Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Biology
Click here for the English version

Biology

Méthode d’élevage à la main pour les ouistitis en bas âge

Published: June 9, 2023 doi: 10.3791/65296
Automatic Translation
1,2, 1, 1,2, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1,2, 1,2, 1,2, 1, 1,3, 1,4, 1,2,4, 1,2,4
1Department of Neurology of the Second Affiliated Hospital and Interdisciplinary Institute of Neuroscience and Technology, School of Medicine, Zhejiang University, 2Key Laboratory of Biomedical Engineering of Ministry of Education, College of Biomedical Engineering and Instrument Science, Zhejiang University, 3Rehabilitation Medicine Center, Rehabilitation & Sports Medicine Research Institute of Zhejiang Province, Department of Rehabilitation Medicine, Zhejiang Provincial People’s Hospital, Affiliated People’s Hospital, Hangzhou Medical College, 4NHC and CAMS Key Laboratory of Medical Neurobiology, MOE Frontier Science Center for Brain Science and Brain-Machine Integration, School of Brain Science and Brain Medicine, Zhejiang University

Summary

Nous décrivons ici une méthode d’élevage à la main pour élever des bébés ouistitis dans un incubateur animal. Cette méthode augmente considérablement le taux de survie des bébés ouistitis, ce qui permet d’étudier le développement des bébés ouistitis ayant des antécédents génétiques similaires élevés dans différents environnements postnataux.

Abstract

Le ouistiti commun (Callithrix jacchus) est un petit singe du Nouveau Monde très social avec des taux de reproduction élevés, qui s’est avéré être un modèle de primate non humain convaincant pour la recherche biomédicale et neuroscientifique. Certaines femelles donnent naissance à des triplés ; Cependant, les parents ne peuvent pas tous les élever. Pour sauver ces nourrissons, nous avons mis au point une méthode d’élevage à la main pour élever les ouistitis nouveau-nés. Dans ce protocole, nous décrivons la formule de l’aliment, le moment de l’alimentation, la configuration de la température et de l’humidité, ainsi que l’adaptation des nourrissons élevés à la main à l’environnement de la colonie. Cette méthode d’élevage à la main augmente considérablement le taux de survie des bébés ouistitis (sans élevage à la main : 45 % ; avec élevage à la main : 86 %) et offre la possibilité d’étudier le développement des bébés ouistitis ayant des antécédents génétiques similaires élevés dans différents environnements postnatals. Comme la méthode est pratique et facile à utiliser, nous prévoyons qu’elle pourrait également être appliquée à d’autres laboratoires travaillant avec des ouistitis communs.

Introduction

Le ouistiti commun (Callithrix jacchus) est un petit singe arboricole du Nouveau Monde originaire d’Amérique du Sud et d’Amérique centrale. L’utilisation des ouistitis dans la recherche biomédicale a connu une croissance rapide au cours des dernières décennies en raison de plusieurs avantages clés des ouistitis par rapport aux autres primates non humains (PSN), notamment leur taille corporelle plus petite, leur manipulation et leur reproduction plus faciles en captivité, leur temps de gestation plus court, leur maturation sexuelle plus précoce et leur réduction des risques zoonotiques 1,2,3,4,5,6 . Le ouistiti commun a une structure cérébrale et une fonction cérébrale similaires à celles des humains et affiche un riche répertoire de vocalisations et un comportement hautement social avec des émotions riches. Il s’agit d’un modèle de PSN convaincant pour différents types d’études en neurosciences, telles que les études sur le traitement sensoriel 7,8,9,10,11,12,13,14, la communication vocale 15,16,17,18,19, les modèles de lésions de la moelle épinière 20,21,22,23, la maladie de Parkinson 24,25,26,27,28 et les maladies liées à l’âge 29. Comparé à d’autres PSN, le ouistiti commun a un taux de reproduction relativement élevé, ce qui est potentiellement utile pour la modification transgénique30,31,32. Ce primate est également largement utilisé en pharmacologie, en angiographie et dans les études sur les agents pathogènes et le système immunitaire 33,34,35,36,37,38,39. Cependant, l’offre de ouistitis reste très limitée, notamment en Chine, et ne peut répondre aux besoins croissants de la recherche scientifique.

Dans les colonies de ouistitis, les animaux adultes sont nourris une ou deux fois par jour, et quelques institutions modifient le régime alimentaire des ouistitis juvéniles40. Généralement, les ouistitis en bas âge s’agrippent fermement au corps du père ou des frères et sœurs aînés pour les soins quotidiens et sont remis à la mère plusieurs fois par jour pour le lait. Certaines femelles ouistitis donnent naissance à des triplés, et dans ce cas, un ou deux nourrissons ne peuvent pas survivre en raison d’un manque de lait ; De plus, certains parents ne s’occupent pas de leurs nourrissons parce qu’ils manquent d’expérience en soins infirmiers ou pour d’autres raisons inconnues. C’est une grosse perte pour de nombreux laboratoires. Quelques études ont rapporté des méthodes de gestion de la nutrition des ouistitis adultes en captivité 40,41,42 utilisant des aliments et des formules avec différentes compositions de macronutriments, de vitamines et de minéraux, ainsi que différents protocoles d’alimentation pour l’enrichissement (purée, gélifiée, purifiée ou en conserve)2,41. Une étude antérieure a fait état d’une méthode d’élevage collaboratif pour les triplés de ouistitis43, dans laquelle les soignants prennent un bébé par jour, le nourrissent à la main tout au long de la journée et l’échangent contre un autre des triplés le lendemain. Bien que cette méthode permette aux nourrissons d’avoir des soins parentaux, elle nécessite un soignant expérimenté pour saisir le nourrisson du corps des parents tous les jours et demande beaucoup de travail. Jusqu’à présent, aucune étude n’a fait état d’une méthode détaillée d’élevage à la main, étape par étape, pour les ouistitis nouveau-nés.

