Monitoramento Actina Desmontagem com a Time-lapse Microscopia

Protocol

Construir uma câmara de fluxo, como mostrado no vídeo. Certifique-se que o selo parafilme é apertado e use lamínulas lavadas. Incubar agente de ligação de actina na câmara para '5-10. Bloco não-específicos sítios de ligação na lamela de vidro com uma proteína de bloqueio. Polimerizar actina no interior da câmara de fluxo em G-actina na polimerização buffer. Washout actina unpolymerized fluindo em tampão em excesso.