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Behavior

एक घ्राण खुदाई कार्य के माध्यम से माउस निर्णय पूर्वाग्रह का आकलन

Published: March 4, 2022 doi: 10.3791/63426
Automatic Translation
*1, *2,3, 4, 1
1Department of Integrative Biology, University of Guelph, 2Institute of Cell Biology and Neurosciences, National Scientific and Technical Research Council-University of Buenos Aires, 3Laboratory of Experimental Animals, Faculty of Veterinary Sciences, National University of La Plata, 4Department of Animal Biosciences, University of Guelph
* These authors contributed equally

Summary

यह लेख एक उपन्यास माउस निर्णय पूर्वाग्रह प्रोटोकॉल का विस्तृत विवरण प्रदान करता है। भावात्मक अवस्था के प्रति इस घ्राण खुदाई कार्य की संवेदनशीलता के साक्ष्य भी प्रदर्शित किए जाते हैं और विभिन्न अनुसंधान क्षेत्रों में इसकी उपयोगिता पर चर्चा की जाती है।

Abstract

निर्णय पूर्वाग्रह (जेबी) सकारात्मक और नकारात्मक भावात्मक / भावनात्मक राज्यों में व्यक्तियों को अस्पष्ट जानकारी की व्याख्या करने के तरीके में अंतर है। यह घटना लंबे समय से मनुष्यों में देखी गई है, सकारात्मक राज्यों में व्यक्ति 'आशावादी रूप से' अस्पष्टता का जवाब देते हैं और नकारात्मक राज्यों में इसके बजाय 'निराशावाद' दिखाते हैं। पशु प्रभाव का आकलन करने का लक्ष्य रखने वाले शोधकर्ताओं ने इन अंतर प्रतिक्रियाओं का लाभ उठाया है, भावात्मक स्थिति के संकेतक के रूप में निर्णय पूर्वाग्रह का आकलन करने के लिए कार्यों को विकसित किया है। ये कार्य विभिन्न प्रजातियों और अनुसंधान के क्षेत्रों में तेजी से लोकप्रिय हो रहे हैं। हालांकि, प्रयोगशाला चूहों के लिए, अनुसंधान में सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले कशेरुक और एक प्रजाति मॉडल भावात्मक विकारों पर बहुत अधिक निर्भर थी, केवल एक जेबी कार्य को भावात्मक स्थिति में परिवर्तन के प्रति संवेदनशील के रूप में सफलतापूर्वक मान्य किया गया है। यहां, हम इस उपन्यास म्यूरिन जेबी कार्य का विस्तृत विवरण प्रदान करते हैं, और माउस प्रभाव के प्रति इसकी संवेदनशीलता का प्रमाण देते हैं। यद्यपि शोधन अभी भी आवश्यक हैं, माउस जेबी का मूल्यांकन माउस कल्याण के बारे में व्यावहारिक दोनों प्रश्नों के उत्तर देने के लिए दरवाजा खोलता है, और अनुवादसंबंधी अनुसंधान में भावात्मक स्थिति के प्रभाव के बारे में मौलिक प्रश्न।

Introduction

भावात्मक रूप से संशोधित निर्णय पूर्वाग्रह (अब से जेबी) को मापना जानवरों की भावनात्मक स्थिति का अध्ययन करने के लिए एक उपयोगी उपकरण साबित हुआ है। यह अभिनव दृष्टिकोण मानव मनोविज्ञान से उधार लेता है क्योंकि सकारात्मक या नकारात्मक भावात्मक राज्यों (भावनाओं और दीर्घकालिक मूड) का अनुभव करने वाले मनुष्य मज़बूती से जानकारी 1,2,3 को संसाधित करने के तरीके में अंतर प्रदर्शित करते हैं। उदाहरण के लिए, चिंता या अवसाद का अनुभव करने वाले मनुष्य तटस्थ चेहरे के भावों को नकारात्मक, या तटस्थ वाक्यों को 4,5 की धमकी के रूप में व्याख्या कर सकते हैं। यह संभावना है कि इन पूर्वाग्रहों का अनुकूली मूल्य है और इसलिए प्रजातियों 6,7 में संरक्षित हैं। पशु प्रभाव का आकलन करने का लक्ष्य रखने वाले शोधकर्ताओं ने चतुराई से इस घटना का लाभ उठाया है, तटस्थ या अस्पष्ट संकेतों के जवाब में इनाम की बढ़ती उम्मीद के रूप में आशावाद का संचालन किया है, और निराशावाद सजा या इनाम अनुपस्थिति 8,9 की बढ़ती उम्मीद के रूप में। इस प्रकार, एक प्रयोगात्मक सेटिंग में, अस्पष्ट उत्तेजनाओं के लिए आशावादी और निराशावादी प्रतिक्रियाओं को क्रमशः10,11 सकारात्मक और नकारात्मक प्रभाव के संकेतक के रूप में व्याख्या की जा सकती है।

पशु प्रभाव के अन्य संकेतकों की तुलना में, जेबी कार्यों में विशेष रूप से मूल्यवान उपकरण होने की क्षमता है क्योंकि वे भावात्मक राज्यों10,11 की वैलेंस और तीव्रता दोनों का पता लगाने में सक्षम हैं। सकारात्मक राज्यों का पता लगाने के लिए जेबी कार्यों की क्षमता (जैसे, रायगुला एट अल .12) विशेष रूप से उपयोगी है क्योंकि पशु प्रभाव के अधिकांश संकेतक नकारात्मक राज्यों का पता लगाने तक सीमित हैं13. जेबी कार्यों के दौरान, जानवरों को आमतौर पर एक अस्पष्ट क्यू (जैसे, मध्यवर्ती स्वर) के साथ प्रस्तुत होने से पहले इनाम (जैसे, उच्च आवृत्ति टोन) और सजा की भविष्यवाणी करने वाले एक नकारात्मक भेदभावपूर्ण क्यू (जैसे, कम आवृत्ति टोन) का जवाब देने के लिए प्रशिक्षित किया जाता है। यदि अस्पष्ट संकेतों के जवाब में एक जानवर 'आशावादी रूप से' सकारात्मक क्यू के लिए प्रशिक्षित प्रतिक्रिया करता है (जैसे कि इनाम की उम्मीद है), तो यह एक सकारात्मक निर्णय पूर्वाग्रह को इंगित करता है। वैकल्पिक रूप से, यदि जानवर सजा से बचने के लिए नकारात्मक प्रशिक्षित प्रतिक्रिया प्रदर्शित करते हैं, तो यह 'निराशावाद' या नकारात्मक निर्णय पूर्वाग्रह का संकेत है।

हार्डिंग और सहकर्मियों द्वारा जानवरों के लिए पहले सफल जेबी कार्य के विकास के बादसे 8, विभिन्न अनुसंधान क्षेत्रों में प्रजातियों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए कई जेबी कार्य विकसित किए गएहैं 7. लेकिन उनकी बढ़ती लोकप्रियता के बावजूद, पशु जेबी कार्य अक्सर श्रम-गहन होते हैं। इसके अलावा, शायद इसलिए कि वे उन मानव कार्यों से पद्धतिगत रूप से अलग हैं जो उन्हें प्रेरित करते हैं, वे कभी-कभी शून्य या प्रतिकूल परिणाम14 उत्पन्न करते हैं और आमतौर पर केवल छोटे उपचार प्रभाव आकार15 उत्पन्न करते हैं। नतीजतन, जेबी कार्यों को विकसित करने और कार्यान्वित करने के लिए चुनौतीपूर्ण हो सकता है। वास्तव में, प्रयोगशाला चूहों के लिए, अनुसंधान16,17 में सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले कशेरुक और एक प्रजाति ने भावात्मक विकारों18 को मॉडल करने के लिए भारी भरोसा किया, केवल एक जेबी कार्य को पिछले दशक में कई प्रयासों के बावजूद भावात्मक स्थिति19 में परिवर्तन के प्रति संवेदनशील के रूप में सफलतापूर्वक मान्य किया गया है (रेसास्को एट अल की पूरक सामग्री देखें।  सारांश के लिए)। यह आलेख हाल ही में मान्य म्यूरिन जेबी कार्य का वर्णन करता है, इसके जैविक रूप से प्रासंगिक डिजाइन का विवरण देता है, और उन तरीकों को उजागर करता है जो इस मानवीय कार्य को माउस प्रभाव के लिए प्रासंगिक महत्वपूर्ण परिकल्पनाओं का परीक्षण करने के लिए लागू किया जा सकता है। कुल मिलाकर, प्रोटोकॉल चूहों में जेबी पर ब्याज के किसी भी चर के भावात्मक प्रभावों की जांच करने के लिए लागू किया जा सकता है। इसमें यहां वर्णित श्रेणीबद्ध उपचार चर (दवा या रोग प्रभाव, पर्यावरणीय स्थितियां, आनुवंशिक पृष्ठभूमि, आदि), या निरंतर चर (शारीरिक परिवर्तन, घर पिंजरे के व्यवहार, आदि) के साथ संबंध शामिल होंगे।

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Protocol

पशु देखभाल दिशानिर्देशों पर कनाडाई परिषद के अनुपालन में आयोजित गुएल्फ की पशु देखभाल समिति (एयूपी # 3700) विश्वविद्यालय द्वारा प्रयोगों को मंजूरी दी गई थी, और आगमन (पशु अनुसंधान: विवो प्रयोगों की रिपोर्टिंग) 20 आवश्यकताओं के अनुसार रिपोर्ट की गई थी।

