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진단 부검 및 조직 수확

Overview

출처: 케이 스튜어트, RVT, RLATG, CMAR; 발레리 A. 슈뢰더, RVT, RLATG. 노틀담 대학교, IN

많은 동물 실험은 장기와 조직의 수확 및 테스트에서 수집되는 최종 데이터 수집 시간 지점에 의존합니다. 장기 및 조직의 수집을 위한 적절한 방법의 사용은 견본의 질 및 조직의 시험을 위해 수집되는 데이터의 분석에 영향을 미칠 수 있습니다. 동물의 안락사 방법은 또한 견본의 질에 영향을 미칠 수 있습니다. 이 원고는 쥐에 대한 적절한 부검 기술을 설명합니다.

Principles

마우스와 쥐에 가장 일반적으로 사용되는 안락사 방법은이산화탄소(CO2)가스의 과다 복용이다. 미국 수의학 협회(AVMA)에 따라 CO2의 사용은 혐오와 고통을 최소화하는 조건으로 허용됩니다. 1 동물은 집 새장에 남아 있으며, 이 새장에 놓인다. CO2는 점차적으로 챔버 부피/분의 10%에서 30%까지 변위 비율로 챔버내로 유입되며, 이는 동물이 탄산산에 의한 노시셉터 활성화와 관련된 통증 지각 전에 의식을 잃게 한다. 동물이 죽도록 호흡 이가 발생하면 챔버에서 흐름을 유지합니다. 흡입제 마취의 과다 복용은 또한 허용됩니다, CO2는 폐 조직에 손상을 일으키는 원인이 되기 때문에, 폐 조직의 사용을 요구하는 프로젝트에 특히. 동물의 exsanguination 또한 조직에 있는 혈액의 양을 감소시키기 위하여 몇몇 실험에 요구될 수 있습니다.

모든 사실 인정의 정확한 기록은 부검 도중 필수적입니다. 동물 식별, 성별, 주거 조건, 생년월일, 사망일, 연구 번호/프로토콜 번호 및 원칙 조사자의 이름을 포함하여 동물의 완전한 병력을 기록하는 양식이 시작되어야 합니다. 신체 구멍이 노출되어 내부 장기를 드러내면서 총 내부 검사가 수행됩니다. 명백한 이상은 주목해야 합니다. 2

장내 세균 누출이 일부 항도에서 세균 누출이 일부 항문체를 혼동 할 수 있기 때문에 부검 및 조직 수확은 동물의 안락사 직후에 시작해야합니다. 내부 장기는 복강에서 시작하여 흉부 구멍으로 이동하는 것을 관찰해야합니다. 조직 샘플을 제거하기 전에, 그 안에 있는 기관을 관찰하는 것이 중요합니다. 2 조직 학적 검사를위한 장기 및 조직 수확은 조직이 제대로 준비될 것을 요구합니다. 조직학을 위한 조직 견본은 고정용액의 충분한 침투를 허용하기 위하여 두께가 0.5-1 cm이어야 합니다. 고정은 부패, 자동 용해 및 퍼레파션을 방지하는 생물학적 조직을 보존합니다. 그것은 또한 어떤 지속적인 생화학 반응을 중지 하 고 치료 된 조직의 기계적 강도 또는 안정성을 증가 시킬 수 있습니다. 조직 고정의 넓은 목적은 얇고 얼룩진 섹션의 준비를 허용하기 위해 세포와 조직 구성 요소를 보존하는 것입니다. 달리 명시되지 않는 한 가장 일반적으로 사용되는 고정은 10% 중성 버퍼링 된 포르말린입니다. 즉시 사용할 수 있는 10% 중성 버퍼포머는 주요 공급업체에서 시판됩니다. 3

Figure 1
그림 1. 여성 쥐의 복부 및 흉부 기관.

Figure 2
그림 2. 남성 쥐의 복부 및 흉부 기관.

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Procedure

1. 외부 검사

병변과 질량에 대한 신체의 육안 검사를 포함하는 신체의 총 외부 검사는 부검의 초기 단계로 수행되어야합니다. 헤어 코트는 탈모 부위를 검사해야합니다. 치아와 손톱은 과도한 성장이나 마모를 평가합니다. 입, 나레, 눈, 항문 및 생식기 개구부에서 모피의 얼룩을 주목해야합니다. 테이프 테스트, 피부 긁기 및 펠트 검사는 외부 기생충을 감지하기 위해 수행되어야합니다 (아래 절차 참조).

