Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

कृन्तकों में हेटरोटोपिक हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के लिए एक सरलीकृत मॉडल

Published: September 21, 2021 doi: 10.3791/62948
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, *1, *1
1Department of Surgery, Medical University of South Carolina
* These authors contributed equally

Summary

यह प्रोटोकॉल हृदय वाल्व की सक्रियता के अध्ययन के लिए अनुमति देने के लिए गुर्दे कैप्सूल के तहत महाधमनी वाल्व पत्रक के प्रत्यारोपण के लिए एक सरल और कुशल विधि का वर्णन करता है।

Abstract

हृदय वाल्व प्रतिस्थापन के लिए तत्काल नैदानिक आवश्यकता है जो बच्चों में बढ़ सकती है। हृदय वाल्व प्रत्यारोपण को एक नए प्रकार के प्रत्यारोपण के रूप में प्रस्तावित किया जाता है जिसमें टिकाऊ हृदय वाल्व देने की क्षमता होती है जो एंटीकोआग्यूलेशन की आवश्यकता के बिना दैहिक विकास में सक्षम होती है। हालांकि, हृदय वाल्व प्रत्यारोपण की इम्यूनोबायोलॉजी अस्पष्टीकृत बनी हुई है, इस नए प्रकार के प्रत्यारोपण का अध्ययन करने के लिए पशु मॉडल की आवश्यकता पर प्रकाश डाला गया है। पेट की महाधमनी में हेटरोटोपिक महाधमनी वाल्व प्रत्यारोपण के लिए पिछले चूहे मॉडल का वर्णन किया गया है, हालांकि वे तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण और महंगे हैं। इस चुनौती को संबोधित करने के लिए, हृदय वाल्व प्रत्यारोपण इम्यूनोबायोलॉजी का अध्ययन करने के लिए एक व्यावहारिक और अधिक सरल विधि के रूप में कृन्तकों में एक गुर्दे के सबकैप्सुलर प्रत्यारोपण मॉडल को विकसित किया गया था। इस मॉडल में, एक एकल महाधमनी वाल्व पत्रक काटा जाता है और गुर्दे के सबकैप्सुलर स्पेस में डाला जाता है। गुर्दे आसानी से सुलभ है, और प्रत्यारोपित ऊतक सुरक्षित रूप से एक सबकैप्सुलर स्पेस में निहित है जो अच्छी तरह से संवहनी है और विभिन्न प्रकार के ऊतक आकारों को समायोजित कर सकता है। इसके अलावा, क्योंकि एक चूहा तीन दाता महाधमनी पत्रक प्रदान कर सकता है और एक एकल गुर्दा प्रत्यारोपित ऊतक के लिए कई साइटें प्रदान कर सकता है, किसी दिए गए अध्ययन के लिए कम चूहों की आवश्यकता होती है। यहां, प्रत्यारोपण तकनीक का वर्णन किया गया है, जो हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के प्रत्यारोपण इम्यूनोलॉजी का अध्ययन करने में एक महत्वपूर्ण कदम प्रदान करता है।

Introduction

जन्मजात हृदय दोष मनुष्यों में सबसे आम जन्मजात विकलांगता है, जो हर साल 1,000 जीवित पैदा हुए बच्चों में से 7 को प्रभावितकरती है। वयस्क रोगियों के विपरीत जिसमें विभिन्न यांत्रिक और बायोप्रोस्थेटिक वाल्व नियमित रूप से प्रत्यारोपित किए जाते हैं, बाल चिकित्सा रोगियों के पास वर्तमान में वाल्व प्रतिस्थापन के लिए कोई अच्छा विकल्प नहीं है। इन पारंपरिक प्रत्यारोपणों में प्राप्तकर्ता बच्चों में बढ़ने की क्षमता नहीं है। नतीजतन, बच्चों के बढ़ने के साथ-साथ क्रमिक रूप से बड़े संस्करणों के लिए हृदय वाल्व प्रत्यारोपण का आदान-प्रदान करने के लिए रुग्ण पुन: संचालन की आवश्यकता होती है, प्रभावित बच्चों को अक्सर अपने जीवनकाल में पांच या अधिक ओपन-हार्ट सर्जरी की आवश्यकता होती है 2,3. अध्ययनों से पता चला है कि हस्तक्षेप या मृत्यु से स्वतंत्रता बड़े बच्चों की तुलना में शिशुओं के लिए काफी खराब है, कृत्रिम हृदय वाल्व वाले 60% शिशुओं को अपने प्रारंभिक ऑपरेशन के 3 वर्षों के भीतर फिर से ऑपरेशन या मृत्यु का सामना करना पड़ताहै 4. इसलिए, हृदय वाल्व देने की तत्काल आवश्यकता है जो बाल चिकित्सा रोगियों में कार्य को विकसित और बनाए रख सकता है।

दशकों से, बढ़ते हृदय वाल्व प्रतिस्थापन देने के प्रयास ऊतक इंजीनियरिंग और स्टेम कोशिकाओं पर केंद्रित हैं। हालांकि, इन वाल्वों को क्लिनिक में अनुवाद करने के प्रयास अब तक 5,6,7,8 असफल रहे हैं। इसे संबोधित करने के लिए, एक हृदय वाल्व प्रत्यारोपण को बढ़ते हृदय वाल्व प्रतिस्थापन देने के लिए एक अधिक रचनात्मक ऑपरेशन के रूप में प्रस्तावित किया जाता है जिसमें आत्म-मरम्मत और थ्रोम्बोजेनेसिस से बचने की क्षमता होती है। पूरे दिल को प्रत्यारोपित करने के बजाय, केवल हृदय वाल्व प्रत्यारोपित किया जाता है और फिर प्राप्तकर्ता बच्चे के साथ बढ़ेगा, पारंपरिक हृदय प्रत्यारोपण या रॉस फुफ्फुसीय ऑटोग्राफ 9,10,11 के समान। पोस्ट-ऑपरेटिव रूप से, प्राप्तकर्ता बच्चों को इम्यूनोसप्रेशन प्राप्त होगा जब तक कि प्रत्यारोपित वाल्व को वयस्क आकार के यांत्रिक कृत्रिम के लिए आदान-प्रदान नहीं किया जा सकता है जब वाल्व के विकास की आवश्यकता नहीं होती है। हालांकि, हृदय वाल्व प्रत्यारोपण ग्राफ्ट का प्रत्यारोपण जीव विज्ञान अस्पष्टीकृत रहता है। इसलिए, इस नए प्रकार के प्रत्यारोपण का अध्ययन करने के लिए पशु मॉडल की आवश्यकता होती है।

