Summary
Här presenterar vi detaljerade protokoll för monokulär visuell deprivation och okulär dominans plasticitet analys, som är viktiga metoder för att studera neurala mekanismer visuell plasticitet under den kritiska perioden och effekterna av specifika gener på visuell utveckling.
Abstract
Monokulär visuell deprivation är ett utmärkt experimentellt paradigm för att inducera primära visuella när svar plasticitet. I allmänhet är svaret från cortex till det kontralaterala ögat till en stimulans mycket starkare än svaret från det ipsilaterala ögat i det kikare segmentet av musprimära visuella cortex (V1). Under den däggdjurskritiska perioden kommer suturering det kontralaterala ögat resultera i en snabb förlust av lyhördhet för V1-celler till kontralateral ögonstimulering. Med den fortsatta utvecklingen av transgen teknik, fler och fler studier använder transgena möss som experimentella modeller för att undersöka effekterna av specifika gener på okulär dominans (OD) plasticitet. I denna studie introducerar vi detaljerade protokoll för monokulär visuell deprivation och beräknar förändringen i OD-plasticitet i mus V1. Efter monokulär deprivation (MD) i 4 dagar under den kritiska perioden mäts orienteringsjusteringskurvorna för varje neuron, och trimkurvorna i lager fyra nervceller i V1 jämförs mellan stimulering av de ipsilaterala och kontralaterala ögonen. Det kontralaterala biasindex (CBI) kan beräknas med hjälp av varje cells okulära OD-poäng för att ange graden av OD-plasticitet. Denna experimentella teknik är viktig för att studera de neurala mekanismerna för OD-plasticitet under den kritiska perioden och för att kartlägga rollerna för specifika gener i neural utveckling. Den stora begränsningen är att den akuta studien inte kan undersöka förändringen i neural plasticitet av samma mus vid en annan tidpunkt.
Introduction
Monokulär visuell deprivation är ett utmärkt experimentellt paradigm för att undersöka V1 plasticitet. För att studera vikten av visuell erfarenhet av neural utveckling, David Hubel och Torsten Wiesel1,2 berövade kattungar av normal syn i ett öga vid olika tidpunkter och under olika tidsperioder. De observerade sedan förändringar i svarsintensiteten i V1 för de eftersatta och oefterställda ögonen. Deras resultat visade ett onormalt lågt antal nervceller reagerar på ögat som hade sutured stängas under de första tre månaderna. Emellertid, svaren från nervceller i kattungarna förblev identiska i alla avseenden till de av en normal vuxen katt öga som var sutured stängd i ett år, och kattungarna inte återhämta sig. MD hos vuxna katter kan inte inducera OD-plasticitet. Därför är effekten av visuell erfarenhet på V1 ledningar stark under en kort, väldefinierad utvecklingsfas, före och efter vilken samma stimuli har mindre inflytande. En sådan fas av ökad känslighet för visuell ingång kallas den kritiska perioden i visuella cortex.
Även om musen är ett nattligt djur, enskilda nervceller i musen V1 har liknande egenskaper som nervceller som finns hos katter3,4,5. Under de senaste åren, med den snabba utvecklingen av transgen teknik, ett ökande antal studier inom visuell neurovetenskap har använt möss som en experimentell modell6,7,8. I mus visuella studier, neuroforskare använder mutanter och knockout mus linjer, som tillåter kontroll över den genetiska makeup av möss. Även möss V1 saknar OD kolumner, enda nervceller i V1 kikare zonen visar betydande OD egenskaper. Till exempel, de flesta celler reagerar starkare på kontralateral stimulering än ipsilateral stimulering. Tillfällig stängning av ett öga under den kritiska perioden leder till en betydande förändring i OD-indexfördelningen9,10,11. Därför kan MD användas för att upprätta en OD plasticitet modell för att undersöka hur gener som deltar i neurala utvecklingsstörningar påverkar när som är i kraft plasticitet in vivo.