  1. 테이프 테스트
    1. 테이프 테스트에 필요한 장비에는 장갑, 투명한 셀로판 테이프 스트립, 유리 현미경 슬라이드 및 가위가 포함됩니다.
    2. 접착제가 손가락에서 오일과 피부 세포를 들어 올리거나, 발견을 가리는 또는 슬라이드를 평가할 때 혼동을 일으키므로 장갑은 테이프를 다룰 때 항상 착용됩니다.
    3. 현미경 슬라이드의 너비보다 약간 좁고 길이보다 짧은 테이프 조각을 잘라냅니다.
    4. 테이프의 끈적끈적한 면을 항문과 주변 지역으로 조심스럽게 누르고 신속하게 제거합니다.
    5. 테이프의 반대쪽 끝을 사용하여 견갑골 사이를 누르고 신속하게 제거합니다.
    6. 현미경 슬라이드에 테이프를 적용합니다.
    7. 테이프 테스트는 현미경 검사를 위한 준비가 되었습니다. 기생충 계란은 4X 배율에서 볼 수 있지만 종을 제대로 식별하기 위해 10배배율로 검사되어야 합니다.
    8. 테이프의 접착제 측면을 만지지 않는 것이 중요합니다. 테이프는 장갑을 낀 손에서 이물질을 들어 올리고 슬라이드를 읽기 어렵게 만듭니다.
  2. 피부 긁힘
    1. 피부 긁는 시험은 탈모증, 피부 병변 또는 외피의 어떤 지역에든 수행됩니다.
    2. 피부 스크래핑에 필요한 장비는 깨끗한 유리 현미경 슬라이드, 미네랄 오일 및 금속 주걱 또는 메스 블레이드입니다.
    3. 현미경 슬라이드에 미네랄 오일 몇 방울을 놓습니다.
    4. 병변의 가장자리 또는 관심 영역에서 피부를 접게 합니다.
    5. 소량의 미네랄 오일을 피부에 놓습니다.
    6. 주걱 이나 메스 블레이드의 가장자리를 피부에 놓고 모발 성장 방향에 긁어 냅니다.
    7. 피부에 소량의 발적을 볼 때까지 긁어 계속.
    8. 피부 표면에서 긁힌 머리카락과 조직을 현미경 슬라이드의 오일에 넣습니다. 필요한 경우 오일에 균등하게 분배되도록 재료를 확산하십시오.
    9. 슬라이드는 이제 현미경으로 검사 할 준비가되어 있습니다. 원하는 경우, 슬라이드의 오일 드롭에 커버슬립이 적용될 수 있다. 슬라이드를 4X 및 10배율로 검사합니다.
  3. 펠트 시험
    1. 펠트 시험은 마지막으로 수행 된 외부 시험입니다; 그러나 내부 심사가 완료된 후에 실제로 수행됩니다.
    2. 동물은 모든 내부 장기 샘플을 수집 한 후 유리 또는 플라스틱 페트리 접시에 배치됩니다.
    3. 요리는 15 분 동안 냉장고에 넣습니다.
    4. 15 분 후, 요리는 해부 현미경 의 밑에 배치되고 펠트는 외부 기생충을 위해 검토됩니다. 대부분의 모피 미테는 머리카락의 끝으로 이동하고 쉽게 관찰됩니다.

2. 복강 내부 총검사

  1. 피부 절제
    1. 작은 컷은 여성의 골반과 남성의 프레덕트 위에 전방으로 만들어집니다.
    2. 피부 컷은 턱까지 확장됩니다.
    3. 무딘 해부는 근막과 근육에서 피부를 느슨하게하는 데 사용됩니다.
    4. 횡방향 컷은 앞다리의 뒷다리와 후방에 앞쪽으로 만들어집니다. 축가의 혈관을 끊지 않도록주의해야 합니다.
    5. 무딘 해부를 사용하여 자궁 경부 부위와 가슴을 노출시하십시오. 목에 있는 경마및 경동맥 혈관의 파열을 피하기 위하여 추가 주의해야 합니다.
  2. 매머 땀샘
    1. 여성에서, 질량을 찾기 위해 유방 조직을 검사, 변색, 또는 이상.
    2. 수유 또는 임신 한 여성은 유방 조직 볼륨을 증가시킬 것이며, 우유가 존재할 수 있습니다.
    3. 유방 조직은 주뇌 표면의 생식기 개구부까지 주음의 흉골 꼭대기에서 발견되며, 엉덩이와 어깨의 등쪽 표면에 거의 닿는 양쪽을 옆으로 확장합니다.
    4. 유방 땀샘의 절제는 엄지 손가락 집게로 선의 가장자리를 잡고 무딘 해부를 사용하여 피부에 부착물을 풀어야합니다. 동맥이 피부와 분리되면 홍채 가위를 사용하여 고정 용액에 선통을 넣기 전에 남은 부착물을 잘라낼 수 있습니다.
  3. 피하 땀샘
    1. Preputial 땀샘은 짝을 이루고 남성 쥐의 프레덕트에 단면에 위치합니다. 그들은 큰 표시 하 고 거품 모양과 노란색에 회색.
    2. 하악침 타액 선은 하악에 위치한 페어링되어 목을 따라 마누브리움 흉골까지 확장됩니다. 그들은 힘든 덮개를 가지고 있으며 근육에 단단히 부착되어 있습니다.
    3. 이 땀샘의 제거는 혈관의 파열을 방지하기 위하여 자궁 경관 지역에서 일할 때 무딘 해부 및 추가 배려를 요구합니다. 무딘 해부는 조직이 분리되고 절단없이 노출되는 근본적인 구조물이 있는 해부학 적인 해부에 있는 기술입니다.
    4. 무딘 해부에 대 한, 가위는 떨어져 그들을 잘라 보다는 떨어져 조직을 확산 하는 데 사용 됩니다. 닫힌 팁은 조직으로 밀려 난 다음 자연 평면을 따라 조직을 분할하기 위해 열립니다. 이 과정은 조직의 스트레칭이 인접한 장기와 혈관에 손상을 초래할 수 있기 때문에 인내와 섬세한 터치가 필요합니다.
    5. 한 번 기본 근육에서 해방 된 땀샘은 들어 올려지고 잔류 부착물은 절단됩니다.
    6. 땀샘은 고정의 침투를 허용하기 위해 적어도 하나의 컷이 필요합니다.
    7. 피하 지방은 양과 증착을 위해 평가됩니다. 뚱뚱한 동물은 피부가 두꺼워진 느낌으로 많은 양의 지방을 가질 수 있습니다. 탈수된 동물은 피부의 탄력을 감소시키고 얇아질 것입니다.
  4. 근육
    1. 목과 사지의 복부, 늑간 및 노출된 근육을 관찰하십시오. 비정상적인 두껍게, 질량 또는 변색에 유의하십시오.
    2. 분석을 위해 근육이 필요한 경우, 혈액 오염을 줄이기 위해 복부 장기를 복용하기 전에 샘플을 선택하고 잘라냅니다.
  5. 바디 캐비티 열기
    1. 작은 횡방향 컷은 노출된 복부 근육의 가장 caudal 지점에서 만들어집니다.
    2. 장기에서 멀리 근육을 들어 올려, 시포이드에 라인나 알바를 따라 잘라.
    3. 양쪽의 뒷다리 바로 위에 있는 중간선에서 복부 근육을 옆으로 자른다.
    4. 양쪽에 갈비뼈의 곡선을 따라 복부 근육을 잘라.
  6. 복부 지방
    1. 체 지방의 양과 축적을 평가합니다. 건강한 동물은 복강내 의 등변 표면을 따라 복부 지방 패드와 일부 지방을 해야합니다. 지나치게 얇은 동물, 또는 아주 어린 동물, 신장을 둘러싼 지방의 상당한 금액을 하지 않습니다.
    2. 체 지방의 색상을 관찰 하 고 어떤 이상을 주의.