पेट की महाधमनी 12,13,14,15,16,17,18 में महाधमनी वाल्व के हेटरोटोपिक प्रत्यारोपण के लिए पहले कई चूहे मॉडल का वर्णन किया गया है। हालांकि, ये मॉडल निषेधात्मक रूप से मुश्किल हैं, अक्सर प्रशिक्षित सर्जनों को सफलतापूर्वक संचालित करने की आवश्यकता होती है। इसके अतिरिक्त, वे महंगे और समय लेने वाले19 हैं। हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के इम्यूनोबायोलॉजी का अध्ययन करने के लिए एक सरल पशु मॉडल बनाने के लिए एक उपन्यास चूहा मॉडल विकसित किया गया था। एकल महाधमनी वाल्व पत्रक को उत्सर्जित किया जाता है और गुर्दे के सबकैप्सुलर स्पेस में डाला जाता है। गुर्दे विशेष रूप से प्रत्यारोपण अस्वीकृति का अध्ययन करने के लिए अनुकूल है क्योंकि यह परिसंचारी प्रतिरक्षा कोशिकाओं20,21 तक पहुंच के साथ अत्यधिक संवहनी है। जबकि कई अन्य लोगों ने अग्न्याशय, यकृत, गुर्दे और कॉर्निया 22,23,24,25,26,27 जैसे अन्य एलोग्राफ्ट प्रत्यारोपण के प्रत्यारोपण जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए एक गुर्दे के सबकैप्सुलर मॉडल का उपयोग किया है, यह इस स्थिति में हृदय ऊतक के प्रत्यारोपण का पहला विवरण है। यहां, प्रत्यारोपण तकनीक का वर्णन किया गया है, जो हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के प्रत्यारोपण इम्यूनोलॉजी का अध्ययन करने में एक महत्वपूर्ण कदम प्रदान करता है।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ गाइड के बाद पशु अनुसंधान समिति द्वारा अध्ययन को मंजूरी दी गई थी।

1. पशु मॉडल (चूहों) पर जानकारी

  1. सभी शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं के लिए 20x आवर्धन के साथ एक ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप ( सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करें।
  2. प्रयोग के लिए आवश्यक प्रत्यारोपण के लिए सिंजेनिक (जैसे लुईस-लुईस) या एलोजेनिक (जैसे लुईस-ब्राउन नॉर्वे) उपभेदों का उपयोग करें।
  3. प्रयोगात्मक प्रश्न के लिए उपयुक्त हैं कि 5-7 सप्ताह और 100-200 ग्राम के शरीर के वजन के बीच उम्र के चूहों का प्रयोग करें।

2. फर को हटाने, त्वचा की तैयारी, और संज्ञाहरण

  1. बाँझ परिस्थितियों में सभी ऑपरेशन करें।
    नोट: कदम एक समर्पित सर्जिकल अंतरिक्ष में और बाँझ परिस्थितियों में किया जाता है।
  2. चूहों को एक संवेदनाहारी प्रेरण कक्ष में रखें और ऑक्सीजन में 5% आइसोफ्लूरेन के साथ संज्ञाहरण को प्रेरित करें। पूरी प्रक्रिया में ऑक्सीजन में 3.5% आइसोफ्लूरेन के साथ संज्ञाहरण बनाए रखें।
  3. दाता ऑपरेशन के लिए, फर क्लिपर्स का उपयोग करके चूहे के फर को नाभि से उरोस्थि पायदान तक हटा दें। प्राप्तकर्ता ऑपरेशन के लिए, पसलियों से श्रोणि तक पीछे की अक्षीय रेखा पर सर्जिकल क्षेत्र पर बालों को क्लिप करें। इसके बाद, एक सर्जिकल कीटाणुनाशक के साथ त्वचा तैयार करें।
  4. प्रक्रिया शुरू करने से पहले संज्ञाहरण का एक सर्जिकल विमान प्राप्त करें। दृढ़ता संदंश के साथ चूहे के पैर की उंगलियों को संपीड़ित करके संज्ञाहरण की पर्याप्त गहराई की पुष्टि करें। यदि चूहा दर्द के लिए वापस ले ता है, तो आवश्यकतानुसार संवेदनाहारी को टाइट्रेट करें।
  5. श्वसन दर और प्रक्रिया के दौरान नैदानिक रूप से संज्ञाहरण की गहराई की निगरानी करें; मिनट की सांस लेने की दर को बनाए रखने के लिए आइसोफ्लूरेन के स्तर को आवश्यकतानुसार समायोजित किया जाता है।

3. दाता ऑपरेशन

  1. चरण 2 में बताए अनुसार चूहे को तैयार और संवेदनाहारी करें। विदारक कैंची का उपयोग करके एक्सिफॉइड से स्टर्नल पायदान तक त्वचा को चीरा लगाएं। हृदय तक इष्टतम पहुंच प्राप्त होने तक उरोस्थि के पार्श्व में प्रत्येक तरफ पसलियों को काटकर एक स्टर्नेक्टॉमी करें।
  2. बाएं आलिंद में 100 यू / 100 ग्राम इंजेक्शन के साथ चूहे को हेपरिनाइज़ करें।
  3. बहिष्कार के माध्यम से दाता का बलिदान करें।
  4. महान जहाजों के दृश्य में सुधार करने के लिए थाइमस को उत्पादित करें। फिर, एनोमिनेट धमनी के स्तर तक आरोही महाधमनी के साथ दिल एन ब्लॉक को हटा दें।