Här introducerar vi en experimentell metod för MD och föreslår en vanlig metod (elektrofysiologisk inspelning) för att analysera förändringen i OD-plasticitet under monokulär visuell deprivation. Metoden har använts i stor utsträckning i många laboratorier i mer än 20 år12,13,14,15,16. Det finns andra metoder som används för att mäta OD-plasticitet också, såsom kronisk visuell framkallad potential (VEP) inspelning17, och inneboende optisk bildbehandling (IOI)18. Den betydande fördelen med denna akuta metod är att det är lätt att följa, och resultaten är anmärkningsvärt tillförlitliga.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
I detta protokoll erhölls manliga C57Bl/6 möss från Institute of Laboratory Animals of Sichuan Academy of Medical Sciences och Sichuan Provincial People's Hospital. Alla djurvårds- och försöksförfaranden godkändes av kommittén för institutionsdjursvård och användning, University of Electronic Science and Technology of China.
1. Monokulär deprivation (MD) på postnatal dag 28 hos möss
- Sätt de kirurgiska verktygen, suturnålan (0,25 mm diameter, strängdiameter 0,07 mm) och bomullspinnar i en aluminiumlåda och autoklav dem vid 120 °C för 0,5 h. Sterilisera huven med 75% etanol. Torka de kirurgiska verktygen i en torkugn.
- Förbered en 2% agarose lösning, lägg den i ett vattenbad vid 75 °C för att undvika stelning.
- Använd isofluran blandat med syre för att södinra musen (2% induktion och 1,2–1,5% underhåll). Fäst musen på stereotaxic apparaten och använd en värmereglerande anordning för att hålla muskroppstemperaturen vid 37 °C och förhindra hypotermi.
- Applicera ett tunt lager petroleumbaserad ögonsalva på båda ögonen.
- Under det anatomiska mikroskopet med belysning, sutur ögonlocket på ett öga. Få nålen att passera om båda sidor av ögonlocket 2x(figur 1A)och gör ungefär fyra stygn.
- Knut tråden 2–3x och trimma sedan tråden. Applicera 3 μl omedelbarttorkningslim på knuten för att öka dess stabilitet. Skär sedan den extra suturerande tråden.
- Ge musen en intraperitoneal injektion av buprenorfin (1 mg/kg).
- Överför musen till en värmedyna för att bibehålla sin kroppstemperatur vid 37 °C och förhindra hypotermi och övervaka den tills den återfår medvetandet.
- När musen är helt vaken placera den i en separat anläggning bur.
- Kontrollera ögonlocken dagligen för att säkerställa att de förblir stängda och oinfekterade. Uteslut musen om en ögonlocksöppning hittas.
- Före elektrofysiologisk inspelning, använd isofluran blandas med syre för att södinra musen (2% induktion och 1,2-1,5% underhåll).
- Ta bort stygnen med ögonsax för att exponera ögongloben. Trimma försiktigt ögonlocken.
- Spola ögat med linslösning och kontrollera ögat under ett mikroskop för tydlighetens skull. Exkludera möss med hornhinnans opaciteter eller tecken på infektion.
2. Craniotomy i musen V1 kikare regionen efter monocular deprivation på 4: e dagen
- Efter att du söp musen, kontrollera om bedövningsdjupet är svar på en tånypa.
- Placera och fäst musen på stereotaxic apparaten. Justera höjden på öronstången och tandstången för att hålla hjärnan platt och stabil.
- Använd en värmedyna för att bibehålla kroppstemperaturen.
- Applicera en petroleumbaserad ögonsalva på ögonens yta för att hålla dem fuktiga.
- Ta bort håret på musens huvud för att exponera dess hud. Gnugga huden med alternerande scrubs av jod och 70% etanol 3x.
- Incise en 8 x 8 mm område av huden mellan öronen för att exponera skallen och ta bort hårbotten vävnad. Ta sedan bort den överliggande bindväven med 30% väteperoxid.