1. प्रयोग की तैयारी

  1. प्रायोगिक डिजाइन (देखें) तालिका 1).
    नोट: यह व्यवहार परीक्षण एक गंध-आधारित गो / गो खुदाई कार्य है, जिसमें चूहों को उच्च या निम्न-मूल्य पुरस्कारों के लिए खुदाई करनी होती है। यह एक आयताकार अखाड़े का उपयोग करता है (चित्र 1) दो भुजाओं के साथ, जिसमें एक हाथ सुगंधित होता है जबकि दूसरा बिना सुगंधित होता है। जैसा कि नीचे उल्लिखित है, चूहों को एक अस्पष्ट गंध मिश्रण के साथ प्रस्तुत करने से पहले सकारात्मक और नकारात्मक गंध संकेतों के बीच भेदभाव करने के लिए प्रशिक्षित किया जाता है।
    1. छद्म यादृच्छिक रूप से टकसाल या वेनिला सकारात्मक भेदभावपूर्ण उत्तेजना (डीएस +) समूहों को निम्नानुसार पिंजरे असाइन करें।
      नोट: यह प्रोटोकॉल केवल वेनिला डीएस + गंध मिश्रण को सौंपे गए चूहों के लिए मान्य किया गया है (विवरण के लिए प्रतिनिधि परिणाम और रेसास्को एट अल .19 देखें)। हालांकि, पायलट परीक्षणों को यह पुष्टि करने के लिए दृढ़ता से अनुशंसा की जाती है कि डीएस +, डीएस-, और अस्पष्ट मिश्रण वैध जेबी मूल्यांकन (चरण 4.7.3 और 5.3) के लिए आवश्यकताओं को पूरा करते हैं। इस प्रकार, यहां उल्लिखित विधियों में एक वेनिला और टकसाल डीएस + दोनों का परीक्षण शामिल है, एक समूह का एक उदाहरण प्रदान करने के लिए जो जेबी (वेनिला डीएस + चूहों) के मूल्यांकन के लिए आवश्यकताओं को सफलतापूर्वक पूरा करता है और एक समूह जो ऐसा करने में विफल रहता है (टकसाल डीएस + चूहे)। पूर्व पायलट परीक्षण पहले से ही इस प्रकार की समस्या की पहचान करेंगे।
    2. टकसाल डीएस + चूहों: इन चूहों के लिए, प्रशिक्षण के लिए अखाड़ा सेटअप के दौरान (नीचे चरण 1.4 देखें), टकसाल गंध क्यू के साथ एक उच्च मूल्य इनाम युक्त गंध डिस्पेंसर और बर्तन चिह्नित करें, और वेनिला गंध क्यू के साथ कोई इनाम नहीं है।
    3. वेनिला डीएस + चूहों: इन चूहों के लिए, प्रशिक्षण के लिए अखाड़ा सेटअप के दौरान (नीचे चरण 1.4 देखें), वेनिला गंध क्यू के साथ एक उच्च मूल्य इनाम युक्त गंध डिस्पेंसर और बर्तन चिह्नित करें, और टकसाल गंध क्यू के साथ कोई इनाम नहीं है।
      नोट: इस कार्य में प्रबलित प्रशिक्षण परीक्षण और अप्रबलित परीक्षण परीक्षण शामिल हैं। अप्रबलित परीक्षण परीक्षणों के दौरान, चूहों के लिए कोई पुरस्कार सुलभ नहीं है (नीचे चरण 1.4.3 देखें) और टकसाल और वेनिला डीएस + चूहों दोनों के लिए अस्पष्ट गंध क्यू समान 1: 1 टकसाल /
    4. छद्म यादृच्छिक रूप से बाएं या दाएं सुगंधित हाथ समूहों (डीएस + गंध समूहों में काउंटरबैलेंसिंग) को पिंजरे असाइन करते हैं।
    5. बाएं: इन चूहों के लिए, प्रशिक्षण और परीक्षण के लिए अखाड़ा सेटअप के दौरान (नीचे चरण 1.4 देखें), बाएं हाथ को उपयुक्त डीएस + या डीएस- गंध क्यू के साथ चिह्नित करें और सुनिश्चित करें कि दाहिना हाथ हमेशा सुगंधित हो (केवल आसुत जल के साथ चिह्नित)।
    6. दाएं: इन चूहों के लिए, प्रशिक्षण और परीक्षण के लिए अखाड़ा सेटअप के दौरान (नीचे चरण 1.4 देखें), उचित डीएस + या डीएस- गंध क्यू के साथ दाहिने हाथ को चिह्नित करें और सुनिश्चित करें कि बाएं हाथ को हमेशा सुगंधित किया जाता है (केवल आसुत जल के साथ चिह्नित)।
    7. बेतरतीब ढंग से प्रत्येक जानवर को निम्नानुसार "अंधा कोड" असाइन करें।
      नोट: ब्लाइंडिंग शोधकर्ता को चूहों को संभालने और अवांछनीय व्यक्तिपरक पूर्वाग्रह से बचने, पशु आईडी या उपचार से अनजान रहने के लिए अपने व्यवहार को स्कोर करने की अनुमति देता है। यह आगमन (पशु अनुसंधान: विवो प्रयोगों की रिपोर्टिंग) दिशानिर्देशों और अन्य संदर्भ दस्तावेजों का अनुपालन करने के लिए एक अनिवार्य कदमहै।
    8. प्रत्येक पशु आईडी और उन्हें सौंपे गए संबंधित उपचार वाले स्प्रेडशीट में ब्लाइंड कोड के लिए एक कॉलम जोड़ें।
    9. बेतरतीब ढंग से प्रत्येक जानवर को एक अद्वितीय कोड (जैसे, एक अक्षर और संख्या संयोजन "ए 2") असाइन करें जो पिंजरे की संख्या या उपचार से असंबंधित है।
      नोट: सभी यादृच्छिकीकरण एक यादृच्छिक संख्या जनरेटर (जैसे, Random.org) का उपयोग करके आयोजित किया जाना चाहिए। इस यादृच्छिकीकरण चरण के दौरान, उपचार, तनाव, आदि में काउंटर-बैलेंस, जहां लागू हो। इसे एक शोध सहायक द्वारा किया गया है जो प्रयोगों के दौरान उपचार के लिए "अनब्लाइंड" रहेगा। पक्षपातपूर्ण आकलन से बचने के लिए इस व्यक्ति को परीक्षण के दौरान डेटा एकत्र नहीं करना चाहिए।
    10. सभी डेटा संग्रह के दौरान, "अंधा" शोधकर्ता प्रदान करें जो शोधकर्ता को उपचार के लिए अंधा रखने के लिए केवल जानवर के अंधा कोड के साथ खोदने और खोदने के लिए लाइव- और वीडियो-स्कोरिंग विलंबता है।
      नोट: डेटा संग्रह के दौरान उपयोग की जाने वाली स्प्रेडशीट में केवल जानवर का अंधा कोड और प्रत्येक परीक्षण के लिए खोदने और खुदाई की अवधि के लिए संबंधित विलंबता शामिल होगी। प्रयोगों के अंत में, संबंधित पशु आईडी और उपचार की जानकारी को स्प्रेडशीट में जोड़ा जा सकता है, इस प्रकार डेटा विश्लेषण के लिए शोधकर्ताओं को "अनब्लाइंडिंग" किया जा सकता है।
  2. सामग्री की तैयारी।
    1. उच्च मूल्य वाले खाद्य पुरस्कार: सूखे मीठे केले के चिप्स को हाथ से लगभग 0.5 सेमी x 0.5 सेमी टुकड़ों में तोड़दें।
    2. कम मूल्य वाले खाद्य पुरस्कार: एक कटिंग बोर्ड और चाकू का उपयोग करके, कृंतक चाउ (जानवरों के नियमित आहार से) को लगभग 0.125 सेमी3 टुकड़ों में काट लें।
      नोट: कार्य शुरू करने से पहले उच्च और निम्न मूल्य पुरस्कारों की पहचान करने के लिए पायलट परीक्षण आयोजित किए जाने चाहिए।
    3. टकसाल और वेनिला सार: 1 एमएल सिरिंज या माइक्रोपिपेट का उपयोग करके, लेबल अपकेंद्रित्र ट्यूबों में टकसाल और वेनिला निकालने जोड़ें। आसुत जल के साथ अर्क 1: 4 पतला करें और कई बार उलटा करके मिलाएं। मिश्रण ताजा और सुसंगत हैं यह सुनिश्चित करने के लिए उपयोग करने से पहले इन्हें दैनिक और बार-बार उल्टा करें।
    4. अस्पष्ट गंध मिश्रण: टकसाल और वेनिला सार पतला होने के बाद, एक अपकेंद्रित्र ट्यूब में बराबर मात्रा में जोड़ें (पतला सार का 1: 1 मिश्रण बनाना)। अस्पष्ट गंध मिश्रण के परीक्षण प्रतिक्रियाओं के दिन इन्हें बनाएं, और यह सुनिश्चित करने के लिए उपयोग करने से पहले बार-बार उल्टा करें कि मिश्रण ताजा और सुसंगत है।
