Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

מודלים בעלי חיים של דיכאון - מודל ייאוש כרוני (CDM)

Published: September 23, 2021 doi: 10.3791/62579
Automatic Translation
1,2, 3,4, 1,5
1Department of Psychiatry and Psychotherapy, Medical Center - University of Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, 2Berta-Ottenstein-Programme for Clinician Scientists, Faculty of Medicine, University of Freiburg, 3Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université de Strasbourg, Institut des Neurosciences Cellulaires et Intégratives, 4Department of Stereotactic and Functional Neurosurgery, Medical Center - University Freiburg, Faculty of Medicine, University of Freiburg, 5Center for Basics in Neuromodulation, Faculty of Medicine, University of Freiburg

Summary

מודל עכבר הייאוש הכרוני (CDM) של דיכאון מורכב ממפגשי שחייה כפויים חוזרים ונשנים ועוד שלב שחייה מושהה כקריאה. הוא מייצג מודל מתאים לגיוס מצב דמוי דיכאון כרוני יציב במשך 4 שבועות לפחות, ניתן לתיקון להערכת התערבויות טיפול תת-קרקעיות ואקוטיות.

Abstract

הפרעת דיכאון גדולה היא אחת הצורות הנפוצות ביותר של מחלות נפש וגורמת לסבל אישי עצום ולנטל סוציו-אקונומי. למרות חשיבותו, הטיפול הפרמקולוגי הנוכחי מוגבל, ויש צורך דחוף באפשרויות טיפול חדשניות. אחד הגורמים המרכזיים בחיפוש אחר תרופות חדשות פוטנציאליות הוא הערכת העוצמה שלהן נגד דיכאון במודלים מתאימים של בעלי חיים. מבחן השחייה הכפוי הקלאסי של פורשולט שימש למטרה זו במשך עשרות שנים כדי לגרום ולהעריך מצב דמוי דיכאון. הוא מורכב משתי תקופות קצרות של שחייה בכפייה: הראשונה לגרום למצב מדוכא והשנייה למחרת כדי להעריך את ההשפעה נוגדת הדיכאון של הסוכן שניתן בין שני מפגשי השחייה. מודל זה עשוי להתאים ככלי סינון עבור סוכנים פוטנציאליים נוגדי דיכאון, אך מתעלם מהתחלת הפעולה המתעכבת של תרופות נוגדות דיכאון רבות. ה- CDM הוקם לאחרונה וייצג שינוי של המבחן הקלאסי עם הבדלים בולטים. עכברים נאלצים לשחות במשך 5 ימים רצופים, בעקבות הרעיון כי אצל בני אדם, דיכאון נגרם על ידי כרוני ולא על ידי מתח חריף. בתקופת מנוחה של מספר ימים (1-3 שבועות), בעלי חיים לפתח ייאוש התנהגותי מתמשך. שיטת הקריאה הסטנדרטית היא מדידת זמן חוסר תנועה בשחייה מאוחרת נוספת, אך מוצעות מספר שיטות חלופיות כדי לקבל מבט רחב יותר על מצב הרוח של החיה. ניתן להשתמש בכלי ניתוח מרובים תוך התמקדות בשינויים התנהגותיים, מולקולריים ואלקטרופיזיולוגיים. הפנוטיפ המדוכא יציב לפחות 4 שבועות, ומספק חלון זמן לאסטרטגיות טיפול מהירות אך גם תת-קרקעיות לטיפול בתרופות נוגדות דיכאון. יתר על כן, שינויים בהתפתחות של מצב דמוי דיכאון ניתן לטפל באמצעות גישה זו. CDM, אם כן, מייצג כלי שימושי כדי להבין טוב יותר דיכאון ולפתח התערבויות טיפול חדשניות.

Introduction

הפרעות רגשיות, כגון הפרעת דיכאון גדולה, הן בין מחלות הנפש השכיחות והמאתגרות ביותר ומקושרות לסבל אישי גבוה1, עלייה בסיכון להתאבדות2, וגורמות לנטל חברתי-כלכלי ניכר 3 עבור החברה. למרות השפעתו, אפשרויות הטיפול מוגבלות, ויש צורך דחוף בפיתוח התערבויות נוגדות דיכאון חדשניות, במיוחד בשל משבר החדשנות בפסיכופרמקולוגיה בעשורים האחרונים. על מנת להבין את הפתולוגיה של דיכאון ולבדוק סוכנים פוטנציאליים חדשים, מודלים בעלי חיים רציונליים ותקינים נדרשים בדחיפות4. במשך כמעט חצי מאה, מבחן השחייה הכפוי הקלאסי (FST), שתואר במקור על ידי Porsolt5, שימש אינדוקציה וקריאה להקרנה של תרופות נוגדות דיכאון חדשניות פוטנציאליות. הוא מורכב מתקופת שחייה כפויה במשך 5-15 דקות ביום 1, יישום סמים חד פעמי לאחר מכן, והערכה של עכברי החלק לבלות ללא תנועה במים בתקופה אחרת לשחות ביום שלמחרת. זמן חוסר התנועה נחשב לייצג התנהגות בריחה טבעית חסרה ונחשב לתאם עם מידת מצב דמוי דיכאון בעכברים 5.

FST הקלאסי זכה לביקורת רבה, לא רק בקהילה המדעית6,7,8 אלא גם בתקשורת הציבורית8. רוב המחלוקות סביב FST נובעות מתקופות אינדוקציה וטיפול קצרות של יום אחד בלבד בפרדיגמה הקלאסית. נטען כי FST מייצג מודל טראומה חריף למדי מאשר מצב דומה דיכאון אנושי. יתר על כן, בדיקת פורשולט עשויה להתאים ככלי סינון עבור סוכנים פוטנציאליים נוגדי דיכאון, אך היא מתעלמת מהתחילה המתעכבת של פעולה של תרופות נוגדות דיכאון רבות.

מודל הייאוש הכרוני (CDM)9,10,11,12,13,14,15, הנגזר מה-FST המקורי, מייצג מודל בעלי חיים מתאים יותר לדיכאון. ב- CDM, מתח שחייה חוזר ונשנה במשך 5 ימים רצופים מונע השפעות טראומטיות חריפות. עכברים אינם מצליחים להימלט ממצב מלחיץ חוזר ומתמשך, ונחשבים כמי שמפתחים מצב של חוסר אונים, כניעה ובסופו של דבר ייאוש. פרדיגמה זו דומה יותר לתיאוריות הפסיכולוגיות הנוכחיות להתפתחות דיכאון בבני אדם מאשר טראומה חריפה אחת, אשר מנוסה בדרך כלל בתחילתה של הפרעת דחק פוסט טראומטית. המצב דמוי דיכאון וכתוצאה מכך ב- CDM יציב עד 4 שבועות9 ולכן פותח את האפשרות לתקופות טיפול ארוכות יותר, אשר דומים יותר לתנאים קליניים, שבו תרופות נוגדות דיכאון בדרך כלל צריך 2-4 שבועות כדי להראות יתרון16.