L’objectif de la présente étude est de fournir une méthode d’élevage manuel pour ceux qui s’intéressent au développement des ouistitis, mais qui disposent de ressources limitées. Contrairement à l’ancienne méthode d’élevage collaboratif43, la méthode actuelle est une alternative qui perturbe moins la famille de l’enfant et qui est facile à apprendre. Sur la base des règles de base de l’allaitement maternel et de 5 ans de pratique, cet article décrit une méthode d’élevage manuel pour l’élevage des ouistitis qui comprend la préparation de la nourriture, un calendrier d’alimentation, la configuration de la température et de l’humidité de l’incubateur animal, ainsi que l’adaptation des bébés animaux à l’environnement de la colonie.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Toutes les procédures expérimentales ont été approuvées par le Comité d’utilisation et de soins aux animaux de l’Université du Zhejiang et ont suivi les directives des National Institutes of Health (NIH).

1. Logement et élevage44

  1. Réglez la pièce de la colonie avec un cycle jour/nuit de 12 h :12 h, la température à 26-28 °C et l’humidité relative à 45 %-55 %.
  2. Couplez les ouistitis mâles et femelles âgés de 2 à 6 ans et maintenez-les dans des cages (850 mm x 800 mm x 800 mm) avec suffisamment d’espace et d’air frais avec un système de ventilation 24 heures sur 24.
  3. Prévoyez des planches de repos, des balançoires, des perchoirs et des hamacs dans les cages.
  4. Nourrissez le couple de ouistitis avec de l’eau fraîche et 30 à 40 g de nourriture deux fois par jour, y compris des céréales, des œufs, des patates douces, du miel, des fruits, des légumes et des vers de farine.
    REMARQUE : Les vétérinaires et les expérimentateurs doivent inspecter l’animalerie au moins une fois par jour pour s’assurer que toute personne malade est diagnostiquée et traitée immédiatement.

2. Préparation avant la naissance des bébés ouistitis

  1. Soins pour les ouistitis gestantes
    REMARQUE : Le moment de la conception a été diagnostiqué par palpation (généralement 10 à 20 jours après le début de la période embryonnaire), et nous nous sommes également référés à l’histoire de la reproduction des sujets animaux.
    1. Fournir un espace plus grand et un minimum de perturbation humaine pour les couples reproducteurs.
    2. Nourrissez les couples reproducteurs avec des aliments supplémentaires tels que des vers de farine, des œufs, du yaourt et des fruits secs pour garantir la nutrition des femelles.
    3. Prenez soin des ouistitis gestantes et vérifiez-les fréquemment pour les préparer à leur parturition.
      NOTE : La période de gestation du ouistiti est estimée à 148 jours ± 4,3 jours45.
  2. Préparez les articles suivants : une couveuse pour animaux (855 mm [L] x 470 mm [L] x 440 mm [H]), des serviettes jetables (tailles M/L), des lingettes pour bébés, des jouets en peluche (figure 1A), des rouleaux jouets (figure 1B), des cadres d’escalade (figure 1B), des couvertures (10 cm х 10 cm, figure 1C) et une balance électronique (précision de 0,2 g, figure 1F).
    REMARQUE : Pour éviter que les animaux ne pendent, les jouets en peluche ne doivent pas avoir de structures en boucle.
  3. Préparation d’aliments et d’appareils d’alimentation
    1. Préparez les articles suivants : lait maternisé (pour les enfants de 0 à 12 mois), pâte de riz pour bébé (pour les enfants de 0 à 6 mois), bouilloire électrique, bécher (100 ml), coussin chauffant, plat de pesée en plastique (80 mm x 80 mm x 22 mm, figure 1D), tubes à centrifuger stériles (50 ml), seringues stériles jetables (1 à 5 ml), injecteurs intraveineux (pour tétines d’alimentation sur mesure) (figure 1E), et des écouvillons (80-100 cm).
      REMARQUE : Pour fabriquer une tétine pour l’alimentation, une incision est faite à 1 cm de l’extrémité d’un injecteur intraveineux attaché à une seringue (Figure 1E).
  4. Préparation du formulaire d’enregistrement
    1. Préparez un formulaire, généralement de plusieurs pages, pour chaque bébé ouistiti afin d’y consigner des informations de base telles que le nom, la date de naissance, le poids à la naissance, les parents, d’autres informations de base d’intérêt telles que la circonférence de la tête et la longueur de la queue, des informations sur la reproduction telles que la date et l’heure de reproduction, la quantité (mL) de la prise alimentaire, l’état de défécation (oui/non, dur/lâche), ainsi que la température et l’humidité de l’incubateur.
      REMARQUE : Habituellement, le poids corporel est mesuré et enregistré deux fois par jour, une fois avant le premier repas et une fois avant le dernier repas.

