Overview
Fonte: Peiman Shahbeigi-Roodposhti e Sina Shahbazmohamadi, Departamento de Engenharia Biomédica, Universidade de Connecticut, Storrs, Connecticut
As nanopartículas têm sido cada vez mais utilizadas para a entrega de drogas direcionadas e a liberação controlada de drogas. Embora a maioria dessas partículas tenham sido desenvolvidas como partículas poliméricas ou liposômicas por causa de sua biocompatibilidade, há uma tendência na pesquisa atual para o uso de nanopartículas metálicas e magnéticas. Estas nanopartículas metálicas foram originalmente usadas como um agente de contraste na imagem, mas os recentes avanços mostraram o quão importantes elas poderiam ser na entrega de medicamentos e genes e na terapêutica. Nanopartículas de ouro, prata e paramagnéticas têm a maior participação na pesquisa que está sendo feita. Mostraram-se ter boa biocompatibilidade e certas variedades de nanopartículas magnéticas já foram desenvolvidas e distribuídas como drogas-alvo terapêuticas.
Esses elementos pesados são tipicamente imagens para pesquisas usando fluorescência para avaliar a entrega e distribuição, mas seus pesos atômicos são boas qualificações para o aumento do contraste na análise de elétrons backscatter usando um microscópio eletrônico de varredura (SEM). Espectroscopia de raios-X dispersivos de energia, que utiliza raios-X característicos emitidos na interação do feixe de elétrons com a amostra para identificar a composição química, também pode ser usada com o SEM. Esses métodos têm os benefícios do aumento da resolução e do aumento da confiança na detecção, pois o EDS pode garantir que o sujeito de uma imagem seja da composição correta, enquanto os métodos atuais de fluorescência podem se desprender das nanopartículas e podem desaparecer rapidamente durante a imagem.
Esta demonstração examinará a distribuição de nanopartículas metálicas dependentes do tamanho em órgãos do corpo ao longo do tempo. Os órgãos excisados serão examinados com SEM para vários tamanhos de partículas em uma variedade de pontos de tempo após a entrega de partículas ao corpo.
Principles
É difícil superestimar a importância das nanopartículas (NPs) para aplicações médicas. Eles são usados como drogas, portadores de drogas, agentes de contraste, etc. No entanto, para usar um certo tipo de nanopartícula é necessário saber como e onde ele será distribuído em cada órgão após a aplicação e quanto tempo levará antes de deixar o órgão e, posteriormente, o corpo. Isso é chamado de biodistribução.
O processo de entrega de drogas nanopartículas pode variar amplamente em sua complexidade, desde drogas passivas que não visam o tecido, mas são liberadas em todo o corpo, até o direcionamento mais ativamente manipulado de drogas para um órgão ou localização muito preciso. A maioria dos medicamentos e terapias usará direcionamento passivo, o que ainda mostra grande sucesso devido à maior permeabilidade e retenção (efeito EPR) em tumores com grandes quantidades de fluxo sanguíneo e altas quantidades de vazamento vascular. Além do direcionamento passivo, o direcionamento ativo pode ser feito no processamento das nanopartículas através da fixação de ligantes específicos do local do tumor, ou pode ser feito após a injeção por meio da adição de uma força magnética às nanopartículas magnéticas. Este campo magnético retira as nanopartículas da corrente sanguínea em direção à área aflita, diminuindo assim o tempo de gasto do medicamento na corrente sanguínea e aumentando a dose para a área afetada. Esses diferentes métodos de entrega devem afetar muito a distribuição das nanopartículas após o tratamento, e este experimento visa investigar tanto sua distribuição inicial, quanto sua distribuição ao longo do tempo.
Os métodos atuais de medição da distribuição de nanopartículas geralmente envolvem a fixação de partículas de fluorescência nas nanopartículas. Dependendo da concentração das nanopartículas, do tamanho da área alvo e da intensidade da fluorescência, os camundongos translúcidos podem ser analisados usando imagens ópticas enquanto ainda estão vivos para determinar se as partículas estão na área correta. Fluorescência pós-morte também pode ser usada para determinar níveis de nanopartículas em diferentes órgãos de camundongos. No entanto, esses métodos carecem da resolução de nanopartículas e afirmação de que a fluorescência não se desvinculou das nanopartículas.
A demonstração atual explora a microscopia eletrônica rescattered (BEM) e a análise baseada em espectroscopia dispersiva de energia (EDS) para entender a biodistribuição de nanopartículas magnetoelétricas (MENs) dependendo de seu tamanho e do tempo gasto no corpo. As MENs na amostra são nanopartículas magnetoelétricas de bário e titânio que foram introduzidas em órgãos de camundongos através da injeção e, em seguida, passivamente direcionadas aos órgãos. Os camundongos ficaram inconscientes e seus órgãos removidos e preservados em 1 semana, 4 semanas e 8 semanas após a injeção. Os órgãos: fígado, baço, pulmões, rins e cérebro, foram então seccionados usando uma máquina de microtome e preparados usando métodos de preparação amostral descritos no vídeo educativo "SEM Imaging of Biological Samples". Como modo de digitalização da microscopia eletrônica (SEM), o BEM juntamente com a análise eds fornece uma análise composicional de alta resolução que permite detectar nanopartículas individuais de até 10 nm de diâmetro. Enquanto isso, esta demonstração pode ilustrar como diferentes detectores podem ser usados para detectar, confirmar e mapear diferentes elementos e partículas em um cenário de pesquisa e também como diferentes parâmetros podem afetar a imagem resultante.
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Procedure
1. Injeção de nanopartículas e colheita de órgãos
- Injete nanopartículas em um rato anestesiado por via intravenosa para permitir o direcionamento passivo.
- Nos pontos de tempo desejados, ou seja, 1, 4 e 8 semanas, pós-injeção, eutanásia humana dos camundongos de acordo com as Diretrizes da American Veterinary Medical Association (AVMA).
- Abra a cavidade corporal e remova cirurgicamente os órgãos de interesse. Coloque os órgãos em formalina tamponada de fosfato de 10% em um recipiente de polipropileno até a preparação da amostra.
2. Preparação da amostra de tecido
- Use fórceps para transferir o tecido do rato do fixador para salina tamponada de fosfato (PBS). Balance a amostra por 30 minutos, substituindo o PBS a cada 10 minutos.
- Retire o tecido e seque com um kimwipe. Em seguida, coloque-o em um molde plástico contendo o composto de temperatura de corte ideal (OUT). Armazene a -80 °C durante a noite.
- No dia seguinte, transfira a amostra para o criostat e adefina a temperatura para -23 °C.
- Rotular slides com o tipo de órgão e tamanho de nanopartículas, e colocá-los em uma prateleira no criostat.
- Cubra o mandril criostat com OCT e coloque a amostra em cima. Abaixe o êmbolo extrator sobre a amostra e deixe-o equilibrar por 3-5 min.
- Monte o mandril no suporte do espécime e oriente-o para que a lâmina possa cortar em linha reta através da amostra congelada. Leve a amostra para perto da lâmina para enfrentar o áspero. Coloque a espessura em 30 μm e corte várias seções até que uma fatia cortada uniformemente seja produzida.
- Mude para uma frente fina, diminuindo a espessura da seção para 7-8 μm. Colete uma seção fatiada pressionando um deslizamento de vidro rotulado na fatia. Coloque dois slides em cada slide e armazene em um rack de slides. Deixe secar à temperatura ambiente.
- Uma vez seco, desidrate as amostras mergulhando o rack de slides em 50% de etanol por 3 minutos para remover oct. Em seguida, transfira o rack para 80% de etanol por 3 min antes de colocar o rack em uma proporção de 1:1 de metanol frio para acetona por 10 min a -20 °C.
- Remova o rack de slides e escorra o excesso de solvente em uma toalha de papel. Depois de 20-30 min, coloque os slides em uma caixa de slides e guarde em um congelador a -20 °C até a imagem.
3. Imagem de alta resolução usando SEM e EDS
- Prepare a amostra conforme descrito em "SEM Imaging of Biological Samples". Em seguida, carregue a amostra no SEM.
- Ligue o SEM e ajuste a distância de trabalho para cerca de 5 mm e a tensão acelerada e a corrente de feixe para 25 keV, que normalmente seria muito alta para uma amostra biológica. No entanto, a amostra é revestida para condutividade e proteção.
- Inicie a imagem e amplie em torno de 1.000-2.000X de ampliação para ver as estruturas que conteriam as nanopartículas. Observe que, sem a detecção de dispersão traseira (BSD), não se pode distingui-los abaixo de uma determinada profundidade.
- Insira o BSD sob os mesmos parâmetros e mova o estágio na direção z para a mesma distância de trabalho de antes.
