好中球は炎症性免疫応答のサイトに到着する最初のセルの一つです、そしてその機能とメカニズムをin vitroで広く研究されている。我々は、市販の分離媒体を用いて全血からヒト好中球を分離するために標準の密度勾配分離法を示しています。
好中球多形核顆粒球(PMN)はヒトおよび炎症性免疫応答のサイトに到着する最初のセルの中で最も豊富に存在する白血球である。炎症におけるそれらの重要な役割のために、このような運動、サイトカイン産生、貪食、および腫瘍細胞の戦闘などの好中球の機能は広範囲に研究されています。好中球が短命であり、コレクションの2-4時間以内に使用すべきである特に以来、好中球の特定の機能を特徴づけるために、他の血液細胞からそれらを分離する、クリーンで高速、かつ信頼性の高い方法は、in vitro試験が望ましい。ここで、我々は、ナトリウムmetrizoateとデキストラン500の混合物である市販の分離媒体を用いて全血からヒト好中球を分離するために標準の密度勾配分離法を示しています。手順は、密度勾配媒体上階層化全血を、遠心分離、好中球層の分離、および残存赤血球の溶解で構成されています。次いで、細胞を洗浄しカウント、および所望の濃度の緩衝液に再懸濁されている。正しく実行する場合、このメソッドは> 95%の生存率で> 95%の好中球のサンプルを得ることが示されている。
密度勾配分離法は、ナトリウムmetrizoateとデキストラン500の混合物を用いて全血からヒト好中球を分離するために使用されます。このメソッドは、フェランテとトーン(1980)による好中球を分離するために変更されたBoyum(1968)によって単核白血球分離法に基づいています。
ドナーから収集した後、全血は、EDTA、クエン酸、またはヘパリンで抗凝固することができます。彼らは短命なので、好中球は?…
NIH R01 HL56621から資金調達。