3. 복부 장기

    1. 일반적으로 간 색상은 어두운 빨간색이어야 합니다. 여백은 매끄럽고 선명한 가장자리가 있어야 합니다. 비정상적인 간은 가장자리가 두꺼워지고 노치 또는 가리비 가장자리가있을 수 있습니다.
    2. 간을 다룰 때는 간을 다룰 때, 그것은 friable 조직이기 때문에 주의해야 합니다. 장기의 무결성에 어떤 중단은 바디 구멍으로 혈액이 새어 있고 기관을 가리는 귀착될 것입니다.
    3. 횡격막에서 멀리 간을 부드럽게 반사하고 혈관을 통해 간으로 잘라냅니다.
    4. 횡격막쪽으로 다시 간을 반사하고 중앙에 간의 모든 엽을 연결하는 섬유 노드를 파악합니다. 내장과 위장에 대한 모든 부착물을 끊으면서 간을 들어 올립니다.
    5. 한 조각으로 간을 제거하고 장기의 표면에서 과잉 혈액을 얼룩. 그것은 식염수 목욕에 배치 될 수있다, 또는 멸균 식염수에서 헹구는, 고정 솔루션의 침투를 허용하기 위해 얇은 섹션으로 절단하기 전에.
  1. 쓸개
    1. 담낭은 담즙의 축적으로 인해 종종 노란색으로 나타나는 작은 투명 주머니입니다. 그것은 쥐에 존재하지만 쥐에는 존재하지 않습니다.
    2. 담낭은 중간선을 따라 간 에서 가장 많은 엽 사이에 있습니다. 그것은 일반적으로 실수로 찢어질 수 있는 얇은 frenulum에 의해 다이어프램에 연결됩니다, 담낭파열을 일으키는 원인이 됩니다.
    3. 담낭은 간과 분리하고 나중에 검사를 위해 분리 될 수 있습니다.
  2. 지라
    1. 비장은 어두운 빨간색이며 위장의 낮은 곡률을 따라 위치합니다. 약간 무광택 표면이 있는 모양이 규칙적이어야 합니다.
    2. 그것은 일반적으로 여성 보다 남성에서 더 큰. 내부 기생 감염, 세균 감염 또는 혈액 질환을 가진 동물은 비장을 확대 했을 수 있습니다.
    3. 비장 필터로 혈액으로 가득 차 있습니다. 비장을 제거할 때 장기에 구멍을 뚫지 마십시오.
    4. 그것을 제거하기 위하여는, 비장을 들어 올리고 부속물은 위장과 비장 사이 를 잘라냅니다.
  3. 장내
    1. 사후 변화는 급속하게 발생하고 조직에 있는 혈액의 풀링을 포함합니다, 멍이 의 출현과 세균성 과성장에 의해 수시로 생성된 가스를 가진 장의 풍선귀착됩니다. 장관은 몸에서 제거 된 후 철저하게 검사됩니다.
    1. 위장은 식도의 말단 끝에 위치하고 있습니다. 그것은 근육과 선 부분을 차별화, 두 톤 것으로 보인다.
    2. 위장은 느낌으로 음식의 존재에 대해 평가되어야한다. 설치류는 일반적으로 높은 신진 대사 속도 때문에 지속적으로 먹는다. 공복은 질병을 나타낼 수 있으므로 주의해야 합니다.
    3. 내용이 복강에서 장기를 오염시킬 것이기 때문에 위를 자르지 마십시오.
    4. 장에서 위를 제거하기 위해 식도는 위장에 앞쪽으로 절단됩니다. 위장이 고정의 일반적인 용기에 배치될 경우 절단 전에 위 내용물의 유출을 방지하기 위해 봉합사의 조각을 식도 주위에 묶을 수 있습니다.
  4. 작은창자
    1. 소장은 십이지장, 제주넘, 일레움의 세 부분으로 구성되어 있습니다. 배설물 펠릿을 포함하지 않습니다.
    2. 십이지장은 후배 괄약근에서 제주의 시작까지 짧은 부분입니다. 담관은 십이지장에서 소장에 들어가고 췌장 조직은 소장의이 부분에 더 단단히 부착됩니다.
    3. 제주는 소장의 중심부분이다.
    4. 작은 타원형 패치에서 림프구 조직으로 구성된 페이어의 패치는 쥐의 제주누와 일레움의 비메젠트 표면에 존재한다. 3 이들은 면역 계통의 일부이고 면역 질병의 진단에 도움이 될 수 있습니다.
    5. ileum은 소장의 단산 부분이며 가장 긴 부분이며, cecum에서 종료됩니다.
  5. 맹장
    1. cecum은 녹색 색상과 매우 부드러운입니다.
    2. 그것은 소장과 큰 창자의 접합에 위치하고 있습니다.
    3. 발효는 cecum에서 발생하므로 기관의 천개는 박테리아로 장기의 악취와 오염을 초래할 것입니다.
  6. 대형 장
    1. 대장은 cecum에서 시작하여 항문으로 계속합니다. 배설물 펠릿이 장의 루멘 내에서 시각화될 수 있으므로 쉽게 식별할 수 있습니다.
    2. 안락사 직후 출혈이나 변색 의 영역이 없어야합니다.
  7. 장간막
    1. 크고 작은 내장은 혈관, 지방 및 림프절을 포함하는 막인 막인 막에 의해 몸에 고정됩니다.
    2. 그것은 확대 된 림프절 및 장 내 제거 전에 질량에 대 한 검사 해야 합니다.