- Comece a fotografar em torno da mesma ampliação e verifique se você é capaz de ver alto contraste na presença de nanopartículas. Guarde as imagens.
- Use diferentes configurações de BSD (onde as cargas no detector se alinham) para escolher a que mostra o maior contraste para as nanopartículas.
- Zoom-in em uma área de alto contraste mostrando uma nanopartícula ou aglomerado de nanopartículas.
- Abra a2ª câmera da câmara e observe enquanto você insere o EDS no sistema pressionando o botão para baixo no acessório SEM. Uma vez que o EDS esteja perto, mas não tocando no BSD ou na arma, solte o botão.
- Abra o programa asteca no computador EDS (ainda na estação de trabalho) e adquira uma imagem do SEM. Use o método "ponto e tiro" para clicar em uma área muito densa em contraste e nanopartículas.
- O EDS mostrará o espectro de raios-X característicos a partir desse ponto. Procure por picos de bário e titânio para serem identificados no gráfico. Isso confirma que o que você está olhando são de fato as nanopartículas e não qualquer tipo de contaminação.
- Retorne à amostra e use o software Atlas para mapear as bordas do órgão no slide. Selecione o protocolo "Órgão" para criar uma imagem de mosaico da área e deixe-o funcionar (isso pode levar algumas horas no máximo).
- Uma vez que a imagem composta é criada e costurada pelo software, exporte-a como um arquivo Tif.
- Abra o arquivo Tif no ImageJ, um software de código aberto, e ajuste os valores de limiar de contraste para destacar as áreas de contraste muito alto (ou seja, as nanopartículas). Use funções incorporadas para quantificar o volume de nanopartículas usando o tamanho do pixel definido no protocolo do Órgão (deve ser em torno de 100 nm).
- Embora este procedimento se refira apenas à amostra de 1 semana do pulmão do camundongo, este procedimento é repetido com as amostras de outras semanas e outros órgãos para compilar um gráfico mostrando a distribuição.
- Após o cálculo da bioco distribuição de cada órgão para cada semana, os gráficos de biodistribução mostrarão as mudanças na biodistribução e concentração de nanopartículas ao longo das 8 semanas. Estes mostram o pico de concentração e também fornecem informações sobre quanto tempo leva para as nanopartículas se dissiparem do órgão.
Nanopartículas metálicas e magnéticas estão sendo amplamente usadas como nanocarriers para entrega de drogas. E sua biodistribução em tecidos é essencial para avaliar sua eficácia terapêutica e segurança. Nanocarriers são partículas de submicron, geralmente limitadas a menos de 200 nanômetros, que podem ser carregadas com agentes terapêuticos. Devido ao seu tamanho, eles são capazes de acessar muitos locais e órgãos no corpo. Onde as partículas acabam no corpo, chamada de biodistribução, é um parâmetro importante usado para avaliar a segurança, otimizar a dosagem e melhorar a segmentação de drogas.
Neste vídeo serão descritos os princípios básicos da entrega de medicamentos direcionados e um método para avaliar a biodistribução utilizando técnicas de imagem de alta resolução. Outras aplicações de portadores baseados em nanopartículas também serão discutidas.
Comecemos discutindo os fundamentos das nanopartículas e entendamos por que elas estão sendo desenvolvidas como portadoras de drogas.
Primeiro, partículas nanoesponíveis, que podem ser poliméricas, lipossômicas ou metálicas são geralmente biocompatíveis, o que significa que não são prejudiciais ou reativas ao tecido vivo e não provocam uma resposta imune. No entanto, estudos de nanotoxicologia devem ser realizados para entender como os materiais e o tamanho das partículas afetam a biodistribução no corpo.
Em segundo lugar, seu pequeno tamanho permite sua extravasação através do endotélio em locais inflamatórios, como em tumores, e resulta em absorção celular eficiente. À medida que as células cancerígenas se dividem, um suprimento vascular é necessário para fornecer nutrientes e oxigênio e apoiar o crescimento do tumor. Estes vasos sanguíneos formam-se rapidamente e, portanto, são geralmente anormais e eficazes, contendo grandes lacunas em seu revestimento endotelial, resultando em uma vasculatura vazada e um aumento na permeabilidade. As nanopartículas são então capazes de escapar da corrente sanguínea e se acumular dentro do microambiente tumoral. Isso é chamado de segmentação passiva onde o nanocarrier atinge o órgão alvo através de um fenômeno conhecido como efeito EPR ou o aumento da permeabilidade e do afeto de retenção.