4. महाधमनी वाल्व पत्रक की तैयारी

  1. कार्डियेक्टॉमी के तुरंत बाद एक बाँझ पेट्री डिश में दाता दिल रखें। एक बर्फ-ठंडे कोल्ड स्टोरेज बफर में दाता दिल को विच्छेदित करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
  2. संदंश और वन्नस वसंत कैंची का उपयोग करके, दाता दिल को विच्छेदित करें जब तक कि केवल महाधमनी जड़ महाधमनी वाल्व के समीपस्थ 1 मिमी वेंट्रिकुलर कफ के साथ न रह जाए।
  3. सभी तीन पत्रकों की कल्पना करने के लिए बाएं और गैर-कोरोनरी साइनस के बीच वलसाल्वा के साइनस को खोलने के लिए अनुदैर्ध्य कटौती करके महाधमनी वाल्व खोलें।
    नोट: कट वलसाल्वा के साइनस की पूरी लंबाई होनी चाहिए। वास्तविक आयाम चूहे के आकार पर निर्भर करते हैं।
  4. प्रत्येक महाधमनी वाल्व पत्रक को व्यक्तिगत रूप से उत्पादित करें। विशेष रूप से, पत्रक के किनारे को समझने के लिए कुंद संदंश का उपयोग करें और वन्नस वसंत कैंची का उपयोग करें ताकि एक कमिश्नर से एन्युलस तक काटकर पत्रक को उत्पादित किया जा सके, और फिर अगले कमिश्नर की ओर।
    नोट: वाल्वुलर एंडोथेलियल कोशिकाओं के विघटन को कम करने के लिए केवल पत्रक के किनारे को समझने के लिए विशेष देखभाल करें।
  5. बर्फ-कोल्ड स्टोरेज बफर समाधान में पत्रक छांटना के बाद के नमूनों को स्टोर करें जब तक कि वे प्राप्तकर्ता चूहे में प्रत्यारोपित होने के लिए तैयार न हों। कोल्ड स्टोरेज के 4 घंटे के भीतर सभी पत्रक प्रत्यारोपित करें।

5. प्राप्तकर्ता ऑपरेशन

  1. चरण 2 में बताए अनुसार चूहे को तैयार और संवेदनाहारी करें। सर्जरी करने के लिए 36-38 डिग्री सेल्सियस पर बनाए गए हीटिंग पैड का उपयोग करें।
  2. सर्जरी से पहले सभी प्राप्तकर्ता चूहों को ब्यूप्रेनोर्फिन (0.03 मिलीग्राम / किग्रा चमड़े के नीचे) का प्रशासन करें और दर्द को कम करने के लिए आवश्यकतानुसार हर 6-12 घंटे पोस्ट-ऑपरेटिव रूप से।
  3. बाएं गुर्दे तक पहुंचने के लिए चूहे को एक सही पार्श्व लेटा हुआ स्थिति में रखें।
    नोट: बाएं गुर्दे को दाहिने गुर्दे के सापेक्ष इसकी अधिक दुम स्थिति के कारण पसंद किया जाता है।
  4. कैंची का उपयोग करके 1-इंच से अधिक फ्लैंक पर त्वचा को तिरछा करें।
    नोट: चीरा प्रक्रिया के दौरान पेट की गुहा में वापस लेने से गुर्दे को रोकने के लिए पर्याप्त तनाव प्रदान करने के लिए गुर्दे के आकार से छोटा रहना चाहिए।
  5. इसी तरह, अंतर्निहित पेट की दीवार को चीरा लगाएं।
  6. गुर्दे को बाहरी बनाएं
    1. अंगूठे और तर्जनी का उपयोग करके, पेट और त्वचा चीरा के माध्यम से गुर्दे के दुम ध्रुव को उठाने के लिए घुमावदार संदंश का उपयोग करते समय पृष्ठीय और उदर रूप से प्रकाश दबाव लागू करें। गुर्दे के कपाल छोर को इसी तरह बाहरी बनाएं।
    2. वैकल्पिक रूप से, गुर्दे को पेरिरेनल वसा को पकड़कर और हल्के तनाव के साथ ऊपर की ओर खींचकर बाहरी किया जा सकता है।
      नोट: ध्यान रखें कि गुर्दे या गुर्दे की वाहिकाओं को सीधे न समझें।
    3. एक बार जब गुर्दा बाहरी हो जाता है, तो इसे गुर्दे पर गर्म खारा के साथ नम रखें।
  7. एक सबकैप्सुलर पॉकेट बनाएं।
    1. हल्के ढंग से कुंद संदंश के एक सेट का उपयोग कर गुर्दे कैप्सूल के लिए दबाव लागू इतना है कि गुर्दे कैप्सूल स्पष्ट रूप से अंतर्निहित पैरेन्काइमा से अलग किया जा सकता है। इसके साथ ही कुंद संदंश के एक और सेट का उपयोग करते हुए, सावधानी से कैप्सूल को समझें और कैप्सूल में एक छेद बनाने के लिए धीरे-धीरे ऊपर की ओर खींचें।
      नोट: कैप्सूल की नाजुक प्रकृति के कारण, इस चीरा को स्थापित करने के लिए न्यूनतम बल की आवश्यकता होती है।
    2. महाधमनी वाल्व पत्रक को समायोजित करने के लिए ~ 2 मिमी अंतरिक्ष बनाया गया है जब तक चीरा का विस्तार करने के लिए कुंद संदंश का उपयोग जारी रखें।
    3. संदंश के एक सेट के साथ चीरा के किनारे को उठाने और गुर्दे कैप्सूल के तहत एक कुंद जांच को आगे बढ़ाते हुए वाल्व पत्रक से थोड़ा बड़ा है कि एक उथले सबकैप्सुलर जेब विकसित करें।
  8. महाधमनी वाल्व को सबकैप्सुलर जेब में प्रत्यारोपित करें।
    1. कोल्ड स्टोरेज से महाधमनी पत्रक को पुनः प्राप्त करें और इसे सर्जिकल क्षेत्र में रखें।
    2. किनारे रेशेदार कैप्सूल उठाते समय, कुंद संदंश के साथ उपकैप्सुलर जेब में महाधमनी पत्रक अग्रिम।
      नोट: सुनिश्चित करें कि ऊतक चीरा से काफी दूर है ताकि यह कैप्सूल के तहत दृढ़ता से सुरक्षित हो। अंतर्निहित पैरेन्काइमा को नुकसान या रेशेदार कैप्सूल के आगे चीरने से बचने के लिए देखभाल की जानी चाहिए।
    3. गुर्दे कैप्सूल में चीरा खुला छोड़ा जा सकता है।
  9. चीरा किनारों पर लागू काउंटर कर्षण का उपयोग करके गुर्दे को धीरे-धीरे अपनी शारीरिक स्थिति में वापस धकेलें।
  10. एक चल रहे बाँझ सर्जिकल सिवनी के साथ पेट चीरा बंद करें। स्टेपल के साथ त्वचा को बंद करें।
  11. पोस्ट-ऑपरेटिव देखभाल
    1. ऑपरेशन के बाद, भोजन और पानी तक पहुंच के साथ एक हीटिंग पैड पर एक साफ पिंजरे में चूहे को रखें।
    2. नियमित घाव भरने और दर्द या संकट के संकेतों का आकलन करने के लिए दैनिक जानवर की निगरानी करें। 7-10 दिनों के बाद स्टेपल निकालें।

