Light Spot Assay: En metod för att undersöka Drosophila fototaktiskt beteende

- Börja med att välja en tredje instar larva, den största av larvformerna, från odlingsmediet och tvätta den med vatten för att ta bort någon mat. Eftersom larvögonen, eller Bolwig-organen, ligger i larvens övre front, placera larven i mitten av en agarplatta med ljuskällan ovanför djuret.

Eftersom larven knappt kan upptäckas på en ljuspunkt gjord av synligt ljus, slå på infraröda LED-lampor för att belysa djuret för kameran. Vänta tills djuret börjar krypa rakt för att kontrollera sin väg. Och rotera sedan plattan så att larven kryper direkt mot ljuspunkten.

I följande exempel kommer vi att utföra ljuspunktsanalysen för att testa förmågan hos olika genetiska stammar av Drosophila larver att fly ljus.

- Innan larven introduceras i bildupplägget, skaffa en kort video av ljuspositionen och namnge den ofiltrerade kontrollbakgrundsvideon "lightarea1". Placera tillbaka filtret på kameralinsen och tänd ett ljus långt från den experimentella enheten vid en så låg inställning som möjligt samtidigt som larverna fortfarande kan observeras tydligt. Använd en sked för att ta bort några larver från odlingsmediet och välj försiktigt en tredje i larstarva.

Tvätta larven i destillerat vatten och placera larven i mitten av agarplattan.

Borsta försiktigt larven i mitten av plattan. När larven börjar krypa rakt, rotera plattan för att få larven att krypa mot ljuspunkten.

Flytta filtret bort från kameran och skaffa en kort video av ljuspunktens position.