Finalmente, essas nanopartículas têm uma grande área de superfície que pode ser funcionalizada com ligantes específicos, como anticorpos ou proteínas. No alvo ativo, esses ligantes podem então reconhecer e se ligar a receptores que são superexpressos pelas células no local do tumor. Interações específicas entre os ligantes na superfície da nanocarrier e os receptores celulares desencadeiam a endocitose mediada pelo receptor e facilitam a absorção celular.
Agora que entendemos o básico da entrega de drogas de nanopartículas, vamos ver uma demonstração que usa imagens de alta resolução para determinar a biodistribução de nanopartículas metálicas em um modelo de rato.
Primeiro, prepare as nanopartículas que serão injetadas no mouse. Aqui foram usadas partículas de bário e titânio de 30 nanômetros. Depois que o rato tiver sido anestesiado injete as nanopartículas por via intravenosa através da veia da cauda. Permita que o rato se recupere enquanto eles miram passivamente os órgãos ao longo de uma, quatro e oito semanas.
No ponto de tempo de pós-injeção apropriado, eutanásia humanamente os ratos de acordo com as diretrizes da AVMA. Em seguida, abra a cavidade corporal e remova cirurgicamente os órgãos de interesse, como o baço, rim, fígado e pulmões. E armazene os órgãos em formalina tamponada com fosfato até a análise.
Agora use fórceps para transferir o tecido do rato do fixador para salina tamponada com fosfato. Balance a amostra por 30 minutos substituindo o PBS a cada 10 minutos para remover o excesso de fixação. Em seguida, remova o tecido do agitador. Adicione o composto de temperatura de corte ideal que contém glicols solúveis em água e resinas a um molde de plástico rotulado.
Seque o tecido com um Kimwipe e coloque-o no molde de plástico. Encha o molde com composto OCT cobrindo o tecido e coloque em um saco plástico. Coloque o saco em um balde contendo gelo seco e mova-se para um congelador de menos 80 graus Celsius durante a noite.
No dia seguinte, retire a amostra do congelador e coloque em gelo seco enquanto transporta para o criostat. Coloque a temperatura da câmara em menos 23 graus e, em seguida, transfira a amostra para o criostat. Slides de rótulo com o tipo de órgão e tamanho de nanopartículas da amostra que você estará secionando. Então ative o criostat. Em seguida, cubra o mandril criostat com OCT. Em seguida, remova a amostra do molde e coloque-a em cima do mandril. Monte o mandril no suporte do espécime e oriente e ajuste para que a lâmina corte em linha reta através da amostra congelada. Agora aproxime a amostra da lâmina e coloque a espessura em 30 micrômetros para enfrentar o áspero. Gire a roda da mão para cortar seções de 30 micrômetros de espessura e continue secionando até que uma fatia de tecido uniforme seja cortada. Para frente fina, ajuste a espessura da seção para sete a oito micrômetros e corte a amostra.
Colete as seções pressionando um deslizamento de vidro rotulado na fatia. Em seguida, adicione os slides ao rack e o ar seco à temperatura ambiente. Uma vez seco, mergulhe repetidamente o rack de lâmina em 50% de etanol por três minutos para remover o OCT. Transfira o rack para 80% de etanol e mergulhe por três minutos. Em seguida, mova o rack para uma proporção de um para um de metanol frio para acetona e coloque em um congelador a menos 20 graus Celsius. Após 10 minutos, retire o rack de slides do congelador e escorra-o em uma toalha de papel. Quando estiver seco, coloque os slides em uma caixa de slides e armazene a menos 20 graus Celsius até usar.
Agora vamos imaginar tecido pulmonar do rato que foi coletado uma semana após a injeção com partículas de bário e titânio de 30 nanômetros para determinar sua biodistribuição. Para começar, primeiro monte um slide preparado para o palco SEM. Para aprender a espirrar casaco e preparar sua amostra, assista ao vídeo anterior nesta coleção. Em seguida, carregue o palco para a câmara SEM. Uma vez que a amostra esteja no campo de visão, mova a amostra verticalmente para uma distância de trabalho de aproximadamente cinco milímetros. Ligue o feixe de elétrons e selecione o detector para elétrons secundários. Em seguida, coloque a tensão acelerada do feixe para 25 volts de quiloeletríncro. Para começar a imagem, amplie a amostra para uma ampliação de aproximadamente 1.000 a 2.000X. Nesta ampliação, a estrutura que contém as nanopartículas deve ser visível mesmo que as nanopartículas não sejam. Isso é chamado de imagem secundária.
