JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Biyoloji
0 görüntülenme • 3:32 dk. • April 30th, 2023
- Bir mikroskop lamı üzerinde bir damla tampon çözeltisi ile başlayın ve sağlam solucanları damlacığa aktarın. Solucanlar yerleştirildikten sonra, tamponu emmek ve çıkarmak için tüy bırakmayan bir doku kullanın. Numuneleri birkaç kez %90 etanol ile yıkayarak numuneyi sabitleyin ve her uygulamadan sonra buharlaşmasına izin verin.
Son durulamadan sonra etanol buharlaştıktan sonra, numuneye nükleik asit boyası DAPI içeren bir çözelti ekleyin. DAPI, tercihen DNA'nın küçük oluğundaki adenin ve timin bazlarına bağlanır. Bağlandığında, DAPI-DNA kompleksi UV ışığını emer ve görünür mavi ışık yayar.
Ardından, numunenin raf ömrünü uzatmak için solmaya karşı koruyucu bir koruyucu ekleyin. Bir kapak fişi uygulayın ve slayta kapatın. Ardından, hücreye ve döngü durumuna bağlı olarak tek kromozomları, kardeş kromatid çiftlerini veya tüm çekirdekleri temsil edebilen DAPI cisimlerini görselleştirmek için mavi filtreli bir floresan mikroskobu kullanın. Bu deneyde, Caenorhabditis elegans'ın tetraploid suşlarını tanımlamak için oositlerde DAPI lekeli kardeş kromatid çiftlerini sayacağız.
- Tetraploid suşlar, döllenmemiş oositlerdeki DAPI lekeli cisimlerin sayılmasıyla doğrulanabilen 12 kromozom çiftin
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin