Summary
Psikofiziksel araçlar, hem araştırma hem de sağlık değerlendirme amacıyla tat sisteminin işlevselliğini ölçmektedir. Bu makalede, 6 yaş kadar genç bireyler tarafından tadılabilen en düşük sakkaroz, sodyum klorür veya monosodyum glutamat konsantrasyonunun belirlenebileceği tat algılama eşiklerini ölçmek için bir yöntem açıklanmaktadır.
Abstract
Bu makalede, çocukluktan yetişkinliğe kadar tatlı, tuzlu ve umami tat algılama eşiklerinin güvenilir bir ölçüsünü sağlayan, Tat Algılama Eşiği (TDT) testi adı verilen iki alternatifli, zorunlu seçim, merdiven, izleme prosedürü açıklanmaktadır. Yöntemin avantajları arasında çocuklar ve yetişkinler için aynı olan prosedürler, böylece varsa tat algısındaki yaşa bağlı ve bireysel farklılıkların belirlenmesine izin vermek ve nispeten kısa bir zaman diliminde tamamlanabilen görevler, sürekli dikkat gerektirmeyen veya ezber gerektiren, öznel yanıt önyargıları için kontrol ve dil gelişiminin etkisini en aza indiren görevler yer almaktadır. 1 saatlik bir orucun ardından katılımcılara bir çift çözüm sunulur; her çiftte, bir çözelti sudur ve diğer çözelti farklı konsantrasyonlarda lezzetli içerir.
Tam ağız tadım yöntemi kullanarak, katılımcılar her çözeltiyi (yutmadan ve tadımlar arasında durulama ile) tadır ve daha sonra çözeltiyi bir tatla veya sudan farklı tadıyla işaret eder. Uyaranın sonraki çiftteki konsantrasyonu, tek bir yanlış yanıt sonrasında artar ve ardışık iki doğru yanıt sonrasında azalır. Konsantrasyon sırası yön değiştirdiğinde bir ters dönüş meydana gelir. Görev, birbirini izleyen iki ters çevirme arasında en fazla iki seyreltme adımı olması ve ters çevirmeler dizisinin artan bir desen oluşturmaması koşuluyla, dört ters çevirmenin gerçekleşmesinden sonra tamamlanmış sayılır. Bu ek kriterler, sonuçlarda daha fazla güvenilirlik sağlar. TDT daha sonra dört ters çevirmenin konsantrasyonlarının geometrik ortalaması olarak hesaplanır. Bu yöntem, hedoniklerden bağımsız, yaşlanma ve belirli hastalık durumlarıyla değişebilen ve değerli bir psikofizik testi haline getiren tat algısı boyutu hakkında bilgi sağladığı için gerçek dünya ilgisine sahiptir.
Introduction
Tat alma duyusu, kısmen bir bireyin bir yiyeceği veya sıvıyı reddedip reddetmediğini veya ağız boşluğuna kabul edip etmediğini belirleyen bir kapı bekçisi olarak işlev eder. Tat psikofizik- farklı kimyasal uyaranlar ve ürettikleri duyumlar ve algılar arasındaki ilişkilerin incelenmesi-tat sisteminin işleyişi hakkında önemli bilgiler sağlar1. Sadece birkaç temel tat (tatlı, tuzlu, acı, ekşi, umami) değil, her tat kalitesi, bireylerin kimyasal uyaranı tespit etme veya tadını tanıma konusunda ne kadar hassas oldukları ve tat duyusunu ne kadar beğendikleri veya sevmedikleri de dahil olmak üzere farklı algısal boyutlar ile karakterize edilebilir.
Bu makalede, 6 yaş kadar genç bireylerde tat algılama eşiklerini (yani tespit edilebilen en düşük lezzetli konsantrasyon) güvenilir bir şekilde ölçmek için kullanılabilecek psikofiziksel bir yöntem açıklanmaktadır. Çocukluktan yetişkinliğe kadar, travma veya hastalık durumlarının klinik değerlendirmelerinde,2,3 ve temel araştırma uygulamalarında, diyet, yaşlanma, gelişme, obezite ve sigaranın tat sistemi üzerindeki etkilerinin yanı sıra genotip tadı fenotip ilişkileri 4 ,5,6,7,8, 9,10, 11.
Bu tat algılama eşiği (TDT) testi, genellikle uyaran başına ortalama 15 dakika süren (aralık: 4-35 dk; ortanca: 13 dk) tamamlamak için, iki alternatifli, zorlanmış seçim, merdiven, bir tat olarak tespit edilebilen çözeltideki en düşük sakkaroz, sodyum klorür (NaCl) veya monosodyum glutamat (MSG) konsantrasyonını ölçmek için kullanılan izleme prosedüründen oluşur. Burada belirtildiği gibi, katılımcılara çözüm çiftleri sunulmaktadır; her çiftte, bir çözelti sudur ve diğer çözelti farklı konsantrasyonlarda lezzetli içerir. Tam ağız tadım yöntemi kullanarak, katılımcılar her çözeltiyi (yutmadan) tadır ve daha sonra çözeltiyi bir tatla veya sudan farklı tadıyla işaret eder. Uyaranın sonraki çiftteki konsantrasyonu, tek bir yanlış yanıt sonrasında artar ve ardışık iki doğru yanıt sonrasında azalır. Konsantrasyon sırası yön değiştirdiğinde bir ters dönüş meydana gelir.
Görev, birbirini izleyen iki ters çevirme arasında en fazla iki seyreltme adımı olması ve ters çevirmeler dizisinin artan bir desen oluşturmaması koşuluyla, dört ters çevirmenin gerçekleşmesinden sonra tamamlanmış sayılır. Monell-Jefferson Kemosensory Klinik Araştırma Merkezi2'dekiDr. Cowart ve meslektaşları tarafından klinik uygulamada belirlenen bu ek kriterler, sonuçlarda daha fazla güvenilirlik sağlar ve bireysel tat işleyişi önlemlerinin geçerliliğine olan güveni arttırır. Araştırma çalışmaları, 6 yaş, ergenler ve yetişkinler 4 ,5, 6 ,7,8,9,10 ,11gibi yüzlerce sağlıklı çocukta sakkaroz, tuz veya MSG için tat algılama eşiklerini belirlemek için bu yöntemi kullanmış ve çocukların çoğunluğunun (%>~%80) psikofizik görevi 4 , 6, 7,8, yöntemin pediatrik popülasyonlara uygunluğunu vurgulamaktadır.