6. विश्लेषण के लिए ऊतक का संग्रह

  1. प्रत्यारोपण के बाद चयनित समापन बिंदुओं पर, जानवर को एक्सेंगुइनेशन द्वारा इच्छामृत्यु दें। विशेष रूप से, एक औसत लैपरोटॉमी करें और ऑक्सीजन में 5% आइसोफ्लूरेन के तहत पेट की महाधमनी को स्थानांतरित करें।
  2. गुर्दे को जुटाना और कैंची के साथ गुर्दे की धमनी, नस और मूत्रवाहिनी को काटकर इसे उत्पादित करें।
    नोट: ध्यान रखें कि प्रत्यारोपित पत्रक वाले क्षेत्र को न समझें।
  3. गुर्दे को रात भर फॉर्मलिन में रखें, इसे पैराफिन में एम्बेड करें, और वांछित धुंधला होने के लिए इसे खंडित करें। गुर्दे कैप्सूल के साथ नमूना को पूर्वकाल का सामना करना पड़ रहा है और गुर्दे पैरेन्काइमा पीछे की ओर सामना करना पड़ रहा है।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

प्रयोगात्मक डिजाइन का एक चित्रमय चित्रण चूहे मॉडल (चित्रा 1) के लिए प्रदान की जाती है। इसके अतिरिक्त, दाता के दिल से विच्छेदित एक महाधमनी जड़ और आरोपण के लिए तैयार एक व्यक्तिगत महाधमनी वाल्व पत्रक भी चित्रा 2 में दिखाया गया है। अगला, आरोपण के लिए गुर्दे कैप्सूल के तहत महाधमनी वाल्व पत्रक की स्थिति की एक प्रतिनिधि छवि चित्रा 3 ए में और प्राप्तकर्ता चूहे (आंकड़े 3 बी-डी) के भीतर 3, 7 और 28 दिनों के बाद दिखाया गया है, प्रत्यारोपित ऊतक का पता लगाने और पुनर्प्राप्त करने में आसानी का प्रदर्शन करता है।

महाधमनी वाल्व पत्रक सिंजेनिक जानवरों में हेटरोटोपिक प्रत्यारोपण के बाद अपने मूल वास्तुकला को बनाए रखते हैं, जो एलोजेनिक प्रत्यारोपण में प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की तुलना करने के लिए एक आधार रेखा के रूप में इस मॉडल की उपयोगिता का प्रदर्शन करते हैं। विशेष रूप से, हेमटॉक्सिलिन और ईओसिन (एच एंड ई) धुंधला होने के साथ ऊतक विज्ञान से पता चला है कि 7 दिनों के बाद सिंजेनिक प्रत्यारोपण में वाल्व पत्रक संरचनात्मक रूप से बरकरार थे, जिसमें एडिमेटस सूजन (चित्रा 4 ए) का कोई संकेत नहीं था। वाल्व पत्रक की संरचनात्मक अखंडता अल्फा चिकनी मांसपेशी एक्टिन (एएसएमए) और सीडी 31 (चित्रा 4 बी) के लिए इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री द्वारा पुष्टि की गई थी।

Figure 1
चित्रा 1: चूहों में गुर्दे कैप्सूल के तहत महाधमनी वाल्व के हेटरोटोपिक प्रत्यारोपण का प्रायोगिक डिजाइन। दिल दाता चूहे (ए) से एकत्र किया जाता है। महाधमनी वाल्व पत्रक विच्छेदित और प्राप्तकर्ता चूहे (सी) में गुर्दे कैप्सूल के तहत आरोपण प्रक्रिया तक ठंडे भंडारण (बी) में रखा जाता है। पत्रकों को तब निर्धारित समय बिंदुओं पर प्रत्यारोपित किया जाता है और सूक्ष्म रूप से विश्लेषण किया जाता है (डी)। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 2
चित्रा 2: आरोपण के लिए महाधमनी वाल्व पत्रक की तैयारी। दाता हृदय (ए) से विच्छेदित महाधमनी जड़ का उदाहरण और आरोपण (बी) के लिए महाधमनी वाल्व पत्रक का आगे विच्छेदन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 3
चित्रा 3: गुर्दे कैप्सूल के तहत महाधमनी वाल्व पत्रक का दृश्य। महाधमनी वाल्व पत्रक प्रत्यारोपण (ए), 3 (बी), 7 (सी), और 28 दिनों (डी) के बाद सिंजेनिक जानवरों में और एलोजेनिक जानवरों में 3 (ई), 7 (एफ), और 28 दिनों (जी) के बाद गुर्दे कैप्सूल के तहत कल्पना की जाती है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 4
चित्रा 4: महाधमनी वाल्व पत्रक सिंजेनिक जानवरों में 7 दिनों के लिए गुर्दे कैप्सूल के तहत प्रत्यारोपण के बाद संरचनात्मक रूप से बरकरार रहते हैं। शीर्ष पंक्ति नियंत्रण हृदय वाल्व के लिए डीएपीआई, एएसएमए और सीडी 31 के लिए एच एंड ई धुंधला और इम्यूनोस्टेनिंग दिखाती है जो खरीदे गए थे लेकिन प्रत्यारोपित नहीं किए गए थे। निचली पंक्ति 7 दिनों के बाद प्रत्यारोपित एक सिंजेनिक वाल्व पत्रक में डीएपीआई, एएसएमए और सीडी 31 के लिए एच एंड ई धुंधला और इम्यूनोस्टेनिंग दिखाती है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