    1. 췌장은 위 아래와 십이지장의 첫 번째 주름 사이에 위치한 확산 기관입니다. 회색색에 밝은 황갈색이며 불규칙한 가장자리가 있는 여러 개의 작은 엽으로 구성되어 있습니다.
    2. 한 조각으로 췌장을 제거하는 것이 불가능할 수 있습니다.
    3. 췌장 조직을 수확하려면 장내를 제거하기 전에 수행해야합니다.
    4. 췌장으로 확인된 조직은 그것을 둘러싼 막질 조직에서 조심스럽게 놀리어야합니다.
  8. 장 내 제거
    1. 장관은 위장에서 시작하여 항문으로 확장되는 한 조각으로 제거됩니다.
    2. 절단은 항문에 단지 전방, 큰 내장을 통해 이루어집니다. 창자 전체를 들어 올릴 수 있으며 모든 빈약한 부착물을 절단할 수 있습니다. 그런 다음 장내를 장간에서 제거하고 단면으로 잘라 고정할 수 있습니다.
    3. 장의 부분을 다른 장기를 포함하는 항아리에 넣을 때, 끝이 장 내 세균을 가진 조직의 오염을 방지하기 위하여 묶는 것이 필수적입니다.
    4. 장내 루멘은 작고 미세한 가위를 사용하여 길이를 줄임으로써 노출될 수 있습니다. 내부는 루멘을 노출 한 후 헹을 수 있습니다.
    5. 일부 연구는 장의 일부를 제거하고 절단보다는 플러시할 것을 요구할 수 있습니다. 절제된 조직의 한쪽 끝에 무딘 바늘을 고정시킴으로써, 식염수 또는 고정용액은 장안으로 강제로 내용물의 플러시될 수 있다.
  9. 신장
    1. 신장은 뒤쪽의 근육에 대하여 있는 쌍기관입니다. 오른쪽 신장은 왼쪽보다 높습니다. 오래된 동물에 있는 신장은 뚱뚱한 예금에 의해 포위될 수 있습니다, 그(것)들을 구상하기 어렵게 만듭니다.
    2. 그것은 대략 어두운 신장 콩의 크기와 색상이며, 표면은 매끄러워야합니다.
    3. 신장에 즉시 전방은 작은, 밝은 분홍색 결절로 나타나는 부신이다.
    4. 신장을 제거하려면 집게를 사용하여 분리하고 신장과 요관 사이에서 잘라냅니다.
    5. 신장은 표면을 더 잘 시각화하기 위하여 벗겨질 수 있는 힘든 외부 캡슐이 있습니다. 긴 축을 따라 신장 1개를 반으로 자르고 다른 신장은 반대로 잘라냅니다. 신장 내의 모든 모래는 결정 이나 미네랄 예금의 존재를 나타낼 수 있습니다.
  10. 여성 생식 시스템
    1. 자궁은 Y자형 구조입니다. 자궁의 몸은 왼쪽과 오른쪽에 짝을 이루는 뿔로 짧습니다. 뿔은 나팔관과 난소에서 종료됩니다. 임신하지 않은 여성에서 뿔은 옅은 분홍색과 얇은 것입니다. 임신 한 동물에서 뿔은 어두워 보이고 자궁 뿔에 인접한 혈관을 발음합니다. 임신이 진행됨에 따라, 자궁 뿔은 "진주의 문자열"모양을해야합니다. 개발 배아는 뿔 내에서 창백한 영역을 만들 것입니다, 그리고 개발으로, 자궁은 스트레칭하고 조직은 시각화를 허용, 얇아질 것이다.
    2. 난소는 신장 바로 아래에 위치합니다. 그(것)들은 여포의 다른 성숙 단계 때문에 거친 표면을 가질 것입니다. 낭포성 난소는 액체 채워진 소포를 갖습니다. 이 유체는 빨대 색깔에서 상냥한에 이르기까지 다양합니다.
    3. 난소를 제거하려면 동맥 부착물을 앞쪽으로 자르고 나팔관을 후방으로 자릅니다. 원하는 경우 난소는 자궁에 부착되어 꺼낼 수 있습니다.
    4. 자궁을 제거하려면 자궁 경부 아래를 절단 할 수 있도록 부드럽게 파악하고 견인력을 적용해야합니다. 절단 후, 자궁의 몸과 뿔을 들어 올려 신체 구멍에 부착을 부러.
  11. 남성 생식 시스템
    1. 정액 소포는 흰색, 램의 뿔 모양의 쌍구조는 오줌 방광에 앞쪽으로 위치하고 전립선의 중간선에 부착됩니다. 크기는 다양하지만 cecum만큼 클 수 있습니다.
    2. 전립선은 기지에 있는 오줌 방광을 둘러싸고 있습니다. 이 조직은 일반적으로 가벼운 황갈색입니다. 오래된 동물에서는, 그것은 증식을 전시할 수 있습니다. 오래된 동물은 일반적으로 전립선의 시각화를 어렵게 만들 수있는 더 많은 체지방을 가질 것이다.
    3. 고환은 쌍과 음낭에 위치하고 있습니다. 표면은 표면에 분명한 미세한 혈관화로 부드러워야 합니다. 마우스와 쥐는 동물이 복강으로 고환을 철회 할 수 있도록 잉게날 링 또는 괄약근이 부족합니다. 이를 시각화하려면 하복부에 있는 복부 지방 패드를 잡고 앞쪽으로 당깁니다. 이것은 검사를 허용하기 위하여 음낭에서 고환을 당깁니다. 부피는 고환의 낮은 마진을 따라 상단을 향해 테이퍼입니다. 꽃병 은 부피의 끝에 부착하고 전립선으로 다시 리드.
    4. 고환의 제거는 음낭에서 부착물을 절단하고 화병을 절단하여 달성 될 수있다.
    5. 전립선 및 정액 소포를 제거하려면 전립선 아래 첨부 파일을 분리하면서 오줌 방광의 기지를 잡고 들어 올려야합니다.

