Tek Hücreli Bakteri Büyümesinin Mikroakışkan Desenleme ve Floresan Tabanlı İzlenmesi

0 views • 3:27 min • October 30th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Karbonsuz bir tampona eklenen floresan etiketli bir bakteri kültürü ile başlayın.

Bakterileri peletlemek ve süpernatanı atmak için santrifüjleyin.

Peleti, hafif bir deterjan içeren taze, karbonsuz bir tamponda yeniden süspanse edin.

Karbon kaynağının olmaması büyümeyi durdururken, deterjan topaklanmayı önler ve hücrelerin askıda kalmasını sağlar.

Bakteri süspansiyonunu bir şırıngaya yükleyin ve bir pompaya bağlayın.

Süspansiyonu, zemine gömülü tuzaklara sahip bir kanal içeren bir mikroakışkan çipin girişine enjekte edin.

Sıvıyı kanal çıkışından yavaşça çekin.

Sıvı geri çekildikçe, kılcal kuvvetler bakterileri çıkışa doğru yönlendirir.

Bu süreçte, tek bakteri hücreleri tuzaklara yerleşerek bakteri desenlenmesine neden olur.

Kanalı sürekli olarak önceden ısıtılmış, besin açısından zengin bir et suyu ile yıkayın.

Bakteriler büyümeye devam eder ve tuzakların içinde mikro koloniler oluşturur.

Hızlandırılmış görüntüler yakalamak ve kontrollü bir ortamda bakteri üremesini analiz etmek için floresan mikroskobu kullanın.

Bir mililitre MOPS ortamını bir santrifüj şişesine pipetleyin ve 10 mikrolitre 0.132 molar potasyum fosfat ekleyin.

Gece kültürünün 100 mikrolitresini santrifüj şişesine ayırın ve kültürü iki dakika boyunca 2.300 kez g'da santrifüjleyin. Peleti %0.015 Tween 20 ve %0.01 potasyum fosfat içeren bir mililitre taze MOPS ortamında yeniden süspanse etmek için süpernatanı yavaşça atın ve bakteri süspansiyonunu bir mililitrelik bir şırıngaya yükleyin. Şırıngayı ve boru bağlantısını sabitlemek için doğrudan boruya bir iğne sokun.

Şimdi şırıngayı şırınga pompasına monte edin ve süspansiyonu, süspansiyon şablon bölgesini tuzaklarla kaplayana kadar kanalın yukarı akış kısmında bulunan girişten mikroakışkan çipe enjekte edin. Bakteri süspansiyonunu geri çekmek ve mikroskop yazılımı aracılığıyla desenleme sürecini izlemek için şırınga pompasını dakikada 0,07 ila 0,2 mikrolitre akış hızına ayarlayın. Şablon hücrelerle modellendikten sonra, mikroakışkan kanalı hızlı bir şekilde boşaltmak için geri çekme akış hızını artırın ve daha önce en az 30 dakika boyunca gazdan arındırılmış ve 30 santigrat derecede önceden ısıtılmış taze LB ile yıkayın.

Şimdi kanalı nazikçe yıkamak için şırınga pompasını dakikada iki mikrolitre akış hızına ayarlayın. Kanal doldurulduktan sonra akış hızını tekrar artırın. İstenilen büyütme ve zaman aralığında büyüyen bakterilerin görüntülerini elde edin.

10:37

Bacillus subtilis tek hücreli mikrosıvısal analizi

Related Videos

0 Views

12:32

Akışkan Cihazların Mikroskopi ve Akış Sitometrisi ile Birleştirilmesi, Mekansal Ölçekler Arasında Gözenekli Ortamda Mikrobiyal Taşımayı İncelemek

Related Videos

0 Views

08:19

Hücresel Düzeyde Mantar-Mikrobiyal Etkileşimleri Probalamak için Mikroakışkan Araçlar

Related Videos

0 Views

14:16

Mikroakışkan damlacık platformları için Floresan algılama yöntemleri

Related Videos

0 Views

02:53

Mikrofluidik bir sistemde tek hücre çözünürlüğünde bakteri büyümesini takip etmek

Related Videos

0 Views

02:10

Mikrofluidik Cihaz Kullanarak Bakteriyel Hareketliliğin Değerlendirilmesi

Related Videos

0 Views

12:04

Mikrobiyal Tek Hücreli Analiz için Mikroakışkan Pikolitre Biyoreaktör: Fabrikasyon, Sistem Kurulumu ve Çalışması

Related Videos

0 Views

11:14

Tek hücreli Seviyesinde Kavitasyon Kabarcık (ler) -Hücre Etkileşim ve Sonuç biyoetkiler incelenmesi için yüzey Desenlendirme ile mikroakışkan Sistemi

Related Videos

0 Views

09:24

Bir Mikro Kuyruklu Dizi Platformunda Mikrobik Topluluk Geliştirmenin Montajı ve Takibi

Related Videos

0 Views

10:07

Mikrobiyal Davranışı İncelemek Için Kontrollü, Dinamik Kimyasal Manzaralar Üretmek

Related Videos

0 Views

Last updated: 11 July 2026