Figure 1
Figure 1 : Photos des articles dans l’incubateur et des outils et accessoires d’alimentation. a) Jouets en peluche ; (B) les portiques à rouleaux et les structures d’escalade jouets ; (C) couverture ; (D) plat de pesée en plastique ; (E) injecteur intraveineux et seringue muni d’une tétine d’alimentation sur mesure ; (F) balance électronique ; (G) soignant avec équipement de protection individuelle. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

3. Procédure d’élevage à la main

  1. Nettoyez et stérilisez la pièce avant la date d’échéance.
    1. Vaporisez de l’acide hypochloreux ou de l’alcool éthylique à 75 % sur le sol et la table, laissez agir pendant 30 s, puis essuyez la table et passez la serpillière.
  2. Réglez la température de l’incubateur à 35 °C et l’humidité à 40 %. Habituellement, pour simuler la température de base requise par les bébés ouistitis, comme le montre le tableau 1 , avant le jour postnatal 14 (P14), maintenir la température de l’incubateur à 35 °C, et à partir de P15, baisser la température de 0,5 °C tous les 3 jours. Maintenez l’humidité à 40 % à 45 % à l’intérieur de l’incubateur, qui est proche de l’humidité de la colonie et garde la fourrure des nourrissons au sec.
  3. Carrelez un tampon à couches jetable pour couvrir le châssis de l’incubateur.
  4. Pour minimiser le stress des nourrissons, mettez quelques couvertures et peluches dans l’incubateur avant d’introduire les bébés ouistitis, qui ont tendance à imiter les ouistitis adultes.
    REMARQUE : Les couvertures et les peluches sont placées dans la cage d’accueil des couples reproducteurs pendant 1 jour avant utilisation.
  5. Mettez les bébés ouistitis dans l’incubateur et placez-les sur les peluches une fois qu’ils sont séparés de leurs parents dans la cage de la maison.
    REMARQUE : Pour éviter l’isolement social et en accord avec le bien-être des animaux, généralement, deux nourrissons sont choisis ensemble pour l’éducation à la main.
    1. Portez un équipement de protection individuelle (EPI, figure 1G) stérilisé avant de l’alimenter.
    2. Réchauffez quelques couvertures à 35 °C.
    3. Tenez doucement le bébé ouistiti avec des couvertures chaudes et obtenez le poids de l’animal comme poids de naissance.
    4. Transférez le bébé ouistiti dans l’incubateur avec des couvertures chaudes.
    5. Prenez des enregistrements, comme mentionné à l’étape 2.4.
  6. Mélangez les ingrédients alimentaires et nourrissez le bébé ouistiti.
    1. Dissoudre 5 g de lait maternisé dans 30 mL d’eau bouillie à 50 °C dans un tube à centrifuger stérile de 50 mL.
      REMARQUE : Les ouistitis infantiles à différents âges postnataux ont besoin de recettes alimentaires différentes. Le tableau 2 comprend les différentes doses de lait maternisé, de pâte de riz et d’eau aux âges postnataux de P1 à P60. La posologie est généralement suffisante pour 1 jour. Mixez les ingrédients avant le premier repas et conservez le reste des aliments dans un réfrigérateur à 4 °C. Chauffez les aliments à 30-35 °C pour chaque repas.
    2. Prenez 1 mL de nourriture avec une seringue de 1 mL et couvrez la seringue avec une tétine d’alimentation faite sur mesure.
      REMARQUE : Sélectionnez une seringue de la bonne taille, en vous référant au tableau 2.
    3. Maintenez la température des aliments à 30-35 °C avec le coussin chauffant.
    4. Réchauffez les mains avant de le nourrir et tenez doucement le bébé ouistiti avec une couverture chaude dans une main dans l’incubateur.
    5. Placez la tétine d’alimentation dans la bouche du bébé ouistiti pendant que la tête du bébé ouistiti est doucement tenue avec le pouce et l’index de la main qui tient le soignant, et poussez lentement la nourriture hors de la seringue à une vitesse constante.
      REMARQUE : Ne poussez jamais la nourriture plus vite que le bébé ouistiti n’avale. Pousser vite peut provoquer un étouffement, avec de la nourriture sortant du nez par la gorge. Cela peut provoquer des maladies telles que la pneumonie, qui peut même entraîner la mort. Si la nourriture déborde, le bébé ouistiti aura du mal. Chaque fois que cela se produit, arrêtez de nourrir et essuyez soigneusement la nourriture du visage de l’animal. Continuez à vous nourrir une fois que le ouistiti a commencé à se comporter normalement.
  7. Une fois que le bébé ouistiti a consommé une quantité appropriée de nourriture, essuyez son anus avec un coton-tige avec de l’eau tiède, ce qui nettoie l’anus et favorise la défécation.
  8. Observez l’animal pendant quelques minutes et vérifiez la locomotion et la défécation de l’animal.
  9. Notez l’heure d’alimentation, la quantité (mL) de nourriture ingérée, l’état de défécation (oui/non, dur/lâche) ainsi que la température et l’humidité de l’incubateur.
    REMARQUE : Enveloppez le bébé ouistiti avec des couvertures chaudes pendant la pesée pour éviter que le bébé n’ait froid ou ne se blesse.
  10. Gardez le châssis de l’incubateur propre en ramassant les matières fécales solides ou en passant à un nouveau tampon à couches jetable.
  11. Avant P50, nourrissez les bébés ouistitis en suivant les étapes 3.3 à 3.7 et utilisez la dose d’ingrédients alimentaires ainsi que la durée et la fréquence d’alimentation indiquées dans le tableau 2.
  12. À partir de P50, le bébé ouistiti est généralement prêt à être mangé volontairement.
    1. Utilisez des boîtes de pesée en plastique au lieu de seringues. Préparez les aliments en mélangeant les ingrédients alimentaires directement dans le plat ; se reporter au tableau 2 pour connaître les montants.
    2. Mettez le plat de nourriture dans l’incubateur et fixez le fond au cas où il serait retourné. Observez pendant quelques minutes pour vous assurer que les bébés ouistitis mangent la nourriture. Pour les premières fois, guidez l’animal pour qu’il mange volontairement en l’attirant vers le plat de nourriture et en guidant sa bouche pour qu’elle touche la nourriture plusieurs fois.
      REMARQUE : Ne laissez jamais le nez de l’animal toucher la nourriture. Habituellement, l’animal apprend à manger volontairement en 1 jour.

4. Acclimatation avant le retour des bébés ouistitis à la colonie

REMARQUE : Habituellement, l’élevage à la main est terminé lorsque les bébés ouistitis apprennent à manger par eux-mêmes. Il y a quelques procédures d’adaptation à effectuer avant qu’ils ne soient ramenés dans la cage d’origine de la colonie de ouistitis.

  1. Déplacez les ouistitis de l’incubateur de l’animal vers de petites cages (45 cm x 45 cm x 40 cm), qui ressemblent à une cage à oiseaux. Accrochez une bouteille d’eau (50 ml) sur chaque petite cage.
  2. Transférez les petites cages avec les bébés ouistitis à la colonie et placez-les près de la cage familiale.
  3. Nourrissez les bébés ouistitis séparément avec un plat de pesée en plastique pendant 1 semaine, en mélangeant la nourriture selon les recettes quotidiennes préparées pour toute la colonie.
  4. Enregistrez le poids corporel et l’état de défécation une fois par jour.

5. Retour des bébés ouistitis dans la cage familiale

REMARQUE : Après avoir vécu dans la petite cage pendant 7 à 10 jours, les bébés ouistitis s’adaptent généralement bien à l’environnement de la colonie et ne présentent plus d’anxiété.

  1. Remettez les bébés ouistitis dans la cage familiale le matin.
  2. Observez les animaux pendant au moins 15 minutes pour vous assurer qu’il n’y a pas de morsures, de combats ou de poursuites entre les membres de la famille et les nouveaux arrivants.
    REMARQUE : Si vous mordez, vous battez ou vous poursuivez, séparez le bébé des autres dès que possible ; et essayez de rendre l’enfant à sa famille une fois de plus un autre jour. Si l’échec se reproduit, choisissez une autre famille pour l’accueillir. Les groupes familiaux qui ont une riche expérience parentale sont le premier choix pour le placement en famille d’accueil. Mettez une peluche dans une nouvelle cage pour accompagner le bébé singe si aucune famille ne l’accepte.
  3. Arrêtez de nourrir les bébés ouistitis séparément et commencez à les nourrir en utilisant le régime alimentaire de la colonie.
  4. Portez une attention particulière à l’activité des bébés ouistitis pendant 1 semaine après leur retour dans la cage familiale.
  5. Mesurez le poids corporel des bébés ouistitis tous les 2 jours et notez-les. S’ils perdent du poids, donnez-leur des aliments nutritifs supplémentaires à l’aide d’une seringue dans la cage familiale.
  6. Assurer des soins quotidiens aux bébés ouistitis, comme aux ouistitis de la colonie.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Le poids corporel est un indice clé du développement corporel de l’animal et est utilisé comme indicateur de l’état de santé des ouistitis dans ce protocole. Dans ce travail, le poids corporel des animaux élevés à la main augmentait progressivement avec l’âge (Figure 2A, n = 16), similaire au poids des nouveau-nés dans une étude antérieure46. Afin de minimiser le dérangement des familles reproductrices de la colonie, nous n’avons pas pesé les bébés ouistitis de la colonie tous les jours. Nous avons obtenu les poids des animaux élevés par leurs parents 1 mois après la naissance et plus tard, et ceux-ci ont été comparés aux poids des nourrissons élevés à la main aux mêmes âges. Il n’y avait pas de différences significatives dans le poids corporel entre les nourrissons élevés par leurs parents et les nourrissons élevés à la main (P30, groupe élevé à la main, 52,25 g ± 2,10 g, n = 18 ; groupe de colonie, 57,34 g ± 2,77 g, n = 7 ; t = −1,3417, P = 0,1928 ; P60, groupe d’élevage manuel, 91,76 g ± 3,44 g, groupe de colonie, 93,06 g ± 4,68 g ; t = −0,2019, P = 0,8424 ; Test t de l’élève) (Figure 2B).

Figure 2
Figure 2 : Poids corporel des ouistitis élevés à la main et de ceux élevés par leurs parents dans la colonie. (A) Le poids corporel de chaque nourrisson élevé à la main. Les lignes grises indiquent le poids corporel individuel et la courbe orange indique la moyenne de la population. (B) Comparaison du poids corporel entre les nourrissons élevés à la main (orange) et les nourrissons élevés par leurs parents (vert) à P30 et P60. Les cercles gris représentent les individus. Les données présentées sous la forme de la moyenne ± MEB. ns n’indiquent aucune différence significative. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Tableau 1. Configuration de la température dans l’incubateur animal. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.

Tableau 2 : Recettes d’alimentation. Les colonnes sous « ingrédients alimentaires » indiquent la recette du lait pour 1 jour. Par exemple, aux jours postnataux 1 à 14, nous mélangeons 5 g de lait en poudre pour bébé et 30 ml d’eau avant le premier repas et prenons 0,5 à 1,5 ml de ce lait à chaque fois pour la tétée. Les dosages de « lait en poudre pour bébé » et de « pâte de riz » sont pour les formes en poudre. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Le ouistiti commun est un modèle de PSN très utile pour la recherche biomédicale et en neurosciences. Cependant, les ressources en ouistitis sont trop limitées pour répondre aux besoins en croissance rapide. Dans ce travail, nous avons développé une méthode d’élevage à la main qui non seulement augmente le taux de survie des bébés ouistitis, mais offre également la possibilité d’étudier leur développement postnatal. Cette méthode d’élevage à la main est pratique et facile à apprendre et est donc facilement applicable à d’autres laboratoires travaillant avec des ouistitis communs.

Certaines malformations congénitales se développent généralement au cours des 2 premières semaines de vie. Jusqu’à présent, nous avons identifié plusieurs cas de ouistitis nouveau-nés présentant des défauts innés sur la paupière, le poumon, l’intestin et le cerveau, et ils survivent rarement jusqu’à P14. Par conséquent, P1-14 est une période critique pour le dépistage des ouistitis nouveau-nés en bonne santé qui peuvent être élevés par la méthode d’élevage à la main. De plus, si les ouistitis sont abandonnés du corps de leurs parents en raison de la négligence ou du manque de lait, ils ne peuvent pas survivre. Ainsi, la méthode d’élevage à la main contribue à leur sauver la vie. Dans ce travail, sans élevage à la main, le taux de survie était de 45 % (n = 13/29), et il est passé à 86 % (n = 25/29) après l’application de la méthode d’élevage manuel.

Il y a plusieurs points critiques à noter. Les soignants doivent être patients pendant l’alimentation ; Pousser la seringue trop vite n’est pas bon, car cela ne permet pas aux bébés ouistitis d’avaler, ce qui peut entraîner un étouffement ou un iléus et, par conséquent, altérer le système respiratoire ou le système digestif des animaux. Les soignants doivent être doux et silencieux pendant l’alimentation afin de minimiser le stress des bébés animaux, car le stress pourrait affecter considérablement le microbiome intestinal et est associé à une diarrhée chronique chez les ouistitis47,48. Pendant l’élevage à la main, toutes les personnes proches des bébés ouistitis doivent se comporter avec douceur tout au long de l’élevage. Parfois, l’ouverture précipitée de la porte de l’incubateur produit des sons soudains et forts, ce qui peut effrayer les nourrissons et entraîner une réaction de stress.

Le poids corporel des animaux doit être surveillé tous les jours, car le poids corporel est un indicateur clé de l’état de santé d’un animal. La sous-alimentation, la suralimentation, la malnutrition ou la dyspepsie peuvent être détectées rapidement par un changement de poids corporel. Il a déjà été rapporté que les ouistitis de faible poids corporel sont plus sujets aux maladies osseuses et gastro-intestinales concomitantes49. En général, le poids corporel des ouistitis est resté constant au stade P1-5 et a augmenté progressivement de 1 à 4 g par jour lors de l’utilisation de la méthode d’élevage à la main. À partir de P5, si aucune augmentation ou perte progressive de poids corporel sur 2 jours n’est observée, les soigneurs doivent être vigilants et vérifier les ingrédients alimentaires, ainsi que la température corporelle et l’état d’excrétion des animaux. Il est utile d’ajouter des probiotiques dans ce cas.

Il n’est pas nécessaire de nourrir les animaux pendant la nuit. Nous avons essayé de nourrir les bébés ouistitis toutes les 2 h à 4 h 24 heures sur 24 et nous avons constaté que cela ne favorisait pas la croissance des bébés ouistitis (données non présentées). Le manque d’exercice physique adéquat ou la suralimentation pourraient induire des syndromes métaboliques, tels que l’obésité, qui a été liée à la dyslipidémie, à l’altération du métabolisme du glucose et à la résistance à l’insuline chez les ouistitis50,51,52. Les nourrissons doivent être maintenus au chaud pendant l’alimentation et la pesée, surtout dans les premiers jours après la naissance. Nous avons constaté qu’un nourrisson avait la diarrhée après avoir attrapé un rhume ; La diarrhée affaiblit rapidement la vitalité de l’animal et réduit le poids corporel.

La force de préhension et la température corporelle sont les principaux indicateurs de l’état de santé des bébés ouistitis, et ceux-ci doivent être surveillés attentivement. Chaque fois qu’un bébé ouistiti est nourri, il s’agrippe à la couverture ou au doigt de la mangeoire. La force de préhension est généralement affaiblie lorsque l’animal a la diarrhée. Une fois que cela se produit, il faut ajouter des probiotiques de la taille d’un pois à la nourriture et nourrir le nourrisson affecté pendant 3 jours jusqu’à ce que la diarrhée disparaisse. Si la diarrhée dure plus de 3 jours, il faut ajouter de la poudre de montmorillonite au lieu de probiotiques. En revanche, si le nourrisson est constipé, il faut s’essuyer doucement l’anus avec un coton-tige trempé dans de l’eau tiède pour favoriser la défécation, et le lactulose doit être utilisé si nécessaire. De plus, la température corporelle du bébé ouistiti est généralement plus élevée que celle des humains. Si la température de l’animal est inférieure à la normale, ce qui est souvent associé à une force de préhension affaiblie, le comportement de l’animal doit être surveillé de près et l’alimentation ajustée en conséquence.

Lorsque les bébés ouistitis commencent à grimper, ils doivent être équipés de structures d’escalade et de rouleaux jouets dans l’incubateur sous la surveillance de l’éleveur. Les animaux sont autorisés à pratiquer l’escalade avant et après chaque repas à partir de P25. À P50, les bébés ouistitis peuvent bien grimper et sauter, ce qui est une condition préalable à l’alimentation volontaire. Les bébés ouistitis aiment grincer des dents en mordant des couvertures, des jouets en peluche ou des serviettes jetables, mais ceux-ci peuvent former de petites boucles qui menacent leur vie en raison de l’auto-étranglement. Par conséquent, les pièces et le fil déchirés doivent être nettoyés rapidement pour éviter les blessures ou les décès.