ההערכה של המצב דמוי הדיכאון צריכה להיות רב-ממדית. מדידת זמן חוסר התנועה, כגון ב- FST הקלאסי, היא שימושית, אך אין להשתמש בה כפרמטר התוצאה היחיד. שיטות שונות, המתוארות להלן, אמורות להיות מסוגלות למפות ממדים שונים של מצב דיכאוני בהתאם לתסמינים המצויים בדרך כלל בבני אדם מדוכאים. הערכות קריאה מתאימות יכולות לכלול התנהגות בריחה (זמן חוסר תנועה9,10,17), בדיקת השעיית זנב (TST)9, אנהדוניה (מבחן העדפת סוכרוז קלאסי (SPT)18), התנהגות מכוונת מוטיבציה (מבחן העדפת סוכרוז אף-לתקוע (NPSPT)10), ציפייה / חקירה-התנהגות (תגובה לאות מעורפל19; בדיקת מבוך Y9), אלקטרופיזיולוגיה (מדידות של פלסטיות לטווח ארוך (potentiation לטווח ארוך, LTP; דיכאון לטווח ארוך, בע"מ)20), הערכות מולקולריות (דפוסי הפעלה של גנים מוקדמים מיידיים (IEGs); דפוסי לחץ נוספים21).

תיאורטית, מבחן שחייה חוזר ונשנה יכול לשמש כדי לגרום למצב מדוכא ללא כל הערכה של זמן חוסר תנועה. עם זאת, מומלץ מאוד לספק לפחות סדרה ניסיונית הוכחת רעיון עם זמני חוסר תנועה. בנוסף, CDM מייצג מודל מתאים להערכת התפתחות מצב דמוי דיכאון על ידי מדידת זמן חוסר תנועה במהלך שלב האינדוקציה. זני עכבר ספציפיים או עכברים שטופלו לפני השחייה ניתנים להערכה ביחס לחוסן או לפגיעות ללחץ ואינדוקציה של ייאוש התנהגותי.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

כל הניסויים בוצעו בהסכמה עם ההנחיות האירופיות (EU 2010/63) ובהתאם לחוק הגרמני להגנה על בעלי חיים (TierSchG), FELASA (www.felasa.eu/guidelines.php), מדריך הגוף הלאומי לרווחת בעלי חיים GV-SOLAS (www.gv-solas.de/index.html) לטיפול ושימוש בחיות מעבדה, ואושרו על ידי הוועדה לרווחת בעלי חיים של אוניברסיטת פרייבורג ועל ידי Comite d'Ethique en Matiere d'Experimentation Animale de Strasbourg (CREMEAS, CEEA35), כמו גם הרשויות המקומיות. שני המינים של עכברים מסוג C57Bl6N מסוג בר בגילאי 10-14 שבועות (70-98 ימים לאחר לידה, PND) שימשו לניסויים מסוג בר (WT). כקו עמיד בפני מתח, קו העכבר מהונדס עם ביטוי משופר של קולטני אדנוזין A1 תחת מקדם CaMKII העצבי המוח הקדמי שימש9,15. לאחר הניסויים, עכברים הוקרבו על ידי נקע צוואר הרחם.

1. הכנה

  1. השג רישיון מחקר לבעלי חיים, כולל תכנון ניסיוני יסודי.
  2. הגעה: עם ההגעה, לגדל את החיות במתקן החיות כדי לבצע את CDM. אם בעלי החיים נקנים מספק חיצוני, אפשר להם לפחות שבועיים להסתגל לסביבה החדשה.
  3. דיור: כדי לשכן את בעלי החיים, ודא כי הכלובים אינם תפוסים עם המספר המרבי של בעלי חיים כדי למנוע מתח נוסף. להבטיח שתנאי הדיור עולים בקנה אחד עם המלצות בינלאומיות של דיור עכברים (למידע נוסף, ראה 22) ולתחזק אותם כל הזמן בכל עת.
    הערה: תנאי הדיור הסטנדרטיים החשובים ביותר כוללים כלובים מאווררים בנפרד עם 25-120 שינויי אוויר לשעה, מחזור אור כהה של 12 שעות, טמפרטורה יציבה ככל האפשר (לפחות קבועה בין 20-24 מעלות צלזיוס), לחות יציבה ככל האפשר (לפחות בין 45%-65%), חומר מכרסם ומחסה נוכחים, ללא דיור פרטני.
  4. נקודת זמן: בצע את כל הניסויים בו-זמנית של היום.
    הערה: לא נעשתה הערכה ישירה כדי לאמת את השפעת שעות היום על CDM, אך רוב הבדיקות ההתנהגותיות המעריכות מצבים דמויי דיכאון מראות וריאציות בהתאם לשעת היום23,24,25, וסביר מאוד להניח כי היום משפיע גם על CDM.
  5. חומר קינון: הפחיתו את חומר הקינון למינימום. ודא שאין גלגלי ריצה וכו ', נוכחים בכלוב.
    הערה: סביבה מועשרת מונעת אינדוקציה של מצב מדוכא.
  6. הרכב קבוצתי: אפשר לבעלי החיים להישאר באותה קבוצה לאורך כל הניסוי. לקבץ את העכברים הנשיים יחד אפילו מפסולת שונה; לקבץ את העכברים הזכרים יחד עם חיות זכרים המלטה. בשל האגרסיביות הקרובה, במיוחד של זכרים, נשיכה וספרות עשויים להיות בעיה, ולכן לתת דגש מיוחד על הרכב הקבוצה. הימנע דיור יחיד כמו קיפוח הוא גורם לחץ נוסף גדול.
  7. בעלי חיים: השתמש בזני עכבר שונים, למרות שהבדלים ספציפיים נצפו 9,10. זן עכבר הנמצא בשימוש תכוף הוא C57Bl6N. תווית עכברים כדי לבצע ניתוח סטטיסטי מזווג (ראה שלב 3.2.4).
  8. מין בבעלי חיים: יש להשתמש באותה מידה בעכברים זכריים ונקביים כאחד.
  9. גיל בעלי חיים: ודא כי בעלי החיים הם לפחות 10 שבועות (70 PND) ישן. אין להשתמש בבעלי חיים צעירים יותר בשל תשישות הנגרמת על ידי שחייה.
  10. ציוד: השתמש גליל זכוכית שקופה / עם קיבולת של לפחות 2 L, קוטר של 24-26 סמ, וגובה מינימלי של 30 סמ. דרישות נוספות כוללות מדחום לבדיקת טמפרטורת המים, מגבות נייר, מנורת חימום אור אדום / מחצלת חימום או מקור דומה של חימום, טיימר, סטופר, סביבה שקטה. הקלטת וידאו של הפעלות השחייה לניתוח ותיעוד לא מקוונים. ודא שהתאריך והשעה גלויים באופן רציף בקלטת/קובץ, יחד עם מספר קוד זיהוי עבור החיה הבודדת. אחסן את הקבצים לניתוח מאוחר יותר ועיון נוסף. סרט מהצד של גליל הזכוכית, לא מלמעלה, כדי להקל על הניתוח.