      नोट: उचित कमजोर पड़ने और मध्यवर्ती गंध मिश्रण की पहचान करने के लिए पायलट परीक्षणों को अस्पष्ट जांच की उपयोगिता सुनिश्चित करने के लिए दृढ़ता से प्रोत्साहित किया जाता है, क्योंकि तीव्रता निर्माताओं, बैचों आदि के बीच भिन्न हो सकती है। यदि कई अस्पष्ट संकेतों की पेशकश की जाती है, तो यादृच्छिक रूप से चूहों को निकट सकारात्मक, मध्य बिंदु, नकारात्मक परीक्षण संकेतों के पास असाइन करें। अधिक जानकारी के लिए चर्चा देखें।
    5. कपास पैड: प्रत्येक परिपत्र कपास पैड को छह बराबर टुकड़ों में काटें (उन्हें गंध डिस्पेंसर के रूप में उपयोग किए जाने वाले ऊतक कैसेट के भीतर फिट करने की अनुमति दें)।
      नोट: उच्च और निम्न मूल्य वाले खाद्य पुरस्कारों, कपास पैड और गंध मिश्रण की मात्रा की संख्या परीक्षण किए जा रहे विषयों की संख्या पर निर्भर करेगी। कृपया प्रत्येक चरण में प्रति विषय परीक्षणों की संख्या के लिए तालिका 1 और प्रत्येक परीक्षण प्रकार में आवश्यक सामग्रियों के लिए तालिका 2 देखें।
    6. प्रायोगिक क्षेत्र की पहचान करें: कॉलोनी के कमरे में या कहीं और एक बेंच पर प्रशिक्षण और परीक्षण करें। चूहों के सक्रिय होने पर अंधेरे चरण के दौरान लाल बत्ती के तहत सभी परीक्षणों का संचालन करें।
  3. घर के पिंजरे में खुदाई के लिए पूर्व-प्रशिक्षण (प्रयोगों से 1 सप्ताह पहले)।
    1. परीक्षण किए जा रहे प्रत्येक पिंजरे के लिए, दो खुदाई बर्तनों में कॉर्नकोब बिस्तर की एक छोटी मात्रा डालें (बर्तन के नीचे कवर करने के लिए पर्याप्त) ताकि दफन होने पर बर्तन के केंद्र में रहने में मदद मिल सके।
    2. एक बर्तन में, कॉर्नकोब परत के शीर्ष पर उच्च मूल्य इनाम के टुकड़े रखें ताकि पिंजरे में प्रत्येक माउस में एक टुकड़ा हो सके (उदाहरण के लिए, तीन चूहों के पिंजरे के लिए केले के चिप्स के तीन टुकड़े)। दूसरे बर्तन में, कॉर्नकोब परत के शीर्ष पर कम मूल्य इनाम के टुकड़े रखें ताकि पिंजरे में प्रत्येक माउस में एक टुकड़ा हो सके (उदाहरण के लिए, तीन चूहों के पिंजरे के लिए चाउ के तीन टुकड़े)।
    3. धीरे-धीरे प्रत्येक बर्तन में व्यवहार पर कॉर्नकोब बिस्तर डालें, उन्हें कवर करें और बर्तनों को 3 सेमी की ऊंचाई तक भरें।
    4. इसके साथ ही 10 मिनट के लिए प्रत्येक पिंजरे में एक उच्च मूल्य और एक कम मूल्य वाला बर्तन रखें। 10 मिनट के बाद, सभी पिंजरों से बर्तन हटा दें।
    5. किसी भी कॉर्नकोब को त्यागें और बर्तन में शेष का इलाज करें। भविष्य के परीक्षणों को प्रभावित करने से जानवरों और पिंजरे की गंध को रोकने के लिए 70% इथेनॉल के साथ सभी बर्तनों को अच्छी तरह से पोंछ लें।
    6. लगातार 5 दिनों के लिए प्रति दिन एक बार चरण 1.3.1-1.3.5 दोहराएं।
      नोट: इस चरण का लक्ष्य सभी पिंजरे के साथियों को औपचारिक प्रशिक्षण की शुरुआत से पहले खुदाई करने और एक इलाज खाने का अवसर देना है। यह भोजन पुरस्कारों की आदत को भी सुविधाजनक बनाता है।
  4. प्रशिक्षण और परीक्षण के लिए स्थापित अखाड़ा।
    1. अखाड़े को लाल बत्ती के नीचे वर्कबेंच पर रखें। पिछले परीक्षणों से धूल और किसी भी गंध को हटाने के लिए 70% इथेनॉल के साथ अखाड़े के सभी घटकों, खुदाई के बर्तन और सुगंध डिस्पेंसर को अच्छी तरह से पोंछ लें।
    2. खुदाई के बर्तन निम्नानुसार तैयार करें।
    3. "दुर्गम डिब्बे" में उपयुक्त खाद्य पुरस्कार रखें ( चित्र 1 देखें)।
      नोट: इस डिब्बे में शामिल पुरस्कार इस बात पर निर्भर हैं कि किसी दिए गए परीक्षण में कौन से व्यवहार (यदि कोई हो) दफन हैं ( तालिका 2 देखें)। इस प्रकार, प्रत्येक बर्तन में हमेशा केले की चिप का एक टुकड़ा और दो डिब्बों में चाउ का एक टुकड़ा होगा।
      1. डीएस + गंध बर्तन: प्रबलित परीक्षणों के दौरान, दुर्गम डिब्बे में चाउ का एक टुकड़ा रखें और बर्तन के सुलभ क्षेत्र में केले की चिप के एक टुकड़े को दफनाएं।
      2. डीएस- गंध बर्तन: प्रबलित परीक्षणों के दौरान, दुर्गम डिब्बे में चाउ का एक टुकड़ा और केले की चिप का एक टुकड़ा रखें। बर्तन के सुलभ क्षेत्र में कोई खाद्य पुरस्कार उपलब्ध नहीं होगा।
      3. बिना सुगंधित बर्तन: प्रबलित परीक्षणों के दौरान, दुर्गम डिब्बे में केले की चिप का एक टुकड़ा रखें और बर्तन के सुलभ क्षेत्र में चाउ के एक टुकड़े को दफनाएं।
      4. सभी अप्रबलित परीक्षण परीक्षणों (सकारात्मक, नकारात्मक और अस्पष्ट) के दौरान, दुर्गम डिब्बे में चाउ का एक टुकड़ा और केले की चिप का एक टुकड़ा रखें। बर्तन के सुलभ क्षेत्र में कोई खाद्य पुरस्कार उपलब्ध नहीं होगा।
        नोट: यह कदम दफन व्यवहार की गंध को प्रकट करने से रोकने के लिए है कि कौन सा बर्तन पुरस्कृत किया गया है। इस प्रकार, गंध संचरण की सुविधा के लिए दो डिब्बों के बीच की बाधा को छिद्रित किया जाता है।
    4. दफनाए जाने पर खाद्य पुरस्कारों को केंद्रित रखने के लिए प्रत्येक बर्तन में कॉर्नकोब बिस्तर की एक छोटी मात्रा डालें। कॉर्नकोब परत के शीर्ष पर उपयुक्त खाद्य इनाम ( तालिका 2 देखें) का एक टुकड़ा रखें और धीरे-धीरे व्यवहार पर कॉर्नकोब बिस्तर डालें, उन्हें कवर करें और बर्तनों को 3 सेमी की ऊंचाई तक भरें।
    5. 1 मिलीलीटर सिरिंज या माइक्रोपिपेट का उपयोग करके, उपयुक्त गंध मिश्रण (यानी, टकसाल, वेनिला, या अस्पष्ट मिश्रण) या आसुत जल ( तालिका 2 देखें) के 0.1 मिलीलीटर खींचें और इसे सीधे एक परिपत्र गति में कॉर्नकोब के शीर्ष पर इंजेक्ट करें।
    6. खुशबू डिस्पेंसर तैयार करें।
      1. ऊतक कैसेट के आधार में एक कपास पैड टुकड़ा रखें। 1 मिलीलीटर सिरिंज या माइक्रोपिपेट का उपयोग करके, उपयुक्त गंध मिश्रण (यानी, टकसाल, वेनिला, या अस्पष्ट मिश्रण) या आसुत जल ( तालिका 2 देखें) के 0.1 मिलीलीटर खींचें और इसे कपास के टुकड़े पर इंजेक्ट करें। सुगंधित कपास को संलग्न करने के लिए अपने ढक्कन के साथ ऊतक कैसेट को कवर करें जो एक गंध डिस्पेंसर बनाता है।
    7. प्रत्येक हाथ की शुरुआत में हथियारों और गंध डिस्पेंसर के सिरों पर खुदाई के बर्तन रखें। अखाड़ा हथियारों में प्रवेश को अवरुद्ध करने और स्टार्ट डिब्बे बनाने के लिए कैसेट स्लॉट से तुरंत पहले हटाने योग्य "दरवाजा" डालें ( चित्रा 1 देखें)।
      नोट: बर्तन, गंध डिस्पेंसर, और सिरिंज खोदना स्पष्ट रूप से लेबल किया जाना चाहिए और गंध संकेतों के अनजाने मिश्रण से बचने के लिए प्रयोगों में केवल एक गंध के लिए उपयोग किया जाना चाहिए (यानी, टकसाल, वेनिला, अनसुगंधित और अस्पष्ट मिश्रण के लिए सामग्री के एक अलग सेट का उपयोग करें)।

