Cryo-sectie om te worden geanalyseerd uit de vriezer en dehydraat ze door het drogen van de lucht bij kamertemperatuur.
- Gebruik een Liquid blocker pen om een gebied te tekenen dat alle Cryo-secties op de dia bevat. De cirkel zal voorkomen dat de oplossingen van de glijbaan vloeien.
- Vermijd het drogen van de monsters door de glaasjes in een bakje te plaatsen waarin een vochtige omgeving wordt gecreëerd met een door water geweekte papieren doek.
- Breng 100 μL blokkerende buffer (fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) met 0,25% caseïne, dragerproteïne en 0,015 M natrium azide) gedurende 30 min bij kamertemperatuur aan.
- Spoel de dia's tweemaal door met PBS-T (PBS met 0,1% polyoxyethyleen polyethyleenglycolsorbitaanmono monolauraat (Zie tabel van de materialen) gedurende 5 minuten te bebroed.
- Breng 100 μL primair antilichaam, verdund met PBS, aan op elk monster, bedek het bakje met een deksel en incuberen 's nachts bij kamertemperatuur.
- Was 3 keer met PBS-T (5 min voor elke wasbeurt).
- Breng 100 μL secundair antilichaam verdund met PBS op elk monster aan en incuberen gedurende 1 uur bij kamertemperatuur.
Opmerking: gebruik voor anti-laminin kleuring Alexa Fluor 568-geconjugeerd secundair antilichaam. Voor anti-F4/80, anti-MCP-1, en anti-TNF-α, gebruik Alexa Fluor 568-of 488-geconjugeerd secundair antilichaam. - Was 3 keer met PBS-T (5 min voor elke wasbeurt).
- Breng 100 μL DAPI-oplossing verdund met PBS-T op elk monster aan en incuberen gedurende 3 minuten bij kamertemperatuur.
- Was 3 keer met PBS-T (5 min voor elk).
- Monteer de samples met afdekmedium en dek ze af met dekstroken.
5. histo-Morfometrische analyse van gastrocnemius
- Plaats de monster glaasjes op een fluorescentiemicroscoop (Zie tabel met materialen) en Bekijk de monsters met een 20 × doelstelling met geschikte filters (DAPI-B, 360/40 nm voor excitatie en 460/50 nm voor emissie; GFP-B, 470/40 nm voor excitatie en 535/50 nm voor emissie; FRITC, 540/25 nm voor excitatie en 605/55 nm voor emissie.
- Gebruik de software voorbeeld analyse (Zie tabel met materialen), meet het transversale gebied (CSA) van elke myofiber en Tel het aantal F4/80-, MCP-1-en TNF-α-positieve cellen.
Opmerking: Bepaal de CSA van elke myofiber door het traceren van de interne marge van het kelder membraan gevisualiseerd met anti-laminin-2-immunokleuring.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
In overeenstemming met onze eerdere observaties12, werd de CSA van gastrocnemius myovezels significant verlaagd door de hindledemaat immobilisatie (Figuur 2A, B). Bovendien onthulde onze immunofluorescentie kleurings analyse dat cellen die MCP-1 en TNF-α uitdrukken, beide belangrijke rollen spelen bij het reguleren van ontstekingsprocessen13,14, significant verhoogd in gastrocnemius spier weefsels van geïmmobiliseerde achterpoten (MCP-1: Figuur 2C, F, H; TNF-α: Figuur 2D, G, I). Samen met de toename van de cellen positief gekleurd met F4/80, een marker voor macrofagen (Figuur 2C-E, H, I), hindledemaat immobilisatie leek te aanzetten tot kalf spieratrofie met lokale inflammatoire reacties met inbegrip van macrofaag accumulatie. We zochten om te onderzoeken of LCC, een massage-achtige mechanische interventie, gemoduleerd deze immobilisatie-geïnduceerde spier ontsteking en atrofie.
Onder verschillende LCC-magnitudes die we testten door het gewicht van de cilindrische eenheid te veranderen, leek de ene overeenkomend met 50 mmHg intramusculaire drukgolven (LCC met 66 g, Figuur 3a) het meest efficiënt te verlichten immobilisatie-geïnduceerde afname van de myofiber CSA en toename van macrofaag accumulatie in gastrocnemius spieren (Figuur 3b). Op basis van de resultaten van myofiber CSA en macrofaag accumulatie, werkten we 66 g LCC voor verdere studies. Met name de LCC-geïnduceerde intramusculaire drukgolven, waarvan de piek magnitudes afhankelijk waren van het cilindrische eenheidsgewicht, waren zeer uniform (Figuur 3a), wat de consistentie en reproduceerbaarheid van LCC als een mechanische ingreep op skeletspieren.