4. 흉부 구멍

    1. 폐는 일반적으로 밝은 분홍색 색상이며 매끄러운 표면이있는 질감의 스폰지입니다. 그러나 CO2를 가진 안락사는 폐 출혈을 일으키는 원인이 될 수 있습니다, 전체 폐 표면을 커버할 수 있는 어두운 빨간 얼룩의 결과로.
  1. 심장
    1. 심장은 네 개의 챔버와 어두운 빨간색입니다. 심실은 근육질이며 촉감이 단단합니다. 아드리아는 빨간색으로 어둡고 심실 의 상단에 앉아 있습니다. 그들은 훨씬 적은 근육과 flaccid 나타납니다.
    2. 심낭 낭은 심장을 둘러싼 얇고 반투명한 막입니다.
  2. 흉선
    1. 흉선은 심장에 앞쪽으로 위치하고 기관 위에 앉아 있습니다. 그것은 질감에 부드러운해야합니다.
    2. 어린 동물에서는 지방이 많은 황갈색으로 나타납니다.
    3. 오래된 동물은 지방 조직을 흉선에 침투하여 확대하고 흉선에 흰색을 줍니다.
  3. 기관
    1. 기관지는 후두개염에서 기관지의 양면으로 확장됩니다. 그것은 유연한 능선, 광자 튜브입니다.
    2. 그것은 명확해야하고 lumen에 어떤 액체 또는 거품 액체가 없어야합니다. CO2를 가진 안락사는 출혈로 인한 폐 및 기관체에 유체 (혈청상 및/또는 거품) 축적을 일으킬 수 있습니다.
  4. 식도
    1. 식도는 구강에서 위장까지 확장됩니다. 그것은 기관 바로 뒤에 심장 뒤에 놓여 있는 아주 얇은 관이고, 위장에 다이어프램을 통과합니다.
    2. 식도는 조직이 늘어나고 있어도 쉽게 찢어지므로 제거하기가 어렵습니다. 식도제거는 심장과 폐를 제거한 후 기관에서 해부함으로써 가장 쉽게 수행됩니다.
  5. 흉부 장기 제거
    1. 심장과 폐는 가장 쉽게 함께 제거됩니다.
    2. 집게를 기관에 수직으로 놓고 기관지를 단단히 잡고 흉선 바로 위에 놓습니다.
    3. 가위를 사용하여, 집게에 단지 전방 기관수직 절단을합니다. 이 컷은 기관및 식도를 절단해야합니다.
    4. 기관지의 그립을 풀지 않고 기관지의 소싱을 들어 올리고 폐의 부착물을 갈비뼈의 척추 표면에 잘라내립니다.
    5. 식도는 가슴 구멍이없는 심장과 폐를 들어 올릴 수 있도록 절단해야 할 수도 있습니다.
    6. 심장이 몸에서 제거 된 후, 잔류 혈액과 혈전을 제거하기 위해 식염수로 플러시 될 수 있습니다, 또는 대문을 통해 고정으로 채워질 수 있습니다.
    7. 폐가 절제되면 고정으로 팽창됩니다. 합자는 기관 주변에 느슨하게 배치됩니다. 선택의 고정을 포함하는 주사기에 부착된 바늘은 기관지의 루멘으로 나사로 연결됩니다. 합자는 바늘 주위에 조여지고, 폐가 팽창될 때까지 고정이 주입됩니다. 바늘을 제거하면 누출을 방지하기 위해 합자개가 조여됩니다.
  6. 구강
      1. 설치류의 혀가 부드럽습니다.
      2. 아래쪽을 포함하여 병변에 대한 표면을 검사합니다.
      3. 구강암 연구와 같은 전문적인 조사를 제외하고는 혀를 거의 수확하지 않습니다.
      4. 혀를 제거하려면 구강 의 각 측면의 부칼 표면을 측두엽 관절로 잘라냅니다.
      5. 하악을 탈구하고 양막아를 반사하여 후두와 혀의 기초를 드러냅니다.
      6. 혀를 확장하기 위해 집게를 사용하여, 혀의 바닥에 caudally 아래 첨부 파일을 잘라.
      7. 견인력을 유지, 구강에서 그것을 무료로 혀의 바닥에 수평으로 잘라.
    1. 치아
      1. 쥐 찌그러짐은 이빨이 없는 디스템마로 구분되는 각 사분면에 3개의 어금니와 1개의 절개로 구성됩니다. 그들은 단지 실험실 측에 에나멜에 의해 덮여있다; 치아의 내부 표면에 는 덴틴입니다.
      2. 쥐 치아는 일반적으로 노란색 / 주황색입니다. 이 색상은 절개 에나멜에서 가장 두드러지며 철분 함유 안료가 있기 때문입니다. 색상은 출생 후 약 21 일에서 시작하여 나이가 들면서 깊어지고 있습니다.
      3. 치아에서 자라나거나 부조를 피하십시오.

5. 머리

  1. 이목구비
    1. 눈은 크기가 같고 외설이 없어야 합니다. 결막은 매끄럽어야 합니다.
    2. 눈을 제거하려면 눈을 앞뒤로 둘러싼 피부에 압력을 가하여 궤도에서 눈을 돌출합니다. 곡선 형 집게를 사용하여 전 세계를 분리하고 소켓에 부착물을 잘라냅니다.
    1. 식별을 위해 귀를 관찰하십시오. 일부 조사관은 귀 태그를 동물의 신원 확인을 위해 장기 샘플에 포함할 것을 요청합니다.
    2. 외이도는 병변, 질량 또는 추방에 대해 검사됩니다.
    1. 코는 유체 또는 추방을 위해 관찰됩니다.
    2. nares는 대칭적이고 명확해야합니다.