2. खुदाई प्रशिक्षण: 5 दिन, प्रति दिन दो सकारात्मक परीक्षण (तालिका 2)

  1. हॉपर से भोजन को हटाकर अपने घर के पिंजरे में प्रशिक्षण से पहले 1 घंटे के लिए फास्ट चूहों।
  2. ऊपर दिए गए अखाड़ा सेटअप निर्देशों का पालन करके एक प्रबलित सकारात्मक परीक्षण के लिए अखाड़ा सेट करें (चरण 1.4)।
  3. खुदाई प्रशिक्षण के दिन 1 पर, उन्हें दफनाने के बजाय 3 सेमी कॉर्नकोब बिस्तर के ऊपर भोजन पुरस्कार रखें।
  4. उत्तरोत्तर निम्नलिखित 4 दिनों में कॉर्नकोब के नीचे पुरस्कारों को गहराई से दफनकरें, जब तक कि वे दिन 5 तक 3 सेमी बिस्तर के नीचे स्थित न हों (यानी, दिन 1: मकई-कोब के शीर्ष पर, दिन 2: मकई-कोब की एक बहुत पतली परत द्वारा दफन, दिन 3: बर्तन के नीचे आधे रास्ते में दफन, दिन 4: बर्तन के नीचे के रास्ते के तीन-चौथाई दफन, और दिन 5: बर्तन के तल पर दफन)।
  5. एक खाली परिवहन पिंजरे के लिए अपने घर पिंजरे से चूहों ले जाएँ। परिवहन पिंजरे के शीर्ष पर जानवर के अंधा कोड के साथ एक क्यू कार्ड रखें ताकि प्रयोग करने वाला शोधकर्ता पशु आईडी और उपचार के लिए अंधा रहे। प्रयोगात्मक क्षेत्र के लिए चूहों ले लो।
    नोट: चरण 2.1 और 2.5 चूहों से परिचित एक शोध सहायक द्वारा पूरा किया जाना चाहिए। परीक्षणों के दौरान बाद के कदम पशु आईडी (और उपचार, यदि लागू हो) के लिए अंधा एक शोधकर्ता द्वारा आयोजित किए जाएंगे। पारंपरिक पूंछ हैंडलिंग 21 के प्रतिकूल प्रभावों से बचने के लिए हमेशा कप हैंडलिंग (खुले हाथ) या सुरंग हैंडलिंग (पेपर कप या प्लास्टिक सुरंग के साथ) का उपयोग करके चूहों कोसंभालें।
  6. क्षेत्र के प्रारंभ डिब्बे के लिए परिवहन पिंजरे से चूहों ले जाएँ। प्रारंभ "दरवाजा" निकालें, तुरंत अखाड़े पर प्लेक्सीग्लास ढक्कन को कम करें, और 5 मिनट का परीक्षण टाइमर शुरू करें।
    नोट: यदि एक ही पिंजरे से कई चूहों का परीक्षण किया जा रहा है, तो यह एक साथ किया जाना चाहिए। हालांकि, एक ही समय में परीक्षण किए जा रहे जानवरों की संख्या उपलब्ध अंधे पर्यवेक्षकों की संख्या पर निर्भर करेगी; आदर्श रूप से, एक शोधकर्ता एक समय में एक जानवर का निरीक्षण और संभालेगा, लेकिन यदि आवश्यक हो तो एक व्यक्ति एक साथ दो जानवरों का निरीक्षण और संभाल सकता है।
  7. दोनों बाहों में इनाम खाने के लिए खुदाई और विलंबता के लिए लाइव-स्कोर विलंबता।
    1. खुदाई की पहली घटना देखे जाने के समय के रूप में खुदाई करने के लिए विलंबता रिकॉर्ड करें। खुदाई को एक माउस के रूप में वर्णित किया गया है जो सक्रिय रूप से फोरपाव्स और / या थूथन के साथ कॉर्नकोब बिस्तर को धक्का या हेरफेर करता है।
    2. खाने की पहली घटना के समय के रूप में खाने के लिए विलंबता रिकॉर्ड करें। खाने को एक माउस के रूप में वर्णित किया गया है जो इसे अग्रभाग में पकड़ते हुए और हौंच पर बैठे हुए इनाम का उपभोग करता है।
  8. जब परीक्षण समाप्त हो जाता है, तो प्लेक्सीग्लास ढक्कन उठाएं, और माउस को अपने परिवहन पिंजरे में वापस ले जाएं।
  9. बर्तनों में छोड़े गए सभी कॉर्नकोब बिस्तर और व्यवहार को त्याग दें। ऊतक कैसेट खोलें और कपास के टुकड़ों को त्यागें। अखाड़े और खुदाई के बर्तन के सभी घटकों को पोंछें और 70% इथेनॉल के साथ डिस्पेंसर को अच्छी तरह से सुगंधित करें।
  10. एक दूसरे सकारात्मक परीक्षण (चरण 1.4) के लिए अखाड़ा सेट करें। एक प्रबलित सकारात्मक परीक्षण के लिए चरण 2.6-2.9 दोहराएं।
  11. अनुसंधान सहायक को परिवहन पिंजरे लौटाएं ताकि चूहों को उनके घर के पिंजरे में वापस रखा जा सके।
  12. लगातार 5 दिनों के लिए चरण 2.1-2.11 दोहराएँ।

3. भेदभाव प्रशिक्षण: 10 दिन, प्रति दिन चार परीक्षण

  1. चरण 1.4 में दिए गए निर्देशों का पालन करते हुए एक सकारात्मक या नकारात्मक परीक्षण के लिए अखाड़ा सेट करें ( तालिका 2 देखें)।
  2. तालिका 2 में उल्लिखित आदेश के बाद प्रति दिन दो सकारात्मक और दो नकारात्मक परीक्षण करें (यानी, 1-5 दिनों में सकारात्मक और नकारात्मक परीक्षणों को बारी-बारी से और 6-10 दिनों में छद्म यादृच्छिक क्रम)।
  3. प्रत्येक प्रशिक्षण दिन की शुरुआत में चरण 2.1 में दिए गए निर्देशों का पालन करें, और उसके बाद चरण 2.5-2.10 का पालन करें। दोहराएं जब तक कि चूहों ने कुल चार परीक्षण नहीं किए हों।
  4. अनुसंधान सहायक को परिवहन पिंजरे लौटाएं ताकि चूहों को उनके घर के पिंजरे में वापस रखा जा सके।
  5. कुल मिलाकर 10 दिनों के लिए प्रति दिन एक बार चरण 3.1-3.4 दोहराएं (यानी, लगातार दो 5-दिवसीय कार्य सप्ताह, 2-दिवसीय सप्ताहांत से अलग)।

4. परीक्षण

नोट: परीक्षण की अवधि 3-5 दिन है (सीखने के मानदंडों को पूरा करने के लिए प्रत्येक माउस के लिए लिए गए समय के आधार पर), उन सत्रों के लिए प्रति दिन पांच परीक्षण जिनमें सकारात्मक और नकारात्मक परीक्षण परीक्षण किए जाते हैं, और अस्पष्ट परीक्षण आयोजित किए जाने पर प्रति दिन तीन परीक्षण।

  1. हॉपर से भोजन को हटाकर अपने घर के पिंजरे में प्रशिक्षण / परीक्षण से पहले 1 घंटे के लिए फास्ट चूहों।
  2. चरण 1.4 में अखाड़ा सेटअप निर्देशों का पालन करके यादृच्छिक क्रम में एक सकारात्मक परीक्षण और एक नकारात्मक परीक्षण करें (तालिका 1 देखें) और चरण 2.5-2.10 में प्रबलित परीक्षण निर्देशों का पालन करें।
  3. एक वीडियो-रिकॉर्डेड अप्रबलित परीक्षण परीक्षण करें।
    नोट: अप्रबलित परीक्षण प्रबलित परीक्षणों के समान हैं, उस स्थान को छोड़कर जिसमें पुरस्कार रखे गए हैं। इसलिए, अप्रबलित परीक्षण में, प्रत्येक उच्च और निम्न मूल्य इनाम का एक टुकड़ा सुगंधित और सुगंधित बर्तन दोनों के लिए दुर्गम डिब्बे में रखा जाता है।
    1. सीखने के मानदंडों को पूरा करने तक दैनिक रूप से प्रत्येक माउस के लिए एक सकारात्मक या नकारात्मक परीक्षण परीक्षण करें (अधिकतम 4 दिन; सीखने के मानदंड चरण 4.7.3 में वर्णित हैं)। सुनिश्चित करें कि सकारात्मक और नकारात्मक परीक्षण परीक्षण दिनों में बारी-बारी से आयोजित किए जाते हैं (उदाहरण के लिए, दिन 1: सकारात्मक परीक्षण, दिन 2: नकारात्मक परीक्षण, दिन 3: सकारात्मक परीक्षण, आदि)।
    2. चरण 1.4 में क्षेत्र सेटअप निर्देशों का पालन करें।
    3. क्षेत्र के प्रारंभ डिब्बे के लिए परिवहन पिंजरे से चूहों ले जाएँ। एक तिपाई पर एक वीडियो कैमरा सेट करें ताकि हथियारों के सिरों पर दोनों बर्तन दृश्य में हों, और रिकॉर्डिंग शुरू करें। सुनिश्चित करें कि जानवर के अंधा कोड के साथ क्यू कार्ड और परीक्षण प्रकार (सकारात्मक परीक्षण या नकारात्मक परीक्षण) वीडियो में दर्ज किया गया है (वीडियो स्कोरिंग के दौरान संदर्भ के लिए)।
    4. प्रारंभ "दरवाजा" निकालें, तुरंत अखाड़े पर प्लेक्सीग्लास ढक्कन को कम करें, और 2 मिनट परीक्षण टाइमर शुरू करें।
    5. जब परीक्षण समाप्त हो जाता है, तो रिकॉर्डिंग बंद करें, कैमरे को पक्ष में ले जाएं, प्लेक्सीग्लास ढक्कन उठाएं, माउस को अपने परिवहन पिंजरे में वापस ले जाएं।
    6. बर्तनों में छोड़े गए सभी कॉर्नकोब बिस्तर और व्यवहार को त्याग दें। ऊतक कैसेट खोलें और कपास के टुकड़ों को त्यागें। अखाड़े के सभी घटकों, खुदाई बर्तन, और गंध डिस्पेंसर को 70% इथेनॉल के साथ अच्छी तरह से पोंछ लें।
  4. चरण 1.4 में अखाड़ा सेटअप निर्देशों का पालन करके यादृच्छिक क्रम में एक सकारात्मक परीक्षण और एक नकारात्मक परीक्षण करें (तालिका 1 देखें) और चरण 2.5-2.10 में प्रबलित परीक्षण निर्देशों का पालन करें।
  5. अनुसंधान सहायक को परिवहन पिंजरे लौटाएं ताकि चूहों को उनके घर के पिंजरे में वापस रखा जा सके।
  6. एक बार जब सभी चूहों ने अपने पांच दैनिक परीक्षण पूरे कर लिए हैं, तो वीडियो स्कोरिंग के लिए कैमरा मेमोरी कार्ड से कंप्यूटर पर वीडियो स्थानांतरित करें।
  7. परीक्षण के दिन सकारात्मक और नकारात्मक परीक्षण परीक्षण वीडियो स्कोर करें ताकि यह आकलन किया जा सके कि चूहों ने सीखने के मानदंडों को पूरा किया है या नहीं। उसी दिन वीडियो स्कोरिंग सुनिश्चित करें क्योंकि सीखने के मानदंडों को पूरा करने वाले जानवर अगले दिन अस्पष्ट परीक्षणों से गुजरेंगे।
    1. इवेंट रिकॉर्डिंग सॉफ़्टवेयर या स्टॉपवॉच का उपयोग करके, शोधकर्ता जो उपचार के लिए अंधा है, सकारात्मक और नकारात्मक परीक्षण परीक्षणों के पहले मिनट के दौरान प्रत्येक बर्तन में खोदने और खोदने की अवधि को रिकॉर्ड करने के लिए प्रत्येक माउस की विलंबता रिकॉर्ड करता है।
    2. खुदाई की पहली घटना देखे जाने के समय के रूप में खुदाई करने के लिए विलंबता रिकॉर्ड करें। खुदाई को एक माउस के रूप में वर्णित किया गया है जो सक्रिय रूप से फोरपाव्स और / या थूथन के साथ कॉर्नकोब बिस्तर को धक्का या हेरफेर करता है। कुल समय के रूप में खुदाई की अवधि रिकॉर्ड करें एक माउस खुदाई खर्च करता है।
    3. प्रत्येक माउस के लिए सकारात्मक (डीएस +) और नकारात्मक (डीएस-) परीक्षणों के बीच सुगंधित हाथ में खुदाई की अवधि की तुलना करें ताकि यह निर्धारित किया जा सके कि जानवर कार्य में भेदभाव कर सकते हैं या नहीं। सीखने के मानदंड को पूरा करने पर विचार करें यदि डीएस + सुगंधित हाथ में खुदाई की अवधि परीक्षण के पहले मिनट के दौरान डीएस-सुगंधित हाथ के लिए कम से कम दोगुनी है (3 एस की न्यूनतम डीएस + खुदाई अवधि के साथ)।
  8. चूहों सीखने के मानदंड को पूरा किया है जब तक दैनिक कदम 4.1-4.7 दोहराएँ।
    1. उन व्यक्तियों को बाहर करें जिन्होंने अस्पष्ट परीक्षणों (और इस प्रकार, निर्णय पूर्वाग्रह मूल्यांकन) से दिन 4 तक मानदंड ों को पूरा नहीं किया है।
  9. सीखने के मानदंडों को पूरा करने वाले चूहों के लिए, अस्पष्ट गंध मिश्रण के लिए प्रतिक्रियाओं का परीक्षण करें।
    1. हॉपर से भोजन को हटाकर अपने घर के पिंजरे में प्रशिक्षण / परीक्षण से पहले 1 घंटे के लिए फास्ट चूहों।
    2. चरण 1.4 में अखाड़ा सेटअप निर्देशों का पालन करके यादृच्छिक क्रम में एक सकारात्मक और एक नकारात्मक प्रबलित परीक्षण करें और चरण 2.5-2.10 में प्रबलित परीक्षण निर्देश।
    3. अस्पष्ट गंध मिश्रण का उपयोग करके चरण 4.3 में वर्णित एक वीडियो-रिकॉर्डेड अप्रबलित परीक्षण परीक्षण करें ( तालिका 2 देखें)।
  10. निर्णय पूर्वाग्रह का आकलन करने के लिए अस्पष्ट परीक्षण वीडियो स्कोर करें।
    1. इवेंट रिकॉर्डिंग सॉफ़्टवेयर या स्टॉपवॉच का उपयोग करके, एक शोधकर्ता है जो पशु आईडी के लिए अंधा है और परीक्षण परीक्षणों के पहले 1 मिनट और 2 मिनट के दौरान प्रत्येक पॉट में खोदने के लिए प्रत्येक माउस की विलंबता रिकॉर्ड करता है (चरण 4.7.2 देखें)।