LCC (1 Hz, 30 min per dag, 7 dagen) aanzienlijk verlicht de immobilisatie-geïnduceerde dalingen in myofiber CSA van gastrocnemius spieren (Figuur 4A, B). Bovendien, LCC gedeeltelijk gehard de immobilisatie-geïnduceerde afname van de contractkracht van triceps surae spieren (figuur 4c). Bovendien, LCC getemperd de verhogingen in F4/80-positieve, TNF-α-positieve, F4/80-, MCP-1-, en TNF-α-positieve cellen in gastrocnemius spierweefsels van geïmmobiliseerde achterpoten (F4/80, Figuur 4D, F; MCP-1, Figuur 4D, G; TNF-α, Figuur 4E, H). Collectief, LCC, die genereert intramusculaire drukgolven met een amplitude van 50 mmHg, verlicht immobilisatie-geïnduceerde spieratrofie en lokale inflammatoire reacties met inbegrip van macrofaag accumulatie.
Figuur 1: muis bilaterale hindledemaat immobilisatie en lokale cyclische compressie (LCC) toepassing.
(A) bilaterale muis achterpoten werden geïmmobiliseerd door spiraal bedrading met de heupgewrichten ontvoerd, de kniegewrichten verlengd, en de enkelgewrichten plantar-flexed. (B) LCC-apparaat. C) experimentele opstelling voor LCC op het kalf van de muis. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
Figuur 2: muis hindledemaat immobilisatie, die de kuitspieren atrofieeert, induceert een lokale ontstekingsreactie.
A) transversale micrografische afbeeldingen van anti-laminin-2 immunofluorescentie kleuring van gastrocnemius-spieren. Afbeeldingen met een hoge vergroting (rechts) verwijzen naar de gebieden die worden aangegeven door rechthoeken in afbeeldingen met een lage vergroting (links). Schaal staven, 100 μm. (B) immobilisatie veroorzaakte spieratrofie. CSA van gastrocnemius myovezels daalde met de periode van hindledemaat immobilisatie. Om CSA te kwantificeren, werden 100 myofibers willekeurig gekozen. Gegevens worden weergegeven als gemiddelden ± S.D. *, P < 0,05, one-way ANOVA met post hoc Bonferroni-test (n = 3 muizen voor elke groep). (C en D) Micrografische afbeeldingen van anti-MCP-1 (groen in C) en anti-TNF-α (groen in D) en anti-F4/80 (rood) immunokleuring. Voor samengevoegde presentaties (groen en rood) worden afbeeldingen met lage en hoge vergroting als in (A) gelegd. Pijlen wijzen naar dubbele positieve cellen voor F4/80 en MCP-1 (C) of TNF-α (D) schaal staven, 100 μm. (E-I) kwantificering van anti-MCP-1, anti-TNF-α, en anti-F4/80 immunokleuring. Effecten van immobilisatie werden geanalyseerd met verwijzing naar de periode van bilaterale hindledemaat immobilisatie. Statistische analyse werd uitgevoerd met betrekking tot de ' dag 0 ' monsters (gastrocnemius spieren van muizen die niet werden onderworpen aan immobilisatie). Gegevens worden weergegeven als gemiddelden ± S.D. *, P < 0,05, one-way ANOVA met post hoc Bonferroni-test (n = 3 muizen voor elke groep). Dit cijfer is gewijzigd met toestemming11. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
Figuur 3: effecten van LCC met verschillende magnitudes op immobilisatie-geïnduceerde spieratrofie en ontsteking reactie.
A) toepassing van verschillende magnitudes van LCC door het gewicht van de cilindrische eenheid te wijzigen. Schaalbalk, 1 s. 36-g, 66-g en 200-g cilindrische eenheden geproduceerd 45 mmHg, 50 mmHg en 140 mmHg intramusculaire drukgolven, respectievelijk. B) vergelijking van de effecten van LCC-toepassing op geïmmobiliseerde achterpoten met cilindrische eenheden van 36-g, 66-g en 200-g. CSA van gastrocnemius myofibers (links) en F4/80-positieve cellen (rechts) van LCC-toegepast kalf werden gekwantificeerd als relatieve waarden aan die van de Control hindledemaat, die niet aan LCC werd blootgesteld, in elke muis. Gegevens worden weergegeven als gemiddelden ± S.D. *, P < 0,05, one-way ANOVA met post hoc Bonferroni-test (n = 4 muizen voor elke groep). Dit cijfer is gewijzigd met toestemming11. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
Figuur 4: LCC verzwakt immobilisatie-geïnduceerde spieratrofie en inflammatoire respons.
(a, B) Verlichting van immobilisatie-geïnduceerde spieratrofie door LCC toepassing. CSA van gastrocnemius myofibers (B) werd geanalyseerd zoals in Figuur 2b. Gegevens worden weergegeven als gemiddelden ± S.D. *, P < 0,05; * *, P < 0,01, one-way ANOVA met post hoc Bonferroni test (n = 6 muizen voor elke groep). C) de afname van de contracterende kracht van triceps surae spieren na immobilisatie en de gedeeltelijke restauratie ervan door LCC. Gegevens worden weergegeven als gemiddelden ± S.D. *, P < 0,05, gekoppelde student t-test (n = 4 muizen voor controle, n = 5 muizen voor immobilisatie groep). (D, E) Micrografische afbeeldingen van anti-MCP-1 (groen in D), anti-TNF-α (groen in E) en anti-F4/80 (rood) immunofluorescentie kleuring van gastrocnemius-spieren van gemobiliseerde (top) en geïmmobiliseerde achterpoten zonder (midden) en met (onder) LCC-toepassing worden gepresenteerd als in Figuur 2C, D. Schaal staven, 100 μm. (F-H) kwantificering van anti-MCP-1, anti-TNF-α, en anti-F4/80-immunokleuring. We vergeleken kuitspieren van geïmmobiliseerde achterledematen met en zonder LCC applicatie. Gegevens worden weergegeven als gemiddelden ± S.D. *, P < 0,05; * *, P < 0,01, one-way ANOVA met post hoc Bonferroni test (n = 6 muizen voor elke groep). Dit cijfer is gewijzigd met toestemming11. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
Aanvullend figuur 1: schematische weergave van experimentele protocollen. Klik hier om de afbeelding te downloaden.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
We hebben een methode beschreven voor het toepassen van een massage-achtige mechanische stimulus, die ontstekingsremmende effecten heeft. Ons systeem heeft de volgende voordelen, zelfs in vergelijking met de eerder gerapporteerde. Ten eerste, eerdere studies niet kwantificeren de mechanische krachten toegepast2 of gedefinieerd hun magnitudes op basis van de meting op het lichaamsoppervlak, maar niet in de weefsels10. In tegenstelling, we gemeten intramusculaire druk met behulp van een bloeddruk Telemeter. Ten tweede konden we met de simpele structuur van ons apparaat (Figuur 1b) het systeem samenstellen met een hoge consistentie en reproduceerbaarheid (Figuur 3a) tegen relatief lage kosten. Ten derde heeft onze interventie (LCC) betrekking op lichamelijke activiteit (milde spiercontractie) met betrekking tot veranderingen in intramusculaire druk (50 mmHg15). Onze aanpak zal een wetenschappelijke basis bieden voor een massage-achtige ingreep als een mogelijke therapeutische/preventieve procedure die de deverdienste van lichamelijke inactiviteit vermindert16.
De meest kritieke stap in ons protocol is de positionering van muis achterpoten (protocol stap 3,3). We moeten LCC toepassen in de richting loodrecht op kuitspieren; anders, spierweefsels zal gedeeltelijk worden geperst en beschadigd, zelfs wanneer de 66-g cilindrische eenheid wordt gebruikt.
De beperking van de LCC-methode omvat de eis van anesthesie, die sommige effecten op de spier metabolisme kan hebben. Ook kunnen we niet volledig uitsluiten van de invloeden van kleine spiercontractie die kunnen worden veroorzaakt als een reflex naar scherpe effecten tijdens LCC toepassing.
Concluderend hebben we aangetoond dat interstitiële vloeistofverplaatsing de LCC-effecten bemiddelt11. Mogelijk kunnen we de interstitiële stroom efficiënter induceren door de cyclische compressiemodus aan te passen. Bijvoorbeeld, compressie van sinusoïdale modus kan beter zijn in vergelijking met scherpe slagen gebruikt in onze huidige studie.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs verklaren dat er geen concurrerende belangen in verband met het manuscript zijn.
Acknowledgments
We danken K. Nakanishi, K. Hamamoto, N. Kume en K. Tsurumi voor hun consistente ondersteuning gedurende het hele project. Dit werk werd deels gesteund door het intramurale onderzoeksfonds van het Japanse ministerie van volksgezondheid, arbeid en welzijn; Subsidies-in-Aid voor wetenschappelijk onderzoek van de Japan Society for the Promotion of Science; MEXT-ondersteund programma voor de Strategic Research Foundation aan particuliere universiteiten, 2015-2019 van het Japanse ministerie van onderwijs, cultuur, sport, wetenschap en technologie (S1511017).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Aluminum wire | DAISO JAPAN | B028 | An aluminum wire is used to avoid escaping restriction by the wire |
| Blood pressure telemeter | Millar | SPR-671 | A blood pressure telemeter is used to mesure intramuscular pressure. |
| DAPI | Thermo Fisher Scientific | D1306 | DAPI is a fluorescent probe which is commonly used to stain DNA for fluorescent microscopy. |
| Goat anti-rabbit Alexa Fluor 488 (Dilution ratio, 1:500) | Invitrogen | A11034 | Antibody for immunohistochemical staining. |
| Goat anti-rat Alexa Fluor 568 (Dilution ratio, 1:500)) | Invitrogen | A11077 | Antibody for immunohistochemical staining. |
| ImageJ | NIH | N/A | Analysis software for image |
| LabChart8 | ADInstrumens | Analysis software for acquiring biological signals. | |
| Prolong gold | Thermo Fisher Scientific | P36930 | Prolong gold is for mounting stained samples. |
| Protein Block Serum-Free | Dako | X090930-2 | For blocking non-specific background staining in immunohistochemical procedures. |
| Rat monoclonal anti-laminin-2 antibody (Dilution ratio, 1:1000) | Sigma Aldrich | L0663 | Antibody for immunohistochemical staining. |
| Rat monoclonal anti-F4/80 antibody (Dilution ratio, 1:500) | Abcam | ab6640 | Antibody for immunohistochemical staining. |
| Rabbit polyclonal anti-MCP-1 antibody (Dilution ratio, 1:1000) | Abcam | ab25124 | Antibody for immunohistochemical staining. |
| Rabbit polyclonal anti-TNF-α antibody (Dilution ratio, 1:1000) | Abcam | ab66579 | Antibody for immunohistochemical staining. |
| Surgical tape | 3M Japan | 1530EP-0 | Surgical tape is used to restrict joint movement. |
References
- Furlan, A. D., Imamura, M., Dryden, T., Irvin, E. Massage for low back pain: an updated systematic review within the framework of the Cochrane Back Review Group. Spine. 34 (16), 1669-1684 (2009).
- Robertson, A., Watt, J. M., Galloway, S. D. R. Effects of leg massage on recovery from high intensity cycling exercise. British Journal of Sports Medicine. 38 (2), 173-176 (2004).
- Waters-Banker, C., Butterfield, T. A., Dupont-Versteegden, E. E. Immunomodulatory effects of massage on nonperturbed skeletal muscle in rats. Journal of Applied Physiology. 116 (2), 164-175 (2014).
- Haas, C., et al. Massage timing affects postexercise muscle recovery and inflammation in a rabbit model. Medicine & Science in Sports & Exercise. 45 (6), 1105-1112 (2013).
- Crane, J. D., et al. Massage therapy attenuates inflammatory signaling after exercise-induced muscle damage. Science Translational Medicine. 4 (119), 119ra113 (2012).
- Bove, G. M., Harris, M. Y., Zhao, H., Barbe, M. F. Manual therapy as an effective treatment for fibrosis in a rat model of upper extremity overuse injury. Journal of the Neurological Sciences. 361, 168-180 (2016).
- Andrzejewski, W., et al. Increased skeletal muscle expression of VEGF induced by massage and exercise. Folia Histochemica et Cytobiologica. 53 (2), 145-151 (2015).
- Mantovani Junior, N., et al. Effects of massage as a recuperative technique on autonomic modulation of heart rate and cardiorespiratory parameters: a study protocol for a randomized clinical trial. Trials. 19 (1), 459 (2018).
- Zeng, H., Butterfield, S., Agarwal, F., Haq, T., Zhao, Y. An engineering approach for quantitative analysis of the lengthwise strokes in massage therapies. Journal of Medical Devices. 2 (4), (2008).
- Wang, Q., et al. A mechatronic system for quantitative application and assessment of massage-like actions in small animals. Annals of Biomedical Engineering. 42 (1), 36-49 (2014).
- Saitou, K., et al. Local cyclical compression modulates macrophage function in situ and alleviates immobilization-induced muscle atrophy. Clinical Science. 132 (19), 2147-2161 (2018).
- Onda, A., et al. A New mouse model of skeletal muscle atrophy using spiral wire immobilization. Muscle Nerve. 54 (4), 788-791 (2016).
- Luster, A. D.
- Reid, M. B., Li, Y. P. Tumor necrosis factor-α and muscle wasting: a cellular perspective. Respiratory Research. 2 (5), 269-272 (2001).
- Baumann, J. U., Sutherland, M. D., Hangg, A. Intramuscular pressure during walking: An experimental study using the wick catheter technique. Clinical Orthopaedics Related Research. 145, 292-299 (1979).
- Lee, I., et al. Effect of physical inactivity on major non-communicable diseases worldwide: an analysis of burden of disease and life expectancy. Lancet. 380, 219-229 (2012).