Protocol
1. Genel hususlar
NOT: TDT testi için bu protokol, örnek olarak sakkaroz kullanarak, tat çözümlerini hazırlama ve sakkaroz, NaCl veya MSG için tat algılama eşiklerini belirleme yordamlarını açıklar. Bu yöntem Pennsylvania Üniversitesi Düzenleyici İşler Ofisi tarafından onaylanmıştır. Burada açıklanan araştırma çalışmaları için her yetişkin katılımcıdan veya pediatrik katılımcıların ebeveyn/yasal vasisinden bilgilendirilmiş onam alınmıştır. Katılımdan önce yedi yaş ve üzeri her çocuktan bilgilendirilmiş assent elde edildi.
- Tablo 1'degösterildiği gibi, 1 M ile 0.00010 M arasında değişen ve üç günlük adımlar arasında değişen 17 çözüm hazırlayın. İdeal olarak, seyreltici olarak damıtılmış su (dH2O) gibi ultra saf su kullanın ve tat sorunları nedeniyle musluk suyu kullanmayın12. Çözümleri en fazla 2 hafta soğutun, ancak aşağıda açıklanan protokole uyulan olursa.
- Yetişkin katılımcılardan veya ebeveyn/yasal vasilerden bilgilendirilmiş onay alındıktan ve uygun olduğunda, pediatrik katılımcılardan onay alınca, testleri ideal olarak balgam sezici lavabosu olan rahat, özel bir odada yapın. Çözeltilerin yutulmadığını, aksine ağız boşluğunda kaydırılıp tükürdüğünden emin olun. Bir lavabo yoksa, tükürmek için büyük bir fincan sağlayın.
- Test personelinin yoğun kokulu ürünler giymemesini sağlayın ve konuşmayı yöntemlerin talimatı veya açıklamasıyla sınırlayın. Yetişkin katılımcılara ve çocuk katılımcıların ebeveynlerine/yasal vasilerine, katılımcının testten önce 1 saat boyunca su dışında bir şey yemekten veya içmekten veya tütün ürünleri (yalnızca yetişkinler) kullanmaktan kaçınması gerektiğini söyleyin.
2. Tat uyarıcı çözümler yapmak için malzemeler ve tarifler
NOT: Stok çözeltisinin (1000 mmol/L; bundan sonra stokolarak anılacaktır) ve sakkaroz, NaCl veya MSG için stok çözeltisinin 16 seri seyreltmesinin (çeyrek günlük adımlarında) yapılması için ayrıntılı talimatlar burada verilmiştir. Tablo 1, her seyreltme adımının konsantrasyonlarını listeler. Şekil 1, seyreltme adımları 1-16 ile stok çözeltisi yapma adımlarını göstermektedir. Yapılan çözüm hacmi, en az dört katılımcı için eşikleri belirlemek için yeterli olacaktır.
| Adım | Molar | Sakkaroz (g/M) | NaCl (g/M) | MSG (g/M) |
| (1/4 günlük birimi birbirinden ayrı) | ||||
| 0 | 1 M | 342.3 | 58.44 | 187.13 |
| 1 | 0,562 M | 192.37 | 32.84 | 105.17 |
| 2 | 0,316 M | 108.17 | 18.47 | 59.13 |
| 3 | 0.178 M | 60.93 | 10.4 | 33.31 |
| 4 | 0.100 M | 34.23 | 5.84 | 18.71 |
| 5 | 0,056 M | 19.17 | 3.27 | 10.48 |
| 6 | 0,032 M | 10.95 | 1.87 | 5.99 |
| 7 | 0.018 M | 6.16 | 1.05 | 3.37 |
| 8 | 0.010 M | 3.42 | 0.58 | 1.87 |
| 9 | 0,0056 M | 1.92 | 0.33 | 1.05 |
| 10 | 0,0032 M | 1.09 | 0.19 | 0.6 |
| 11 | 0,0018 M | 0.62 | 0.11 | 0.337 |
| 12 | 0,0010 M | 0.34 | 0.058 | 0.187 |
| 13 | 0,00056 M | 0.19 | 0.033 | 0.105 |
| 14 | 0,00032 M | 0.11 | 0.019 | 0.059 |
| 15 | 0,00018 M | 0.06 | 0.0105 | 0.034 |
| 16 | 0.00010 M | 0.03 | 0.0058 | 0.019 |
Tablo 1: Tat Algılama Eşiği (TDT) testi için gereken sakkaroz, sodyum klorür (NaCl) ve monosodyum glutamat (MSG) çözeltilerinin konsantrasyon adımları ve buna karşılık gelen azı dişleri.
- Test malzemeleri hazırlayın.
- Gıda sınıfı bir sakkaroz, NaCl veya MSG kaynağı edinin.
- Gerekli tüm cam eşyaları temizleyin ve sterilize edin (bkz. Malzeme Tablosu).
Şekil 1: Seyreltme adımlarıyla stok çözümleri yapmak için adım adım talimatlar #1-16. Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
- Şekil 1A-C'degösterildiği gibi stok çözümü yapın.
- Tüm cam eşyaları tarih, tastant türü ve Stok ile etiketleyin.
- Lezzetliyi 0,01 g'a kadar doğru bir ölçekte tek kullanımlık bir tartım teknesine tartın ve 2000 mL'lik kabına aktarın.
NOT: Hisse senetlerini hazırlamak için gereken miktarlar sakkaroz için 684.60 g, MSG için 374.26 g ve NaCl için 116.88 g'dır. - Tartım teknesinde kalan herhangi bir ıstırabı dH2O ile durulayın ve kabın içine dökün. Numuneyi çözmek için 1500 mL dH2O ekleyin.
- Beherin içeriğini bir huni kullanarak 2000 mL hacimsel şişeye aktarın ve durulama suyunu şişeye dökerek beher ve huniyi daha fazla dH2O ile durulayın. Matarayı2000mL işaretine dH 2 O ile doldurun ve durdurucuyu mataraya yapıştırın. Püskül çözülene kadar karıştırmak için ters çevirin.