5. डेटा विश्लेषण

नोट: आवश्यक सटीक विश्लेषण प्रयोगात्मक डिजाइन के विवरण पर निर्भर करेगा। यहां एक सामान्य अवलोकन उल्लिखित है, लेकिन शोधकर्ताओं को पशु जेबी प्रयोगों के लिए विश्लेषण की योजना बनाते समय गिगैक्स22 को संदर्भित करने के लिए दृढ़ता से प्रोत्साहित किया जाता है, और नमूना आकार का चयन करते समय गैसकिल और गार्नर23 के लिए (क्योंकि आवश्यक विश्लेषण अक्सर प्राथमिकता शक्ति विश्लेषण के लिए बहुत जटिल होते हैं)।

  1. स्प्रेडशीट में प्रत्येक ब्लाइंड कोड के लिए संबंधित पशु आईडी और उपचार जानकारी (जैसे, समृद्ध या पारंपरिक आवास; दवा या प्लेसबो आदि) जोड़कर शोधकर्ता को "अनब्लाइंड" करें। सुनिश्चित करें कि परिणामी स्प्रेडशीट में प्रत्येक जानवर के लिए तीन पंक्तियां शामिल हैं जो सीखने के मानदंडों को पूरा करती हैं (यानी, सकारात्मक, नकारात्मक और अस्पष्ट परीक्षण परीक्षणों के लिए) सुगंधित हाथ में खुदाई करने के लिए विलंबता का संकेत देती हैं।
  2. पसंदीदा सांख्यिकीय सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके, एक दोहराया उपाय सामान्यीकृत रैखिक मिश्रित मॉडल चलाएं। यहां, परिणाम चर खोदने के लिए विलंबता होगा। सुनिश्चित करें कि मॉडल में उपचार (या ब्याज का निरंतर चर), परीक्षण प्रकार, और उपचार एक्स परीक्षण प्रकार इंटरैक्शन निश्चित प्रभाव के रूप में शामिल हैं। एक यादृच्छिक प्रभाव के रूप में माउस आईडी (उपचार के भीतर नेस्टेड) शामिल करें। मॉडल में शामिल अतिरिक्त शब्द लागू प्रयोगात्मक डिजाइन पर निर्भर करेंगे।
    नोट: यदि चूहों को समूह-रखा जाता है (जैसा कि इस सामाजिक प्रजाति24 के लिए उपयुक्त है) और पिंजरे के साथियों का परीक्षण किया जाता है, तो उपचार के भीतर नेस्टेड पिंजरे (यदि मौजूद है) को यादृच्छिक प्रभाव के रूप में मॉडल में शामिल किया जाना चाहिए (और माउस आईडी बाद में पिंजरे के भीतर घोंसला होना चाहिए)।
  3. प्रत्येक परीक्षण प्रकार में विलंबता के कम से कम वर्ग साधनों को प्लॉट करें ताकि यह पुष्टि की जा सके कि प्रस्तुत अस्पष्ट क्यू को मध्यवर्ती के रूप में व्याख्या की गई थी (यानी, अस्पष्ट परीक्षण के लिए विलंबता कम से कम वर्ग का मतलब है कि सकारात्मक और नकारात्मक विलंबता के बीच मध्य बिंदु पर गिरना चाहिए)। माउस जेबी का आकलन केवल अगर इस आवश्यकता को पूरा किया जाता है।
  4. उपचार एक्स परीक्षण प्रकार बातचीत की जांच करके अस्पष्ट परीक्षण में खुदाई करने के लिए विलंबता पर उपचार (या ब्याज के निरंतर चर) के सरल प्रभाव का आकलन करें यह निर्धारित करने के लिए कि चूहों को प्रभावित-मॉड्यूलेटेड जेबी प्रदर्शित किया गया है या नहीं।

Figure 1
चित्र 1: प्रयोगात्मक उपकरण का आरेख। जेबी तंत्र में दो भुजाओं के साथ एक आयताकार क्षेत्र शामिल है। प्रत्येक हाथ में शुरुआत में स्थित एक गंध डिस्पेंसर और अंत में एक खुदाई बर्तन रखा जाता है। एल्सेवियर की अनुमति के साथ रेसास्को एट अल .19 से पुनर्मुद्रित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चरण: प्रायोगिक डिजाइन
सब उच्च मूल्य इनाम केले की चिप
कम मूल्य इनाम कृंतक चाउ
डीएस + टकसाल या वेनिला (प्रतिसंतुलित)
डीएस- टकसाल या वेनिला (प्रतिसंतुलित)
खुदाई प्रशिक्षण खुदाई प्रशिक्षण अनुसूची 5 दिन: 2 पीओएस परीक्षण /
खुदाई परीक्षण की अवधि 5 मिनट
भेदभाव प्रशिक्षण भेदभाव प्रशिक्षण अनुसूची 10 दिन: 4 परीक्षण /
खुदाई परीक्षण आदेश दिन 1-5: 4 परीक्षण /
परीक्षण 1: पीओएस
परीक्षण 2: नेग
परीक्षण 3: पीओएस
परीक्षण 4: नेग
दिन 6-10: 4 परीक्षण /
भेदभाव परीक्षण की अवधि 5 मिनट
परीक्षण टेस्टिंग शेड्यूल 3-5 दिन (सीखने के मानदंडों को पूरा करने के लिए समय पर निर्भर)
5 परीक्षण / दिन
परीक्षण चरण आदेश परीक्षण 1 और 2: पीओएस या नेग **
परीक्षण 3: परीक्षण परीक्षण
परीक्षण 4 और 5: पीओएस या नेग **
परीक्षण परीक्षण की अवधि 2 मिनट
* परीक्षण छद्म यादृच्छिक थे इसलिए चूहों में हमेशा प्रति दिन दो पीओएस और दो नेग परीक्षण होते थे
** परीक्षण छद्म यादृच्छिक थे इसलिए चूहों के पास परीक्षण परीक्षण से पहले और बाद में हमेशा एक पीओएस और एक नेग परीक्षण था

तालिका 1: प्रशिक्षण और परीक्षण के लिए प्रयोगात्मक डिजाइन और अनुसूची का सारांश। प्रयोगात्मक डिजाइन विवरण के अलावा खुदाई प्रशिक्षण, भेदभाव प्रशिक्षण और परीक्षण चरणों के लिए प्रति दिन परीक्षणों की संख्या और क्रम। एल्सेवियर की अनुमति के साथ रेसास्को एट अल .19 से पुनर्मुद्रित।

परीक्षण विवरण
चरण परीक्षण प्रकार सुगंधित हाथ बिना सुगंधित हाथ
गंध क्यू दफन इनाम दुर्गम इनाम गंध क्यू दफनाया गया इनाम दुर्गम इनाम
खुदाई और भेदभाव प्रशिक्षण पीओएस प्रशिक्षण डीएस + केला चाउ पानी चाउ केला
एनईजी प्रशिक्षण डीएस- कोई इनाम नहीं केला + चाउ पानी चाउ केला
परीक्षण पीओएस टेस्ट डीएस + कोई इनाम नहीं केला + चाउ पानी कोई इनाम नहीं केला + चाउ
नेग टेस्ट डीएस- कोई इनाम नहीं केला + चाउ पानी कोई इनाम नहीं केला + चाउ
अस्पष्ट टेस्ट पुदीना/
वेनिला मिश्रण		 कोई इनाम नहीं केला + चाउ पानी कोई इनाम नहीं केला + चाउ
सीखने की कसौटी चूहों को डीएस- पॉट (नेग टेस्ट) की तुलना में डीएस + पॉट (पीओएस टेस्ट) में दो बार खुदाई करनी चाहिए, और कम से कम 3 एस के लिए खुदाई करनी चाहिए

तालिका 2. परीक्षण विवरण का सारांश। खुदाई प्रशिक्षण, भेदभाव प्रशिक्षण और परीक्षण चरणों के दौरान प्रत्येक परीक्षण प्रकार में प्रस्तुत गंध संकेत और पुरस्कार। डीएस (+): सकारात्मक भेदभावपूर्ण उत्तेजना, डीएस (-): नकारात्मक भेदभावपूर्ण उत्तेजना, पीओएस: सकारात्मक, नेग: नकारात्मक। एल्सेवियर की अनुमति के साथ रेसास्को एट अल .19 से पुनर्मुद्रित। विस्तारित तालिका के लिए मूल लेख में पूरक तालिका S2 देखें।

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Representative Results

यहां प्रस्तुत परिणाम रेसास्को एट अल .19 के प्रयोग 1 से प्रासंगिक निष्कर्षों को दर्शाते हैं। इस प्रयोग में 18 महिला सी 57 बीएल / 6 एनसीआरएल ('सी 57') और 18 बाल्ब / सीएनसीआरएल ('बाल्ब') चूहे थे। जानवर 3-4 सप्ताह की उम्र में सुविधा में पहुंचे और मिश्रित तनाव चौकड़ी25 में पर्यावरण यी रूप से समृद्ध या पारंपरिक आवास उपचार (ईएच या सीएच, क्रमशः) को यादृच्छिक रूप से सौंपा गया। प्रत्येक पिंजरे में एक सी 57 और एक बाल्ब था, इसके अलावा दो डीबीए / 2 एनसीआरएल चूहों को एक अन्य प्रयोग में इस्तेमाल किया जा रहा था। यहां, मादा चूहों के उपयोग ने पर्यावरण संवर्धन के साथ इस सामाजिक प्रजाति के समूह आवास की अनुमति दी, जबकि पुरुष चूहों26 में होने वाली ऊंची आक्रामकता और संसाधन की रखवाली से परहेज करते हुए (हालांकि ध्यान दें कि कार्य गैर-समृद्ध नर नग्न चूहों में भी लागू किया गया है19). सीएच चूहों को मकई कोब बिस्तर, दो प्रकार के घोंसले के शिकार सामग्री (क्रिंकल्ड पेपर स्ट्रिप्स और कपास नेस्लेट्स) के साथ खुले शीर्ष, पारदर्शी पॉलीथीन पिंजरों (27 एल एक्स 16 डब्ल्यू एक्स 12 एच सेमी; एन = 9) में रखा गया था; चित्रा 2 ए), और एक पेपर कप 'आश्रय'। ईएच पिंजरे अपारदर्शी प्लास्टिक थे, जो टिप्पणियों के लिए एक लाल प्लेक्सीग्लास खिड़की के साथ 60 एल एक्स 60 डब्ल्यू एक्स30 एच सेमी 3 को मापते थे (एन = 9; चित्रा 2 बी, सी)। इन स्थितियों को कल्याण में सुधार करने के लिए जाना जाता है: विविध संवर्धन युक्त (जैसा कि पहले एनआईपी एट अल .27 द्वारा वर्णित है) कि चूहों को28 तक पहुंचने के लिए प्रेरित किया जाता है, और जो गरीब कल्याण के संकेत वाले व्यवहार को कम करता है (उदाहरण के लिए, रूढ़िवादी व्यवहार, आक्रामकता और अवसाद जैसी निष्क्रियता 27,28,29 ). प्रत्येक ईएच पिंजरे में एक संलग्न 'अनुलग्नक' पिंजरे (सीएच पिंजरों के समान लेकिन केवल बिस्तर युक्त) भी शामिल था, जो चूहों को एक सुरंग (चित्रा 2 सी) के माध्यम से स्वतंत्र रूप से एक्सेस कर सकता था। एनेक्स पिंजरों ने खाद्य पुरस्कारों के लिए इस लगाव में प्रवेश करने के लिए प्रशिक्षित ईएच चूहों को पकड़ने और संभालने में आसानी के लिए अनुमति दी जब मीठे जई अनाज से भरा एक कप हिल गया था। एक बार एक माउस अनुलग्नक पिंजरे में प्रवेश किया, पहुँच सुरंग अवरुद्ध किया जा सकता है और चूहों आसानी से कप या सुरंग हैंडलिंग21 का उपयोग कर पिंजरों से हटाया जा सकता है। इस प्रकार इस दृष्टिकोण ने जटिल समृद्ध वातावरण30 के माध्यम से तनावपूर्ण 'पीछा' से परहेज किया। भोजन और पानी विज्ञापन लिबिटम उपलब्ध थे और कॉलोनी के कमरे को 21 ± 1 डिग्री सेल्सियस और 35% -55% सापेक्ष आर्द्रता पर बनाए रखा गया था, रिवर्स 12:12 घंटे प्रकाश चक्र (06:00 पर रोशनी बंद और 18:00 पर)। चूहों को उपकरण में खुदाई प्रशिक्षण शुरू करने से पहले 5 सप्ताह के लिए अलग-अलग रखा गया था (चित्रा 2 डी में समयरेखा देखें)।

चूहों ने ऊपर प्रोटोकॉल में उल्लिखित जेबी कार्य में प्रशिक्षण और परीक्षण किया। जेबी पर आवास प्रभावों के परीक्षण के लिए सकारात्मक, नकारात्मक और अस्पष्ट परीक्षण परीक्षणों के पहले और पूर्ण 2 मिनट के दौरान सुगंधित हाथ में खुदाई करने के लिए विलंबता का उपयोग किया गया था। यहां, सामान्यीकृत रैखिक मिश्रित मॉडल का उपयोग करके डेटा का विश्लेषण किया गया था, जहां सामान्यता और समरूपता की मान्यताओं को पूरा करने के लिए आवश्यक परिवर्तनों को लागू किया गया था। विश्लेषण के विस्तृत विवरण के लिए रेसास्को एट अल .19 देखें (उदाहरण के लिए, मॉडल चयन)। संक्षेप में, दोहराए गए उपायों के मॉडल में हमेशा परीक्षण प्रकार, आवास, तनाव, परीक्षण प्रकार एक्स आवास, डीएस + गंध, परीक्षण प्रकार एक्स तनाव, परीक्षण प्रकार एक्स डीएस + गंध, परीक्षण प्रकार एक्स आवास एक्स डीएस + गंध, पिंजरे (आवास और डीएस + गंध में नेस्टेड एक यादृच्छिक प्रभाव), और माउस आईडी (पिंजरे, आवास, डीएस + गंध और तनाव में नेस्टेड एक यादृच्छिक प्रभाव) शामिल थे। विलंबता पर आवास के सरल प्रभाव परीक्षण प्रकार से निर्धारित किए गए थे एक्स आवास जब कम से कम वर्गों की गणना31. ध्यान दें, उपचार प्रभावों की जांच का प्रदर्शन करने के लिए दो-पूंछ वाले पी-मानों की सूचना दी जाती है, लेकिन रेसास्को एट अल .19 द्वारा मूल सत्यापन कार्य ने एक-पूंछ वाले पी-मानों का उपयोग किया जहां उचित32 क्योंकि कार्य को मान्य करने के लिए एक विशिष्ट प्रतिक्रिया की आवश्यकता थी (सत्यापन चर्चा के लिए रेसास्को एट अल .19 देखें)।

किसी भी पशु कार्य में निर्णय पूर्वाग्रह का मूल्यांकन करने से पहले, यह महत्वपूर्ण है कि दो तकनीकी मानदंडों को पूरा किया जाए: सबसे पहले, जानवरों को सकारात्मक और नकारात्मक संकेतों (यानी, सीखने के मानदंडों को पूरा करने) के बीच सफलतापूर्वक भेदभाव करना चाहिए। इस मानदंड को पूरा करने वाले जानवरों के लिए, यह प्रदर्शित किया जाना चाहिए कि अस्पष्ट क्यू की व्याख्या मध्यवर्ती के रूप में की जाती है। यदि इनमें से कोई भी पूरा नहीं होता है, तो निर्णय पूर्वाग्रह और संबंधित भावात्मक राज्यों के बारे में अनुमान नहीं लगाया जा सकता है। इस प्रयोग में, चार सी 57 चूहों को छोड़कर सभी सीखने के मानदंडों को पूरा करते थे और एक सी 57 को पिंजरे के साथी (एन = 31) के लिए परीक्षण से पहले हटा दिया गया था। परीक्षण के पहले और पूर्ण 2 मिनट दोनों में, परीक्षण प्रकार एक्स डीएस + गंध महत्वपूर्ण था (1 मिनट: एफ2,62 = 5.67, पी = 0.006; 2 मिनट: एफ2,62 = 5.74, पी = 0.005), यह खुलासा करते हुए कि टकसाल डीएस + चूहों ने अप्रत्याशित रूप से अस्पष्ट गंध मिश्रण को सकारात्मक (जैसे कि 100% टकसाल) के रूप में व्याख्या की, जबकि वेनिला डीएस + चूहों ने एक ही अस्पष्ट गंध मिश्रण का इलाज किया इस खोज ने संकेत दिया कि केवल वेनिला डीएस + चूहों ने डीएस + और डीएस के बीच मध्यवर्ती के रूप में सुगंध मिश्रण का इलाज करने की तकनीकी आवश्यकता को पूरा किया- और इस प्रकार मिंट डीएस + चूहों को बाद के जेबी विश्लेषण से बाहर रखा गया था।