장기 및 조직 수확의 부검 의미 사후 검사는 수확 된 장기의 분석에서 수집 된 최종 데이터 수집 시간 지점에 의존하는 많은 실험실 실험의 필수적인 구성 요소입니다. 따라서, 절차가 수집된 견본의 질에 현저하게 영향을 미칠 수 있기 때문에, 정확한 진단 부검 및 조직 수확 기술을 배우는 것이 중요합니다. 이 프리젠 테이션은 실험실 동물에서 복부, 생식 및 흉부 장기의 해부 및 추출 방법을 검토합니다.

절차를 시작하기 전에 동물 식별 번호, 성별, 주거 조건, 생년월일, 사망 일자, 연구 / 프로토콜 번호 및 원칙 조사자의 이름을 포함하는 양식을 시작해야합니다.

다음으로 해부 영역을 준비합니다. 가위, 집게, 멸균 메스 블레이드, 뼈 커터, 무딘 프로브, 작은 주걱 및 흡수할 수 없는 봉합사 물질을 포함하는 부검을 위해 지정된 벤치 덮개, 해부 트레이, 계측기를 내려 놓습니다. 조직학적 검사를 위한 장기 및 조직 수확은 조직이 고정 된 해결책에서 보존되어야 합니다. 달리 명시되지 않는 한 가장 일반적으로 사용되는 고정은 10% 중립 버퍼링 포르말린입니다. 조직 샘플은 고정 용액의 충분한 침투를 허용하기 위해 두께가 0.5-1cm여야합니다. 고정은 부패, 자동 lysis 및 퍼트 레파션을 방지합니다. 진행 중인 생화학 적 반응을 중지; 치료된 조직의 기계적 강도와 안정성을 증가시킬 수 있다.

동물의 안락사 방법은 또한 견본의 질에 영향을 미칠 수 있습니다. 쥐와 쥐에 대 한 가장 일반적으로 사용 되는 안락 사 방법은 이산화탄소 가스의 과다 복용. 동물은 챔버에 배치되는 자신의 홈 케이지에 남아 있으며, CO2는 점차적으로 챔버 볼륨 / 분의 10-30 %의 변위 비율로 챔버로 도입된다. 이것은 동물이 탄산에 의한 nociceptor 활성화와 연관되는 고통의 인식의 앞에 의식을 분실하는 원인이 됩니다. 호흡 정지가 발생하고 동물이 죽을 때까지 흐름은 챔버에서 유지됩니다.

안락사에 이어 먼저 병변과 질량에 대한 시체를 육안으로 검사하여 초기 외부 검사를 수행, 과도한 치아 성장, 또는 입에 모피의 얼룩, 나레, 귀, 눈과 항문 및 생식기 개구부. 보증하는 경우, 외부 기생충을 감지하기 위해 테이프 테스트, 피부 긁힘 및 펠트 검사를 수행합니다. 외부 검사가 완료되면 복강으로 시작하여 부검을 시작할 때입니다. 조직 샘플을 제거하기 전에 조직에서장기를 관찰하는 것이 중요합니다.

피부를 절제하기 시작하려면 암컷의 골반과 남성의 프레덕트 위에 작은 컷을 놓습니다. 그런 다음 무딘 해부 기술을 사용하여 근막과 근육에서 피부를 풀어 주세요. 무딘 해부는 조직이 분리되고 절단없이 노출되는 근본적인 구조물이 있는 해부학 적인 해부에 있는 기술입니다. 이 기술에서 가위는 조직을 잘라내기보다는 조직을 분리하는 데 사용됩니다. 닫힌 팁은 조직으로 밀려 난 다음 자연 평면을 따라 조직을 분할하기 위해 열립니다. 이 과정은 조직의 스트레칭이 인접한 장기와 혈관에 손상을 초래할 수 있기 때문에 인내와 섬세한 터치가 필요합니다. 그런 다음 턱에 상처를 확장합니다. 다음으로, 횡방향은 뒷다리와 후방으로 앞쪽을 잘라내고, 무딘 해부를 사용하여 자궁 경부 부위와 가슴을 노출시합니다. 목에 있는 경마및 경동맥 혈관을 파열하지 않도록 여분의 주의를 기울여야 합니다.

여성의 경우, 피부가 절제된 상태, 주혈관의 흉골 꼭대기에서 복부 표면에 생식기 개구부까지 유방 조직을 관찰한다. 양쪽에서 측면으로 확장됩니다. 수유 또는 임신 한 여성은 유방 조직 볼륨을 증가시킬 것이며 우유가 존재할 수 있습니다. 유방 땀샘을 절제하려면 집게로 조직 가장자리를 잡고 무딘 해부를 사용하여 피부에 부착물을 풀어주세요. 선이 분리되면 후속 조직학적 분석을 위한 고정 솔루션에 배치할 수 있습니다.

이 단계에서는 목을 따라 마누브리움 흉골까지 이어지는 하악침선선과 짝을 이루고 하악에 위치한 담수성 침샘을 관찰할 수 있습니다. 이 땀샘의 제거는 혈관의 파열을 방지하기 위하여 자궁 경관 지역에서 일할 때 무딘 해부 및 추가 배려를 요구합니다. 일단 근본적인 근육에서 해방되면, 땀샘을 들어 올리고 잔류 부착물을 분리하십시오. 땀샘은 고정의 침투를 허용하기 위해 적어도 하나의 컷이 필요합니다.

또한, 당신은 기관지의 양면에 후두개에서 확장 기관체를 볼 수 있습니다. 그것은 유연한 능선, 광자 튜브입니다. 일반적으로 명확하지만 CO2를 가진 안락사는 거품이 맑은 액체처럼 보이는 폐와 기관에 액체 축적을 일으킬 수 있습니다. 피하 지방도이 지역에 존재합니다. 수량 및 증착을 위해 평가합니다. 뚱뚱한 동물은 피부가 두꺼워진 느낌으로 많은 양의 지방을 가질 수 있습니다.

신체 구멍을 열기 전에 복부, 늑간 및 노출된 목 근육 및 팔다리를 관찰하여 두껍게 하거나 질량 또는 변색을 합니다. 신체 구멍을 열려면 먼저 노출된 복근의 가장 caudal 지점에서 작은 횡반 절단을 하십시오. 그런 다음 장기에서 근육을 들어 올리고 라인나 알바를 따라 xiphoid로 자른다. 다음으로, 근육을 중간선에서 양쪽의 뒷다리 바로 위로 옆으로 해부합니다. 마지막으로 양쪽의 갈비뼈 곡선을 따라 잘라냅니다. 일단 바디 캐비티가 열리면, 복부 지방의 양과 축적을 평가하십시오. 건강한 동물은 복부 지방 패드와 구멍의 등대 표면을 따라 일부 지방을해야합니다. 이 조직의 색상을 관찰하고 이상을 주의하십시오.

이제 우리는 복부 기관의 수확을 시작할 준비가되어 있습니다. 먼저 진한 빨간색이고 위장의 낮은 곡률을 따라 위치한 비장을 찾는 것으로 시작합니다. 그것은 모양과 약간 매트 표면으로 일반이어야한다. 비장을 제거하려면 장기를 들어 올리고 위장에 부착물을 잘라낸다.

위장은 식도의 말단 끝에 위치하고 있습니다. 그것은 근육과 선 부분을 차별화, 두 톤 것으로 보인다. 음식의 존재를 느껴보십시오. 공복은 질병을 나타낼 수 있으므로 주의해야 합니다. 내용이 복강에서 장기를 오염시킬 것이기 때문에 위를 자르지 마십시오.

소장은 위장에 비열하고 열등하게 연결되어 있습니다. 소장에는 세 개의 뚜렷한 섹션이 있습니다. 첫 번째는 십이지장입니다 - 제주의 시작에 후방 위 괄약근에서 짧은 섹션. 담관은 여기에 들어가고 췌장 조직은 소장의이 부분에 더 단단히 부착됩니다. 제주는 중심 부분입니다. 림프조직으로 구성된 작은 타원형 부위인 페이어의 패치는 제주넘과 일루의 표면에서 관찰될 수 있다. 장막은 소장의 교차점인 소장에서 종결되는 소장 중 가장 긴 부분입니다. cecum 색상에 녹색 표시 하 고 매우 부드러운.

대장은 세쿰에서 항문까지 계속됩니다. 배설물 펠릿이 이 구조의 루멘 내에서 시각화될 수 있으므로 쉽게 식별할 수 있습니다. 크고 작은 내장은 혈관, 지방 및 림프절을 포함하는 막인 막인 막에 의해 몸에 고정됩니다. 이것은 장 내 제거 의 앞에 확대된 림프절 및 어떤 질량든지 검사되어야 합니다. 췌장은 위장의 후방에 위치한 확산 기관입니다. 회색색에 밝은 황갈색이며 불규칙한 가장자리가 있는 여러 개의 작은 엽으로 구성되어 있습니다. 췌장을 수확하려면 장기를 잡고 주변 막질 조직에서 부드럽게 애타게합니다. 이것은 장 내의 제거 전에 수행해야합니다.

위장으로 시작하여 항문으로 확장한 원피스로 전체 항을 제거하려면 먼저 직장에 합자를 배치한 다음 항문으로 앞쪽에 있는 대장을 잘라냅니다. 다음으로, 식도와 위장의 접합에 합자를 배치, 그 다음에 전체 장관을 해제 할 수 있으며, 모든 membranous 부착이 절단. 모든 것은 다음 간질에서 분리 될 수 있습니다, 섹션으로 잘라 고정.

신장은 뒤쪽의 근육에 대하여 있는 쌍기관입니다. 그들은 어두운 신장 콩의 크기와 색상이어야하며 매끄러운 표면을 가져야합니다. 신장에 즉시 전방은 작은 밝은 분홍색 결절로 나타나는 부신이다.

신장을 제거하려면 집게를 사용하여 분리하고 장기와 요관 사이를 잘라냅니다. 그런 다음 거친 외부 층을 벗겨 서 표면을 검사 할 수 있습니다. 긴 축을 따라 한 신장을 반으로 자르고 다른 신장은 반대로 자른다. 내의 모든 모래는 결정 이나 미네랄 예금의 존재를 나타낼 수 있습니다. 마지막으로, 색상이 어두운 빨간색이며, 그 여백은 선명한 가장자리로 부드럽게해야 간을 제거합니다. 간을 다룰 때는 간을 다룰 때, 그것은 friable 조직이기 때문에 주의해야 합니다. 기관의 무결성에 어떤 중단은 바디 구멍으로 혈액 이새는 귀착될 것이고 그밖 기관을 모호하게 할 것입니다.

간을 제거하기 위해 먼저 횡격막에서 멀리 떨어진 엽을 부드럽게 반사하고 혈관을 통해 구조에 절단합니다. 다음으로, 횡격막쪽으로 다시 간을 반사하고 중앙에 모든 엽을 연결하는 섬유 성 노드를 파악합니다. 마지막으로, 장과 위장에 대한 모든 첨부 파일을 끊으면서 장기를 들어 올립니다.

여성 생식 시스템은 자궁과 난소에 구성됩니다. 자궁은 양쪽 방향으로 확장 뿔짧은 Y 자형 구조입니다. 뿔은 나팔관과 난소에서 종료됩니다 - 신장 바로 아래에 위치합니다. 난소는 여포의 다른 성숙 단계로 인해 거친 표면을 가질 것이다.

난소를 제거하려면 동맥 부착물을 앞쪽으로 자르고 나팔관을 후방으로 자릅니다. 자궁을 제거하려면 자궁 경부 아래를 부드럽게 잡고 잘라냅니다. 절단 후, 몸과 자궁의 뿔을 들어 올려 신체 구멍의 부착물을 파괴합니다.

남성에서, 당신은 또한 프레추에 바로 앞에 위치한 preputial 땀샘을 관찰 할 수 있습니다. 그들은 큰 표시 하 고 거품 모양과 노란색에 회색. 이 땀샘을 제거하고 고정하는 것은 하안 증선과 유사합니다. 또한, 남성 생식 시스템은 정액 소포, 전립선 및 고환으로 구성됩니다. 정액 소포는 백색, "램의 뿔 모양" 구조는 오줌 방광에 앞쪽에 위치하고 전립선에 있는 중간선에 붙어 있습니다.

전립선은 일반적으로 밝은 황갈색으로 베이스의 오줌 방광을 둘러싸고 있습니다. 고환을 시각화하려면 하복부에 있는 복부 지방 패드를 잡고 앞쪽으로 당깁니다. 이것은 검사를 허용하기 위하여 음낭에서 고환을 당깁니다. 표면은 표면에 분명한 미세한 혈관화로 부드러워야 합니다.

부피는 고환의 낮은 마진을 따라 상단을 향해 테이퍼입니다. 꽃병 은 부피의 끝에 부착하고 전립선으로 다시 리드. 고환을 제거하려면 음낭의 부착물을 잘라 내고 꽃병을 잘라냅니다. 전립선 및 정액 소포를 제거하려면 오줌 방광의 기초를 잡고 전립선 아래 첨부 파일을 분리하면서 들어 올립니다.

흉부 구멍 내의 장기로 이동. 중요한 구조물을 노출하려면 부착물에서 갈비뼈에 다이어프램을 제거합니다. 다음으로, 양면의 갈비뼈를 통해 마누브리움 흉골 의 꼭대기까지 잘라낸 다음 뼈를 두개골 을 비정형 장기를 시각화합니다.

폐는 일반적으로 밝은 분홍색 색상, 매끄러운 표면과 질감에 해면. 그러나 CO2를 가진 안락사는 전체 폐 표면을 커버할 수 있는 어두운 빨간 얼룩의 결과로 폐 출혈을 일으키는 원인이 될 수 있습니다.

심장은 짙은 빨간색이고 심실은 근육질의 근육이며, 이는 촉감에 단단히 느껴집니다. 아드리아는 빨간색으로 어둡고 심실 의 상단에 앉아 있습니다. 그들은 훨씬 적은 근육과 flaccid 나타납니다. 심근 낭이라고 불리는 얇은 반투명 막이 심장을 둘러싸고 있습니다.

흉선은 심장앞쪽에 위치하며 기관 지 위에 자리 하고 있습니다. 그것은 질감에 부드러운해야합니다. 당신은 전에 설명 한 대로 기관을 볼 수 있습니다., 그리고 식도 는 기관 바로 뒤에 거짓말 하 고 심장 뒤에 거짓말 하 고 위장에 다이어프램을 통과 하는 매우 얇은 튜브.

흉부 구멍에서 장기를 제거하려면, 흉선 바로 위에 기관지를 잡고 서 포셉에 단지 전방절단을 합니다. 손아귀를 유지하면서 기관차를 caudally 들어 올리고 폐의 부착물을 흉곽의 척추 표면에 잘라내립니다. 식도는 가슴 구멍이없는 심장과 폐를 들어 올릴 수 있도록 절단해야 할 수도 있습니다.

심장이 신체를 위해 제거 된 후, 잔류 혈액과 혈전을 제거하기 위해 식염수로 씻어 내거나 대문을 통해 고정으로 채웁니다. 폐가 절제되면 기관 주위에 느슨한 합자를 배치하십시오. 다음으로, 기관지의 루멘에 고정제를 포함하는 주사기에 부착된 바늘을 실어, 합자를 조입니다. 그런 다음 폐가 팽창 될 때까지 고정을 주입하십시오. 마지막으로, 바늘을 제거하고 누출을 방지하기 위해 합자를 더 조입니다.

설치류 부검 및 조직 수확에 관한 지식의 이 호흡으로, 이러한 절차와 관련된 현재 실험실 실험의 일부를 살펴 보자.

진단 부검은 암 전이 실험에서 일반적인 종점입니다. 이 예에서, 조사원은 설치류의 비장에 암세포를 주입한 다음, 30~60일 후에, 중요한 간 전이를 드러내는 부검을 실시했습니다.

조직 추출은 종종 샘플의 미세한 해부학 연구에 도움이되는 조직학적 분석이 뒤따릅니다. 고정, 포함, 단면 및 조직의 염색 프로토콜에 따라, 연구원은 이 기관에 있는 현미경 구조물을 공부하고, 원자 수준에서 유전 또는 약리학적 인 내정간섭의 효력을 밝힐 수 있습니다.

때때로 연구원은 혈관 신생과 같은 생리적 과정을 연구하기 위해 조직을 제거합니다. 여기서, 실험자는 혈관 성장을 자극하기 위하여 쥐의 막질 조직을 외장했습니다. 그런 다음, 그들은 몇 가지 섹션을 수확하고 혈관 네트워크 성장에 관련된 세포 역학을 연구하기 위해 혈관의 세포를 얼룩지게하는 마커로 처리했습니다.

실험실 동물에서 진단 부검 및 조직 수확 단계를 자세히 설명하는 JoVE의 비디오를 방금 시청했습니다. 추출 절차가 수집 된 데이터의 해석에 영향을 미치지 않도록 장기 제거 및 보존에 적합한 기술을 사용하는 것이 중요합니다. 언제나처럼, 시청주셔서 감사합니다!

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Applications and Summary

많은 연구 프로젝트의 마지막 단계는 실험 동물의 부검입니다. 추가 분석을 위해 조직 수집에 이어 외부 및 내부 구조를 자세히 관찰하면 많은 양의 연구 데이터를 제공합니다. 적절한 고정 솔루션으로 조직 제거 및 보존을 위한 적절한 기술은 발견의 올바른 해석에 필수적입니다.

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References

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Transcript

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