- Şekil 1D-F'degösterildiği gibi çözümleri #1-4yapın.
- Etiket 1000 mL hacimsel şişeler ile sayılar 1 ila 4 ve karşılık gelen 1000 mL cam şişeler tarih, tastant türü ve Stok adım 4.
- Sırasıyla 560 mL, 320 mL, 180 mL ve 100 mL stokları 1, 2, 3ve 4şişelere aktarın. Şişeleri 1-4 dH2O ile 1000 mL işaretine doldurun, durdurucu ile yapıştırın ve püskül çözülene kadar karıştırın. Gerekirse bir huni kullanarak her şişenin içeriğini karşılık gelen 1000 mL cam şişesine (Adım 1ila Adım 4 olarak etiketlenmiştir) dökün.
- Kalan stok çözeltisini Stoketiketli şişeye dökün; kapağı sıkıca kapatın ve buzdolabına 4 °C'de yerleştirin.
- Şekil 1G-I'degösterildiği gibi çözümleri yapın #5-16.
- On iki adet 1000 mL şişeyi tarih, tastant türü ve Adım 5 ile Adım 16 arasında etiketle.
- Şişeleri ön sırada 1 - 4. adım çözeltileri içeren şişelerle 4 x 4 ızgarada hizalayın (Şekil 1G-I'degösterildiği gibi).
NOT: Bu konumlandırma, basit bir seyreltme serisine izin verir, böylece satırdaki en seyreltilmiş adımla başlar(örneğin, adım 4) ve en konsantre adımla(örneğin, adım 1)sona erir. - Pipet 50 mL adım 1, 2, 3ve 4 sırasıyla şişeler 5, 6, 7, ve 8içine. 5-8 şişelere 450 mL dH2O ekleyin, durdurucuları yapıştırın ve karıştırmak için ters çevirin (Şekil 1 H).
- İkinci satırdan başlayarak işlemi yineleyin. Pipet 50 mL adım 5, 6, 7ve 8 şişeler içine 9, 10, 11, ve 12sırasıyla. Şişelere 9-12D450mL dH 2 O ekleyin, durdurucuları yapıştırın ve karıştırmak için ters çevirin.
- Üçüncü satırdan başlayarak işlemi tekrarlayın (Şekil 1 I). Pipet 50 mL adım 9, 10, 11ve 12 şişeler içine 13, 14, 15, ve 16sırasıyla. Şişelere 450 mL dH2O ekleyin 13 - 16, durdurucuları yapıştırın ve karıştırmak için ters çevirin. Kapakları 1 - 16şişelere yerleştirin, kapakları sıkıca kapatın ve buzdolabında 4 °C'de saklayın.
- Sterilize edilmiş 120 mL etiketli birkaç cam şişeyi dH2O ile doldurun, kapakları sıkıca kapatın ve buzdolabında 4 °C'de saklayın.
3. Psikofizik yöntem: TDT
- Katılımcılara, biri belirli bir şok tabancası konsantrasyonu ve diğeri dH2O olan çözelti çiftleri içeren ilaç bardakları sunun.
NOT: İlk çift için, dH2O ile eşleştirilen şok tabancası, sakkaroz eşiklerini belirlerken konsantrasyon adımı 10 ve NaCl veya MSG eşiklerini belirlerken 12. İlk adımdaki şok konsantrasyonları seçildi, çünkü her biri bu tastant için ortalama algılama eşiğinin birkaç adım altında. Bununla birlikte, TDT, ortalamanın üzerinde veya altında olup olmadığına bakılmaksızın eşikleri ölçmek için güvenilir bir araçtır. - Katılımcılardan her iki çözeltiyi yutmadan tatmalarını ve tadımlar arasında dH2O ile ağızlarını çalkalamalarını isteyin. Tadı olduğunu düşündükleri veya tadı sudan farklı olan ilaç kabını işaret etmelerini söyleyin.
NOT: Sonraki çiftler sırasında sunulan şok tabancasının konsantrasyonu, katılımcının yanıtının doğru olup olmadığına bağlıdır(yani,katılımcı şok tabancasını işaret etti). Yöntem, katılımcıların "hiçbiri" veya "bilmiyorum" diyerek yanıt veremeyeceği anlamına gelen zorunlu bir seçim prosedürüdür; bunun yerine, iki çözümden birini seçmeleri gerekir. Yöntem bir merdiven prosedürüdür, çünkü tat uyaranları katılımcının yanıtına bağlı olarak artan (daha yüksek tastant konsantrasyonları) veya alçalan (daha düşük tastant konsantrasyonları) sırada sunulur13. Açıklama kolaylığı için, sakkaroz serisinin yapılması ve sakkaroz algılama eşiklerinin belirlenmesi için talimatlar sağlanmıştır. MSG ve NaCl yöntemleri iki istisna ile aynıdır: (a) stok çözeltisini yapmak için gereken lezzetli konsantrasyon farklılık gösterir (Tablo 1) ve (b) yukarıda belirtildiği gibi, testin başladığı konsantrasyon sakkaroz için 10. - Pediatrik popülasyonda algılama eşiklerini değerlendirirken, testi seans başına tek bir şok tabancası ile sınırlayın.
NOT: Yetişkinler üç eşiği de tek bir oturumda tamamlayabilir.
Şekil 2: Eşik izleme ızgarası. (A) Tat algılama eşiklerini kaydetme. (B) Bir tepsinin kurulumu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
4. Testlerden önce malzemelerin hazırlanması
- Çiftler içinde uyaranların sunum sırası için bir rastgeleleştirme dizisi oluşturun ve su önce gelirse kutuya W veya birinci sırada T yerleştirerek her çift için izleme ızgarasının üst satırını (Şekil 2A) doldurun.
- Çözeltiler ( adım0 - 16) ve dH2O içeren şişeleri buzdolabından çıkarın ve her adım için çözeltinin ~120 mL'lik kısmını test etmeden önce uygun şekilde etiketlenmiş 120 mL sterilize cam şişelere 2 saat aktarın.
- Adım 0 - 16 şişeyi buzdolabına geri döndürün ve aktarılan çözeltilerin oda sıcaklığına eşdeğer olmasını sağlar.