2. שלב האינדוקציה

  1. לפני ההתחלה
    1. התבונן חזותית בבעלי החיים עבור חריגות, כולל סימנים של נשיכה או ספר. אל תכלול את כל הכלוב מסדרת הניסויים אם בעל חיים מראה פציעות מינימליות. ודא כי וטרינר זמין בכל עת כמו פציעות יחמירו במהלך הניסוי וימנע המשך כמו עכברים להיות אגרסיביים יותר תחת השפעת מתח.
    2. להשיג את משקל הגוף עבור כל בעל חיים לפני תחילת הניסוי. ודא כי הירידה במשקל נצפתה לעתים קרובות אינו עולה על 20% ממשקל הגוף הראשוני. אל תכלול בעלי חיים עם ירידה במשקל של מעל 20% ומיד להרדים אותם בשל הסבל הגבוה המשוער.
    3. מלאו או צילינדר במים בטמפרטורת החדר (22-23 מעלות צלזיוס) לגובה של לפחות 20 סמ מלמטה, והותירו מינימום של 10 סמ בין פני המים לגבול העליון של כלי השיט.
  2. ביצועים
    1. מעבירים בעדינות את החיות למים. במהלך שלב השחייה, לשמור על החיה תחת תצפית מתמשכת כדי למנוע טביעה. התבונן מעמדה שבה החיה לא יכולה לראות את הנסיין (למשל, התבוננות וידאו מחדר הסמוך).
    2. הגדר כרונומטר בתחילת הניסוי. הוציאו את החיות מהמים אחרי 10 דקות פשוט על ידי תפיסת הזנבות שלהם. ייבשו אותם בעדינות במגבת נייר והניחו אותם תחת מנורת חימום או על מחצלת חימום.
    3. הערך רק חיה אחת בכל פעם. ודא כי בעלי חיים לא יכולים לראות אחד את השני (למשל, להפריד את כלוב הדיור מן ההגדרה הניסיונית על ידי מחיצת חדר).
    4. בצע את סשן השחייה הכפוי במשך 10 דקות בכל יום במשך 5 ימים רצופים.
  3. גימור
    1. העבר את בעלי החיים בחזרה לכלובים הביתיים שלהם לאחר חמישה מפגשי שחייה ולאפשר להם לנוח לפחות 2 ימים. התחל התערבויות טיפול ספציפיות לאחר מכן.

3. הערכת טיפול נוגד דיכאון

  1. קורס זמן
    1. להעריך את הטיפולים האקוטיים subchronic עם CDM. בהתאם לשאלה המדעית, התאם את תקופת המנוחה בין שלב האינדוקציה לקריאה.
    2. כדי להעריך את העוצמה החריפה והמהירה של קטמין, בחר תקופת מנוחה קצרה (כמה ימים) לאחר שלב האינדוקציה של CDM. החל את הטיפול (כלומר, הזרקה תוך-פריטונית), ולאחר מכן בצע את ההערכה (מפגש שחייה נוסף או שיטת הערכה שונה) זמן קצר לאחר מכן.
    3. כדי להעריך את ההשפעות של טיפול subchronic, להגדיל את תקופת הטיפול עד 4 שבועות (אין נתונים זמינים לתקופות טיפול ארוכות יותר). לדוגמה, לתת את הטיפול אוראלי עם imipramine לבעלי החיים במהלך 4 שבועות לאחר שלב האינדוקציה ולהעריך לאחר מכן.
    4. התחל להעריך את המצב מדוכא מיד לאחר תום תקופת הטיפול, למשל, למחרת. בחר תמיד פרק זמן זהה עבור תנאי בקרה וניסוי.
  2. זמן חוסר תנועה
    1. הוכחת רעיון
      1. כדי להשתמש בזמן חוסר תנועה כשיטת קריאה, הערך כל יום של שלב האינדוקציה ויום הבדיקה כדי לספק הוכחת רעיון (ראו איור 1). לסדרות ניסיוניות נוספות, הפחיתו את ההערכות ליום הראשון, ליום החמישי וליום הבדיקה (ראו איור 1C).
      2. צלם כל ניסוי. אפשר לשני משקיפים מיומנים אשר עיוורים לתנאי הניסוי לבצע את הניתוח באופן עצמאי. ניתוח וידאו מאפשר לנסיין להתבונן בהתנהגות מחדר אחר, ולכן למזער את ההפרעה עם הבדיקה (לדוגמה, ראה את קובץ הווידאו בחומר המשלים).
    2. תנאים: התבונן וזיהה את שלושת התנאים ההתנהגותיים השונים במהלך מבחן השחייה: מאבק, שחייה וחוסר תנועה. רוב החוקרים מתמקדים בחוסר תנועה; הבחנה נוספת בין מאבק לשחייה היא לעתים רחוקות שימושית ומגדילה באופן דרמטי את המורכבות ומשך הניתוח.
      1. נאבקים: החיה מנסה באופן פעיל לברוח מהמצב המאיים. זה כרוך כפה את הצד של הגליל עם הראש מכוון לכיוון הקיר ותנועות של כל הגפיים. פני המים בדרך כלל מעט סוערים.
      2. שחייה: החיה נעה לפחות בשתי כפות הרגליים האחוריות ונוסעת מרחק ברחבי המים. הוא מחפש באופן פעיל דרך החוצה אבל לא מנסה להתגבר על קיר הזכוכית של כלי השיט. שחייה אינה כרוכה בהרמת כפות הרגליים מעל פני המים, והגוף מכוון בדרך כלל במקביל לקירות הגליל. במצב זה, בעלי חיים לעתים קרובות להסתובב או לנוע במעגלים.
      3. חוסר תנועה: החיה שומרת עדיין, בתנוחה קפואה, ואינה זזה כלל או רק מזיזה את הזנב, או את הפתחים כדי לשמור על ראשה מעל פני המים. אין מרחק נע באופן פעיל למעט צף פסיבי, ולא נצפתה תנועה מכוונת של כפות הרגליים הקדמיות.
    3. מעקב
      1. בצע את ההערכה באמצעות הקלטות וידאו לא מקוונות. השתמש בדירוגים עיוורים על ידי שני בוחנים עצמאיים ומנוסים וחשב ממוצעים בין שני הדירוגים.
      2. חזור על הדירוגים אם התוצאות של שני הדירוגים שונות מעל טווח שנקבע בעבר. התבונן ללא הרף בעכברים כאשר התנאים השונים משתנים לעתים קרובות בין מאבק, שחייה וחוסר תנועה.
      3. השתמש בשעון עצר כדי למדוד את הזמן הכולל המושקע בשלב ממוקד (בדרך כלל חוסר תנועה) במהלך 10 הדקות שהעכבר נשאר במים. שקול השהיה קצרה של כשנה לפני שינוי מדידת הזמן השוטפת (למשל, אם בעל חיים נשאר במשך 20 שניות בחוסר תנועה וזז רק פעם אחת במשך פחות משנייה וחוזר לחוסר תנועה למשך 10 שניות נוספות, זמן חוסר התנועה הכולל הוא 30 שניות).
    4. סטטיסטיקה: בשל סטיית התקן הבין-פרטנית הגבוהה יחסית (ככל הנראה נגרמת על ידי העברה של התנהגות תלוית היררכיה מהכלוב למבחן השחייה), סמן או תייג את בעלי החיים לביצוע בדיקות פרמטריות מזווגות (במקום לא מזווגות) לאחר מכן. להעריך את התפלגות הנורמליות, בהתאם לשאלה הספציפית, לבצע ניתוח של שונות (ANOVA) עם בדיקות t לאחר הוק או t-בדיקות מזווגות כדי להשוות את הקבוצות השונות. בצע את הניתוח באמצעות ערכים מוחלטים של זמן חוסר תנועה (ים) או כערכים מנורמלים.
      1. ערכים מוחלטים: תן ערכים ממוצעים של זמן חוסר התנועה מהיום הראשון ליום 5 וליום הבדיקה ±-SEM (ראו איור 1A). השווה את הערכים הממוצעים עבור יום 1 ויום 5, רצוי באמצעות t-test מזווג כדי לאמת את האינדוקציה של מצב מדוכא. אם יש הבדל משמעותי בין יום 1 ל-5, השווה את הערכים הממוצעים של יום 5 לתוצאות הממוצעות של יום הבדיקה. ודא שגודל קבוצה טיפוסי בניסוי אחד הוא בין 6 ל -10 בעלי חיים וצפו להבדלים משמעותיים בין זמני חוסר תנועה בסיסיים לאחר אינדוקציה בבעלי חיים מסוג בר. השוואה בין קבוצות שונות לבדיקת t לא מזווגת קשה אם נעשה שימוש בערכים מוחלטים עקב הבדלים בסיסיים; לכן, השתמש בערכים מנורמלים.
      2. ערכים יחסיים/מנורמלים: השווה את השפעות הטיפול השונות על-ידי נורמליזציה לתוצאה הבודדת ביום 5 ולאחר מכן הבא את הערכים כאחוז מהיום החמישי (ראו איור 1B).
    5. ניסויי בקרה
      הערה: ביצועי השחייה עשויים להיות מתואמים עם תנועה. חומרים הגורמים להיפר-תנועה עלולים לגרום לתוצאות חיוביות כוזבות (כלומר, ירידה בזמן חוסר התנועה); כמו גם סוכני הרגעה יכול באופן מלאכותי להגדיל את זמן חוסר התנועה.
      1. להעריך את השינויים בתנועה עבור חומרים לא ידועים לפני ביצוע ניתוח השחייה. השתמש במבחן שדה פתוח (OFT) בקבוצה נפרדת של בעלי חיים למשך 10 דקות לפחות.
      2. בחר את אותו זמן תצפית (10 דקות) ב- OFT כמו ב- CDM כדי לזהות השפעות היפר-קטר לא ספציפיות של המתחם שנבדק שעשוי להשפיע על קריאת CDM באמצעות מדידה של זמן חוסר תנועה עם תוקף גבוה.
      3. במקרה של השפעות משמעותיות של היפר-קטר, אין להעריך את סשן השחייה כדי להעריך את העוצמה האנטי-דיכאונית אלא להשתמש בשיטות קריאה שונות (לדוגמה, העדפת סוכרוז, בדיקת השעיית זנב וכו ').

4. הערכת התפתחות של מצב דמוי דיכאון

  1. כדי להעריך את ההתפתחות של הפרעת דיכאון, להעריך כל יום של שלב אינדוקציה כדי למדוד את חוסר התנועה-זמן.
    הערה: במקרה זה, עלייה מינורית של זמן חוסר תנועה בין כל יום מתארת עמידות, בעוד עלייה חזקה ומוקדם יותר בהשוואה לבעלי חיים לא מטופלים או פראיים מייצגת פגיעות מוגברת לייאוש שנגרם על ידי מתח. על ידי טיפול בעכברים לפני אירוע השחייה, ניתן להעריך את ההתערבות המונעת או קווי העכבר הטרנסגניים לגבי התפתחות הייאוש ההתנהגותי.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

בסשן השחייה הראשון של שלב האינדוקציה של CDM, עכברים בדרך כלל מראים זמן חוסר תנועה ממוצע בין 190 שניות ל-230 שניות, שעולה כל הזמן עם כל סשן שחייה נוסף (איור 1A). עלייה זו בולטת יותר בשלושת הימים הראשונים ומגיעה לשלב דמוי מישור במהלך 2-3 הימים האחרונים. זמן חוסר התנועה הנמדד ביום 5 נשאר יציב במשך עד 4 שבועות, מה שמצביע על ייאוש התנהגותי יציב. ניתן להעריך את העוצמה נוגדת הדיכאון של התערבות על ידי טיפול בבעלי החיים בין היום האחרון של שלב האינדוקציה ליום הבדיקה. שים לב שזמן הניקוד המוחלט במהלך מפגשי השחייה הוא סובייקטיבי למדי ותלוי בנסיין, גיל, מין וקו העכבר המשמשים. עם זאת, ההבדל היחסי בין המפגשים יציב למדי עם הבדלים בין-עירוניים קטנים בלבד.

