सूक्ष्म अवलोकन – परख दवा संवेदनशीलता (Mods) एक कम लागत, कम तकनीक तपेदिक के उच्च प्रदर्शन का पता लगाने (टीबी) और बहुऔषध प्रतिरोधी तपेदिक (MDRTB) के लिए उपकरण है. यह वीडियो MODs तरल मीडिया संस्कृति विधि का वर्णन करता है.
सक्रिय फुफ्फुसीय तपेदिक (टीबी) के साथ मरीजों को प्रति वर्ष 10-15 अन्य व्यक्तियों को संक्रमित, दोनों रोगी के इलाज और नए संक्रमण को रोकने के लिए आवश्यक सक्रिय टीबी निदान बना. इसके अलावा, प्रतिरोधी तपेदिक (MDRTB) बहुऔषध के उद्भव का मतलब है कि दवा प्रतिरोध का पता लगाने के दवा प्रतिरोधी उपभेदों के प्रसार को रोकने के लिए आवश्यक है कि. सूक्ष्म अवलोकन – परख दवा संवेदनशीलता (Mods) एक कम लागत, कम तकनीक टीबी और MDRTB के उच्च प्रदर्शन का पता लगाने के लिए उपकरण है. Mods परख तीन सिद्धांतों पर आधारित है: 1) माइकोबैक्टीरियम क्षयरोग (एमटीबी) ठोस 2 मीडिया पर से तरल मीडिया में तेजी से) बढ़ता सूक्ष्म एमटीबी विकास ठोस मीडिया पर कालोनियों की macroscopic उपस्थिति के लिए प्रतीक्षा की तुलना में तरल मीडिया में पहले पता लगाया जा सकता है, और वृद्धि की है कि एमटीबी की विशेषता है, अनुमति atypical माइक्रोबैक्टीरिया या कवक या बैक्टीरिया संदूषण 3) से प्रतिष्ठित MDRTB के साथ – साथ प्रत्यक्ष पता लगाने के लिए अनुमति देने के isoniazid और रिफैम्पिसिन दवाओं Mods परख में शामिल किया जा सकता है है, subculture प्रदर्शन करने के लिए की जरूरत है obviating एक अप्रत्यक्ष दवा संवेदनशीलता परीक्षण. प्रतिस्पर्धा वर्तमान निदान थूक धब्बा कम संवेदनशीलता के साथ, ठोस मीडिया, संस्कृति मौजूदा तरल मीडिया संस्कृति तरीकों के साथ बेहद उच्च लागत, और अप्रत्यक्ष दवा संवेदनशीलता MDRTB का पता लगाने के परीक्षण के लिए उपसंस्कृति करने की जरूरत के साथ निदान जब तक लंबी देरी के द्वारा बाधा उत्पन्न कर रहे हैं. इसके विपरीत, गैर मालिकाना MODs विधि टीबी और MDRTB के लिए एक उच्च संवेदनशीलता है, एक अपेक्षाकृत तेजी संस्कृति विधि है, MDRTB के लिए एक साथ दवा संवेदनशीलता परीक्षण प्रदान करता है, और टीबी के लिए परीक्षण के लिए बस के नीचे $ 3 पर सीमित संसाधनों वाली स्थितियों के लिए सुलभ है और MDRTB.