Parfois, la procédure d’alimentation peut être légèrement modifiée en raison de différences d’appétit, de vitalité et de conditions environnementales. Si un bébé ouistiti est assez fort, il commencera probablement à pratiquer l’escalade avant P25, apprendra à manger volontairement avant P50, et retournera même dans la famille avant P60. Pendant ce temps, nous abaissons la température de 0,5 °C dans l’incubateur tous les jours ou tous les 2 jours afin que le bébé ouistiti puisse s’adapter à la même température que celle de la colonie avant de retourner dans la cage. Si un bébé ouistiti a un manque d’appétit pendant une certaine période, il faut fournir moins de nourriture par repas, mais à une fréquence plus élevée par jour, et l’incubateur doit être maintenu plus chaud que la colonie pendant une période plus longue. Dans la présente étude, 88,9 % (n = 16/18) des nourrissons ont été acceptés avec succès par les parents biologiques, 11,1 % (n = 2/18) ont été accueillis par d’autres familles et aucun n’a été rejeté.

L’étude des ouistitis juvéniles ayant des structures familiales différentes révèle des différences dans leur développement social et mental ; En effet, les interactions sociales entre parents et enfants et entre pairs au cours du développement peuvent sculpter le fonctionnement socialdu cerveau 53,54,55. Par conséquent, le choix d’un ou deux animaux pour l’élevage à la main dépend des objectifs de l’expérience. Notre laboratoire élève généralement deux nourrissons à la main, si possible, pour répondre aux exigences en matière de bien-être animal et aider davantage de nourrissons à survivre. La méthode d’élevage collaboratif pour les triplés de ouistitis43 est également un bon choix. Les ouistitis élevés à la main avec des interactions parentales limitées peuvent ne pas convenir à des expériences pour l’étude du comportement social.

En conclusion, la méthode d’élevage à la main de la présente étude fournit des instructions sur la façon de nourrir les bébés ouistitis de P1 à P60. Avec ce protocole, il faut ~15 min à un éleveur expérimenté pour nourrir manuellement un bébé ouistiti. Le succès de l’opération dépend de plusieurs facteurs, notamment de la bonne température de la nourriture et de l’environnement, du temps et de la technique d’alimentation, ainsi que de l’excrétion des animaux après les repas. Cette méthode est réalisable et facile à apprendre. Il a été continuellement optimisé avec 5 ans de pratique. Cette méthode peut être appliquée à d’autres laboratoires travaillant avec des ouistitis communs.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Les auteurs n’ont aucun conflit d’intérêts à divulguer.

Acknowledgments

Les auteurs tiennent à remercier Mingxuan Li pour son édition de la grammaire et le polissage de la première version de ce manuscrit. Ce travail a été soutenu par la Fondation chinoise des sciences naturelles de la province du Zhejiang (LD22H090003) ; la Fondation des sciences naturelles de Chine (32170991 et 32071097), STI2030-Grands projets 2021ZD0204100 (2021ZD0204101) et 2022ZD0205000 (2022ZD0205003) ; et le MOE Frontier Science Center for Brain Science & Brain-Machine Integration, Université du Zhejiang.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
animal incubator RCOM, Korea MX - BL600N, 855 mm (W) x 470 mm (L) x 440 mm (H)
baby milk powder Meadjohnson, America suitable for 0-12 months of age, executive standard - GB25596
baby rice paste HEINZ, China suitable for 0-6 months of age, executive standard - GB10769
baby wipes babycare, China soft
beaker ShuNiu, China 100 mL
blankets Grace, China 10 cm × 10 cm, soft
climbing frame WowWee, China firm and no small circular structures
disposable diaper pads Hi Health Pet, China either M or L size
disposable sterile syringe Cofoe, China 1 mL, 2.5 mL, 3 mL, 5 mL, 10 mL
electronic scale YouSheng, China measuring range from 0 to 6,000 g with precision of 0.2 g
intravenous injector HD, China 0.55 mm x 20 mm needle
kettle FGA, China warm-keeping kettle 1,500 mL
lactulose BELCOL, China to solve constipation
plastic weighing dish SKSLAB, China 80 mm x 80 mm x 22 mm, used as a bowl
plush toy Lebiyou, China soft
probiotic powder G-Pet, China to regulate gastrointestinal environment
sterile centrifuge tube NEST, China 50 mL
swab OYEAH, China 80 - 100 mm
toy roller WowWee, China firm and no small circular structures