באיור 1 מוצגים מספר טיפולים מייצגים. Imipramine, מניעת שינה, קטמין הפחית באופן משמעותי את זמן חוסר התנועה, בעוד מניעת שינה בשילוב עם שנת התאוששות לא הראו שינוי משמעותי של פנוטיפ דמוי דיכאון. תוצאות אלה תואמות את העוצמה האנטי-דיכאונית של הטיפולים היישומיים ובדומה להשפעות שנצפו בחולים אנושיים. הטיפול מעורב בליעה של imipramine 20 מ"ג/ק"ג/יום במשך 3 שבועות באמצעות מי שתייה, 3 מ"ג/ק"ג של קטמין על ידי זריקה תוך-אפריטונית אחת 24 שעות לפני הבדיקה, ומחסור בשינה במשך 6 שעות לפני הבדיקה.

בהתאם לשאלת המחקר, ניתן להציג ייצוגים שונים. ייצוג של ערכים מוחלטים יכול לתת סקירת נתונים אמיתית ומאפשר הערכה טובה של שלב האינדוקציה ושל טיפול יחיד (איור 1A,D). עם זאת, לא ניתן להשוות ישירות את ההבדלים של טיפולים שונים; ומכאן לכל קבוצת טיפול יש ערכים ממוצעים שונים של זמן חוסר תנועה ביום 5. לכן, מומלץ להשתמש בייצוג של ערכים ממוצעים מנורמלים במקרה זה (איור 1B). ניתן לבחור ייצוג מופחת עקב מגבלות מקום (איור 1C). שים לב כי חובה להציג לפחות את התוצאות של יום 1, יום 5, ויום הבדיקה.

Figure 1
איור 1: תוצאות מוצלחות הן ערכים מוחלטים ומנורמלים. (א) ניתן לראות אינדוקציה מוצלחת של מצב דמוי דיכאון ב-30 עכברים. כל נקודה מייצגת את זמן חוסר התנועה של בעל חיים יחיד ביום מסוים וסורגים מייצגים את הערכים הממוצעים של בעלי החיים שנבדקו. זמן חוסר תנועה מיוצג עבור כל יום של שלב האינדוקציה (יום 1 עד יום 5) ועבור יום הבדיקה (לאחר הקו המקווקו) עם או בלי טיפול. שים לב כי במדגם זה, ניתן לראות עלייה משמעותית בין היום 1 ליום 2. במקרים מסוימים, רמות המשמעות מושגות לראשונה בין היום הראשון ליום 3. להמשך הניסוי, עלייה משמעותית סטטיסטית בין יום 1 ליום 5 היא חובה. שים לב לאפקט התקרה הטיפוסי (הגדל בין ימים 1, 2 ו- 3, בהשוואה להפרש בין ימים 4 ל- 5). בין היום 5 לימי המבחן, בעלי חיים שוכנו במשך 4 שבועות בכלובי הבית שלהם, או ללא טיפול נוסף (CDM) או טופלו עם imipramine (Imip.); מניעת שינה (SD); מניעת שינה ושינה התאוששות (RS), ו קטמין (Ket). (ב) מסלול זמן למופת של הביצועים של בעלי חיים בודדים ניתנים עבור כל יום. (ג) ייצוג מנורמל של אותן תוצאות שכבר מוצגות באיור 1A. זמן חוסר התנועה של כל בעל חיים ויום היה מנורמל לזמן חוסר התנועה המקביל שלה ביום 5 ובא לידי ביטוי באחוזים. ניתן להציג טוב יותר ערכים לאחר הטיפול של קבוצות שונות ולהשוות אותם באמצעות גישה זו. (ד) ייצוג ערכים מנורמלים עבור יום 1, יום 5 ויום הבדיקה (CDM). לאחר מחקר הוכחת רעיון מוצלח, ניתן לצמצם את נקודות זמן ההערכה ליום הראשון, היום החמישי ויום הבחינה. נקודות זמן אלה נדרשות מכיוון שיש צורך בעלייה משמעותית בין היום הראשון ליום 5 כדי להפגין אינדוקציה מוצלחת, ויש להשוות את היום החמישי ליום הבדיקה כדי לתת הצהרה על יעילות הטיפול. (ה) השוואה של זמן חוסר התנועה של שלושה קווי עכבר שונים: Wildtype (WT) מראה אינדוקציה מוצלחת; קו עמידות למופת (RL) מראה ירידה משמעותית בהתנהגות דמוית דיכאון בשלושת הימים הראשונים וביום המבחן. ANOVA חד כיווני עם Bonferroni פוסט הוק מבחן: ∗/#p < 0.05, ∗∗/##p < 0.01, ∗∗∗/###p < 0.001, ∗∗∗∗/##p < 0.0001. (#ציין את ההבדל לערכים הממוצעים של היום הראשון, ∗צמצם את ההפרש לערכים הממוצעים של היום החמישי באיור 1A,C ולקו העכבר WT באיור 1E). הנתונים מבוטאים כאמצעי ± SEM. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

במקרה של זמן חוסר תנועה ללא שינוי במהלך כל 5 הימים (איור 2), הלחץ המיושם לא הצליח לשנות את ההתנהגות באופן רלוונטי, ולא ניתן להעריך את השפעות הטיפול; בעלי חיים צריכים להיות מוקרבים ואסור להשתמש בהם יותר.

Figure 2
איור 2: תוצאות לא מוצלחות. ייצוג של אינדוקציה לא יעילה מוצג באיור. שים לב כי אין עלייה משמעותית בזמן חוסר תנועה בין יום 1 ליום 5 מתרחשת. לכן, קריטריונים להמשך הניסוי לא הושגו, ואין הארכה נוספת היא רציונלית (במקרה זה, רק עכברים זכרים נבדקו, ולאחר חקירה רטרוספקטיבית, נמצא כי הם לא היו המלטה). לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

יש להשתמש בשיטות קריאה נוספות כדי לתאר מבט רחב יותר על הייאוש ההתנהגותי של בעלי החיים. מגוון בדיקות התנהגותיות, מדידות אלקטרופיזיולוגיות והערכות מולקולריות של שינויים הנגרמים מלחץ זמינים. תוצאות מופתיות לבדיקת השעיית זנב (TST), עם CDM, imipramine וטיפול בקטמין, בדיקת העדפת אף-פוק-סוכרוז (NPSPT), והערכה של פוטנציאציה ארוכת טווח באמצעות טכניקת מהדק התיקון ניתנות באיור 3. תוצאות אלה מעודדות שימוש בשלב האינדוקציה של CDM ככלי כללי לאינדוקציה של ייאוש התנהגותי. לקבלת פרטים נוספים על הטכניקות המשמשות (TST, NPSPT, LTP-assessment) ראה 9,10,17,20.