- İki, 12 fincanlık kek tavalarını çift numarasıyla etiketleyin ve dH2O ilaç bardaklarını tutacak pozisyonları W (Şekil 2B) ile işaretleyin.
NOT: Kaç çiftin gerekli olacağı bilinmemekle birlikte, W pozisyonlarında bulunan ilaç bardaklarını ilk 6 çift için 10 mL dH2O ile doldurun.
5. Katılımcıların teste hazırlanması
- Yetişkinlere tütün ürünleri yemekten, içmekten veya kullanmaktan kaçınmalarını ve ebeveynlere testten önce en az 1 saat boyunca çocuk katılımcılarına yemeleri veya içmeleri için bir şey vermemelerini söyleyin.
- Bir katılımcıyı, 1 ve 2 numaralarıyla etiketlenmiş bir kağıdın önündeki masaya oturt (Şekil 3).
NOT: Katılımcılar önlerine konulana kadar tat uyaranlarını görmemelidir; bu, katılımcıyı araştırmacıdan ayıran opak bir bölüme sahip olarak elde edilebilir. - Katılımcıların test odasına ve test cihazına en az 10 dakika alışmasına izin verin.
- 10 s ara uyaran aralıklarını (ilk uyaranın balgam söktüründen ikinci uyaranı yudumlama zamanı) zamanlamak için bir kronometre kullanın.
Şekil 3: Tat eşiği algılama testine katılan çocuk. Katılımcının önündeki masaya, tadına bakılması gereken sırayla bir çift çözelti yerleştirilir. Katılımcıdan çözeltiyi 5 s için 1 pozisyonunda tatması, balgam sürçme, ağzını dH2O ile durulama ve çözelti için 2 pozisyonundatekrar etmesi istenir. Her iki çözümü de tattıktan sonra, katılımcıdan sudan farklı bir tadı veya tadı olan çözüme işaret etmesi istenir. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
6. Katılımcılara sözlü talimatlar
- Pediatrik katılımcılar
- Bardakları katılımcıya gösterin ve deyin ki: "Tadına bakacak şeyler içeren bir oyun oynayacağız. İşte iki fincan. İlk fincanın içindekinin tadına bakacaksınız, ağzınızın etrafına sallayacaksınız, ama yutmayın ve lavaboya (veya bardağa) ne zaman tüküreceğinizi söyleyeceğim. Daha sonra suyla durulayacak ve ikinci fincanın içindekileri tadacaksınız. Ne zaman tüküreceğini söyleyeceğim. O zaman tadı sudan farklı olana işaret etmeni istiyorum. Emin değilseniz, sadece tahmin edin. Daha sonra ağzınızı iki kez suyla durulayacaksınız ve bunu tekrar yapacağız. Doğru ya da yanlış cevap yoktur; hangisinin tadına varmak istediğinizi bilmek istiyoruz."
- Her yanıta sonra katılımcıyı "Teşekkür ederim" diyerek ödüllendirin. İyi iş çıkarıyorsun!"
- Ergenler ve yetişkinler
- Bardakları katılımcıya gösterin ve deyin ki: "Size tatmak için çözümler vereceğiz. İşte iki fincan. İlk fincanın içindekinin tadına bakacaksınız, ağzınızın etrafına gezdireceksiniz, ama yutmayın ve lavaboya (veya bardağa) ne zaman tüküreceğinizi söyleyeceğim. Daha sonra suyla durulayın ve ikinci fincanın içindekileri tadacaksınız. Ne zaman tüküreceğini söyleyeceğim. O zaman tadı sudan farklı olana işaret etmeni istiyorum. Emin değilseniz, sadece tahmin edin. Daha sonra ağzınızı iki kez suyla durulayacaksınız ve bunu tekrar yapacağız. Doğru ya da yanlış cevap yoktur; hangisinin tadına varmak istediğinizi bilmek istiyoruz."
- Her yanıta sonra katılımcıyı "Teşekkür ederim" diyerek ödüllendirin. İyi iş çıkarıyorsun!"
7. Araştırmacı talimatları: Tat algılama eşikleri
- İzleme kılavuzunda belirtildiği gibi, sakkaroz için 10. Biri 10 mL adım 10, diğeri dH2O içeren iki ilaç bardağını katılımcının önüne 1 ve 2 ile kağıt levhaya yerleştirin (Şekil 3).
NOT: Su veya tat çözeltisinin yerleştirildiği sayı, oluşturulan, randomize uyaran sunum sırası ile belirlenir. Örneğin, Şekil 2'de, çift 1 için randomize sıra W 'dir (önce su), bu nedenle su içeren bardak 1konumundadır ve 10. - Katılımcıya çözümü 1. 5 sn'den sonra, katılımcıya balgam sezdirme, ağzını suyla çalkalama ve tekrar balgam senime talimatı vermek.
- Katılımcıya çözeltiyi 2.
- Katılımcıdan sudan farklı bir tadı veya tadı olan çözümü işaret etmesini isteyin. Katılımcı her ikisini de söylemiyorsa, katılımcıya birini seçmesini söyleyin.
NOT: Katılımcılar geri dönüp her iki çözümü de yeniden tadamazlar ve ikisinden birini seçmelidir. - Seçimini yaptıktan sonra, ağızlarını suyla durulamalarını söyleyin ve katılımcı fincanı suyla(yanlışyanıt)seçtiyse, tastant ( doğru yanıt ) veya eksi işareti (-) ile fincanı seçtiyse ızgaraya bir artı işareti (+) yerleştirin.
- İkinci çifte devam edin, şok tabancasının konsantrasyonunun katılımcının ilk çift için yanıtına bağlı olduğunu belirtin. Katılımcı ilk çift için yanlışsa (katılımcı W'yuseçti), ardından ikinci çiftteki şok tabancasının bir sonraki daha yüksek konsantrasyon olacağını belirterek ızgaraya devam edin (adım 9). Katılımcı doğruysa (T'yeseçildiyse), ikinci çiftteki lezzetlinin aynı adım 10olacağını unutmayın. Sunu sırası için kılavuza bakın ( önceW veya T).
- 7.2-7.5 adımlarında açıklanan bu işlemi yineleyin. Katılımcı adım 10'da art arda iki kez doğruysa (her ikisinde de T'yi seçer), sonraki çiftin bir sonraki alt konsantrasyonu(adım 11)içereceğini unutmayın. Katılımcı çift 2 için yanlışsa (W'yiseçer), ızgarada bir sonraki daha yüksek konsantrasyona(adım 9)ilerleyin.
- Bu işleme devam edin, her yanlış yanıtla ızgarayı bir sonraki daha yüksek konsantrasyona taşıyın veya üst üste iki doğru yanıtdan sonra ızgarayı bir sonraki alt konsantrasyona diriden.
- Bir tersinolduğu ızgaradaki adımları daire içine alırsınız - katılımcının yanıtındaki doğrulukta bir yön değişikliği, yani katılımcı merdivendeki bir sonraki adımları tadırken uyarıyı tanımlamada az çok başarılı olduğunda.
NOT: Özellikle, katılımcı bir adımda T'yi tanımlayamamaktan (-) üst üste iki kez daha konsantre bir sonraki adımda T'yi başarıyla tanımlamaya ( ++ ) veya katılımcı aynı adımda(++) T'yi iki kez başarıyla tanımlamaktan bir sonraki daha az konsantre adım verildiğinde T'yi tanımlayamama; bu hata, daha az konsantre adımın (- veya +-) ilk veya ikinci sunumu sırasında oluşabilir. - Dört ters çevirme elde edilene kadar tat testine devam edin ve bu dört ters çevirmenin adım numaralarını listeleyin.
- Dört ters çevirmenin istenen kriterleri karşıladığını belirleyin; yani,ardışık geri dönüşler birbirinden en fazla iki adım uzaktadır ve katılımcının T'yi aynı adımda iki kez doğru tanımladığı iki çift kümesi vardır. DUR ve algılama eşiğini hesaplamak için 7.13'e gidin.
- Alternatif olarak, dört ters çevirmenin kriterleri karşılamadığını belirleyin; yani,ardışık geri dönüşler birbirinden 2 adımdan fazladır veya katılımcının T'yi aynı adımda iki kez doğru tanımladığı en az 2 çift kümesi bulunmaz. Dört ters çevirme ölçütleri karşılayana veya katılımcı ızgaranın tepesine ulaşana (eşik 1 M 'dir(stok))veya doğru yanıtlar vermeye devam edene ve 16.
- Bu dört ters çevirmenin azı dişlerinin günlük değerlerinin aritmetik ortalamasını hesaplayarak katılımcının algılama eşiğini belirleyin:
aritmetik ortalama = (ters çevirmenin günlük konsantrasyon adımı 1 + ters çevirmenin günlük konsantrasyon adımı 2 + ters çevirmenin günlük konsantrasyon adımı 3 + ters çevirmenin günlük konsantrasyon adımı 4) / 4.
NOT: Bu, son dört ters çevirmenin konsantrasyonlarının geometrik ortalamasını hesaplamaya eşdeğerdir:
- Test için malzemelerin hazırlanması sırasında 120 mL şişelere aktarılan kullanılmayan tat çözeltilerini atın.
Representative Results
Şekil 4, dört temsili katılımcının (A-D) izleme ızgarası sonuçlarını göstermektedir. Katılımcının yanıtları yönünde yapılan değişiklikler olan ters çevirmeler, ölçütlerin ne zaman karşılandığını göstermek için daireler tarafından gösterilir ve oluşum sırasına göre numaralandırilir. Ters çevirmeler, yön değişikliğinin yanlıştan düzeltmeye (yeşil) veya doğrudan yanlışa (kırmızı) ne zaman gittiğini göstermek için renk kodludur.
Şekil 4A, yanıtları ilk dört ters çevirme içindeki kriterleri karşılayan bir katılımcının izleme kılavuzünü gösterir. Oluşum sırasına göre, bu katılımcı için ters dönüşler 8 , 9, 8ve 10. Bu sıra ölçütleri karşılar, çünkü (a) birbirini izleyen iki ters çevirme arasında iki adımdan fazla adım yoktu(adım 8 vs 9, 9 vs 8, 8 vs 10) ve (b) katılımcının T'yi aynı adımda iki kez doğru tanımladığı iki çift kümesi vardı (8 ). Bu katılımcının algılama eşiği, bu dört ters çevirmenin konsantrasyonlarının geometrik ortalaması ile belirlenir:
Geometrik ortalama = 0.0065 M
Şekil 4B, ilk dört ters yöndeki yanıtları kriterleri karşılamayan nispeten yüksek sakkaroz algılama eşiğine (düşük hassasiyet) sahip bir katılımcının izleme ızgarasını göstermektedir. Oluşum sırasına göre, ilk dört ters dönüş 9 , 10, 8 ve 9 adımlarında meydanageldi. Bu geri dönüşler birbirinin iki adımında olmasına rağmen (9 vs 10, 10 vs 8, 8 vs 9), katılımcının T'yi aynı adımda iki kez doğru tanımladığı iki çift kümesi yoktu (8 vs 9). Bu geri dönüşler yükselen bir desen oluşturdu; bu nedenle kriterler karşılanmadı ve testlere devam edildi. Ters çevirmeler 6-9 kriterleri karşılar, çünkü (a) birbirini izleyen iki ters çevirme arasında en fazla iki adım vardı(adım 8 vs 6 , 6 vs 7, 7 vs 6) ve (b) aynı adımda üst üste iki doğru cevap kümesi elde edildi(adım 6 ). Bu katılımcının algılama eşiği, bu dört ters çevirmenin konsantrasyonlarının geometrik ortalaması ile belirlenir:
Geometrik ortalama = 0.021 M
Şekil 4C, ilk dört ters yöndeki yanıtları kriterleri karşılamayan nispeten düşük sakkaroz algılama eşiğine (yüksek hassasiyet) sahip bir katılımcının izleme kılavuzlarını göstermektedir. Geri dönüşler 9, 10, 9 ve 13adımlarında meydanageldi. her ne kadar iki çift halinde (çiftler 3-4 ve 7-8 ), katılımcı aynı adımda(adım 9)iki kez uyarıyı doğru bir şekilde tanımlasa da, 3 ve 4 ters çevirmeleri(adım 9 vs 13)arasında ikiden fazla adım vardı. Böylece testlere devam edildi. Son dört ters dönüş ( adım13, 12, 13, 12) kriterleri karşılar, çünkü (a) birbirini izleyen iki ters dönüş (13'e karşı 12 ) arasında iki adımdan fazla adım yoktu ve (b) katılımcı 17 - 18 ve 20-21çiftleri verildiğinde aynı konsantrasyonu ( adım12 ) doğru tanımladı. . Bu katılımcının algılama eşiği, bu dört ters çevirmenin konsantrasyonlarının geometrik ortalaması ile belirlenir:
Geometrik ortalama = 0.00075 M
Şekil 4D, yanıtları ilk dört ters çevirmedeki kriterleri karşılayan nispeten yüksek sakkaroz algılama eşiğine (düşük hassasiyet) sahip bir katılımcının izleme kılavuzünü gösterir(adım 6, 7, 5, 8). Birbirini izleyen iki ters dönüş ( 6 vs 7 ,7 vs 5,5 vs 8) arasında iki adımdan fazla yoktu ve katılımcı 7 - 8 ve 13- 14çiftleri verildiğinde aynı konsantrasyonu (adım 6) doğru tanımladı. Bu katılımcının algılama eşiği, bu dört ters çevirmenin konsantrasyonlarının geometrik ortalaması ile belirlenir:
Geometrik ortalama = 0.024 M
Şekil 4: İzlenme ızgaraları. (A-D) Dört konudan temsili veriler. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.
Discussion
TDT testi, önceki yöntemler12'dendaha kriterleri karşılamak için katı kurallar kullanan iki alternatifli, zorunlu tercihli, merdiven prosedürüdür, böylece daha istikrarlı bir sonuç ölçüsü sağlar. Monell-Jefferson Kemosensory Klinik Araştırma Merkezi2'debelirlenen kriterleri kullanan TDT, 6 yaşın küçük bireyler arasında tatla tespit edilebilen çözeltideki en düşük sakkaroz, NaCl veya MSG konsantrasyonunu ölçen güvenilir bir swish-and-spit yöntemidir. Her tadımdan önce ve sonra katılımcıların ağızlarını durulamalarını zorlamak da dahil olmak üzere açıklandığı gibi tamamlanırsa, sonuçlar güvenilir ve hızlıdır ve hedoniklerden bağımsız önemli bir tat boyutu hakkında fikir sağlar8.
Bu tat boyutunu ölçmek için psikofiziksel araçların uygulanması alanda iyi kurulmuş olsa da, çocuklarda kullanım için birçok yöntem doğrulanmadı14. Protokolde, bazıları özellikle çocuklar için geçerli olan birkaç kritik adımvardır [ayrıca bkz. İlk olarak, eşiğe elde etmek için kriterler yalnızca dört tersin oluşumuna dayanmamalı veya katılımcının yaşına bağlı olarak değişmemelidir. Bunun yerine, birbirini izleyen iki ters çevirme arasında en fazla iki seyreltme adımı olmalıdır ve geri dönüşler serisi, katılımcının sadece tahminde bulunduğu veya göreve katılmadığı durumlarda, artan bir desen oluşturmamalıdır. Klinik deneyime dayanarak oluşturulan bu ek kriterler2, bireyin tat sisteminin işleyişinin değerlendirilmesine izin verir, kısmen yanlış pozitifleri kontrol ettikleri için, özellikle katılımcı sadece tahmin ederken16.
İkincisi, prosedür zorla seçmedir, bu nedenle katılımcılar "ikisi de" veya "her ikisi de" çözümlerin bir zevki olmadığı yanıtını verirse, bu cevap kabul edilmez. Aksine, onlara "tahmin edin" denilir. TDT sırasında, katılımcılar genellikle tahmin ettiklerini hissederler, ancak bu, tadı uyaranlardan tamamen habersiz olduklarının kanıtı olarak kabul edilmelidir17. Dahası, bireyler bir tat hissi oluşturan şey için iç kriterlerinde değişebilir ve bu nedenle bir çözümün bir tadı olduğunu veya olmadığını söyleme istekleri. Üçüncüsü, yemek yemenin rekreasyonu tat algısını etkilediğinden18, katılımcının en son yediği veya içtiğinden beri zamanı standartlaştırmak, duyusal adaptasyon veya geliştirmenin neden olduğu intersubject değişkenliğini azaltmak için önemlidir. Dördüncüsü, burada kullanılan tastantlar lezzetlidir ve bir gıda matrisinde değil, çözelti içinde sunulur. Bir gıda matrisi kullanıldığında, yiyeceklerin damağı temizlemesi için daha uzun interstimulus aralıkları gerekebilir. Bu yöntem yetişkinler arasında ekşi veya acı tastantlar için algılama eşiklerini ölçmek için kullanılmış olsa da2,11, bazı küçük çocuklar arasında unpalatable tastantlar için algılama eşiklerini ölçmek için kullanımı, bazı acı şok tabancalarına karşı artan duyarlılıkları ve katılımı sürdürme konusundaki potansiyel isteksizlikleri nedeniyle sorunlu olabilir19.
Dört çift artan acı tatma çözeltisi ve dH2O konsantrasyonlarını sunmanın zorunlu seçim prosedürü pediatrik popülasyonlar için başarılı olmuştur19,20. Beşinci olarak, bir oyun bağlamında gömülü olan yöntem, çocukların bilişsel ve dil sınırlamalarına duyarlıdır ve yalnızca katılımcının tadı içeren fincanı işaret etmesini gerektirir. Yeni bir çalışmada, çocukların% 80'i ortalama 15 dakika boyunca sürekli dikkat sağladı ve kriterlere ulaştı8. Görevlerin tamamlanmasıyla ilgili bu tür bilgiler, özellikle pediatrik popülasyonlar incelendiğinde bildirilmelidir.