- Borra ett 1 x 1 mm hål i skallen ovanför lillhjärnan. Fäst en liten benskruv i hålet som referens.
- Utför en liten craniotomy på 1 mm i diameter i V1 kikare regionen från kontralateral halvklotet till det eftersatta ögat(Figur 1B, A-P: lambda -0,51-lambda +1,67 mm; M-L: -2,6– -3,0 mm; D-V: 0–1 mm). Ta försiktigt bort skallfragmentet utan att skada hjärnan.
- Täck den exponerade kortikala ytan med 75 μL på 2 % agarose vid 40 °C för att förhindra torkning.
- Fäst en volframelektrod på stereotaxic-ramen. Placera volframelektroden vertikalt på ytan av den exponerade cortex, den kikare regionen V1, för att se till att de celler som registreras reagerar på båda ögonen.
- Använd bomullspinnar för att ta bort ögongelen och applicera kiselolja på ögat varannan gång.
3. Visuell stimulering och elektrofysiologisk inspelning
- Maskera ett öga med icketransparent plastplatta. Placera en LCD-skärm 23 cm från musens öga.
- Minska anestesi till 0,5–0,8% när musen är helt sövd.
- För mikroelektroden elektroden långsamt med en oljehydraulisk mikromanipulator. Stoppa den när ett högt signal-brusförhållande observeras och elektroden är avancerad till lager 4(figur 1C,cirka 250–450 μm på djupet). Se till att förstärkningsfaktorn är inställd på 1 000, filtret vid 300–100 Hz och provhastigheten på 40 Hz.
- Presentera ett fyrfält satt sittusformad galler(figur 1D, 12 riktningar, 100% kontrast, 2 Hz tillfällig frekvens, 0,04 cykler per grad av rumslig frekvens) på LED-skärmen.
- Mät cellens svar genom att stimulera det ensidiga och kontralaterala ögat separat. Totalt 3–5x totalt.
- Mät svaren från fem till åtta celler i varje penetration. Utför fyra till sex penetrationer i varje mus.
- Efter inspelningen justerar du isofluranflödet till 5 % eller högre, fortsätt isofluranexponering en 1 min och utför sedan massundersökningförskjutningen.
OBS: Separata penetrationer var placerade minst 200 μm isär i V1 kikare zonen.
4. Off-line spike sortering och dataanalys
- Identifiera spikar när den råa signalen passerar en tröskelnivå. Justera fångade spikar på den första positiva eller negativa toppen. Använd programvara för att upptäcka spikar från olika celler.
- Ställ in två markörer: en för positiv och den andra för negativ avböjning. Ange spikmallen (bild 2A). Ange mallområdet till det med den mest betydande variationen mellan olika klasser av spikar.
- Använd huvudkomponentanalys för att separera dem i kluster. Klustermetoder kan variera mellan olika laboratorier.
- Klassificera spiken på en gräns med hjälp av K-medelsalgoritmen.
- Korrelera orienteringen med spikbränningshastigheten och rita orienteringsjusteringskurvorna för det ensidiga och kontralaterala ögat.
- Beräkna OD-indexet för den enda enheten, som representerar förhållandet mellan kontralateral/ipsilateral svarsstyrka:
där Rcontra och Ripsi är cellens optimala svar för det kontralaterala respektive ipsilaterala ögat, och Rspon är cellens spontana aktivitet. - Tilldela OD-poäng till 1–7 enligt följande: − 1 till −0,75 = 1; −0,75 till −0,45 = 2; −0,45 till −0,15 = 3; −0,15 till 0,15 = 4; 0,15 till 0,45 = 5; 0,45 till 0,75 = 6; och 0,75 till 1 = 7.