Figure 3
איור 3: תוצאות נוספות עם עכברי CDM. (א) ייצוג מופתי של ההשפעות של CDM במבחן מתן ההשעיה של הזנב. עכברים הושעו בזנבם, והזמן שהוקדש ללא תנועה נרשם (לפרטים מתודולוגיים ראה9). כל נקודה מייצגת את זמן חוסר התנועה של חיה אחת, וסורגים מייצגים את הערכים הממוצעים של בעלי החיים שנבדקו. ANOVA חד כיווני עם Bonferroni פוסט הוק מבחן: ∗∗∗p < 0.001. הנתונים באים לידי ביטוי כאמצעי ± SEM. (ב) תוצאות מייצגות של בדיקת העדפת סוכרוז שהוקמה לאחרונה בעכברים CDM. במשימה זו, העדפת סוכרוז נמדדה עם מאמץ הולך וגדל בהדרגה להגיע לבקבוק סוכרוז (מספר nosepokes) (לפרטים מתודולוגיים ראה10). שים לב כי העדפת סוכרוז ירדה ב- CDM וכי ההבדל בין CDM ועכברי בקרה גדל בהדרגה עם המאמץ (ערכים ממוצעים של דקירות האף בכל יום המצוין כמו Nspkk1-7) עכברים היו צריכים ליישם כדי לשתות את הפתרון המתוק. ANOVA דו כיווני עם Bonferroni פוסט הוק מבחן: ∗∗p < 0.01, ∗∗∗p < 0.001. הנתונים באים לידי ביטוי כאמצעי ± SEM. (C) שינויים תלויי CDM בפלסטיות סינפטית ארוכת טווח מוצגים כשינויים בערכים הממוצעים של EPSPs לאחר יישום פרוטוקול אינדוקציה LTP אסוציאטיבי בפרוסות המוח ההיפוקמפוס של עכברי WT. הנתונים התקבלו על ידי גירוי של סינפסה CA3-CA1 (לפרטים ראה 17,20). t-test לא מזווג, ∗∗p < 0.01, הנתונים באים לידי ביטוי כאמצעי ± SEM. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.

חומר משלים. נא לחץ כאן כדי להוריד קובץ זה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

מודל ה- CDM מייצג מודל רלוונטי ומבוסס לבדיקת העוצמה האנטי-דיכאונית של התערבויות חדשות ופותח חלון זמן ממושך לניסויים מולקולריים או אלקטרופיזיולוגיים כדי להבהיר את הפתולוגיה של דיכאון. במיוחד בשילוב עם בדיקות אחרות כדי להעריך מצב דמוי דיכאון, CDM יש תוקף פנים גבוה מושג. הוא משלב מתח תת-קרקעי וחוסר אונים נרכש עבור אינדוקציה ומייצר מצב דמוי דיכאון לאורך זמן. זה חסר רגישות ליישום יחיד של תרופות נוגדות דיכאון קלאסיות אבל מגיב ליישום subchronic ולכן מחקה את המצב בבני אדם. בחלון זמן של 4 שבועות, התערבויות נוגדות דיכאון רבות ושונות מראות יעילות, החל משיעורים שונים של תרופות נוגדות דיכאון, גירוי מוחי לא פולשני, מניעת שינה ועד תרופות נוגדות דיכאון הפועלות במהירות9,10,111. יתר על כן, מדידת זמן חוסר תנועה במהלך שלב האינדוקציה יכולה לשמש כסמן של עמידות מתח או פגיעות, במקרה של בדיקת בעלי חיים מהונדסים או עכברים שטופלו לפני שלב האינדוקציה. בסך הכל, ה- CDM חסכוני מבחינת עלות, משך זמן, סטנדרטיזציה ושחזור בין מעבדות. למרות שהביצועים נראים פשוטים למדי - "אתה זורק עכבר לתוך כלי מים ומוציא אותו אחרי 10 דקות" - יש כמה נקודות קריטיות שיש לזכור על מנת להשיג תוצאות סבירות ויציבות. רוב הבעיות נובעות מדיוק לא מספיק במהלך הכנה או ניתוח.

בעיה נפוצה היא שעכברים, במיוחד גברים, אינם מראים עלייה משמעותית בזמן חוסר התנועה בשלב האינדוקציה. במקרים אלה, עכברים אולי כבר הדגיש לפני האינדוקציה מתחילה; לכן, מתח נוסף במהלך פרוטוקול השחייה אינו גורם לעלייה רלוונטית של ייאוש. שים לב כי זמן חוסר תנועה נראה יש אפקט תקרה מאז הגידול בין יום 1 ו 2 הוא גדול יותר מאשר בין יום 2 ו 3, בהתאמה. לאחר יום 3, בדרך כלל, לא ניתן לצפות לעלייה משמעותית נוספת. סיבות נפוצות ללחץ בסיסי מוגזם עשויות לכלול הובלה אחרונה של בעלי החיים או מגורים משותפים של בעלי חיים זכרים מתבגרים / בוגרים, מצב שלעולם אינו מתרחש בטבע. לכן, הנסיין צריך להיות זהיר ותמיד להבטיח כי בעלי חיים הם המלטה, כי היה להם מספיק זמן כדי להתאקלם לסביבה החדשה וכי אין סימנים של נשיכה או ספר לפני תחילת הניסוי. יתר על כן, בעלי החיים חייבים להישקל בכל יום ויש לשלוט בירידה במשקל כדי לא יעלה על 20% ממשקל הגוף הראשוני. ירידה גדולה יותר במשקל נחשבת קריטית, בשל העובדה כי שחייה חוזרת מתישה ובעלי חיים שאינם מסוגלים לשמור על משקל גופם סובלים יותר מדי מתשישות זו. נקודה קריטית כאן היא כי בעלי חיים הסובלים יותר מדי מתשישות הם כנראה לא מסוגלים לשחות או להיאבק במשך 10 דקות במהלך הבדיקה. כאשר זמני חוסר תנועה של בעלי חיים אלה מנותחים, הם נוטים להראות תוצאה שלילית כוזבת עקב תשישות פיזית.