वेनिला डीएस + चूहों के लिए, आवास के सरल प्रभावों की गणना परीक्षण प्रकार एक्स हाउसिंग टर्म31 से की गई थी। इस समूह के भीतर, हाउसिंग ने अस्पष्ट परीक्षणों में खुदाई करने के लिए सीएच जानवरों की तुलना में धीमी गति से खुदाई की, लेकिन सकारात्मक या नकारात्मक परीक्षणों में नहीं। यह 1 मिनट के बाद सच था (अस्पष्ट: टी = 2.27, डीएफ = 92.94, पी = 0.014, कोहेन का डी = 1.148; सकारात्मक: टी = 0.22, डीएफ = 92.94, पी = 0.414, कोहेन का डी = 0.110; नकारात्मक: टी = 0.80, डीएफ = 92.94, पी = 0.214, कोहेन टी = 0.39, डीएफ = 91.89, पी = 0.348, कोहेन का डी = 0.198; नकारात्मक: टी = 0.61, डीएफ = 91.89, पी = 0.273, कोहेन का डी = 0.308; चित्रा 4 बी देखें), भले ही परीक्षण प्रकार एक्स हाउसिंग एक्स डीएस + गंध (1 मिनट: एफ3,65.37 = 0.36, पी = 0.7835; 2 मिनट: एफ3,65.37 = 0.49, पी = 0.688) और परीक्षण प्रकार एक्स आवास (1 मिनट: एफ2,62 = 1.66, पी = 0.198; 2 मिनट: एफ2,62 = 1.41, पी = 0.252) महत्वपूर्ण भिन्नता के लिए जिम्मेदार नहीं था। सीएच चूहों द्वारा अस्पष्ट संकेतों की ये निराशावादी व्याख्याएं नकारात्मक निर्णय पूर्वाग्रहों को दर्शाती हैं जो नकारात्मक प्रभाव का संकेत देती हैं।

Figure 2
चित्रा 2: आवास उपचार और प्रयोग समयरेखा( ए) सीएच प्रयोगशाला पिंजरे। (बी) ईएच का ओवरहेड दृश्य। (सी) माउस पकड़ने/हैंडलिंग की सुविधा के लिए संलग्न 'अनुलग्नक' पिंजरे के साथ ईएच का फ्रंट व्यू। (डी) प्रायोगिक समयरेखा और सकारात्मक, नकारात्मक, और अस्पष्ट प्रशिक्षण और परीक्षण परीक्षणों का सारांश। डीएस (+): सकारात्मक भेदभावपूर्ण उत्तेजना, डीएस (-): नकारात्मक भेदभावपूर्ण उत्तेजना, एएमबी: अस्पष्ट मिश्रण (50% वेनिला -50% टकसाल), बी: केले चिप, सी: कृंतक आहार ('चाउ'), एक्स: कोई खाद्य पुरस्कार नहीं। एल्सेवियर की अनुमति के साथ रेसास्को एट अल .19 से पुनर्मुद्रित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 3
चित्रा 3: यह निर्धारित करना कि चूहे जेबी मूल्यांकन के लिए आवश्यकताओं को पूरा करते हैं या नहीं। सकारात्मक, नकारात्मक और अस्पष्ट परीक्षण परीक्षणों के दौरान विलंबता कम से कम वर्ग का मतलब (±मानक त्रुटि) खोदना। (ए) सकारात्मक भेदभावपूर्ण उत्तेजना (डीएस +) (डेटा बॉक्स कॉक्स परिवर्तित) के रूप में टकसाल (एम, एन = 15) या वेनिला (वी, एन = 16) प्राप्त करने वाले चूहों में 1 मिनट खुदाई विलंबता। (बी) एक ही विषयों में 2 मिनट खुदाई विलंबता (डेटा लघुगणक रूप से परिवर्तित)। दोनों समय अवधि के दौरान, वेनिला डीएस + चूहों ने मध्यवर्ती के रूप में अस्पष्ट संकेतों की व्याख्या करने की तकनीकी आवश्यकता को पूरा किया। टकसाल डीएस + चूहे ऐसा करने में विफल रहे (इसके बजाय सकारात्मक के रूप में अस्पष्ट क्यू की व्याख्या करते हुए) और परिणामस्वरूप बाद के जेबी विश्लेषणों से समाप्त हो गए। एल्सेवियर की अनुमति के साथ रेसास्को एट अल .19 से पुनर्मुद्रित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 4
चित्रा 4: प्रभावित-मॉड्यूलेटेड जेबी पर आवास उपचार का प्रभाव। सकारात्मक, नकारात्मक और अस्पष्ट परीक्षण परीक्षणों के दौरान विलंबता कम से कम वर्ग का मतलब (±मानक त्रुटि) खोदना। (ए) पारंपरिक (सीएच, एन = 7) या समृद्ध (ईएच, एन = 9) आवास (डेटा बॉक्स कॉक्स परिवर्तित) से वेनिला डीएस + चूहों में 1 मिनट खुदाई विलंबता। (बी) एक ही विषयों में 2 मिनट खुदाई विलंबता (डेटा लघुगणक रूप से परिवर्तित)। दोनों समय अवधि के दौरान, सीएच जानवरों ने ईएच की तुलना में अस्पष्ट परीक्षणों के दौरान खुदाई करने के लिए काफी लंबे विलंबता का प्रदर्शन किया, जो नकारात्मक जेबी का संकेत देता है। एल्सेवियर की अनुमति के साथ रेसास्को एट अल .19 से पुनर्मुद्रित। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

यहां उल्लिखित सुगंध-आधारित खुदाई प्रोटोकॉल और परिणाम माउस भावात्मक स्थिति में परिवर्तन का पता लगाने के लिए इस उपन्यास जेबी कार्य की क्षमता का प्रदर्शन करते हैं। इस प्रकार कार्य अनुसंधान के विभिन्न क्षेत्रों के लिए एक मूल्यवान उपकरण प्रस्तुत करता है। किसी भी जेबी कार्य के समान, पशु प्रभाव का आकलन करने के लिए यह महत्वपूर्ण है कि जानवर पहले संकेतों (चरण 4.7.3) के बीच भेदभाव करना सीखें और अस्पष्ट उत्तेजना को मध्यवर्ती (चरण 5.3) के रूप में व्याख्या की जाती है। हालांकि सरल, इन आवश्यकताओं को पूरा करना चुनौतीपूर्ण हो सकता है, खासकर प्रयोगशाला चूहों में जिसके लिए माउस जेबी कार्य को विकसित करने और कार्यान्वित करने के 15 से अधिक पिछले प्रयास विफल रहे हैं। यहां, कई घटकों ने इन तकनीकी मानदंडों को पूरा करने में एक आवश्यक भूमिका निभाई और कार्य की सफलता और उपयोगिता में योगदान दिया।

सबसे पहले, कार्य के नैतिक डिजाइन ने सफल भेदभाव सीखने को बढ़ावा दिया क्योंकि भेदभावपूर्ण संकेत और आवश्यक प्रतिक्रियाएं दोनों जैविक रूप से प्रासंगिक थीं: चूहों में प्रभावशाली घ्राण क्षमताएं होती हैं, जिससे वे गंध उत्तेजनाओं33 के साथ प्रस्तुत होने पर तेजी से सीखने और काफी स्मृति स्पैन करने में सक्षम होते हैं, और वे स्वाभाविक रूप से सामान्य अन्वेषण, फोर्जिंग और बिल निर्माण24 के लिए खुदाई करने के लिए प्रेरित होते हैं, 34. इसके अलावा, काउंटरबैलेंसिंग डीएस + गंधों ने उन तरीकों में अंतर का खुलासा किया जो वेनिला डीएस + और मिंट डीएस + चूहों ने अस्पष्ट मिश्रण की व्याख्या की, यह पुष्टि करते हुए कि अस्पष्ट क्यू को वेनिला डीएस + चूहों के लिए मध्यवर्ती के रूप में व्याख्या की गई थी, लेकिन मिंट डीएस + चूहों के लिए नहीं। इसलिए यह अनुशंसा की जाती है कि यहां उपयोग किए जाने वाले अर्क ब्रांडों और माउस उपभेदों का उपयोग करके भविष्य के किसी भी काम के लिए केवल वेनिला का उपयोग डीएस + के रूप में किया जाता है। महत्वपूर्ण बात यह है कि हालांकि काउंटरबैलेंसिंग ने वर्तमान प्रयोग में सफल परिणाम दिए हैं, हम शोधकर्ताओं से आग्रह करते हैं कि वे परिवर्तनों को लागू करते समय उपयुक्त अस्पष्ट मिश्रण की पहचान करने के लिए पायलट परीक्षण करें, क्योंकि काउंटरबैलेंसिंग कभी-कभी डेटा में काफी शोर जोड़ सकती है, जिससे मास्किंग उपचार प्रभाव35 का खतरा बढ़ जाता है।