Mevcut yöntem gerçek dünya ilgisine sahiptir ve ekşi (sitrik asit) ve acı (kinin)2'nin diğer temel tatları için ve8yaş arasındaki yetişkinlerde algılama eşiklerini değerlendirmek için kullanılmıştır. Yöntem sözlü yanıtlar gerektirmediğinden, talimatlar kolayca diğer dillere çevrilmelidir21Dünya çapında bilim adamları için değerli bir psikofizik aracı haline getirilmelidir. Bununla birlikte, diğer psikofizik yöntemler gibi, özellikle küçük çocuklarda, kullanımında sınırlamalar olacaktır. Prosedür, çocuklar için kriterlere varmak yetişkinlere göre daha zor olabilir. Bir çalışmada, çocukların% 20'si kriterlere ulaşmadı, yetişkinlerin% 5'i8. Tamamlanmama nedenleri arasında odaklanmamış davranış, görevi anlamama veya yorulma ve devam edememe yer aldı.
Bu tadı kullanan çalışmalardan elde edilen bulgular TDT, klinikte tat ageusia tanısına kapsamlı bir şekilde katkıda bulunmuştur ve tat hassasiyetinin yaş ve sağlık durumu ile nasıl değiştiği anlayışını daha da ileriye çekmiştir. Hastaların klinik değerlendirmesi, her iki cinsiyet için 0.025 M ≥ sakkaroz tespit eşiklerinin ve erkekler için 0.012 M'≥ NaCl tespit eşiklerinin veya kadınlar için 0.010 M'≥ anormal olarak kabul edildiğini ortaya koydu2. Yetişkinler arasında, sekizinci on yıla kadar devam eden tatlı, tuzlu, ekşi ve acı tatlar için tat hassasiyetinde kademeli bir düşüş var22. Genç yetişkinler genellikle yaşlı yetişkinlerden daha düşük tat algılama eşiklerine sahiptir (daha hassastır)22,23,24,25. Bununla birlikte, çocuklar ve ergenler, daha yüksek (daha az hassas)8 olan ve propiltiyouralisin acı tadı için yetişkinlerinkinden daha düşük (daha hassas) olan sakkaroz için tat eşiklerine sahiptir, ergenlik döneminde ortaya çıkan yetişkin deseni19,26.
Tat algılama eşiklerinin sağlık göstergeleriyle ilgili olduğu gösterilmiştir. Örneğin, tuz tadı tespit eşikleri normal kilolu çocuklar arasında sistolik kan basıncı ile pozitif olarakilişkilidir 7, merkezi obezitesi olan çocuklar ise sakkaroz için daha düşük tespit eşiklerine sahipti (daha hassas) merkezi obezite olmayanlara göre4, ergenler arasında benzerbulgularla 27. Bununla birlikte, yetişkin kadınlarda obezite ve sakkaroz tespit eşikleri arasındaki ilişki gözlenmedi ve obeziteli yetişkin kadınlar MSG9'untuzlu tadına daha yüksek tespit eşiklerine sahipti (daha az duyarlıydı).
Çocuklar ve yetişkinler arasındaki algılama eşiklerindeki farklılıklarla ilgili araştırmalar sınırlı olmakla birlikte, sakkaroz tat algılama eşiklerinin çocukluktan yetişkinliğe tatlı tat tercihlerini veya suprathreshold yoğunluk derecelendirmelerini tahmin etmediği bilinmektedir8,28,29Tat hassasiyetinin tercihlerden bağımsız ve böylece farklı alttaki mekanizmaları öneren farklı bir tat boyutunu temsil ettiğine dair daha fazla kanıt sağlar. Yaş, beslenme alışkanlıkları, sağlık durumu ve tat sisteminin hassasiyeti arasındaki karmaşık etkileşimin daha iyi anlaşılması ve bu tür etkileşimlerin birincil uyarıcılar arasında farklılık görüpmediği, gelecekteki araştırmalar için önemli bir alandır.
Disclosures
Yazarlar rakip finansal çıkarları olmadığını beyan ederler.
Acknowledgments
Dr. Joseph, Ulusal Alkol Bağımlılığı ve Alkolizm Enstitüsü (Z01AA000135) ve Ulusal Hemşirelik Araştırmaları Enstitüsü (NINR) (1ZNR0000035-01) ve NIH Seçkin Bilgin fonları tarafından desteklenmektedir; Dr. Mennella, Ulusal Sağırlık ve Diğer İletişim Bozuklukları Enstitüleri (NIDCD) tarafından DC016616 ve DC011287 hibeleri ile desteklenmektedir; Dr. Cowart'ın TDT testini iyileştirme çabası NIDCD hibe P50 DC000214 tarafından desteklendi; ve Dr. Pepino, Amerikan Diyabet Derneği (ADA) hibesi 1-19-ICTS-092 ve USDA Ulusal Gıda ve Tarım Enstitüsü (NIFA) Hatch Projesi 698-921 tarafından desteklenmektedir. İçerik yalnızca yazarların sorumluluğundadır ve NIH, NINR, NIDCD, ADA veya USDA NIFA'nın resmi görüşlerini temsil etmek zorunda değildir. Fon kuruluşlarının çalışmanın tasarımında ve yürütülmesinde hiçbir rolü yoktu; verilerin toplanmasında, analizinde ve yorumlanmasında; veya makalenin hazırlanmasında veya içeriğinde.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Digital stopwatch | Fisherbrand | 14-649-7 | |
| Funnel | Thermo Scientific | 10-348D | |
| Glass beaker, 2000 mL | Cole-Parmer | NC0821737 | |
| Glass bottles with lids, 120 mL (25) | Fisherbrand | FB02911904 | |
| Glass bottles with lids, 950 mL (17) | Fisherbrand | FB02911903 | |
| Graduated glass cylinders, 100 mL | PYREX | 08-552E | |
| Graduated glass cylinders, 1000 mL | PYREX | 08-566G | |
| Graduated glass cylinders, 50 mL | PYREX | 08-566C | |
| Graduated glass cylinders, 500 mL | PYREX | 08-566F | |
| Medicine cups | Medline | 22-666-470 | |
| Mini Cupcake, 48-cup Muffin pan (2) | Wilton | NA | |
| Monosodium glutamate (MSG) | Ajinomoto | NA | |
| Pipet Fillers | Thermo Scientific | 14-387-163 | |
| Pipets 50 mL | Fisherbrand | 13-676-10Q | |
| Sodium chloride (NaCl) | Morton | NA | |
| Sucrose, Crystal, NF | Spectrum Chemical MFG Corp | 57-50-1 | |
| Volumetric flask, 2000 mL, with stopper | PYREX | 10-210H | |
| Volumetric flasks, 1000 mL, with stoppers (4) | PYREX | 10-210G | |
| Weight boats | Sartorius | 13-735-744 |
References
- Bartoshuk, L. M. The psychophysics of taste. The American Journal of Clinical Nutrition. 31 (6), 1068-1077 (1978).
- Pribitkin, E., Rosenthal, M. D., Cowart, B. J. Prevalence and causes of severe taste loss in a chemosensory clinic population. Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology. 112 (11), 971-978 (2003).
- Kouzuki, M., et al. Detection and recognition thresholds for five basic tastes in patients with mild cognitive impairment and Alzheimer's disease dementia. BMC Neurology. 20 (1), 110 (2020).
- Joseph, P. V., Reed, D. R., Mennella, J. A. Individual differences among children in sucrose detection thresholds: Relationship with age, gender, and bitter taste genotype. Nursing Research. 65 (1), 3-12 (2016).
- Nance, K., Acevedo, M. B., Pepino, M. Y. Changes in taste function and ingestive behavior following bariatric surgery. Appetite. 146, 104423 (2020).
- Bobowski, N., Mennella, J. A. Repeated exposure to low-sodium cereal affects acceptance but does not shift taste preferences or detection thresholds of children in a randomized clinical trial. Journal of Nutrition. 149 (5), 870-876 (2019).
- Bobowski, N. K., Mennella, J. A. Disruption in the relationship between blood pressure and salty taste thresholds among overweight and obese children. Journal of the Academy of Nutrition and Dietetics. 115 (8), 1272-1282 (2015).
- Petty, S., Salame, C., Mennella, J. A., Pepino, M. Y. Relationship between sucrose taste detection thresholds and preferences in children, adolescents, and adults. Nutrients. 12 (7), 1918 (2020).
- Pepino, M. Y., Finkbeiner, S., Beauchamp, G. K., Mennella, J. A. Obese women have lower monosodium glutamate taste sensitivity and prefer higher concentrations than do normal-weight women. Obesity (Silver Spring). 18 (5), 959-965 (2010).
- Pepino, M. Y., Mennella, J. A. Effects of cigarette smoking and family history of alcoholism on sweet taste perception and food cravings in women. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 31 (11), 1891-1899 (2007).
- Cowart, B. J., Yokomukai, Y., Beauchamp, G. K. Bitter taste in aging: compound-specific decline in sensitivity. Physiology & Behavior. 56 (6), 1237-1241 (1994).
- Hoehl, K., Schoenberger, G. U., Busch-Stockfisch, M. Water quality and taste sensitivity for basic tastes and metallic sensation. Food Quality and Preference. 21, 243-249 (2010).
- Wetherill, G. B., Levitt, H. Sequential estimation of points on a psychometric function. British Journal of Mathematical and Statistical Psychology. 18, 1-10 (1965).
- Chambers, E. Commentary: conducting sensory research in children. Journal of Sensory Studies. 20 (1), 90-92 (2005).
- Mennella, J. A., Bobowski, N. K. Psychophysical tracking method to measure taste preferences in children and adults. Journal of Visualized Experiments: JoVE. , e35416 (2016).
- Running, C. A. High false positive rates in common sensory threshold tests. Attention, Perception, & Psychophysics. 77 (2), 692-700 (2015).
- Kunimoto, C., Miller, J., Pashler, H. Confidence and accuracy of near-threshold discrimination responses. Consciousness and Cognition. 10 (3), 294-340 (2001).
- Puputti, S., Hoppu, U., Sandell, M. Taste sensitivity Is associated with food consumption behavior but not with recalled pleasantness. Foods. 8 (10), 444 (2019).
- Mennella, J. A., Pepino, M. Y., Reed, D. R. Genetic and environmental determinants of bitter perception and sweet preferences. Pediatrics. 115 (2), 216-222 (2005).
- Anliker, J. A., Bartoshuk, L., Ferris, A. M., Hooks, L. D. Children's food preferences and genetic sensitivity to the bitter taste of 6-n-propylthiouracil (PROP). American Journal of Nutrition. 54 (2), 316-320 (1991).
- Okronipa, H., et al. Exposure to a slightly sweet lipid-based nutrient supplement during early life does not increase the level of sweet taste most preferred among 4- to 6-year-old Ghanaian children: follow-up of a randomized controlled trial. The American Journal of Clinical Nutrition. 109 (4), 1224-1232 (2019).
- Murphy, C. The effect of age on taste sensitivity. Special senses in aging: A current biological assessment. Han, S. S., Coons, D. H. , Institute of Gerontology. Ann Arbor, MI. 21-33 (1979).
- Moore, L. M., Nielsen, C. R., Mistretta, C. M. Sucrose taste thresholds: age-related differences. Journal of Gerontology. 37 (1), 64-69 (1982).
- Richter, C. P., Campbell, K. H. Sucrose taste thresholds of rats and humans. American Journal of Physiology. 128, 291-297 (1940).
- Schiffman, S. S., Sattely-Miller, E. A., Zimmerman, I. A., Graham, B. G., Erickson, R. P. Taste perception of monosodium glutamate (MSG) in foods in young and elderly subjects. Physiology & Behavior. 56 (2), 265-275 (1994).
- Mennella, J. A., Pepino, M. Y., Duke, F. F., Reed, D. R. Age modifies the genotype-phenotype relationship for the bitter receptor TAS2R38. BMC Genetics. 11, 60 (2010).
- Pasquet, P., Frelut, M. L., Simmen, B., Hladik, C. M., Monneuse, M. O. Taste perception in massively obese and in non-obese adolescents. International Journal of Pediatric Obesity. 2 (4), 242-248 (2007).
- Snyder, D. J., Prescott, J., Bartoshuk, L. M. Modern psychophysics and the assessment of human oral sensation. Advances in Otorhinolaryngology. 63, 221-241 (2006).
- Webb, J., Bolhuis, D. P., Cicerale, S., Hayes, J. E., Keast, R. The relationships between common measurements of taste function. Chemosensory Perception. 8 (1), 11-18 (2015).