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Miller, C. T., et al. Marmosets: A neuroscientific model of human social behavior. Neuron. 90 (2), 219-233 (2016).
  2. Ross, C. N., Colman, R., Power, M., Tardif, S. Marmoset metabolism, nutrition, and obesity. ILAR Journal. 61 (2-3), 179-187 (2020).
  3. Kishi, N., Sato, K., Sasaki, E., Okano, H. Common marmoset as a new model animal for neuroscience research and genome editing technology. Development, Growth & Differentiation. 56 (1), 53-62 (2014).
  4. Prins, N. W., et al. Common marmoset (Callithrix jacchus) as a primate model for behavioral neuroscience studies. Journal of Neuroscience Methods. 284, 35-46 (2017).
  5. Tokuno, H., Watson, C., Roberts, A., Sasaki, E., Okano, H. Marmoset neuroscience. Neuroscience Research. 93, 1-2 (2015).
  6. Hodges, J. K., Henderson, C., Hearn, J. P. Relationship between ovarian and placental steroid production during early pregnancy in the marmoset monkey (Callithrix jacchus). Journal of Reproduction and Fertility. 69 (2), 613-621 (1983).
  7. Troilo, D., Judge, S. J. Ocular development and visual deprivation myopia in the common marmoset (Callithrix jacchus). Vision Research. 33 (10), 1311-1324 (1993).
  8. Mitchell, J. F., Leopold, D. A. The marmoset monkey as a model for visual neuroscience. Neuroscience Research. 93, 20-46 (2015).
  9. Hung, C. C., et al. Functional MRI of visual responses in the awake, behaving marmoset. NeuroImage. 120, 1-11 (2015).
  10. Gao, L., Kostlan, K., Wang, Y., Wang, X. Distinct subthreshold mechanisms underlying rate-coding principles in primate auditory cortex. Neuron. 91 (4), 905-919 (2016).
  11. Gao, L., Wang, X. Subthreshold activity underlying the diversity and selectivity of the primary auditory cortex studied by intracellular recordings in awake marmosets. Cerebral Cortex. 29 (3), 994-1005 (2019).
  12. Gao, L., Wang, X. Intracellular neuronal recording in awake nonhuman primates. Nature Protocols. 15, 3615-3631 (2020).
  13. Wang, X., et al. Corticofugal modulation of temporal and rate representations in the inferior colliculus of the awake marmoset. Cerebral Cortex. 32 (18), 4080-4097 (2022).
  14. Wang, X., et al. Selective corticofugal modulation on sound processing in auditory thalamus of awake marmosets. Cerebral Cortex. 33 (7), 3372-3386 (2022).
  15. Kajikawa, Y., et al. Coding of FM sweep trains and twitter calls in area CM of marmoset auditory cortex. Hearing Research. 239 (1-2), 107-125 (2008).
  16. Choi, D., Bruderer, A. G., Werker, J. F., et al. Sensorimotor influences on speech perception in pre-babbling infants: Replication and extension of Bruderer et al. Psychonomic Bulletin & Review. 26 (4), 1388-1399 (2019).
  17. Eliades, S. J., Miller, C. T. Marmoset vocal communication: Behavior and neurobiology. Developmental Neurobiology. 77 (3), 286-299 (2017).
  18. Roy, S., Zhao, L., Wang, X. Distinct neural activities in premotor cortex during natural vocal behaviors in a New World primate, the common marmoset (Callithrix jacchus). Journal of Neuroscience. 36 (48), 12168-12179 (2016).
  19. Simões, C. S., et al. Activation of frontal neocortical areas by vocal production in marmosets. Frontiers in Integrative Neuroscience. 4, 123 (2010).
  20. Iwanami, A., et al. Transplantation of human neural stem cells for spinal cord injury in primates. Journal of Neuroscience Research. 80 (2), 182-190 (2005).
  21. Schorscher-Petcu, A., Dupré, A., Tribollet, E. Distribution of vasopressin and oxytocin binding sites in the brain and upper spinal cord of the common marmoset. Neuroscience Letters. 461 (3), 217-222 (2009).
  22. Bowes, C., Burish, M., Cerkevich, C., Kaas, J. Patterns of cortical reorganization in the adult marmoset after a cervical spinal cord injury. Journal of Comparative Neurology. 521 (15), 3451-3463 (2013).
  23. Kondo, T., et al. Histological and electrophysiological analysis of the corticospinal pathway to forelimb motoneurons in common marmosets. Neuroscience Research. 98, 35-44 (2015).
  24. Nash, J. E., et al. Antiparkinsonian actions of ifenprodil in the MPTP-lesioned marmoset model of Parkinson's disease. Experimental Neurology. 165 (1), 136-142 (2000).
  25. van Vliet, S. A., et al. Neuroprotective effects of modafinil in a marmoset Parkinson model: Behavioral and neurochemical aspects. Behavioural Pharmacology. 17 (5-6), 453-462 (2006).
  26. van Vliet, S. A., Vanwersch, R. A., Jongsma, M. J., Olivier, B., Philippens, I. H. Therapeutic effects of Delta9-THC and modafinil in a marmoset Parkinson model. European Neuropsychopharmacology. 18 (5), 383-389 (2008).
  27. Philippens, I. H., t Hart, B. A., Torres, G. The MPTP marmoset model of parkinsonism: a multi-purpose non-human primate model for neurodegenerative diseases. Drug Discovery Today. 15 (23-24), 985-990 (2010).
  28. Santana, M. B., et al. Spinal cord stimulation alleviates motor deficits in a primate model of Parkinson disease. Neuron. 84 (4), 716-722 (2014).
  29. Tardif, S. D., Mansfield, K. G., Ratnam, R., Ross, C. N., Ziegler, T. E. The marmoset as a model of aging and age-related diseases. ILAR Journal. 52 (1), 54-65 (2011).
  30. Sasaki, E., et al. Generation of transgenic non-human primates with germline transmission. Nature. 459, 523-527 (2009).
  31. Sasaki, E. Prospects for genetically modified non-human primate models, including the common marmoset. Neuroscience Research. 93, 110-115 (2015).
  32. Park, J. E., Sasaki, E. Assisted reproductive techniques and genetic manipulation in the common marmoset. ILAR Journal. 61 (2-3), 286-303 (2020).
  33. Smith, D., Trennery, P., Farningham, D., Klapwijk, J. The selection of marmoset monkeys (Callithrix jacchus) in pharmaceutical toxicology. Laboratory Animals. 35 (2), 117-130 (2001).
  34. Smith, T. E., Tomlinson, A. J., Mlotkiewicz, J. A., Abbott, D. H. Female marmoset monkeys (Callithrix jacchus) can be identified from the chemical composition of their scent marks. Chemical Senses. 26 (5), 449-458 (2001).
  35. Jagessar, S. A., et al. Induction of progressive demyelinating autoimmune encephalomyelitis in common marmoset monkeys using MOG34-56 peptide in incomplete freund adjuvant. Journal of Neuropathology and Experimental Neurology. 69 (4), 372-385 (2010).
  36. Kap, Y. S., Laman, J. D., 't Hart, B. A. Experimental autoimmune encephalomyelitis in the common marmoset, a bridge between rodent EAE and multiple sclerosis for immunotherapy development. Journal of Neuroimmune Pharmacology. 5 (2), 220-230 (2010).
  37. Carrion, R., Patterson, J. L. An animal model that reflects human disease: The common marmoset (Callithrix jacchus). Current Opinion in Virology. 2 (3), 357-362 (2012).
  38. Jagessar, S. A., et al. Overview of models, methods, and reagents developed for translational autoimmunity research in the common marmoset (Callithrix jacchus). Experimental Animals. 62 (3), 159-171 (2013).
  39. Feng, Z., et al. Biologically excretable aggregation-induced emission dots for visualizing through the marmosets intravitally: Horizons in future clinical nanomedicine. Advanced Materials. 33 (17), 2008123 (2021).
  40. Goodroe, A., et al. Current practices in nutrition management and disease incidence of common marmosets (Callithrix jacchus). Journal of Medical Primatology. 50 (3), 164-175 (2021).
  41. Power, M. L., Koutsos, L. Chapter 4 - Marmoset nutrition and dietary husbandry. The Common Marmoset in Captivity and Biomedical Research. Marini, R., Wachtman, L., Tardif, S., Mansfield, K., Fox, J. , Academic Press. Cambridge, MA. 63-76 (2019).
  42. Gore, M. A., et al. Callitrichid nutrition and food sensitivity. Journal of Medical Primatology. 30 (3), 179-184 (2001).
  43. Hearn, J. P., Burden, F. J. Collaborative' rearing of marmoset triplets. Laboratory Animals. 13 (2), 131-133 (1979).
  44. Cao, X., et al. Effect of a high estrogen level in early pregnancy on the development and behavior of marmoset offspring. ACS Omega. 7 (41), 36175-36183 (2022).
  45. Watakabe, A., et al. Application of viral vectors to the study of neural connectivities and neural circuits in the marmoset brain. Developmental Neurobiology. 77 (3), 354-372 (2017).
  46. Takahashi, D. Y., et al. The developmental dynamics of marmoset monkey vocal production. Science. 349 (6249), 734-738 (2015).
  47. Malukiewicz, J., et al. The gut microbiome of exudivorous marmosets in the wild and captivity. Scientific Reports. 12 (1), 5049 (2022).
  48. Shigeno, Y., et al. Comparison of gut microbiota composition between laboratory-bred marmosets (Callithrix jacchus) with chronic diarrhea and healthy animals using terminal restriction fragment length polymorphism analysis. Microbiology and Immunology. 62 (11), 702-710 (2018).
  49. Baxter, V. K., et al. Serum albumin and body weight as biomarkers for the antemortem identification of bone and gastrointestinal disease in the common marmoset. PLoS One. 8 (12), e82747 (2013).
  50. Tardif, S. D., et al. Characterization of obese phenotypes in a small nonhuman primate, the common marmoset (Callithrix jacchus). Obesity. 17 (8), 1499-1505 (2009).
  51. Wachtman, L. M., et al. Differential contribution of dietary fat and monosaccharide to metabolic syndrome in the common marmoset (Callithrix jacchus). Obesity. 19 (6), 1145-1156 (2011).
  52. Power, M. L., Ross, C. N., Schulkin, J., Ziegler, T. E., Tardif, S. D. Metabolic consequences of the early onset of obesity in common marmoset monkeys. Obesity. 21 (12), E592-E598 (2013).
  53. Shimizu, K., et al. Peer-social response in 4 juvenile marmosets represented the emotional development traits depending on family structure. Neuroscience Research. 65, S244 (2009).
  54. Schultz-Darken, N., Braun, K. M., Emborg, M. E. Neurobehavioral development of common marmoset monkeys. Developmental Psychobiology. 58 (2), 141-158 (2016).
  55. Gultekin, Y. B., Hage, S. R. Limiting parental feedback disrupts vocal development in marmoset monkeys. Nature Communications. 8, 14046 (2017).

Tags

Méthode d’élevage à la main Bébés ouistitis Ouistiti commun Modèle de primate non humain Recherche biomédicale Recherche en neurosciences Nourrissons élevés à la main Taux de survie Formule de la nourriture Temps d’alimentation Configuration de la température Configuration de l’humidité Adaptation à l’environnement de la colonie Antécédents génétiques Environnements postnataux
Méthode d’élevage à la main pour les ouistitis en bas âge
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Sun, H., Li, R., Lin, Y., Cao, X.,… More

Sun, H., Li, R., Lin, Y., Cao, X., Fan, L., Sun, G., Xie, M., Zhu, L., Yu, C., Cai, R., Lyu, C., Wang, X., Zhang, Y., Bai, S., Qi, R., Tang, B., Jia, G., Li, X., Gao, L. Hand-Rearing Method for Infant Marmosets. J. Vis. Exp. (196), e65296, doi:10.3791/65296 (2023).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter