Drosophila (olika betydelser) Y-labyrintanalys: En metod för att bedöma luktsvar i flugor

- En Y-labyrint består av en Y-formad kontakt med tre flugflaska anslutna till den med raka eller avsmalnande rör. Flugor rör sig genom labyrinten mot sidan med den stimulans som de föredrar. För att starta experimentet, placera ett vävnadspapper med lösningen som innehåller de flyktiga kemikalierna i varje flaska. Sedan ansluter de dem till de avsmalnande rören.

Därefter svälter chill flugor för att sakta ner dem. Använd inte kemisk anestesi, eftersom detta kan påverka resultatet av analysen. Anslut snabbt injektionsflaskan med de kylda flugorna till den sista sidan av labyrinten. Lämna flugorna för att utforska labyrinten.

I exempelprotokollet kommer vi att se en inställning av Y-labyrintanalysen med vild typ Drosophila.

- Innan analysen utfördes följande morgon, i slutet av dagen, överför kohorter på 10 till 20 experimentella linjer till glasflaskor med fukt från en våt handduk. Flugorna måste testas inom 16 till 18 timmar, eller så kan de dö på grund av uttorkning eller svält.

Den tredje grenen av "Y" är fäst vid ett laströr, tillverkat av den stora delen av en pipettspets, och tillåter passage från lastflaskan till labyrintens valpunkt. Bortom varje avsmalnande tunnel är en glasflaska, varav en måste laddas med en lukt.

För att genomföra testet, kyl först flugorna på isen kort, så flugorna saktas ner. Detta bör vara under långt rött ljus från LED-lampor och vid 25 grader Celsius. Släpp försiktigt kohorten flugor i lastflaskan och ladda Y-labyrinten med testflugorna. Använd inte gasbedövning.

- Det är verkligen viktigt att överföra flugorna till lastflaskan både snabbt och försiktigt.

- Flugorna bör tillåtas utforska labyrinten i 24 timmar, så ett maximalt antal flugor flyttas till en eller annan glasflaska. Antalet flugor som finns i de olika rören tjänar till att beräkna luktindexet.

Om 10-flugkohorter inte ger konsekventa resultat kan försöken köras med 20-flugkohorter.