Agora engaje o modo de detecção de elétrons backscatter no módulo SEM para visualizar as nanopartículas. Mova o estágio na direção Z para atingir a mesma distância de trabalho de cinco milímetros usada acima. Ajuste a configuração do detector de backscatter e use diferentes vieses de tensão para os painéis de detecção até que a imagem esteja nítida. Regiões de alto contraste, as nanopartículas, devem agora ser visíveis. Esta é a imagem recattered. Capture e salve a imagem.
Em seguida, alcance espectroscopia de raios-X dispersivos de energia ou dados eds da amostra. Amplie na área de alto contraste de uma moita de nanopartículas. Em seguida, abra a segunda câmera na câmara e baixe o EDS para o sistema. Observe a tela da câmera para garantir que o EDS se aproxime, mas não toque no BSD ou na arma eletrônica. Em seguida, abra o software de microanálise e adquira uma imagem. Use o mouse para selecionar uma região de interesse para análise posterior. Um espectro de raios-X para essa área é então exibido. Aqui os picos representam bário e titânio confirmando a presença de nanopartículas metálicas na amostra. Agora abra o software qualitativo de análise de dados e mapeie as bordas do órgão no slide. Em seguida, selecione e execute o protocolo apropriado do menu para criar uma imagem de mosaico do órgão. Isso pode levar várias horas.
Uma vez concluído, exporte-o como um arquivo TIF e abra o arquivo no ImageJ. Ajuste os valores do limiar de contraste para destacar áreas de contraste muito alto, as nanopartículas. Em seguida, selecione Analisar partículas para obter o número médio de nanopartículas no órgão e a porcentagem de área do órgão contendo nanopartículas.
Repita todas as etapas deste procedimento para amostras de tecido remanescentes de outros pontos de tempo e órgãos. Uma vez que todos os dados são coletados, compile-os em um gráfico de biodistribução.
Agora vamos analisar as imagens para determinar a biodistribução e aprender como o corpo processou as nanopartículas. Primeiro plote a distribuição de partículas medidas em função do tempo para todas as amostras analisadas. Esta é a distribuição de nanopartículas de tamanho de 30 nanômetros em vários órgãos de camundongos ao longo do tempo. Há uma diminuição geral das nanopartículas após oito semanas que indica a eliminação da nanopartícula do corpo.
No entanto, há um aumento da concentração de nanopartículas no fígado após quatro semanas. Isso sugere que o corpo pode estar processando as nanopartículas de bário e titânio de 30 nanômetros usadas neste estudo como toxina. Esta análise também pode ser realizada para avaliar como o tamanho da nanopartícula afeta sua biodistribução no corpo. A alteração do tamanho das nanopartículas afetou a taxa de captação celular global e a taxa de desembaraço.
Nanopartículas e nanocarriers são amplamente utilizados em pesquisas biomédicas e têm aplicações como agentes de imagem, diagnóstico e terapêutica. Nanopartículas estão sendo desenvolvidas para uso na entrega de vacinas contra uma grande variedade de doenças infecciosas porque protegem os componentes da vacina contra a degradação e maximizam a estimulação imunológica. Vesículas multi-lamelar inter-bicamadas, ou ICMVs, estão sendo desenvolvidas para a indução de respostas de células T cd8 positivas específicas de antígeno.
Esses ICMVs localizam especificamente os linfonodos de camundongos para uma entrega eficiente de vacinas e têm provocado respostas imunes robustas contra antígenos malárias e células tumorais. Nanopartículas metálicas são frequentemente usadas como agentes de contraste em ressonância magnética para visualizar a estrutura tecidual e a função para detecção precoce de doenças. Nanopartículas de óxido de ferro são sondas de diagnóstico úteis. Quando sintetizadas com uma moiety bisfosfonato, essas nanopartículas se acumulam de forma rápida e seletiva em placas ateroscleróticas e permitem sua visualização dentro de uma hora para um diagnóstico rápido.
Recentemente, os nanocarriers carregados foram desenvolvidos como estratégia para detectar simultaneamente o câncer em estágio inicial e fornecer agentes quimioterápicos. Esses nanocarriers são chamados de teranostics porque integram habilidades diagnósticas e terapêuticas.
Você acabou de assistir ao vídeo da JoVE sobre determinar a biodistribução de portadores de nanodrogas. Agora você deve conhecer os princípios básicos dos portadores de nanodrogas, como detectar nanocarriers em amostras de tecido usando SEM de alta resolução, e determinar sua biodistribução, e algumas aplicações de nanopartículas na engenharia biomédica.
Obrigado por assistir.
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Results
As imagens a seguir ilustram como os dados de biodistribução podem ser extraídos das imagens. O contraste das nanopartículas é detectado utilizando-se o detector BSE, conforme mostrado na Figura 1. Os dados do EDS, apresentados na Figura 2, mostram onde os aglomerados de titânio e bário correspondem a áreas de alto contraste nas imagens coletadas utilizando o detector BSE.
Figura 1: Imagem eletrônica secundária do pulmão (esquerda) e imagem eletrônica de backscatter da mesma área (direita).
Figura 2: Dados EDS, mostrando clusters de titânio e bário no meio inferior e na parte superior da imagem, correspondendo a áreas de alto contraste vistas usando o detector BSE.
Em uma imagem composta, como mostrado na Figura 3, os círculos vermelhos indicam áreas de alto contraste e sugerem os locais contendo nanopartículas. O volume das áreas de nanopartículas brancas pode então ser calculado e mediado acima do tamanho do próprio órgão. Isso fornece um cálculo da área ocupada pelas nanopartículas. Em seguida, dados de vários órgãos ao longo de várias semanas podem ser agregados para mostrar a distribuição média de partículas em um mícculo quadrado da imagem. Esses dados são apresentados na Figura 4, que mostra uma diminuição global das nanopartículas de tamanho de 30 nm ao longo das 8 semanas, uma indicação de liberação. Outra coisa a notar é o aumento da concentração de nanopartículas no fígado após 4 semanas. Isso fornece informações sobre como o corpo processa as nanopartículas, e a grande migração de partículas para o fígado mostram que o corpo pode estar processando as nanopartículas como toxinas. Essa é uma informação importante para saber no desenvolvimento e teste de nanopartículas in vivo.
Da mesma forma, os dados sobre a distribuição de órgãos de partículas de tamanhos variados são apresentados na Figura 5. Este gráfico demonstra como a mudança de tamanho das nanopartículas pode aumentar a absorção global em células das nanopartículas ou aumentar a taxa de desembaraço.
Figura 3: Seções da imagem composta criada usando o software Atlas.
Figura 4: Biodistribução de nanopartículas de 30 nm no pulmão, fígado, baço e rim após injeção em um rato.
Figura 5: Biodistribução de nanopartículas de tamanho variado ao longo do tempo.
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Applications and Summary
As nanopartículas são amplamente utilizadas em pesquisas de engenharia biomédica e possuem aplicações como agentes de imagem, diagnóstico e terapêutica. Por exemplo, nanopartículas estão sendo desenvolvidas para uso na entrega de vacinas. Ao encapsular a vacina em nanopartículas, os componentes da vacina são protegidos contra a degradação e estimulam a resposta imune máxima.
Em aplicações de ressonância magnética, nanopartículas metálicas são frequentemente usadas como agentes de contraste para visualizar a estrutura e a função tecidual. São sondas de diagnóstico úteis na detecção de placas arteroscleróticas.
Nanopartículas que integram habilidades diagnósticas e terapêuticas são chamadas de teranostia. Há nanopartículas simultaneamente detectam tumores em estágio inicial e fornecem agentes quimioterápicos.
Este experimento demonstrou como o SEM pode ser usado para calcular a biodistribução de nanopartículas injetadas no corpo ao longo do tempo. Este experimento pode ser replicado em outras amostras de nanopartículas ou culturas celulares que têm nanopartículas como forma de analisar concentrações, penetração celular ou liberação de nanopartículas.
Esta demonstração se concentrou em estudar e medir a biodistribução de nanopartículas utilizando SEM. Os resultados dessas medições podem ser importantes em muitos campos. Empresas farmacêuticas e instalações de pesquisa podem usar esses estudos para o desenvolvimento de medicamentos e pesquisas de agentes de contraste.
Lista de Materiais
| Nome | Companhia | Número do catálogo | Comentários |
| Equipamento | |||
| Fatia seccionada (preparada antes) | |||
| Software de código aberto ImageJ | |||
| Traves transversal SEM | ZEISS | ||
| ATLAS 3-D SEM Software | ZEISS |
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References
- Hadjikhani, Ali. "Nanofabrication and Spectroscopy of Magnetic Nanostructures Using a Focused Ion Beam." (2016).
