Ensaio de escalada de moscas: um método para testar a locomoção geral em Drosophila melanogaster

-Primeiro, obtenha um número definido de Drosophila adulto. A câmara de teste para o ensaio de escalada é composta de dois frascos colados juntos.

Sem anestesia de dióxido de carbono, que pode prejudicar o comportamento de escalada, transfira um número definido de moscas para a câmara de testes. Permitir que as moscas se recuperem por um período de tempo pré-determinado. Com o lado marcado da câmara para baixo, toque firmemente a câmara em uma almofada de rato colocada em uma superfície sólida.

Durante o ensaio, as moscas não devem ser expostas à luz solar direta porque as moscas podem exibir comportamento fototaxis, ou movimento em resposta a estímulos leves. Registo o número de moscas que atingem ou passam da linha. Em seguida, obtenha a taxa de passagem percentual dividindo esse número pelo número total de moscas testadas. Permitir que as moscas se recuperem antes de repetir o teste. No exemplo, observaremos um ensaio de escalada de moscas sendo usado para avaliar a função motor de Drosophila após a mutação química.

-Para começar, colete moscas homozigous de linhas pertencentes à coleção mutagenizada da ENU de mutantes Drosophila mapeados para o segundo cromossomo. Vire as moscas de 10 a 12 dias em uma câmara de testes sem anestesia uma linha de cada vez e permita que elas se recuperem por cinco minutos.

Com a linha de cinco centímetros marcada para baixo, toque à força na câmara três vezes em um mouse pad colocado em uma superfície sólida para que todas as moscas comecem o ensaio na parte inferior. Observe a locomoção de moscas durante um período de 10 segundos. Registe o número de moscas que atingem ou passam a linha de cinco centímetros dentro deste tempo, bem como o número total de moscas testadas.