Denne protokollen beskriver en kalsiumfosfatindusert abdominal aortaaneurisme (AAA) musemodell for å studere de patologiske egenskapene og molekylære mekanismene til AAA.
En abdominal aortaaneurisme (AAA) er en livstruende kardiovaskulær sykdom som oppstår over hele verden og er preget av irreversibel utvidelse av abdominal aorta. For tiden brukes flere kjemisk induserte murine AAA-modeller, som hver simulerer et annet aspekt av patogenesen til AAA. Den kalsiumfosfatinduserte AAA-modellen er en rask og kostnadseffektiv modell sammenlignet med angiotensin II- og elastaseinduserte AAA-modeller. Anvendelsen av CaPO4-krystaller til musens aorta resulterer i elastisk fiberforringelse, tap av glatte muskelceller, betennelse og kalsiumavsetning forbundet med aortautvidelse. Denne artikkelen introduserer en standardprotokoll for CaPO4-indusert AAA-modell. Protokollen inkluderer materialforberedelse, kirurgisk påføring av CaPO4 til adventitia av infrarenal abdominal aorta, høsting av aorta for å visualisere aortaaneurismer og histologiske analyser hos mus.
En abdominal aortaaneurisme (AAA) er en dødelig kardiovaskulær sykdom preget av permanent utvidelse av abdominal aorta, med høy dødelighet når brudd oppstår. AAA er assosiert med aldring, røyking, mannlig kjønn, hypertensjon og hyperlipidemi. Flere patologiske prosesser har vist seg å bidra til AAA-dannelse, inkludert ekstracellulær matriksfiberproteolyse, immuncelleinfiltrasjon og tap av vaskulære glatte muskelceller. For tiden forblir de patologiske mekanismene til AAA unnvikende, og det finnes ingen påviste stoffer for behandling av AAA1. Forskning på human AAA er begrenset på grunn av eksistensen av få humane aortaprøver; dermed har flere kjemiske modifikasjonsinduserte AAA-modeller for dyr blitt etablert og allment vedtatt, inkludert subkutan angiotensin II (AngII) infusjon, perivaskulær eller intraluminal elastaseinkubasjon og perivaskulær kalsiumfosfatapplikasjon2. En vanlig musemodell er anvendelsen av kalsiumfosfat (CaPO4) til adventitia av infrarenal abdominal aorta, som er kostnadseffektiv og ikke krever genetisk modifisering.
Direkte periaortisk påføring av CaCl2 på halspulsåren hos kaniner for å indusere aneurysmal forandring ble opprinnelig rapportert av Gertz et al.3 og ble senere brukt på abdominale aortas hos mus. Modellen ble utviklet av Yamanouchi og medarbeidere for å akselerere aortautvidelsen ved å bruke CaPO 4-krystaller hos mus4. Infiltrasjon av CaPO4 i mus aorta rekapitulerer mange patologiske egenskaper observert i humane AAA, inkludert dyp makrofaginfiltrasjon, ekstracellulær matriksnedbrytning og kalsiumavsetning. Risikofaktorene for human AAA, som hyperlipidemi, øker også CaPO4-indusert AAA hos mus5. I motsetning til AngII perfusjonsindusert AAA hos ApoE-/- eller LDLR-/– mus, forekommer CaPO 4-indusert AAA i infrarenal aortaregion, som etterligner human AAA. For tiden har denne metoden blitt mye brukt for å vurdere følsomhet for AAA-utvikling hos genmodifiserte mus og evaluere anti-AAA-effektene av legemidler 6,7.
Periaortisk bruk av CaPO4 er en robust tilnærming for å indusere AAA hos mus. Flere studier har brukt CaPO4-modellen og konsekvent rapportert at dette er en rask og reproduserbar metode for å studere AAA hos mus 7,9. Denne modellen anses å rekapitulere en del av egenskapene til human aortaaneurisme og gi mekanistisk innsikt i AAA-patogenesen, inkludert betennelse og ekstracellulær matriksnedbrytning.
Risikofa…
Denne forskningen ble støttet av finansiering fra National Natural Science Foundation of China (NSFC, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 og 91529203) og National Key R&D Program of China (2019YFA 0801600).
CaCl2 | MECKLIN | C805225 | |
NaCl | Biomed | SH5001-01 | |
PBS | HARVEYBIO | MB5051 | |
Small animal ventilator | RWD | H1550501-012 |