Mods परख सीमित संसाधनों वाली स्थितियों पर लक्षित है. पहली बार के लिए, Mods तपेदिक के तेजी से तरल संस्कृति का पता लगाने के लिए क्षमता लाता है और सीमित संसाधनों वाली स्थितियों के लिए बस के नीचे $ 3 परीक्षण प्रति प्रतिरोध…
हम तपेदिक विकास वीडियो समय चूक खंड के लिए शॉन Fitzwater और कारमेन Giannina लूना कोलंबो स्वीकार करते हैं करना चाहते हैं. हम उसे पूरी तरह से और उत्कृष्ट प्रतिक्रिया के लिए संपादन के दौरान मार्टी नट और सह संलेखन उपयोगकर्ता के गाइड है, जिसमें से वर्तमान प्रोटोकॉल ज्यादातर शब्दशः लिया गया था धन्यवाद. इस वीडियो का उत्पादन NIH / Fogarty इंटरनेशनल सेंटर द्वारा वित्त पोषित किया गया था http://www.fic.nih.gov/ डेविड ए जे मूर इंपीरियल कॉलेज लंदन में संक्रामक रोगों में वेलकम ट्रस्ट क्लीनिकल ट्रॉपिकल मेडिसिन और रीडर में रिसर्च फैलो (फैलोशिप के रूप में योगदान दिया पुरस्कार 078067/Z/05 संख्या). मार्क एफ ब्रैडी एक NIH / Fogarty इंटरनेशनल सेंटर रिसर्च फैलो के रूप में योगदान दिया.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Refrigerator/ freezer | Equipment | to store pre-prepared broth and antibiotic stocks | ||
Vortex | Equipment | to aid sputum decontamination | ||
Centrifuge | Equipment | for sputum concentration; capable of reaching 3000 g; does not need to be refrigerated, but MUST be biosafe (buckets can be sealed) | ||
Incubator (37 degree C) | Equipment | for culture; need not be CO2 enriched | ||
Inverted light microscope | Microscope | to read MODS plates | ||
Autoclave | Equipment | to sterilize media, PBS and used plates | ||
Balance | Equipment | to weigh isoniazid, rifampicin and NALC | ||
Middlebrook 7H9 broth (Difco) | Reagent | Fisher | DF0713-17-9 | 500gr/bottle; culture media base |
Casitone (pancreatic digest casein) | Reagent | Fisher | DF0259‐17‐9 | 500gr/bottle; culture media base |
Glycerol (glycerin) lyophilized | Reagent | Sigma | G‐33‐500 | 500ml/bottle; culture media base |
PANTA (Antibiotic mixture lyophilized BD) | Reagent | Fisher | B4345114 | 6 bottles/pack; antibiotic media supplement |
OADC (Middlebrook OADC enrichment BD) | Reagent | Fisher | B11886 | 10 x 20ml/pack; nutritional media supplement |
Dimethyl sulphoxide (Hibri-Max) | Reagent | Sigma | D-2650 | 100ml/bottle; to prepare rifampicin stock |
Antibiotic stocks: isoniazid | Reagent | Sigma | I-3377 | 50gr/bottle; direct susceptibility testing |
Antibiotic stocks: rifampicin | Reagent | Sigma 99 | R-3501 | 1gr/bottle; direct susceptibility testing |
Sodium hydroxide (pellets) | Reagent | Sigma | 221465 | 500gr/bottle; sputum decontamination |
Sodium citrate (trisodium salt dihydrate) | Reagent | Sigma | S-4641 | 500gr/bottle; sputum decontamination |
N-acetyl-L-cysteine | Reagent | Sigma | A-7250 | 50gr/bottle; sputum decontamination |
Potassium Phosphate Monobasic crystal. KH2PO4 | Reagent | Sigma | P0662 | 500gr/bottle; sputum decontamination |
Sodium Phosphate Dibasic, anhydrous. Na2HPO4 | Reagent | Sigma | S0876 | 500gr/bottle; sputum decontamination |
Sodium hypochlorite | Reagent | household bleach | to discard contaminated waste | |
15ml centrifuge tubes (polypropylene 15ml Falcon 35‐2096) | Consumable | Fisher | 14‐959‐49B | 500ea/case; for sputum decontamination and concentration |
24 well plates (Plates Tissue 24 wells BD Falcon 35‐3047) | Consumable | Fisher | 08-772-1 | 50 plates/case; for culture and reading |
Sealable polythene bags 6 X 6 “ (ziplock) | Consumable | for biosecurity to contain 24 well plate | ||
Glass tubes with lid (16 x 100mm and 18 x 145mm) | Consumable | VWR | 47729-583 | 500 tubes/case; to store aliquots of prepared broth |
Screw cap microcentrifuge tubes (1.5ml) | Consumable | Fisher | 05‐669‐22 | 1000ea/case; to store aliquots of antibiotic stocks |
0.22μm filters (aqueous solvents) Syringe filter Millex blue | Consumable | Fisher | SLGL 025 OS | 50 units/case; to filter antibiotic stocks |
0.22μm filters (organic solvents) Syringe filter Millex yellow | Consumable | Fisher | SLGV 033 RS | 50 units/case; to filter antibiotic stocks |
Disposable Pasteur pipettes borosilicate glass 9″ | Consumable | Fisher | 13‐678‐20C | 720ea/case; to mix PANTA with media mix |
Aerosol barrier tips 1000‐1300μl | Consumable | Fisher | 02‐707‐51 | 1000ea/pk; to dispense media into plate |
USA Scientific Tips One 1‐200μl yellow tips | Consumable | Fisher | 1111‐0006 | 1000 tips/bag; to dilute antibiotic stocks |