महत्व और संभावित अनुप्रयोग
जबकि यांत्रिक और बायोप्रोस्थेटिक हृदय वाल्व नियमित रूप से वयस्क रोगियों में वाल्व प्रतिस्थापन की आवश्यकता होती है, इन वाल्वों में बढ़ने की क्षमता की कमी होती है और इसलिए, बाल चिकित्सा रोगियों के लिए उप-इष्टतम होते हैं। हृदय वाल्व प्रत्यारोपण जन्मजात हृदय रोग वाले नवजात शिशुओं और शिशुओं के लिए बढ़ते हृदय वाल्व प्रतिस्थापन देने के लिए डिज़ाइन किया गया एक प्रयोगात्मक ऑपरेशन है। हालांकि, पारंपरिक हृदय प्रत्यारोपण के प्रत्यारोपण इम्यूनोबायोलॉजी के विपरीत, इस नए प्रकार के प्रत्यारोपण के प्रत्यारोपण इम्यूनोबायोलॉजी का खराब पता लगाया गया है। यहां, महाधमनी वाल्व पत्रक के सबकैप्सुलर गुर्दे प्रत्यारोपण के लिए एक अद्वितीय चूहा मॉडल का वर्णन किया गया है, जो हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के प्रत्यारोपण इम्यूनोबायोलॉजी का अध्ययन करने में एक महत्वपूर्ण कदम प्रदान करता है।

गुर्दे की उपकैप्सुलर अंतरिक्ष हृदय वाल्व के प्रत्यारोपण इम्यूनोबायोलॉजी का अध्ययन करने के लिए एक इष्टतम वातावरण प्रदान करता है। प्रत्यारोपित ऊतक सुरक्षित रूप से परिसंचारी प्रतिरक्षा कोशिकाओं तक पहुंच के साथ एक अच्छी तरह से संवहनी स्थान में निहित है20. इसके अतिरिक्त, अग्न्याशय, यकृत, गुर्दे और अन्य सेल प्रकार 22,23,24,25,26,27 जैसे कई ऊतकों में एलोग्राफ्ट अस्वीकृति का परीक्षण करने के लिए सबकैप्सुलर मॉडल का सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है, यह दर्शाता है कि यह मॉडल महाधमनी वाल्व पत्रक की इम्यूनोजेनेसिटी का अध्ययन करने में उचित है।

इस मॉडल में महाधमनी वाल्व के प्रत्यारोपण इम्यूनोलॉजी का अध्ययन करने के लिए कई प्रोटियेशनल अनुप्रयोग हैं। सबसे पहले, मॉडल का उपयोग ग्राफ्ट अस्वीकृति को रोकने के लिए हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के लिए आवश्यक प्रणालीगत प्रतिरक्षा दमन के स्तर को निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है, जैसे कि टैक्रोलिमस, माइकोफेनोलेट और स्टेरॉयड। इसके अलावा, कई अध्ययनों ने संकेत दिया है कि वाल्व ऊतक अन्य हृदय ऊतकों से प्रतिरक्षात्मक रूप से अलग हो सकता है, क्योंकि वाल्व पारंपरिक हृदय प्रत्यारोपण 28,29,30 की फुलमिनेंट अस्वीकृति के दौरान अपेक्षाकृत बख्शा जाता है। यह मॉडल इस अवधारणा की खोज की अनुमति देता है क्योंकि सबकैप्सुलर स्पेस इन ऊतकों की इम्यूनोजेनेसिटी की तुलना करने के लिए वाल्व पत्रक और मायोकार्डियम जैसे विभिन्न ऊतक प्रकारों को समायोजित कर सकता है।

यह मॉडल फायदेमंद है क्योंकि यह तकनीकी रूप से सीधा, त्वरित है, और जटिलताओं के कम जोखिम के साथ उच्च जीवित रहने की दर है। क्योंकि प्रत्येक दाता तीन महाधमनी वाल्व पत्रक प्रदान कर सकता है, एक चूहा तीन अलग-अलग प्राप्तकर्ताओं के लिए दाता के रूप में काम कर सकता है। औसतन, दाता ऑपरेशन की लंबाई 27.2 मिनट (एन = 12) थी, और प्राप्तकर्ता ऑपरेशन की अवधि 29.7 मिनट (एन = 36) थी। श्वसन अवसाद के कारण एक इंट्राऑपरेटिव मृत्यु के साथ प्राप्तकर्ता ऑपरेशन की जीवित रहने की दर 97.2% (एन = 35/36) थी। सबकैप्सुलर जेब बनाते समय गुर्दे के पैरेन्काइमा के आघात के कारण न्यूनतम रक्तस्राव प्राप्तकर्ता संचालन के 11.1% में नोट किया गया था। हालांकि, कपास टिप आवेदक से संपीड़न के साथ सभी मामलों में रक्तस्राव को आसानी से नियंत्रित किया गया था। एक नमूना सबकैप्सुलर स्पेस से हटा दिया गया था और 7 दिनों के बाद भी स्पष्टीकरण पर पुनर्प्राप्त नहीं किया गया था।

इससे पहले, वाल्व पत्रक को सबकैप्सुलर स्पेस से हटाकर बाहर निकाला जाता था और बिना किसी संलग्न महाधमनी ऊतक के एम्बेडेड, खंडित और दाग दिया जाता था। हालांकि, यह विधि उप-इष्टतम है क्योंकि पत्रक स्वयं बेहद छोटे, पतले और पारदर्शी होते हैं, जिसके परिणामस्वरूप प्रसंस्करण में कई नमूनों का नुकसान होता है। इसके बजाय, गुर्दे एन ब्लॉक को हटाने और ऊतक को एम्बेड करने और अनुभाग करने की सिफारिश की जाती है, जबकि अभी भी गुर्दे के कैप्सूल के नीचे सुरक्षित है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि कोई नमूना खो न जाए। इसके अतिरिक्त, यह दृष्टिकोण पत्रक के आघात और हेरफेर को कम करता है।

महत्वपूर्ण कदम
प्रक्रिया के महत्वपूर्ण कदम संज्ञाहरण के एक सर्जिकल विमान को स्थापित करना, गुर्दे पर पेट की दीवार को चीरना, गुर्दे को उखाड़ फेंकना, सबकैप्सुलर फ्लैप को बढ़ाना, हेटरोटोपिक प्रत्यारोपण ऊतक का सम्मिलन, हेमोस्टेसिस प्राप्त करना, गुर्दे को शारीरिक स्थिति में वापस करना और त्वचा को बंद करना है।

संशोधन और समस्या निवारण
जबकि यह गुर्दे के कैप्सूल के तहत हृदय ऊतक के प्रत्यारोपण का पहला विवरण है, कई अन्य लोगों ने गुर्दे के सबकैप्सुलर स्पेस20,22,23,24,25,26,27 में अन्य ऊतक प्रकारों के प्रत्यारोपण का वर्णन किया है। इस प्रोटोकॉल में, तकनीक को अनुकूलित करने और जटिलताओं को कम करने के लिए पिछले सबकैप्सुलर मॉडल में मामूली समायोजन किए गए थे। विशेष रूप से, जबकि अन्य ने गुर्दे के कैप्सूल20,26 में प्रारंभिक चीरा बनाने के लिए वन्नास वसंत कैंची का उपयोग करने की सिफारिश की है, इस विधि से अंतर्निहित पैरेन्काइमा को आघात होने की अधिक संभावना है और इसके परिणामस्वरूप सबकैप्सुलर हेमेटोमा गठन होता है। बहुत अधिक रक्तस्राव के परिणामस्वरूप कैप्सूल का विघटन होगा और प्रत्यारोपित26 की सुरक्षा से समझौता होगा। इसलिए, कैप्सूल को खोलने के लिए कुंद संदंश का उपयोग किया जाना चाहिए। इसके अतिरिक्त, जबकि कुछ प्रोटोकॉल कैप्सुलर चीरा26,31 पर होमोस्टैटिक संपत्ति के साथ वाणिज्यिक उत्पादों के प्लेसमेंट की वकालत करते हैं, यह कदम तब तक अनावश्यक है जब तक कि ऊतक सबकैप्सुलर जेब में काफी उन्नत हो।

बड़े चूहों में, गुर्दे को पेरिरेनल वसा में कवर किया जा सकता है, और घुमावदार संदंश के साथ उठाने के माध्यम से गुर्दे को बाहरी बनाना संभव नहीं हो सकता है। इन मामलों में, संदंश के साथ पेरिरेनल वसा को धीरे-धीरे टग करके और क्षति या रक्तस्राव के बिना गुर्दे को पेट की गुहा से बाहर निकालकर गुर्दे को बाहरी बनाना सबसे अच्छा है।

मौजूदा हेटरोटोपिक प्रत्यारोपण मॉडल के साथ तुलना
जबकि हेटरोटोपिक महाधमनी वाल्व प्रत्यारोपण के लिए कई अन्य पशु मॉडल को पहले 12,13,14,15,16,17,18 वर्णित किया गया है, वर्तमान प्रोटोकॉल एक सीधा और अधिक व्यावहारिक विकल्प प्रदान करता है जो पिछले मॉडल को कई तरीकों से बेहतर बनाता है। सबसे पहले, प्रक्रिया की तकनीकी रूप से सरल प्रकृति के कारण, सफलतापूर्वक संचालित करने के लिए बहुत कम प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है। यह पेट की महाधमनी में पहले वर्णित हेटरोटोपिक महाधमनी वाल्व प्रत्यारोपण के विपरीत है। इसलिए, यह मॉडल चूहों की रुग्णता, दर्द और मृत्यु दर को कम करते हुए महाधमनी वाल्व प्रत्यारोपण का अध्ययन करने के लिए एक अधिक व्यावहारिक और लागत प्रभावी विकल्प प्रदान करता है। इसके अतिरिक्त, क्योंकि प्राप्तकर्ता ऑपरेशन के लिए केवल एक महाधमनी वाल्व पत्रक की आवश्यकता होती है और प्रत्येक दाता चूहा तीन पत्रक प्रदान करता है, किसी भी प्रयोग के लिए कम दाता चूहों की आवश्यकता होती है। इसके अलावा, कॉन्ट्रालेटरल किडनी या एक अलग सबकैप्सुलर जेब में ऊतक प्रत्यारोपण आंतरिक नियंत्रण या एक चूहे के भीतर अलग-अलग ऊतकों के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं की तुलना की अनुमति दे सकता है। इस मामले में, सबसे अच्छा तरीका मिडलाइन लैप्रोटॉमी चीरा के माध्यम से है।

पेट की महाधमनी में हेटरोटोपिक महाधमनी वाल्व प्रत्यारोपण का वर्णन करने वाले पशु मॉडल के अलावा, अन्य अध्ययनों ने महाधमनी वाल्व32 की इम्यूनोजेनेसिटी का अध्ययन करने के लिए एक चमड़े के नीचे के मॉडल का उपयोग किया है। हालांकि यह दृष्टिकोण निस्संदेह पेट की महाधमनी में प्रत्यारोपण की तुलना में अधिक सरल है, मौजूदा सबूत बताते हैं कि चमड़े के नीचे का आरोपण एंटीजन प्रस्तुति33,34 का एक कम प्रभावी तरीका है। प्रत्यारोपित नमूना भी खोजने और विश्लेषण करने के लिए चुनौतीपूर्ण है। इसलिए, गुर्दे के सबकैप्सुलर स्पेस को आरोपण की एक साइट के रूप में प्रस्तावित किया गया है जो महाधमनी वाल्व प्रत्यारोपण जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए सरलीकृत अभी तक इष्टतम है।

संक्षेप में, नया प्रस्तावित मॉडल हृदय वाल्व प्रत्यारोपण का अध्ययन करने और पहले वर्णित मॉडल की खुराक के लिए वैज्ञानिकों के आयुध के अतिरिक्त के रूप में कार्य करता है।

सीमाओं
यद्यपि गुर्दे के कैप्सूल के तहत महाधमनी वाल्व पत्रक का प्रत्यारोपण विवो में एलोइम्युनिटी का अध्ययन करने के लिए एक कुशल तरीका है, इस मॉडल की कुछ सीमाएं मौजूद हैं। जबकि सबकैप्सुलर स्पेस अच्छी तरह से संवहनी है, यह उप-कोरोनरी स्थिति के समान हेमोडायनामिक वातावरण प्रदान नहीं करता है। यह प्रत्यारोपित ऊतक के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को प्रभावित कर सकता है। कुछ ने परिकल्पना की है कि वाल्व ऊतक में देखे गए विशिष्ट प्रतिरक्षा गुण उप-कोरोनरी स्थिति में महाधमनी वाल्व पर उच्च दबाव वाले रक्त प्रवाह के परिणामस्वरूप हो सकते हैं, जो कीमोटैक्टिक प्रतिक्रिया28,35 को शून्य कर सकते हैं। इसके अलावा, यह मॉडल वाल्व फ़ंक्शन पर एलोरेक्टिविटी के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए अपर्याप्त है क्योंकि पत्रक गुर्दे कैप्सूल के तहत अपना शारीरिक कार्य नहीं कर रहे हैं। हालांकि, हेटरोटोपिक पेट महाधमनी प्रत्यारोपण मॉडल के लिए समान सीमाएं मौजूद हैं क्योंकि इन मॉडलों की सफलता ग्राफ्ट घनास्त्रता15,36 से बचने के लिए वाल्व पत्रक को अक्षम करने पर निर्भर करती है।

प्रोटोकॉल की सीमाओं में ऊतक को गुर्दे के सबकैप्सुलर स्पेस और अन-रिकवरी योग्य (36 जानवरों में से 1) से विस्थापित होने की संभावना शामिल है। एक और सीमा सर्जरी के दौरान जानवर की मृत्यु है (36 जानवरों में से 1); हालाँकि, मृत्यु ब्यूप्रेनोर्फिन की अधिकता के कारण हुई थी, और एनाल्जेसिया की खुराक के लिए अन्य तरीकों को नियोजित किया जा सकता है।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

लेखकों ने घोषणा की कि अनुसंधान किसी भी वाणिज्यिक या वित्तीय संबंधों की अनुपस्थिति में आयोजित किया गया था जिसे हितों के संभावित संघर्ष के रूप में माना जा सकता है।

Acknowledgments

चित्रा 1 biorender.com के साथ बनाया गया था। इस काम को टीकेआर के लिए एएटीएस फाउंडेशन सर्जिकल इन्वेस्टिगेटर प्रोग्राम द्वारा भाग में समर्थित किया गया था, टीकेआर के लिए दक्षिण कैरोलिना के मेडिकल यूनिवर्सिटी में बाल रोग विभाग द्वारा आयोजित बच्चों की उत्कृष्टता निधि, टीकेआर को एमर्सन रोज हार्ट फाउंडेशन अनुदान, सीनेटर पॉल कैंपबेल द्वारा टीकेआर, एनआईएच-एनएचएलबीआई इंस्टीट्यूशनल पोस्टडॉक्टरल ट्रेनिंग ग्रांट्स (टी 32 एचएल -007260) से जेएचके और बीजी को परोपकार और मेडिकल यूनिवर्सिटी ऑफ साउथ कैरोलिना कॉलेज ऑफ मेडिसिन प्री-क्लर्कशिप फ्लेक्स रिसर्च फंड टू एमएएच।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
0.9% Sodium Chlordie, USP Baxter NDC 0338-0048-04
4-0 Polyglactin 910 Ethicon J415H
7.5% Povidone-Iodine CareFusion 29904-004
70% ETOH Fisher Scientific BP82031GAL
Anesthesia induction chamber Harvard Apparatus 75-2030 Air-tight inducton chamber for rats
Anesthesia machine Harvard Apparatus 75-0238 Mobile Anesthesia System with Passive Scavenging
Anesthesia Mask Harvard Apparatus 59-8255 Rat anesthesia mask
Brown Norway Rats (BN/Crl) Charles River Strain Code 091 Male, 5-7 weeks, 100-200 g
Buprenorphine Hydrochloride, 0.3 mg/mL PAR Pharmaceutical NDC 42023-179-05 0.03 mg/kg, administered subcutaneously
Electric hair clippers WAHL 79434
Electric Heating Pad Harvard Apparatus 72-0492 Maintained at 36-38 °C
Heparin Sagent Pharmaceuticals NDC 25021-400-10 100U/100g injection into the left atrium
Insulin Syringe, 1 mL Fisher Scientific 14-841-33
Iris forceps curved World Precision Instruments 15917
Iris forceps straight World Precision Instruments 15916
Isoflurane, USP Piramal Critical Care NDC 66794-017-25 Induced at 5% isoflurance in oxygen and maintained with 3.5% isoflurane in oxygen
Lewis Rats (LEW/ Crl) Charles River Strain Code 004 Male, 5-7 weeks, 100-200 g
Micro forceps World Precision Instruments 500233 Dumont #5
Micro scissors World Precision Instruments 501930 Spring-loaded Vannas Scissors
Needle Driver World Precision Instruments 500226 Ryder Needle Driver
Operating microscope AmScope SM-3BZ-80S 3.5x - 90x Stereo Microscope
Petri Dish Fisher Scientific FB0875714
Petrolatum ophthalmic ointment Dechra NDC 17033-211-38
Skin staples Ethicon PXR35 Proximate 35
Sterile cotton swabs Puritan 25-806 1WC
Sterile gauze sponges Fisher Scientific 22-037-902
Surgical Scissors World Precision Instruments 1962C Metzenbaum Scissors
University of Wisconsin Buffer (Servator B) S.A.L.F S.p.A. 6484A1 Stored at 4 °C