נסיבות בעייתיות נוספות המתרחשות לעיתים, במיוחד כאשר נדרשות תקופות טיפול ארוכות יותר, הן ירידה ספונטנית בזמן חוסר התנועה בהערכת הבחינה. לאחר 4 שבועות, זמן חוסר התנועה בדרך כלל פוחת בהשוואה להערכות שבוצעו 2 ימים לאחר תום תקופת האינדוקציה (N.B. זה מתאים, אם כי עם סרגל זמן שונה, למצב בבני אדם שבו פרקים מדוכאים הם בדרך כלל מגבילים את עצמם). כדי למזער את המלכודת הזו, יש להבטיח כי לא יחול חומר קינון מיותר על כלוב הבית של החיה, אשר ניתן לראות כהתערבות נוגדת דיכאון יעילה (סביבה מועשרת). יתר על כן, עלייה בגודל הקבוצה עשויה לעזור להפחית את השונות. במידת הצורך, ניתן להוסיף מפגש שחייה נוסף כשינוי של הפרוטוקול הסטנדרטי המתואר לעיל. לדוגמה, ניתן לבצע עלייה מחמישה לשבעה מפגשי שחייה ב -7 ימים רצופים וצריכה לגרום למצב מדוכא יציב יותר של בעלי החיים. לא מומלץ להגדיל עוד יותר את משך השחייה האישית כדי למנוע תשישות מוגזמת.

אין הסכמה בתוך הקהילה המדעית על מסגרת הזמן ההגיונית ביותר שיש לנתח. בעוד כמה קבוצות לשקול את כל 10 דקות חשוב9,10, אחרים טוענים כי ההתנהגות בתוך הדקות הראשונות מייצגים מצב מתח חריף ולנתח רק את 4 הדקות האחרונות או 6 דקות18. ההנחה האחרונה נגזרת בעיקר מן המנהג הנפוץ בתהליך ההערכה של FST הקלאסי. ראיות ניסיוניות העוסקות בשאלת מסגרת הזמן הרציונלית ביותר שניתחו ב- CDM חסרות. פרסומים בכירים שונים השתמשו בניתוח של כל 10 הדקות ב- CDM9,10.

למרות מספר גדל והולך של תוכנות זמינות מסחרית לניתוח וידאו אוטומטי, אף הגדרה לא הפגינה דיוק מספיק כדי להחליף צופה מיומן. רוב התוכנות מסתמכות על מעקב אחר תנועה של עכברים במים ודורשת מיקום מצלמה מלמעלה. הערכות על ידי בני אדם מיומנים יש את היתרון כי לא רק תנועה אלא גם הניח כוונה של תנועות מורכבות יותר ניתן להעריך, כולל את עוצמת תנועות כפות הרגליים. לדוגמה, עכברים נעים לעתים קרובות על ידי סיבוב סביב גופם או על ידי תנועות זנב עדינות כדי לשמור על ראשם מעל המים, אשר תוכנה בדרך כלל עוקבת כמו שחייה. דוגמה נוספת היא התנועה המופנית לכיוון קיר הזכוכית של כלי השיט, כולל אף תכופים שנדחפו ממרחק קצר. למרות הכוונה הברורה לברוח על ידי תנועות אנכיות, התוכנה לעתים קרובות עוקבת אחר חוסר תנועה עקב תנועה קטנה. עם זאת, הערכות מדויקות ואמינות נותרות קשות וגוזלות זמן רב. מומלץ להכשיר שיעור על ידי נסיין מנוסה ולהכין הערכות משותפות של קטעי וידאו לדוגמה על ידי שני שיעורים עצמאיים כדי לדון בהגדרות נפוצות ועמימות. יתר על כן, יש להשוות את התוצאות הראשונות של מעבדה עם ה- CDM לתוצאות שפורסמו בעבר מקבוצות אחרות.

חוקרים המשתמשים ב- CDM עשויים לעתים קרובות לחוות את הרעיון כי חוסר תנועה מוגברת היא תגובה מלומדת אינטליגנטית למדי לחיסכון באנרגיה של עכברים למצב מלחיץ בלתי נמנע אך זמני. לדעתנו, זה מפריז בגמישות הקוגניטיבית של עכברים; עם זאת, הוא מדגיש את הצורך בהערכות נוספות של מצב מדוכא ללא תלות בזמן חוסר תנועה. עוד ניתן לטעון כי מודלים אחרים של בעלי חיים מבוססים היטב של דיכאון כמו מבחן הלחץ המתון הכרוני, לייצר תוצאות דומות; וכי מצב מדוכא או גורמי לחץ חזקים לעכב, לא להגביר את הלמידה הן בבני אדם והן בבעלי חיים17,20,20,26,27,28,29,30.

הנטל של בעלי החיים מדורג בדרך כלל כגבוה עד קיצוני ביישומי מחקר בבעלי חיים. יש לתכנן ביסודיות סדרות ניסיוניות כדי למזער את מספר בעלי החיים, ויש להתייחס לבעלי חיים בזהירות ובכבוד לפני ואחרי מפגשי השחייה. עם זאת, במדינות מסוימות, ייתכן שלא ניתן יהיה להשיג רישיון מחקר לבעלי חיים עבור ה- CDM. ה- CDM מאפשר הערכה של יעילות אנטי-דיכאונית של מגוון רחב של התערבויות ואינדוקציה של מצב מדוכא יציב יחסית. ההטרוגניות והמורכבות של הפרעת דיכאון גדולה בבני אדם לא ניתן לשכפל בכל מודל בעלי חיים. רוב המודלים החייתיים של דיכאון מבוססים על ניסיון דמוי סטרס-induced/טראומה בעכברים, וזה לא בהכרח המקרה בבני אדם, שבו מניעת ילדות, היסטוריית למידה מורכבת ו / או גורמי סיכון חברתיים-תרבותיים נראה גם חשוב. מודלים עכבר של דיכאון ולכן צריך להיות מוכר כמו מה שהם: מודל פשוט עבור הפרעה מורכבת מאוד. עם זאת, אם מבוצע כראוי ואם נעשה שימוש בשיטות קריאה מרובות, ה- CDM הוא כלי מתאים בחיפוש אחר תובנות ויעדים חדשניים במחקר דיכאון.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

כל המחברים מצהירים שאין ניגודי אינטרסים.