- Beräkna det kontralaterala biasindex (CBI):
där N är cellnumret och nx är lika med cellnumret med OD-poäng som är lika med x.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
De experimentella resultat som beskrivs här möjliggör framgångsrika MD och OD plasticitet mätningar från en eftersatt och icke eftersatt mus under den kritiska perioden (P19-P32). Bild 1 visar hur du utför enstaka enhetsinspelningar i lager 4 från V1 den kikare zonen för att jämföra svar i det ensidiga och kontralaterala ögat 4 dagar efter MD. Figur 2 visar spike sortering och orientering tuning mätningar för att stimulera ipsilaterala och kontralaterala ögon. För spiksortering fastställdes spikmallen genom att kluster av de viktigaste komponentvikterna för spikarna. Som ett exempel i (figur 2A,B), cell 01 och cell 02 klassificerades genom spike sortering. Orienteringsjusteringskurvorna för enstaka enheter mättes genom stimulering av de ensidiga och kontralaterala ögonen. Bild 2C,D visar orienteringsjusteringskurvorna för fyra provceller, där två är från musen som genomgick MD och de andra från musen som inte gjorde det. Våra resultat visar att eldhastigheten var relativt nära genom att stimulera det kontralaterala och ipsilaterala ögat i musen 4 dagar efter MD utfördes(figur 2C). Den eldningshastighet som erhålls genom att stimulera det kontralaterala ögat var dock mycket starkare än den som erhålls genom att stimulera det ipsilaterala ögat i den icke eftersatta musen(figur 2D). Bild 3A visar fördelningen av OD-poäng för alla enheter och CBI-index för en mus som genomgick MD (P28, 4 dagar efter MD). Figur 3B visar OD-poängen för alla enheter och CBI-index från en nondeprived C57/BL6 mus (P26, ingen MD). CBI-indexet är 0,38 för en MD-mus och 0,67 för en annan utan MD.
Resultaten visar att svaret från V1 nervceller till kontralaterala ögat till en stimulans var mycket starkare än svaret från det ipsilaterala ögat i binokulära segmentet av den icke eftersatta musen. Emellertid, 4 dagar efter MD i den kritiska perioden, var svaret från de flesta nervceller till stimulering till det kontralaterala ögat relativt nära eller svagare än svaret på det ipsilaterala ögat. Därför har V1 nervceller i kritiska perioder betydande OD plasticitet. MD ändrar den relativa styrkan i cellens svar genom att stimulera det kontralaterala och ipsilaterala ögat.
Figur 1: Schematisk av det visuella fattigdomsexperimentet. (A)En schematisk för suturering ögonlocket. Nålen passerar genom ögonlocket 2x och sedan 2–3 knop är gjorda. Bilder 1–4 visar den position där nålen passerar genom ögonlocket. (B)Inspelning schematisk i en sethetiserad, huvudfast mus. En förstorad vy över V1 visas i den grå cirkeln och den kikare zonen indikeras med mörkgrått. Inspelningsplatserna i kikarenszonen visas med små cirklar. (C)Mushjärnans koronala plan och inspelningsplatserna visas i lagret 4 i V1. (D)Illustrationer av den visuella stimulansen av olika orienteringar. Tolv olika orienteringar användes helt i varje mätning. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Bild 2: Illustrationer av dataanalysförfarande. (A)Spikar sorterades med hjälp av en kommersiell programvara (se Materialförteckning). Vågformen i grönt visar den filtrerade signalen (0,3–10 kHz). Två celler sorterades från filtrerade data. (B)Exempel på separation av tillsattaktivitet på en enda mikroelektrod genom spiksortering. Spiksorteringsmetoden är en huvudkomponent i analysen. (C)Orienteringsjusteringar från två celler för att svara på den kontralaterala (röda fasta linjen) och ipsilateral (röd prickad linje) stimuli i en monokulär-berövad mus (cell 01 och cell 02). (D)Orienteringsjustering från två celler för att svara på kontralateral (blå fast linje) och ipsilateral (blå prickad linje) ögonstimuli i en icke eftersatt mus (cell 03 och cell 04). Felfältet anger standardfelet för medelvärdet (SEM) i varje mätning. Den svarta linjen indikerar spontan aktivitet. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Bild 3: Förskjutning i OD-index efter MD. Vi spelade in cellens svar från den kikaren zonen i den kontralaterala hjärnan genom att stimulera de ensidiga och kontralaterala ögon individuellt. Vi beräknade och lade till OD-indexet för de enskilda enheterna. (A)Distribution av OD poäng för 38 nervceller registreras från en C57/BL6 mus som genomgick MD från P28-P32. (B)Distribution av OD poäng för 38 nervceller från en nondeprived C57/BL6 mus. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Vi presenterar ett detaljerat protokoll för MD och mätning OD plasticitet genom en enhet inspelning. Detta protokoll används ofta i visuell neurovetenskap. Även om MD-protokollet inte är komplicerat, finns det några kritiska kirurgiska ingrepp som måste följas noggrant. För det första finns det två viktiga detaljer som säkerställer kvaliteten på sömmarna. Suturen är tillräckligt stabil om stygnen är koncentrerade till den mediala delen av ögonlocket. Dessutom appliceras 3 μl lim på knutens huvud för att öka knutens stabilitet för att förhindra att ögat öppnas igen. För det andra bör vissa viktiga steg vidtas för att förbättra sårläkning och minska obehag. Suturmetoden är mycket viktig för protokollet. Tidigare studier har visat att en enkel kontinuerlig suturering mönster har fördelarna med bättre sårläkning och kortare suturering tid19,20. Tråden ska vara tunn och stabil för att undvika att orsaka ett stort sår och minska obehaget. En suturnål med en diameter på ca 0,25 mm är lämplig för suturering och två till tre knop är nödvändiga.
Det finns också några viktiga punkter som måste uppmärksammas i inspelningen. Kontroll av anestesikoncentration är en viktig faktor i elektrofysiologiska inspelningar. Hos bedövningsdjur är experimentet mycket lätt att kontrollera, och resultaten är mycket stabila och tillförlitliga. Många tidigare studier används uretan som bedövningsmedel. Det är dock svårt att använda uretan för att kontrollera djupet av anestesi hos möss. Vid lägre nivåer är mössen inte helt sövda, och vid högre nivåer är mössen dödsbenägna. Isofluran är lämpligare som bedövningsmedel i en musstudie. Även om det är nästan omöjligt att få god neural aktivitet i neocortex av möss som får över 1% isofuran21, de flesta V1 nervceller har bra visuell framkallad aktivitet på lägre nivåer av isofluran. Börja med en högre koncentration av isofluran (1%) för att söva musen, och sedan minska isofluran (0,5–0,8%) när mössen är helt sytetiserade. Dessutom kan alternerande mätningar från det eftersatta ögat och det nondeprived ögat säkerställa noggrannheten i de experimentella resultaten. Det är inte lämpligt att mäta ett ögas svar många gånger och sedan mäta det andra ögat, eftersom elektroden kan röra sig, och intensiteten i cellens svar kan ändras under långsiktiga inspelningar. Dessutom riktar detta protokoll nervceller i lager 4, vilket är den primära thalamo-mottagare lager i V1. Men hos äldre möss, som uppvisar OD-plasticitet som främst medieras av öppen ögonpotentiering, är det bättre att spela in i lager 2 eller 3, som behåller plasticitetbortom den kritiska perioden. Därför är det viktigt att bestämma den när som är kortikal laminat i inspelningen.