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Van Der Linde, D., et al. Birth prevalence of congenital heart disease worldwide: A systematic review and meta-analysis. Journal of the American College of Cardiology. 58 (21), 2241-2247 (2011).
  2. Jacobs, J. P., et al. Reoperations for pediatric and congenital heart disease: An analysis of the Society of Thoracic Surgeons (STS) congenital heart surgery database. Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. 17 (1), 2-8 (2014).
  3. Syedain, Z. H., et al. Pediatric tri-tube valved conduits made from fibroblast-produced extracellular matrix evaluated over 52 weeks in growing lambs. Science Translational Medicine. 13 (585), 1-16 (2021).
  4. Khan, M. S., Samayoa, A. X., Chen, D. W., Petit, C. J., Fraser, C. D. Contemporary experience with surgical treatment of aortic valve disease in children. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 146 (3), 512-521 (2013).
  5. Boyd, R., Parisi, F., Kalfa, D. State of the art: Tissue engineering in congenital heart surgery. Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery. 31 (4), 807-817 (2019).
  6. Feins, E. N., Emani, S. M. Expandable valves, annuloplasty rings, shunts, and bands for growing children. Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. 23, 17-23 (2020).
  7. Lintas, V., et al. TCT-795 Human cell derived off-the-shelf tissue engineered heart valves for next generation transcatheter aortic valve replacement: a proof-of-concept study in adult sheep. Journal of the American College of Cardiology. 70 (18), 271 (2017).
  8. Blum, K. M., Drews, J. D., Breuer, C. K. Tissue-engineered heart valves: A call for mechanistic studies. Tissue Engineering Part B: Reviews. 24 (3), 240-253 (2018).
  9. Bernstein, D., et al. Cardiac growth after pediatric heart transplantation. Circulation. 85 (4), 1433-1439 (1992).
  10. Delmo Walter, E. M., et al. Adaptive growth and remodeling of transplanted hearts in children. Europeon Journal of Cardiothoracic Surgery. 40 (6), 1374-1383 (2011).
  11. Simon, P., et al. Growth of the pulmonary autograft after the Ross operation in childhood. Europeon Journal of Cardiothoracic Surgery. 19 (2), 118-121 (2001).
  12. Oei, F. B. S., et al. A size-matching heterotopic aortic valve implantation model in the rat. Journal of Surgical Research. 87 (2), 239-244 (1999).
  13. Oei, F. B. S., et al. Heart valve dysfunction resulting from cellular rejection in a novel heterotopic transplantation rat model. Transplant International. 13, SUPPL. 1 (2000).
  14. El Khatib, H., Lupinetti, F. M. Antigenicity of fresh and cryopreserved rat valve allografts. Transplantation. 49 (4), 765-767 (1990).
  15. Yankah, A. C., Wottge, H. U. Allograft conduit wall calcification in a model of chronic arterial graft rejection. Journal of Cardiac Surgery. 12 (2), 86-92 (1997).
  16. Moustapha, A., et al. Aortic valve grafts in the rat: Evidence for rejection. Journal of Thoracic and Cardiovascualr Surgery. 114 (6), 891-902 (1997).
  17. Légaré, J. F., et al. Prevention of allograft heart valve failure in a rat model. Journal of Thoracic and Cardiovascualr Surgery. 122 (2), 310-317 (2001).
  18. Legare, J. F., Lee, T. D. G., Creaser, K., Ross, D. B., Green, M. T lymphocytes mediate leaflet destruction and allograft aortic valve failure in rats. The Annals of Thoracic Surgery. 70 (4), 1238-1245 (2000).
  19. Niimi, M. The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: Experience of 3000 operations by one surgeon. Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).
  20. Burgin, M., et al. Kidney Subcapsular Allograft Transplants as a Model to Test Virus-Derived Chemokine-Modulating Proteins as Therapeutics. Methods in molecular biology. 2225, Clifton, N.J. 257-273 (2021).
  21. Foglia, R. P., DiPreta, J., Donahoe, P. K., Statter, M. B. Fetal allograft survival in immunocompetent recipients is age dependent and organ specific. Annals of Surgery. 204 (4), 402-410 (1986).
  22. Cunha, G. R., Baskin, L. Use of sub-renal capsule transplantation in developmental biology. Differentiation. 91 (4-5), 4-9 (2016).
  23. Hori, J., Joyce, N., Streilein, J. W. Epithelium-deficient corneal allografts display immune privilege beneath the kidney capsule. Investigative Opthalmology & Visual Science. 41 (2), 443-452 (2000).
  24. Mandel, T., et al. transplantation of organ cultured fetal pig pancreas in non-obese diabetic (NOD) mice and primates (Macaca fascicularis). Xenotransplantation. 2 (3), 128-132 (1995).
  25. Ricordi, C., Flye, M. W., Lacy, P. E. Renal subcapsular transplantation of clusters of hepatocytes in conjunction with pancreatic islets. Transplantation. 45 (6), 1148-1150 (1988).
  26. Shultz, L. D., et al. Subcapsular transplantation of tissue in the kidney. Cold Spring Harbor Protocols. 2014 (7), 737-740 (2014).
  27. Vanden Berg, C. W., et al. Renal subcapsular transplantation of PSC-derived kidney organoids induces neo-vasculogenesis and significant glomerular and tubular maturation in vivo. Stem Cell Reports. 10 (3), 751-765 (2018).
  28. Mitchell, R. N., Jonas, R. A., Schoen, F. J. Pathology of explanted cryopreserved allograft heart valves: Comparison with aortic valves from orthotopic heart transplants. Journal of Thoracic and Cardiovasular Surgery. 115 (1), 118-127 (1998).
  29. Valante, M., et al. The aortic valve after heart transplantation. Annals of Thoracic Surgery. 60, SUPPL. 2 (1995).
  30. O'Brien, M. F., Stafford, E. G., Gardner, M. A. H., Pohlner, P. G., McGiffin, D. C. A comparison of aortic valve replacement with viable cryopreserved and fresh allograft valves, with a note on chromosomal studies. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 94 (6), 812-823 (1987).
  31. Ng, T. F., Osawa, H., Hori, J., Young, M. J., Streilein, J. W. Allogeneic neonatal neuronal retina grafts display partial immune privilege in the subcapsular space of the kidney. The Journal of Immunology. 169 (10), 5601-5606 (2002).
  32. Heslop, B. F., Wilson, S. E., Hardy, B. E. Antigenicity of aortic valve allografts. Annals of Surgery. 177 (3), 301-306 (1973).
  33. Steinmuller, D., Weiner, L. J. Evocation and persistence of transplantation immunity in rats. Transplantation. 1 (1), 97-106 (1963).
  34. Billingham, R. E., Brent, L., Brown, J. B., Medawar, P. B. Time of onset and duration of transplantation immunity. Plastic and Reconstructive Surgery. 24 (1), 410-413 (1959).
  35. Tector, A. J., Boyd, W. C., Korns, M. E. Aortic valve allograft rejection. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 62 (4), 592-601 (1971).
  36. Sugimura, Y., Schmidt, A. K., Lichtenberg, A., Akhyari, P., Assmann, A. A rat model for the in vivo assessment of biological and tissue-engineered valvular and vascular grafts. Tissue Engineering Methods (Part C). 23 (12), 982-994 (2017).

Tags

चिकित्सा अंक 175
कृन्तकों में हेटरोटोपिक हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के लिए एक सरलीकृत मॉडल
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hill, M. A., Kwon, J. H., Gerry, B., … More

Hill, M. A., Kwon, J. H., Gerry, B., Kavarana, M., Nadig, S. N., Rajab, T. K. A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents. J. Vis. Exp. (175), e62948, doi:10.3791/62948 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter