Encyclopedia of Experiments: Biology
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Transcript
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- Para empezar, asegure una pupa dorsal de mosca de la fruta, o hacia atrás, hacia arriba. Retire el operculum o el extremo anterior de la pupa para exponer la cabeza del animal.
Para exponer el complejo eye-brain, que incluye las dos retinas unidas a los lóbulos ópticos, comience a arrancar el epitelio del borde abierto del tórax y continúe abriendo la cápsula de la cabeza gradualmente.
En el protocolo de ejemplo, veremos una demostración de una disección pupal ojo-cerebro utilizada para aislar el tejido para varios análisis aguas abajo.
- Después de colocar la pupae Drosophila en un plato de disección negro, coloque un trozo fresco de cinta de doble cara en el plato de disección lejos de las pupas y use un par de fórceps para colocar cuidadosamente el lado dorsal pupae en la cinta.
Coloque el plato bajo un microscopio estéreo y use fórceps para eliminar el operculum de cada pupa. Utilice tijeras de microdisección para cortar cada caja pupal, lo que permite que se abra para revelar la cabeza, el tórax y el segmento abdominal anterior, y asegure los bordes de la caja pupal a la cinta de doble cara.
Perforar el abdomen de cada pupa con fórceps afilados y eliminar la pupa de su caja pupal. Coloque la pupa en el plato de disección lejos de la cinta, y cubra la pupa con 400 microlitros de PBS helado.
Usando dos pares de fórceps finos, agarra los bordes cortados de cada epitelio torácico y abre gradualmente el tórax y la cápsula de la cabeza, exponiendo el complejo ojo-cerebro en el tejido graso circundante.