Det finns fortfarande vissa begränsningar i metoderna. Beräkning av ett relativt exakt CBI-index kräver 4–6 penetrationer och mer än 30 enheter eftersom registrering en för få prover kommer att leda till felaktiga resultat. Men det är inte lätt att få mer än 30 högkvalitativa enheter från en enda mus. En bättre metod är att använda flerenhetsinspelning, vilket kan ge tillräckligt med enheter i en enda mätning. Dessutom kan VEP-inspelning och IOI också användas för att mäta OD-plasticitet17,18. Single unit inspelning innebär aktiviteten hos enskilda nervceller, medan VEP innebär att registrera aktiviteten hos summan av nervceller nära elektroden. Men single unit inspelning data ger ingen information om synkronisering bland nervceller, medan VEP amplituder beror på tidsmässiga synkronisering bland nervceller22. Ett återföringsgaller används ofta för VEP-mätning. Den vanligaste återföringsfrekvensen är 3–4 Hz. Det exakta värdet bestäms dock av datorns uppdateringsfrekvens när du presenterar gallret. OD-plasticitet mäts genom att man jämför genomsnittet av VEP-amplituder som framkallas av det eftersatta och oeftersatta ögat. IOI-tekniken kan effektivt upptäcka den blodtrycksberoende signal som framkallas av kontralateral och ipsilateral stimulering. Det kan visa OD plasticity av ett stort område i V1.
Sammanfattningsvis är en enhetsinspelning och IOI lämpliga för akut anestesi experiment. I framtiden kommer MD och OD plasticity mätningar i samband med används i stor utsträckning i studiet av neural plasticitet som en experimentell metod.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna förklarar att de inte har några konkurrerande ekonomiska intressen.
Acknowledgments
Denna studie stöddes av National Natural Science Foundation of China (81571770, 81771925, 81861128001).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 502 glue | M&G Chenguang Stationery Co., Ltd. | AWG97028 | |
| Acquizition card | National Instument | PCI-6250 | |
| Agarose | Biowest | G-10 | |
| Amplifier | A-M system | Model 1800 | |
| Atropine | Aladdin Bio-Chem Technology Co., Ltd | A135946-5 | |
| Brain Stereotaxic Apparatus | RWD Life Science Co.,Ltd | 68001 | |
| Cohan-Vannas spring scissors | Fine Science Tools | 15000-02 | |
| Contact Lenses Solutions | Beijing Dr. Lun Eye Care Products Co., Ltd. | GM17064 | |
| Cotton swabs | Henan Guangderun Medical Instruments Co.,Ltd | ||
| Fine needle holder | SuZhou Stronger Medical Instruments Co.,Ltd | CZQ1370 | |
| Forcep | 66 Vision Tech Co., Ltd. | 53320A | |
| Forcep | 66 Vision Tech Co., Ltd. | 53072 | |
| Forcep | 66 Vision Tech Co., Ltd. | #5 | |
| Heating pad | Stryker | TP 700 T | |
| Illuminator | Motic China Group Co., Ltd. | MLC-150C | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co.,Ltd | R510-22 | |
| LCD monitor | Philips (China) Investment Co., Ltd. | 39PHF3251/T3 | |
| Microscope | SOPTOP | SZMT1 | |
| Noninvasive Vital Signs Monitor | Mouseox | ||
| Oil hydraulic micromanipulator | NARISHIGE International Ltd. | PC-5N06022 | |
| Petrolatum Eye Gel | Dezhou Yile Disinfection Technology Co., Ltd. | 17C801 | |
| Spike2 | Cambridge Electronic Design, Cambridge, UK | Spike2 Version 9 | |
| Surgical scissors | 66 Vision Tech Co., Ltd. | 54010 | |
| Surgical scissors | 66 Vision Tech Co., Ltd. | 54002 | |
| Suture Needle | Ningbo Medical Co.,Ltd | 3/8 arc 2.5*8 | |
| Tungsten Electrode | FHC, Inc | L504-01B | |
| Xylocaine | Huaqing |
References
- Hubel, D. H., Wiesel, T. N. Effects of monocular deprivation in kittens. Naunyn-Schmiedebergs Archiv für experimentelle Pathologie und Pharmakologie. 248 (6), 492-497 (1964).
- Daw, N. W., Fox, K., Sato, H., Czepita, D. Critical period for monocular deprivation in the cat visual cortex. Journal of Neurophysiology. 67 (1), 197-202 (1992).
- Guire, E. S., Lickey, M. E., Gordon, B. Critical period for the monocular deprivation effect in rats: assessment with sweep visually evoked potentials. Journal of Neurophysiology. 81 (1), 121-128 (1999).
- Wang, L., Sarnaik, R., Rangarajan, K. V., Liu, X., Cang, J. Visual receptive field properties of neurons in the superficial superior colliculus of the mouse. Journal of Neuroscience. 30 (49), 16573-16584 (2010).
- Niell, C. M. Cell Types, circuits, and receptive fields in the mouse visual cortex. Annual Review of Neuroscience. 38 (1), 413-431 (2015).
- Lee, S. H., et al. Activation of specific interneurons improves V1 feature selectivity and visual perception. Nature. 488 (8), 379-383 (2012).
- Cossell, L., et al. Functional organization of excitatory synaptic strength in primary visual cortex. Nature. 518 (2), 399-403 (2015).
- Lacaruso, M. F., Gasler, L. T., Hofer, S. B. Synaptic organization of visual space in primary visual cortex. Nature. 547 (7), 449-452 (2017).
- Metin, C., Godement, P., Imbert, M. The primary visual cortex in the mouse: Receptive field properties and functional organization. Experimental Brain Research. 69 (3), 594-612 (1988).
- Marshel, J. H., Garrett, M. E., Nauhaus, I., Callaway, E. M. Functional specialization of seven mouse visual cortical areas. Neuron. 72 (6), 1040-1054 (2011).
- Gordon, J. A., Stryker, M. P. Experience-dependent plasticity of binocular responses in the primary visual cortex of the mouse. The Journal of Neuroscience. 16 (10), 3274-3286 (1996).
- McGee, A. W., Yang, Y., Fischer, Q. S., Daw, N. W., Strittmatter, S. M. Experience-driven plasticity of visual cortex limited by myelin and Nogo receptor. Science. 309 (5744), 2222-2226 (2005).
- Sawtell, N. B., et al. NMDA receptor-dependent ocular dominance plasticity in adult visual cortex. Neuron. 38 (6), 977-985 (2003).
- Hofer, S. B., Mrsic-Flogel, T. D., Bonhoeffer, T., Hubener, M. Prior experience enhances plasticity in adult visual cortex. Nature Neuroscience. 9 (12), 127-132 (2006).
- Crozier, R. A., Wang, Y., Liu, C., Bear, M. F. Deprivation-induced synaptic depression by distinct mechanisms in different layers of mouse visual cortex. Proceedings of the National Academy of Sciences. 104 (4), 1383-1388 (2007).
- Tagawa, Y., Kanold, P. O., Majdan, M., Shatz, C. J. Multiple periods of functional ocular dominance plasticity in mouse visual cortex. Nature Neuroscience. 8 (3), 380-388 (2005).
- Lickey, M. E., Pham, T. A., Gordon, B. Swept contrast visual evoked potentials and their plasticity following monocular deprivation in mice. Vision Research. 44, 3381-3387 (2004).
- Cang, J., Kalatsky, V. A., Lowel, S., Stryker, M. P. Optical imaging of the intrinsic signal as a measure of cortical plasticity in the mouse. Vision Neuroscience. 22 (5), 685-691 (2005).
- Khan, I. U., et al. Evaluation of different suturing techniques for cystotomy closure in canines. Journal of Animal & Plant Sciences. 23 (4), 981-985 (2013).
- Weisman, D. L., Smeak, D. D., Birchard, S. J., Zweigart, S. L. Comparison of a continuous suture pattern with a simple interrupted pattern for enteric closure in dogs and cats: 83 cases (1991-1997). Journal of the American Veterinary Medical Association. 214 (10), 1507-1510 (1999).
- Heneghan, C. P. H., Thornton, C., Navaratnarajah, M., Jones, J. G. Effect of isoflurane on the auditory evoked response in man. BJA: British Journal of Anaesthesia. 59 (3), 277-282 (1987).
- Mitzdorf, U. Current source-density method and application in cat cerebral cortex: investigation of evoked potentials and EEG phenomenal. Physiological Reviews. 65 (1), 37-100 (1985).