यहां तक कि जब इन आवश्यक मानदंडों को पूरा किया जाता है, तो जेबी का पता लगाना हमेशा आसान नहीं होता है, शायद छोटे उपचार प्रभाव आकारों के कारण जो इन प्रयोगों से आमतौर पर15 उत्पन्न होते हैं। इस प्रकार, कार्य संवेदनशीलता सुनिश्चित करने के लिए, एक अद्वितीय गो / गो डिज़ाइन का उपयोग किया जाता है क्योंकि इस दृष्टिकोण को अन्य प्रजातियों 15 में गो / नो-गोडिज़ाइनों की तुलना में पशु प्रभाव में परिवर्तन के प्रति अधिक संवेदनशील दिखाया गया है। हालांकि, सभी परीक्षणों में कम मूल्य वाले इनाम वाले एक अनसुगंधित हाथ का उपयोग इस कार्य को चूहों36,37,38 के लिए गो / गो जेबी कार्य को मान्य करने के पिछले असफल प्रयासों से अलग करता है। यहां, सकारात्मक परीक्षणों के दौरान चूहों ने डीएस + बांह में उच्च मूल्य इनाम और बिना सुगंधित हाथ में कम मूल्य इनाम के बीच चयन किया; और नकारात्मक परीक्षणों में, वे डीएस-आर्म में कोई इनाम नहीं और बिना सुगंधित हाथ में कम मूल्य वाले इनाम के बीच चयन करते हैं। यद्यपि इसके लिए चूहों को अधिक जटिल कार्य सीखने की आवश्यकता होती है (यानी, इनाम उपस्थिति या अनुपस्थिति के बजाय इनाम के विभिन्न मूल्यों की भविष्यवाणी करने वाले संकेतों के बीच भेदभाव करना), ऐसा प्रतीत होता है कि एक सुसंगत विकल्प होने के कारण, जहां कम मूल्य का इनाम हमेशा मौजूद था, चूहों के लिए प्रशिक्षण और परीक्षण कम तनावपूर्ण हो सकता है और सीखने को बढ़ाया जा सकता है (86% चूहों के साथ सीखने के मानदंडों को पूरा करना)। जबकि चूहों को अक्सर प्रशिक्षित करने के लिए चुनौतीपूर्ण माना जाता है या कठिन कार्यों को सीखने में असमर्थहोता है 18, यहां परिणाम बताते हैं कि उनकी क्षमताओं को कम करके आंका नहीं जाना चाहिए, और कम तनाव, नैतिक कार्यों को डिजाइन करना सरल कार्यों या कठोर परिणामों वाले लोगों की तुलना में प्रभाव में परिवर्तन का पता लगाने के लिए अधिक प्रभावी दृष्टिकोण हो सकता है (उदाहरण के लिए, केवल इनाम अनुपस्थिति39 के बजाय हवा कश या सफेद रोशनी जैसी सजा शामिल है, 40,41)।

अंत में, तनाव को कम करने के लिए जो अन्यथा उपचार प्रभावों में हस्तक्षेप कर सकते हैं और अवांछित परिवर्तनशीलता का परिचय दे सकते हैं, मानवीय हैंडलिंग विधियों को लागू किया गया था21. यहां, चूहों को केवल अपने पूरे जीवन में कप या सुरंग विधियों के माध्यम से संभाला गया था (परिवहन पिंजरों और जेबी तंत्र सहित) पारंपरिक पूंछ हैंडलिंग21 के प्रतिकूल प्रभावों से बचने के लिए। इसके अलावा, ईएच जानवरों को स्वेच्छा से हैंडलिंग के लिए एक अनुलग्नक पिंजरे में प्रवेश करने के लिए प्रशिक्षित किया गया था, इस प्रकार जटिल वातावरण के माध्यम से तनावपूर्ण 'पीछा' से बचा गया था। साथ में, इस दृष्टिकोण ने अस्पष्ट संकेतों के जवाब में लंबे विलंब के माध्यम से सीएच चूहों में निराशावादी निर्णय पूर्वाग्रहों का पता लगाया। भविष्य के शोधकर्ताओं को इसी तरह विचार करना चाहिए कि क्या ब्याज, आवास या पशुपालन प्रथाओं के उनके उपचार के पहलुओं में उपचार प्रभावों को मुखौटा करने या फर्श प्रभावों को प्रेरित करने की क्षमता है (यानी, जहां सभी जानवर चिह्नित निराशावाद दिखाते हैं, अधिक सूक्ष्म उपचार मतभेदों का पता लगाने के लिए कार्य की क्षमता को नकारते हैं) ताकि इन्हें रोका जा सके या कम किया जा सके।

इस आशाजनक कार्य की आगे प्रतिकृति और शोधन अब आवश्यक है। आज तक, यह जेबी कार्य केवल दीर्घकालिक, कम उत्तेजना नकारात्मक प्रभाव (प्रतिबंधात्मक आवास या पुरानी बीमारी19 के परिणामस्वरूप) का अनुभव करने वाले जानवरों पर लागू किया गया है। इसलिए यह महत्वपूर्ण है कि भविष्य के काम का उद्देश्य तीव्र तनाव और उच्च उत्तेजना नकारात्मक भावात्मक राज्यों के लिए इस कार्य की संवेदनशीलता का परीक्षण करना है। इसके अलावा, इस कार्य के मूल्य को अधिकतम करने में व्यक्तियों की परीक्षण-पुन: परीक्षण विश्वसनीयता की जांच करने वाले अध्ययनों को दोहराना, या कई अस्पष्ट जांच भी शामिल होंगे। एक ही जांच के साथ पुन: परीक्षण शोधकर्ताओं को समय के साथ प्रभाव में परिवर्तन के बारे में परिकल्पनाओं का परीक्षण करने की अनुमति देगा, जबकि विषयों को अस्पष्ट संकेतों के स्पेक्ट्रम (यानी, सकारात्मक, मध्यवर्ती और नकारात्मक के पास) को उजागर करने से संभावित रूप से विभिन्न प्रकार के नकारात्मक राज्यों (विशेष रूप से अवसाद- बनाम चिंता जैसी स्थितियों) की पहचान की अनुमति मिल सकती है 11,42 . अतिरिक्त सत्यापन प्रयोगों को छोटे प्रोटोकॉल के मूल्य के साथ-साथ उपभेदों और लिंगों के बीच संभावित अंतर का भी अध्ययन करना चाहिए (हालांकि मूल प्रकाशन इन मुद्दों को संबोधित करता है, सफलतापूर्वक पुरुष चूहों19 में प्रभाव का आकलन करने के लिए एक छोटे प्रोटोकॉल को नियोजित करता है)। दरअसल, इस कार्य को संभावित रूप से43,44 बनाने के लिए आंतरिक रूप से प्रेरित किसी भी कृन्तकों तक बढ़ाया जा सकता है, बशर्ते उचित आकार संशोधन किए जाएं, और सत्यापन की पुष्टि की जाए। इस तरह की प्रतिकृति और शोधन महत्वपूर्ण हैं क्योंकि चूहों के लिए आज तक कोई अन्य वैध जेबी कार्य विकसित नहीं किया गया है और चूंकि जेबी कार्य भावात्मक राज्यों की वैलेंस और तीव्रता दोनों के प्रति संवेदनशील हैं (जैसा कि परिचय में उल्लिखित है), कुछ ऐसा जो जानवरों को प्रभावित करने वाले अधिकांश संकेतक ऐसा करने में विफल रहते हैं (उदाहरण के लिए, हाइपोथैलेमिक-पिट्यूटरी-अधिवृक्क गतिविधि को सकारात्मक और नकारात्मक दोनोंअनुभवों के जवाब में बदला जा सकता है 7, 45)।

कुल मिलाकर, माउस जेबी कार्य का विकास एक आशाजनक नए उपकरण का प्रतिनिधित्व करता है और माउस प्रभाव के मूल्यांकन में महान प्रगति के लिए दरवाजा खोलता है। चूहे बुनियादी और अनुवादक अनुसंधान17 दोनों में सबसे व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले कशेरुक हैं, और यह कार्य विश्व स्तर पर उपयोग किए जाने वाले इन लाखों जानवरों के कल्याण के बारे में आवश्यक सवालों के जवाब देने का एक साधन प्रदान करता है, साथ ही साथ प्रभाव और बीमारियों या स्थितियों के बीच संबंध जो वे मॉडल के लिए उपयोग किए जाते हैं। यद्यपि दिन-प्रतिदिन के कल्याण मूल्यांकन के लिए इस कार्य के उपयोग की सिफारिश नहीं की जाती है, आवास और पशुपालन प्रथाओं की प्रयोगात्मक जांच उन शोधनों की पहचान करने में मदद कर सकती है जो माउस कल्याण को बढ़ावा देते हैं और पशु पीड़ा के अधिक सूक्ष्म संकेतों की पहचान करने में सहायता करते हैं जिन्हें पिंजरे के किनारे देखा जा सकता है। इस कार्य की मानवीय और संभावित समृद्ध प्रकृति को देखते हुए, और प्रोटोकॉल को लागू करने की कम आर्थिक लागत, इस उपन्यास जेबी कार्य की बहुत उपयोगिता है।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।

Acknowledgments

लेखक मिगुएल अयाला, लिंडसे किचनहम, डॉ मिशेल एडवर्ड्स, सिल्विया लैम और स्टेफनी डेजार्डिन के लिए रेसेस्को एट अल .19 सत्यापन कार्य में उनके योगदान के लिए आभारी हैं, जिस पर यह प्रोटोकॉल आधारित है। हम चूहों और हमारे अद्भुत पशु देखभाल तकनीशियनों, मिशेला रान्डेल और मिशेल सिप्लक को भी धन्यवाद देना चाहते हैं।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Absolute ethanol Commercial alcohol P016EAAN Dilute to 70% with distilled water, for cleaning
Centrifuge tubes Fischer 55395 15 mL tubes used to dilute essences here. However, size may be selected based on total volume required for sample size
Cheerios (original) Cheerios N/A Commercially available. Used as reward to train animals to enter annex cage for handling
Corncob bedding Envigo 7092 Teklad 1/8 corncob bedding used in digging pots and animal cages
Cotton pads Equate N/A Commercially available. Modified in lab to fit within tissue cassettes for scent dispensing
Digging pots Rubbermaid N/A Commercially available. Containers were modified to fit the apparatus in the lab
Dried, sweetened banana chips Stock and Barrel N/A Commercially available. High value reward in JB task
JB apparatus N/A The apparatus was made in the lab
JWatcher event recording software Animal Behavior Laboratory, Macquarie University Version 1.0 Freely available for download online. Used to score digging behavior during JB task
Mint extract Fleibor N/A Commercially "Menta (Solución)". Discriminative stimulus odor
Rodent Diet Envigo 2914 Teklad global 14% protein rodent maintenance diets. Low value reward in JB task and regular diet in home cage
SAS statistical software SAS Version 9.4 Other comparable software programs (e.g. R) are also appropriate
Vanilla extract Fleibor Commercially available "Vainilla (Solución)". Discriminative stimulus odor
Video camera Sony DCR-SX22 Sony handycam.

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एक घ्राण खुदाई कार्य के माध्यम से माउस निर्णय पूर्वाग्रह का आकलन
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MacLellan, A., Resasco, A., Young, L., Mason, G. Assessment of Mouse Judgment Bias through an Olfactory Digging Task. J. Vis. Exp. (181), e63426, doi:10.3791/63426 (2022).

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