Acknowledgments

עבודה זו מומנה על ידי כספים פנימיים של מרפאת האוניברסיטה פרייבורג, המחלקה לפסיכיאטריה ופסיכותרפיה ותוכנית ברטה-אוטנשטיין למדענים קלינאיים (ל- SV). TS ממומן על ידי המענקים של קרן המחקר הרפואי (FRM) (AJE201912009450) ומכון שטרסבורג ללימודים מתקדמים (USIAS) (2020-035), כמו גם המרכז הלאומי דה לה Recherche Scientifique (CNRS), צרפת.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Beaker, 2000 mL Kimble Kimax 14000-2000 any vessel >2000ml and diameter of 24-26 cm possible
Digital Thermometer Hanna Instruments 846-4708 any digital thermometer possible
Digitalwaage 200 g Dipse DIPSE tp200 any digital scale possible
Lenovo ThinkCentre V50a-24IMB AiO 11FJ00DVGE - 60,5 cm Lenovo A 908278 any standard Personalcomputer possible
Logitech PTZ Pro Logitech 1000005246 any high resolution camera possible
Stopwatch ROTILABO Carl Roth L423.1 any stopwatch possible
Timer ROTILABO Carl Roth A802.1 any timer possible

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. James, S. L., et al. Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 354 diseases and injuries for 195 countries and territories, 1990-2017: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017. The Lancet. 392 (10159), 1789-1858 (2018).
  2. Aleman, A., Denys, D. Mental health: A road map for suicide research and prevention. Nature. 509 (7501), 421-423 (2014).
  3. Greenberg, P. E., Fournier, A. -A., Sisitsky, T., Pike, C. T., Kessler, R. C. The economic burden of adults with major depressive disorder in the United States (2005 and 2010). The Journal of Clinical Psychiatry. 76 (2), 155-162 (2015).
  4. Nestler, E. J., Hyman, S. E. Animal Models of Neuropsychiatric Disorders. Nature Neuroscience. 13 (10), 1161-1169 (2010).
  5. Porsolt, R. D., Le Pichon, M., Jalfre, M. Depression: a new animal model sensitive to antidepressant treatments. Nature. 266 (5604), 730-732 (1977).
  6. Can, A., et al. The mouse forced swim test. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (59), e3638 (2012).
  7. Chatterjee, M., Jaiswal, M., Palit, G. Comparative evaluation of forced swim test and tail suspension test as models of negative symptom of schizophrenia in rodents. ISRN Psychiatry. 2012, 595141 (2012).
  8. Reardon, S. Depression researchers rethink popular mouse swim tests. Nature. 571 (7766), 456-457 (2019).
  9. Serchov, T., et al. Increased signaling via adenosine A1 receptors, sleep deprivation, imipramine, and ketamine inhibit depressive-like behavior via induction of Homer1a. Neuron. 87 (3), 549-562 (2015).
  10. Holz, A., et al. Enhanced mGlu5 signaling in excitatory neurons promotes rapid antidepressant effects via AMPA receptor activation. Neuron. 104 (2), 338-352 (2019).
  11. Sun, P., et al. Increase in cortical pyramidal cell excitability accompanies depression-like behavior in mice: A transcranial magnetic stimulation study. Journal of Neuroscience. 31 (45), 16464-16472 (2011).
  12. Hellwig, S., et al. Altered microglia morphology and higher resilience to stress-induced depression-like behavior in CX3CR1-deficient mice. Brain, Behavior, and Immunity. 55, 126-137 (2016).
  13. Serchov, T., Heumann, R., van Calker, D., Biber, K. Signaling pathways regulating Homer1a expression: implications for antidepressant therapy. Biological Chemistry. 397 (3), 207-214 (2016).
  14. van Calker, D., Serchov, T., Normann, C., Biber, K. Recent insights into antidepressant therapy: Distinct pathways and potential common mechanisms in the treatment of depressive syndromes. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 88, 63-72 (2018).
  15. Serchov, T., et al. Enhanced adenosine A1 receptor and Homer1a expression in hippocampus modulates the resilience to stress-induced depression-like behavior. Neuropharmacology. 162, 107834 (2020).
  16. Quitkin, F. M., Rabkin, J. G., Ross, D., Stewart, J. W. Identification of true drug response to antidepressants. Use of pattern analysis. Archives of General Psychiatry. 41 (8), 782-786 (1984).
  17. Normann, C., et al. Antidepressants rescue stress-induced disruption of synaptic plasticity via serotonin transporter-independent inhibition of L-type calcium channels. Biological Psychiatry. 84 (1), 55-64 (2018).
  18. Zanos, P., et al. NMDAR inhibition-independent antidepressant actions of ketamine metabolites. Nature. 533 (7604), 481-486 (2016).
  19. Alboni, S., et al. Fluoxetine effects on molecular, cellular, and behavioral endophenotypes of depression are driven by the living environment. Molecular Psychiatry. 22 (4), 552-561 (2017).
  20. Niehusmann, P., et al. Coincidence detection and stress modulation of spike time-dependent long-term depression in the hippocampus. The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 30 (18), 6225-6235 (2010).
  21. Schreiber, S. S., Tocco, G., Shors, T. J., Thompson, R. F. Activation of immediate early genes after acute stress. Neuroreport. 2 (1), 17-20 (1991).
  22. National centre for the replacement refinement and reduction of animals in research. , Available from: https://www.nc3rs.org.uk (2021).
  23. Loss, C. M., et al. Influence of environmental enrichment vs. time-of-day on behavioral repertoire of male albino Swiss mice. Neurobiology of Learning and Memory. 125, 63-72 (2015).
  24. Walker, W. H., Walton, J. C., DeVries, A. C., Nelson, R. J. Circadian rhythm disruption and mental health. Translational Psychiatry. 10 (1), 1-13 (2020).
  25. Merrow, M., Spoelstra, K., Roenneberg, T. The circadian cycle: daily rhythms from behaviour to genes. EMBO Reports. 6 (10), 930-935 (2005).
  26. Holderbach, R., Clark, K., Moreau, J. -L., Bischofberger, J., Normann, C. Enhanced long-term synaptic depression in an animal model of depression. Biological Psychiatry. 62 (1), 92-100 (2007).
  27. Nissen, C., et al. Learning as a model for neural plasticity in major depression. Biological Psychiatry. 68 (6), 544-552 (2010).
  28. Kuhn, M., et al. State-dependent partial occlusion of cortical LTP-like plasticity in major depression. Neuropsychopharmacology. 41 (6), 1521-1529 (2016).
  29. Schwabe, L. Stress and the engagement of multiple memory systems: integration of animal and human studies. Hippocampus. 23 (11), 1035-1043 (2013).
  30. Ballan, R., Gabay, Y. Does acute stress impact declarative and procedural learning. Frontiers in Psychology. 11, 342 (2020).

Tags

התנהגות בעיה 175
מודלים בעלי חיים של דיכאון - מודל ייאוש כרוני (CDM)
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Vestring, S., Serchov, T., Normann,… More

Vestring, S., Serchov, T., Normann, C. Animal Models of Depression - Chronic Despair Model (CDM). J. Vis. Exp. (175), e62579, doi:10.3791/62579 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter