Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- द्वीप परख साबुन के पानी की एक ट्रे में एक उठाया सफेद मंच के होते हैं, एक खुले पक्ष के साथ एक पारदर्शी बॉक्स द्वारा कवर किया। बॉक्स के शीर्ष पर एक कैमरा मंच की ओवरहेड छवियों को रिकॉर्ड करता है, और रोशनी को क्षेत्र की रोशनी सुनिश्चित करने के लिए रखा जाता है।
मैदान पर मक्खियों को लोड करने के लिए, सभी मक्खियों को नीचे लाने के लिए एक सपाट सतह के खिलाफ एक शीशी पर टैप करें। त्वरित उत्तराधिकार में, शीशी प्लग को हटा दें, शीशी को चालू करें, और शीशी के खुले छोर को मंच पर टैप करें ताकि सभी मक्खियों को एक ही समय में बाहर निकाला जा सके। मंच पर लैंडिंग एक भागने की प्रतिक्रिया को ट्रिगर करती है। ठेठ गतिशीलता के साथ मक्खियां लोकोमोटर दोषों के विपरीत कुछ ही सेकंड में मंच को साफ कर सकती हैं।
विषयों बॉक्स तक ही सीमित हैं, और जो साबुन के पानी पर भूमि जल्दी जलमग्न हो जाते हैं क्योंकि साबुन पानी की सतह तनाव कम हो जाता है । विभिन्न परिस्थितियों से लोकोमोटर व्यवहार का आकलन करने के लिए, एक निर्धारित समय अवधि के बाद मंच पर शेष मक्खियों की गिनती करें ।
इस उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम अर्ध-स्वचालित छवि विश्लेषण के साथ संगत द्वीप परख का एक सेटअप देखेंगे।
- सबसे पहले, जैविक प्रतिकृति के रूप में प्रयोगात्मक स्थिति के अनुसार न्यूनतम तीन शीशियों को तैयार करें। प्रत्येक शीशी में एक ही लिंग और समान उम्र की लगभग 15 मक्खियां होनी चाहिए। महत्वपूर्ण बात यह है कि मक्खियों में बरकरार पंख होने चाहिए।
प्रयोगों को स्टोर करने के लिए फ़ोल्डर बनाएं। शर्तों और प्रतिकृति द्वारा परिभाषित निर्देशिका संरचना में इन्हें उत्पन्न करें। उदाहरण के लिए, प्रयोग में पांच प्रतिकृति के साथ दो जीनोटाइप होते हैं, फिर प्रयोग की तारीख के साथ एक मुख्य फ़ोल्डर बनाते हैं, और उस फ़ोल्डर के अंदर, प्रत्येक जीनोटाइप के लिए एक सबफोल्डर बनाएं।
इसके बाद, परीक्षण तंत्र स्थापित करें। स्नान ट्रे में थोड़ी मात्रा में साबुन के साथ ठंडा पानी डालें और स्नान के बीच में मंच की स्थिति करें, यदि पहले से स्नान में तय नहीं है। ट्रे और प्लेटफ़ॉर्म को पारदर्शी बॉक्स से कवर करें।
प्लेटफ़ॉर्म को रोशन करने के लिए, एक शांत दीपक की स्थिति, जैसे कि साधारण 12-वोल्ट एलईडी, इसके ऊपर। इसके अलावा, मंच के ऊपर सीधे कंप्यूटर से जुड़े वेबकैम को रखें।
कंप्यूटर पर इमेज रिकॉर्डिंग सॉफ्टवेयर खोलें। मेनू सिस्टम से, उपयुक्त वेबकैम को कैप्चर डिवाइस के रूप में चुनें। वीडियो सेटिंग्स को समायोजित करने के लिए द्वीप पर एक मृत फ्लाई रखें। सॉफ्टवेयर में चमक, विपरीत और रंग को ट्विक करें ताकि मृत फ्लाई एक सफेद पृष्ठभूमि के खिलाफ काला दिखाई दे।
इसके बाद, फिल्मों को AVI फ़ाइलों के रूप में सहेजने के लिए टाइम लैप्स मूवी सेटअप को समायोजित करें । फिर, निर्देशिका जहां डेटा सहेजा जाना चाहिए और फिल्म के नाम को परिभाषित करने के लिए ब्राउज़ करें । इन परिवर्तनों को सहेजें ।
इमेज डेटा के संपीड़न के लिए, इंटेल आईयूवी कोड चुनें। रिकॉर्डिंग स्पीड को हर 0.1 सेकंड में एक फ्रेम पर सेट करें और संबंधित प्लेबैक रेट को 10 इमेज प्रति सेकंड में एडजस्ट करें।
अंत में, उन्नत सेटिंग पर जाएं और प्रत्येक कैप्चर किए गए फ्रेम के लिए एक बीएनपी छवि बनाएं का चयन करें। फिर, उसी निर्देशिका को ब्राउज़ करें जिसे आपने AVI फ़ाइलों को होस्ट करने और ओके दबाने के लिए चुना है।
शुरुआत से पहले, सुनिश्चित करें कि द्वीप खाली और साफ है। फिर, छवि रिकॉर्डिंग सॉफ्टवेयर के समय चूक छवि इंटरफेस में रिकॉर्डिंग शुरू करें।
मक्खियों से युक्त शीशी लें और सभी मक्खियों को नीचे तक गिराने के लिए दो या तीन बार टैप करें। फिर, शीशी से प्लग को जल्दी से हटा दें और मक्खियों को मंच पर तेजी से टैप करें। वे सभी को लगभग एक ही समय में मंच से टकराना चाहिए।
प्लेटफ़ॉर्म छोड़ने के लिए मक्खियों को 30 सेकंड तक दें। फिर, रिकॉर्डिंग बंद करें। यदि आवश्यक हो, तो, मैन्युअल रूप से प्लेटफ़ॉर्म से किसी भी शेष मक्खियों को हटा दें।
अगले प्रयोग के लिए आगे बढ़ने से पहले, निर्देशिका को फिर से परिभाषित करने के लिए निश्चित रहें जहां डेटा का अगला सेट संग्रहीत किया जाना है।